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摘要:目的:探讨高压氧预处理对减压病大鼠肺组织细胞凋亡的影响相关蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为3组,正常对照组(NC group)、HBO预处理组(HBOP group)、减压组(DCS group),每组8只。连续进行HBO预处理5天后进行减压病模型制备,取左侧肺组织进行湿干重比值测定,右侧肺组织用于病理实验;HE染色观察肺组织病理学改变,免疫组织化学法标记Bcl-2、Bax、Caspase-3与MMP-9阳性细胞表达,并对bcl-2/bax值进行分析。结果:减压组肺组织Bax、Caspase-3与MMP-9阳性细胞数明显增加(P〈0.05),而Bcl-2阳性细胞表达减少(P〈0.05);高压氧预处理组与减压组相比,Bax、Caspase-3与MMP-9阳性细胞数明显减少(P〈0.05),而Bcl-2阳性细胞表达增加(P〈0.05);大鼠肺组织减压组与高压氧预处理组Bcl-2/Bax值较对照组明显降低(P〈0.05);与减压组相比,高压氧预处理组明显升高(P〈0.05)。结论:HBO预处理可以减轻减压对肺组织的病理损伤,减轻肺泡和支气管上皮细胞的变性坏死,抑制细胞凋亡,从而起到对减压病的保护作用。
摘要:目的:研究羟苯磺酸钙对小鼠肾间质纤维化、Ⅰ型胶原表达的影响。方法:将C57小鼠随机分为假手术组(Sham组,n=4)、肾间质纤维化模型组(UUO组,n=5)及羟苯磺酸钙治疗组(CDT组,n=4);采用单侧输尿管梗阻制备肾间质纤维化模型,CDT组给予羟苯磺酸钙灌胃、Sham组和UUO组给予双蒸水灌胃;采用HE染色、Masson染色、免疫组化、实时定量PCR以及蛋白免疫印迹观察单侧输尿管梗阻术后14 d小鼠术侧肾脏的肾间质纤维化程度和Ⅰ型胶原表达情况。结果:与Sham组比较,UUO组小鼠术后14 d术侧肾脏肾发生显著肾间质纤维化,Ⅰ型胶原表达显著增强(Ⅰ型胶原基因相对表达量:Sham组:1.00000,UUO组:114.92289,P〈0.0001)。与UUO组比较,CDT组小鼠术后14 d术侧肾间质纤维化程度显著减轻,Ⅰ型胶原表达显著减弱(Ⅰ型胶原基因相对表达量:UUO组:114.92289,CDT组:45.33516,P〈0.005)。结论:羟苯磺酸钙通过抑制小鼠肾间质Ⅰ型胶原表达从而减轻单侧输尿管结扎小鼠肾间质纤维化。
摘要:目的:构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法:使用RT-PCR法获取人snail基因全长c DNA,经Bam H I、Eco R I双酶切、连接,插入pc DNA3.1(+)真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达。结果:pc DNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBI Gen Bank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高。结论:成功构建pc DNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。
摘要:目的:HMGA2(high-mobility group AT-hook 2)一个染色质蛋白,被报道在多种癌症中都发挥重要作用。本文研究染色体蛋白HMGA2对Wnt信号传递的影响,及对结直肠癌细胞增殖的影响。方法:本文通过q RT-PCR和免疫印迹法检测HMGA2在结直肠癌样本中m RNA和蛋白水平。用荧光素酶报告基因系统研究HMGA2对Wnt信号通路的作用。用细胞增殖实验检测HMGA2对结直肠癌细胞增殖的作用。结果:在我们检测的大部分结直肠癌样本里,HMGA2表达水平升高;HMGA2蛋白可上调Wnt信号通路荧光素酶报告基因TOPflash-luciferase的表达,并呈现剂量依赖的形式。降低HMGA2表达可抑制由Wnt3a、Dvl(Dishevelled)、Li Cl以及βcatenin(S37A)引起的TOPflash-luciferase报告基因表达上调作用。此外,SW480中过量表达HMGA2可以促进细胞增殖。结论:HMGA2在结直肠癌中表达升高,HMGA2在结直肠癌中通过增强Wnt信号来促进结直肠癌细胞的增殖。
摘要:目的:探讨冠心病患者血清中趋化因子CX3CL1的表达在冠心病中的临床意义。方法:采用病例-对照的研究方法,依据临床症状收集经冠脉造影显示确诊为冠心病的患者250例,其中临床症状诊断为稳定性心绞痛患者75例,不稳定型心绞痛患者75例,急性心肌梗死患者100例(其中包含ST段抬高型急性心肌梗死和非ST段抬高型急性心肌梗死患者各50例)。同期收集对照组200例,对照组为冠状动脉造影显示为正常。ELISA方法检测上述不同人群血清中趋化因子CX3CL1表达变化,利用流式细胞仪检测上述不同人群血清中CD4^+CD28~-CX3CR1+T细胞表达含量的变化。结果:冠心病患者组血清趋化因子CX3CL1表达明显高于对照组(P〈0.05);与稳定型冠心病组患者相比较,不稳定型冠心病组和急性心肌梗死组患者血清中趋化因子CX3CL1水平明显高于稳定型冠心病患者组(P〈0.05);ST段抬高型急性心肌梗死患者血清CX3CL1表达水平高于非ST段抬高型急性心肌梗死患者(P〈0.05)。不稳定型心绞痛患者冠状动脉介入手术后即刻抽取患者的静脉血,血清中CX3CL1表达含量明显高于冠状动脉介入手术前血清中的表达含量。冠心病患者CD4^+CD28~-CX3CR1+T细胞受体的表达含量明显增高,在急性ST段抬高型心肌梗死患者血清中的表达最高(P〈0.05)。结论:趋化因子CX3CL1可能参与冠心病动脉粥样硬化不稳定斑块的形成,并且可能成为外周血中预测不稳定型斑块的血清生物学标志物。
摘要:目的:分析新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织中Smad7和Ki-67表达及相关性。方法:采用免疫组化SP法检测宫颈炎组织88例(汉族42例,维吾尔族46例)以及宫颈鳞癌组织120例(汉族50例,维吾尔族70例)中Smad7、Ki-67蛋白的表达。结果:Smad7、Ki-67蛋白在宫颈鳞癌中的阳性表达率(78.3%、76.7%)均分别显著高于宫颈炎组织(15.9%、23.9%),差异有统计学意义(P〈0.05);维吾尔族妇女宫颈鳞癌中Smad7的阳性表达率(87.1%)显著高于汉族(66%)(P〈0.05)。维吾尔族宫颈鳞癌患者中Smad7、Ki-67的阳性表达率呈显著正相关性(x^2=1.93,r=0.138,P〈0.05)。结论:宫颈鳞癌组织中Smad7、Ki-67蛋白的阳性表达率显著高于宫颈炎组织,宫颈鳞癌中Smad7蛋白的表达存在民族差异,Smad7、Ki-67等多种蛋白的联合检测可能会间接提高新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌诊断的准确度和精确度。
摘要:目的:确定甘草次酸结肠靶向微丸的制剂处方,评价其释药特性。方法:采用挤出-滚圆法制备甘草次酸素丸,利用流化床包衣技术对甘草次酸素丸进行包衣,用浆法评价微丸的体外释药性能。结果:采用微晶纤维素和甘草次酸,同时加入黏合剂羧甲基纤维素钠,经过充分搅拌混合,以30%的乙醇作为润湿剂,通过挤出-滚圆制得甘草次酸素丸。以尤特奇S100为膜控材料,加入适量柠檬酸三乙酯与滑石粉配制包衣液,对甘草次酸素丸进行包衣,制得甘草次酸包衣微丸。释放度实验表明甘草次酸素丸在其增重20%时,在0.1 mo L/L的盐酸溶液中不释放,在p H6.8的磷酸缓冲液条件下6 h内其释放率不到20%。而在p H7.4的磷酸缓冲液条件下2 h内释放率达到80%以上。结论:所制的甘草次酸素丸处方合理,制剂工艺简便,通过流化床包衣技术所制的甘草次酸包衣微丸在模拟的胃液中不释放,在小肠液中释放缓慢,在结肠液中释药良好,具有良好的结肠靶向作用。
摘要:目的:探讨17β-雌二醇对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及可能机制。方法:选取SH-SY5Y细胞传代培养,分为四组:(1)阴性对照组;(2)氧化损伤组:0.1 mmol·L^-1谷氨酸作用24 h;(3)17β-雌二醇低、高浓度组:加入(1.0×10^-4 mmol·L^-1和1.0×10^-3mmol·L^-1)17β-雌二醇作用24 h之后,加入谷氨酸作用24 h。采用MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,Hoechst-PI染色观查细胞凋亡,分光光度计检测上清液中Caspase-3及Caspase-9含量。结果:7β-雌二醇能明显抑制谷氨酸诱导的细胞活性的下降,减少谷氨酸所致SH-SY5Y细胞内ROS的生成,降低细胞凋亡率,减少凋亡因子的活性。结论:17β-雌二醇对神经细胞损伤具有保护作用,这可能与其抗氧化作用有关。
摘要:目的:探讨氢饱和生理盐水对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的治疗效果及可能的作用机制。方法:SD大鼠(250-300g)随机分为3组(n=20):假手术组(Sham组),缺血再灌注损伤模型组(I/R组),氢饱和盐水治疗组(HS组)。采用大鼠线栓法右侧中动脉栓塞模型(MCAO模型),于模型90 min时拔出线栓进行再灌注,再灌注同时,I/R组腹腔给予生理盐水10 m L/kg,HS组腹腔给予氢饱和生理盐水10 m L/kg。24 h后,对各组大鼠进行神经功能缺陷评分。断头取脑后,TTC染色法检测脑组织梗死体积(n=10)。选取缺血半暗带处大脑皮层组织进行相关指标测定(n=10)。HE染色观察大鼠缺血半暗带脑组织形态结构,测定缺血半暗带区域氧化应激反应,选取指标为SOD,MDA;并观察缺血半暗带区域炎症反应,利用Elisa方法测定该处TNF-α,IL-6含量。结果:TTC染色证实,右侧MCAO明显诱导大鼠脑局灶性缺血(P〈0.05)。与I/R组相比,HS组明显降低脑梗死体积(P〈0.05),显著降低大鼠神经功能缺陷评分(P〈0.05)。与I/R组相比,氢饱和生理盐水治疗后,很好的保持了缺血半暗带区域细胞结构完整性,明显提高了SOD含量(P〈0.05),有效降低了MDA水平(P〈0.05),并且减轻了炎症因子TNF-α,IL-6含量(P〈0.05)。结论:氢饱和生理盐水可有效的治疗脑缺血再灌注损伤,其机制可能涉及氢气在缺血半暗带区域的选择性的抗氧化应激作用,以及抗炎症反应。
摘要:目的:探讨急性酒精中毒合并中度创伤性脑损伤对大鼠海马NOS2表达和学习记忆的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠96只,水迷宫训练3天后分为4组:生理盐水组(N组)、急性酒精中毒组(A组)、中度创伤性脑损伤组(T组)和急性酒精中毒合并中度创伤性脑损伤(AT组)。腹腔单注射25%酒精(2.5g/kg),2 h后以重物自由落体击打大鼠头部建立动物模型,存活1、3、5、7、14天。免疫组化方法检测海马CA1区NOS2表达,水迷宫检测大鼠学习记忆。结果:NOS2免疫组化染色发现各实验组阳性细胞数均高于N组。术后1天T组比AT组表达显著增高(P〈0.01);术后5天AT组比T组表达增高(P〈0.05);术后14天AT组比T组表达显著增高(P〈0.05)。水迷宫实验测潜伏期,术后1天AT组比T组延长(P〈0.05),术后3天AT组比T组缩短(P〈0.05),术后14天AT组比T组显著延长(P〈0.01)。结论:大鼠急性酒精中毒合并颅脑外伤后晚期,潜伏期延长,空间位置学习与记忆能力显著下降;在海马CA1区NOS2表达阳性细胞增多,为继发性脑损伤致其表达上调,是酒精急性中毒合并中度颅脑外伤预后欠佳的原因之一。
摘要:目的:研究绝经女性中冠脉钙化积分(CACS)与臂踝动脉脉搏波传导速度(ba PWV)之间的相关性。方法:从1918名社区人群筛选出546名无冠心病病史并可以进行CACS检查的绝经女性为样本,对其进行标准化问卷调查、实验室指标检测、ba PWV及CACS测量。根据CACS将研究对象分为CACS=0组和CACS〉0组,并根据ba PWV四分位数进行分组,利用logistic回归分析冠脉钙化与ba PWV的相关性。结果:研究人群中CACS〉0组87例(15.9%),CACS=0组459例(84.1%)。其中CACS〉0组在年龄、BMI、高血压、收缩压、总胆固醇、低密度脂蛋白及糖尿病方面均高于CACS=0组。同时,CACS〉0组ba PWV比CACS=0组高(27.6%vs.24.2%,35.6%vs.23.1%),两组间差异有统计学意义(P=0.011),并且Logistic回归发现,绝经女性年龄(OR=1.094,95%CI 1.039-1.152,P〈0.001)、高血压(OR=1.933,95%CI 1.092-3.422,P=0.024)、ba PWV第三分位数(OR=2.435,95%CI1.141-5.196,P=0.021)、ba PWV第四分位数(OR=3.323,95%CI 1.594-6.930,P=0.001)是冠脉钙化的独立危险因素。结论:绝经女性ba PWV升高与CACS相关,ba PWV可以作为一种评估冠脉钙化程度和心血管风险的有效手段得以应用。
摘要:目的:探讨福辛普利联合通心络胶囊对心衰患者心功能及IL-17、CRP水平的影响。方法:108例心力衰竭患者(CHF)依据随机数字表法分为两组:对照组采用福辛普利治疗,观察组采用福辛普利联合通心络胶囊治疗,比较两组患者治疗前后心功能和细胞因子水平变化。结果:观察组治疗总有效率(51例,94.4%)显著高于对照组(41例,75.9%)(x^2=7.34,P=0.01);两组患者治疗后各项心功能指标(LVESV、LVEDD、LVEF、CO、CI、SV、LVMI)较治疗前显著改善(P〈0.05),但观察组治疗后LVESV、LVEDD、LVEF、CO、CI、SV值显著优于对照组,差异显著(P〈0.05);心衰患者经治疗之后BNP、IL-17和CRP均显著下降,但观察组治疗后各细胞因子水平显著低于对照组(P〈0.05);观察组与对照组不良反应率(11.1%与14.8%)无统计学差异(P〉0.05)。结论:福辛普利联合通心络胶囊能够有效改善患者心功能,降低血清IL-17和CRP水平,具有较好的治疗效果。
摘要:目的:通过与常规冠脉造影(Digital Signature Algorithm,DSA)对比评估双低扫描(低放射剂量,低造影剂量)方案在320排动态容积CT冠脉成像(coronary angiography with CT,CCTA)中应用的可行性。方法:选取2014年5月2015年8月完成CCTA双低扫描30例患者为双低组,双低组根据患者体重指数采取相应的管电压(BMI重指数采取相应的管电压(BMI≤25 kg/m^2:80 kv,25 kg/m^2BMI≤28kg/m^2:100kv,BMI〉28kg/m^2:120kv),造影剂浓度选用320mgI/mL,接受0.6mL/kg的对比剂;完成双低扫描的30例患者并在CCTA检查的前后两周内同时完成了DSA检查为对照组,另外完成CCTA常规扫描检查的30例患者为常规组,电压设置为常规使用的120kv管电压,造影剂浓度选用370mgFmL,以及均接受造影剂的量为65mL。结果:与DSA比较,CCTA对诊断冠脉狭窄的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为91%、94%、92%、93%,在诊断冠脉狭窄方面没有明显统计差异;与常规扫描比较,CCTA有效辐射剂量降低了约62%。结论:应用双低扫描的CCTA检查具有与DSA几乎同样的图像诊断质量,有效辐射剂量有了大幅度减低。
摘要:目的:探讨导致蛋白C、蛋白S、抗凝血酶缺乏症的分子发病机制。方法:检测蛋白C活性(PC:C)、蛋白S活性(PS:C)以及抗凝血酶活性(AT:C);PCR法分别扩增患者PC、PS、AT基因序列,寻找突变点。结果:蛋白C合并蛋白S合并抗凝血酶AT缺乏患者PC基因启动子区域存在C4867T杂合突变(NG_016323.1),为蛋白C基因的多态性位点;在蛋白S基因第四号外显子区域有G68395T杂合突变(NG_009813.1),导致Arg90Leu(NP_000304.2),为国际首次报道。遗传性PS缺陷在家系:四名家系成员均检测到PS基因第四号外显子区域一个杂合(错义)突变,G68395T(NG_009813.1)。结论:PC基因启动子的多态性位点C4867T杂合突变(NG_016323.1),PS基因第四号外显子区域的G68395T杂合突变(NG_009813.1),可能是导致患者PC、PS联合缺乏的原因。PS基因第四号外显子区域G68395T(NG_009813.1)杂合突变,可能是导致PS缺陷症家系成员PS缺乏的原因。
摘要:目的:探讨慢性肾衰竭(CRF)患者治疗前后血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)及甲状旁腺激素(PTH)水平变化及临床意义。方法:筛选2013年12月至2014年12月我院就诊的CRF患者258例作为研究组,并选取同时期健康体检者258例为对照组,研究组患者入院后针对病情给予相应治疗,检测研究组治疗前后血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、Cys C、Hcy及PTH水平变化,分析不同分期CRF患者各指标的水平差异,并与对照组进行对比分析,分析Scr、BUN与Cys C、Hcy及PTH的相关性。结果:研究组血清Scr、BUN、PTH、Cys C和Hcy水平均明显高于对照组,异有统计学意义(P〈0.05),经过治疗后以上各项指标水平较前明显下降,差异有统计学意义(P〈0.05),但仍明显高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);研究组患者Scr、BUN、Cys C、Hcy及PTH水平随着CRF分期发展而上升,其中尿毒症期〉肾功能衰竭期〉肾功能失代偿期〉肾功能代偿期,组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05);采用Pearson相关性分析,研究组患者的Scr、BUN水平分别与Cys C、Hcy及PTH的水平呈正相关(r=0.731、0.642、0.813,P〈0.05;r=0.682、0.752、0.833,P〈0.05)。结论:Cys C、Hcy、PTH水平能够反映CRF患者临床治疗效果,反映疾病的严重程度,为CRF患者的诊断和预后提供参考,具有重要的临床意义。
摘要:目的:探索黄连素四联方案用于幽门螺杆菌感染根除失败患者补救治疗的有效性及安全性。方法:将经四联方案初次根除治疗失败并自愿接受补救治疗的130例患者按纳入顺序,以1:1的比例分配治疗,随机接受14天黄连素四联(埃索美拉唑20mg+胶体果胶铋200 mg+阿莫西林1000 mg,2/d+黄连素300 mg 3/d)或四环素四联(埃索美拉唑20 mg+胶体果胶铋200 mg+四环素750 mg+呋喃唑酮100 mg,2/d)方案的治疗。所有患者均于治疗14天及治疗结束至少28天后随诊,详细记录患者症状及不良反应情况。治疗结束至少28天后进行^13C尿素呼气试验来判断幽门螺杆菌根除情况。结果:65例接受黄连素四联根除治疗,65例接受四环素四联方案治疗。两组分别有6例和4例患者因不良反应服药依从性小于80%,其余患者均完成了14天的治疗。黄连素组和四环素组的幽门螺杆菌根除率ITT分析分别为76.9%(50/65)和81.5%(53/65),P=0.520;PP分析分别为84.7%(50/59)和86.9%(53/61),P=0.739。黄连素组和四环素组不良事件总体发生率分别为49.2%和41.5%,P=0.370。结论:黄连素四联疗法用于幽门螺杆菌感染的二次根除治疗,根除率较高,未明显增加不良事件发生率,是有效及安全的补救治疗方案。
摘要:目的:探讨重症颅脑损伤合并胸外伤患者的临床救治要点和预后。方法:对2006年1月至2015年12月陕西省森工医院收治的重型颅脑损伤及重型颅脑损伤合并胸外伤患者的临床资料进行回顾性研究,并随访观察其预后情况。结果:我院10年间收治单纯重症颅脑损伤患者137例及重症颅脑损伤合并胸外伤患者86例,单纯重症颅脑损伤患者死亡率为9.5(13/137),主要死亡原因为:脑内出血(36/26.3%)、脑挫裂伤(31/22.6%)、呼吸衰竭(27/19.7%)等;重症颅脑损伤合并胸外伤患者死亡率为17.4(15/86),主要死亡原因为:呼吸衰竭(18/20.9%)、脑挫裂伤(18/20.9%)、脑内出血(15/17.4%)等。单纯重症颅脑损伤患者手术时间为187.6±11.3分钟、术后住院时间为10.9±1.8天、肢体运动障碍12例(8.8%)、植物生存2例(1.5%);重症颅脑损伤合并胸外伤患者手术时间为265.4±18.9分钟、术后住院时间为14.3±2.1天、肢体运动障碍10例(11.6%)、植物生存3例(3.5%)。其中,两组间在手术时间、术后住院时间及肢体运动障碍方面有统计学差异。结论:重症颅脑损伤合并胸外伤较单纯重症颅脑损伤的致死率更高,手术时间长,术后并发症发生率更高,术后住院天数较长。对于重症颅脑损伤合并胸外伤的患者,应尽量保全肢体功能,提高患者存活率和术后生活质量。
摘要:目的:研究原发性高血压患者血压昼夜节律异常是否与靶器官损害存在关联。方法:将2015年2~11月份在我院治疗的94例原发性高血压病人按照血压昼夜节律是否正常分为节律正常组52例和异常组42例。比较两组患者的24h、白天、夜间的收缩压(SBP)与舒张压(DBP)及血压负荷,并且比较两组患者心脏、脑、肾损伤相关指标。结果:异常组全天24h、白天、夜间SBP及DBP,血压负荷均高于正常组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。异常组患者左室重量(LVM)和左室重量指数(LVMI)、发生心肌缺血次数及持续时间、发生脑梗死几率均明显高于正常组,差异有统计学意义(P〈0.05)。异常组尿微量白蛋白(MAU)、尿酸(UA)水平均高于正常组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:原发性高血压患者出现昼夜节律异常,可能对相关靶器官造成损伤。