现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2007年第04期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志研究快报

YN23菌株作用下的铁矾沉淀481-485

摘要：为更好地了解勤奋金属球菌（Metallosphaem sedula）作用下沉淀的累积进程及沉淀的特性，将一株在我国首次分离鉴定的勤奋金属球菌（YN23）接种在以Fe^2＋为能源的培养基中，于该菌最佳生长条件（pH1．5，53℃，0．2g·l^-1酵母提取物，30g·l^-1 Fe2SO4·7H2O and 170rpm）下培养。接种25h后，当Fe^2＋氧化率达到90％时，开始出现沉淀，pH也达到1.92的最高值；到第95h，当沉淀累积到7.9g·l^-1时，沉淀反应停止，此时pH达到1．32的最低点。菌群密度随着Fe^2＋的氧化，前期快速增长；当沉淀出现以后，随着沉淀的累积，逐渐降低。X衍射图谱、红外吸收光谱、能谱和扫描电镜数据揭示，YN23菌株合成的沉淀是黄钾铁矾和黄铵铁矾的混合物。形态特征更接近于后者。

关于“生物医学”优秀论文评选活动的通知485-485

热休克蛋白90在缺氧心肌细胞中表达的初步研究486-488

摘要：目的：观察热休克蛋白90（HSP90）在缺氧心肌细胞中的表达变化规律，并初步阐明HSP90在早期心肌缺氧损害中的作用。方法：原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞，随机分为正常对照组、缺氧组和加HSP90阻断剂格尔霉素（geldanamycin，GA）预处理后再缺氧组（GA＋缺氧组），蛋白免疫印迹法（Western blot）及间接免疫荧光法检测缺氧1、3、6、12、24h后心肌细胞中HSP90蛋白分布表达情况，并检测细胞上清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）及乳酸脱氢酶（LDH）的含量变化。结果：心肌细胞缺氧3h后HSP90蛋白在胞浆内表达量升高，持续到12h达到峰值。与单纯缺氧组相比，GA＋缺氧组中LDH，CK-MB含量在不同时相点均有显著升高。结论：缺氧早期即可引起心肌细胞胞浆中HSP90蛋白表达增强，HSP90可能在早期心肌缺氧损害中发挥其内源性抗损伤机制。

诱变后混合菌在锌矿中生长的研究489-493

摘要：为了研究诱变后混合菌的生长情况，我们采用Leathen和9K培养基，培养保存2年的诱变菌群和连续传代的诱变菌群，做出它们的生长曲线。结果表明：连续传代的诱变菌群2天达到稳定期，而保存2年的诱变菌群生长达到稳定期，需要多生长2天；在培养基中，加入矿浆浓度（2％、4％、8％、16％、32％）的硫化锌矿，矿浆浓度在32％时E菌群生长量最高；矿浆浓度4％、8％、16％时B菌群生长量最高；矿浆浓度2％时D菌群生长量最高。实验结果说明：混合菌诱变可以大大提高菌群在锌矿中生长能力。

嗅鞘细胞复合PLGA导管修复周围神经缺损的研究494-498

摘要：目的：探讨嗅鞘细胞（OECs）复合聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（PLGA）导管对大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法：SD大鼠80只，随机分成4组，切除右侧部分神经干造成10mm的神经缺损。OECs＋PLGA组用充满细胞外基质凝胶和OECs悬液（CM—DiI预标记）的PLGA导管桥接坐骨神经缺损；OECs＋硅胶管组用含相同内容物的硅胶管桥接；PLGA组和硅胶管组则分别用充满细胞外基质凝胶和DMEM／F12培养基的PLGA导管和硅胶管桥接。术后每周进行感觉运动功能检测，8周时行腓肠肌湿重恢复率、乙酰胆碱脂酶（ACHE）染色、电生理和组织形态学分析等检测，同时移植细胞的两组每周进行细胞示踪观察。结果：移植细胞沿神经纵轴分布；除坐骨神经功能指数（SFI）指标外，OECs＋PLGA组的各项再生功能指标均优于其它三组。结论：OECs复合PLGA导管能够促进再生神经的成熟和靶组织功能的恢复，二者联合移植是一种有效的周围神经缺损修复方法。

人永生化角朊细胞表达干细胞表型的流式细胞术分析499-503

摘要：目的：观察人永生化角朊细胞系HaCaT细胞表达的几种干细胞表型，为以该细胞系构建人组织工程皮肤和进行基因操作提供相应的实验依据。方法：采用无血清培养基对HaCaT细胞进行培养，获取处于对数生长期的细胞进行直接荧光双标法、直接荧光单标法和间接荧光单标法以分别CD49fCD71、角蛋白K19、CD29和CD133，依托流式细胞仪检测上述抗原在HaCaT细胞的表达情况。结果：特异性较高的角朊干细胞表型CD49f＋CD71-和K19＋在HaCaT细胞的百分率分别为16．6±2．8％和14．94±1．23％。CD29＋HaCaT细胞为49．55＋6．68％，可能包括了角朊干细胞和短暂扩增细胞。分别反映细胞黏附特性和增殖能力的cD49f＋HaCaT细胞和CD71＋HaCaT细胞各占98．1±0，8％和82．1±3．9％。HaCaT细胞仅表达3．43±0．77％的干细胞表型CD133。结论：人永生化角朊细胞系HaCaT细胞的表型特征表明它具有较高的角朊干细胞和短暂扩增细胞比例以及很强的黏附基底膜特性和增殖能力，提示它可以作为构建人组织工程皮肤种子细胞和基因修饰角朊干细胞的替代物。

LPS诱导海马星形胶质细胞活化与活化的星形胶质细胞对海马神经元的影响504-506

摘要：目的：探讨脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）对长时间存活大鼠海马内星形胶质细胞的反应以及对神经元的影响。方法：本实验用10只健康成年雄性SD大鼠，海马CA3区注射LPS10μl，7和14d后，尼氏染色观察神经元的变化，免疫组织化学染色结合图像分析方法观察海马CA3区注射部位胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein GFAP）、的表达变化。结果：脂多糖可促进海马星形胶质细胞的活化，但并不能引起海马区神经元的损伤。结论：星形胶质细胞在脑损伤后的脑内炎症反应起了一定的作用．但并不能引起神经元的损伤。

抗Cu^2＋嗜酸氧化亚铁硫杆菌的驯化及诱变育种507-510

摘要：从我国三大铜矿的酸性矿坑水中富集分离出9个具有较强活性的嗜酸氧化亚铁硫杆菌菌株，经过Cu^2＋的系列浓度梯度的培养，选出其中天然抗铜能力最强的菌株26^#，在Cu^2＋浓度为0．20mol／L的9K培养基中能在72h内完全氧化培养基中的Fe^2＋，在含0．22mol／L Cu^2＋的9K培养基中能在192h内完全氧化培养基中的Fe^2＋。以CuSO4·5H2O为单变量驯化介质驯化该26^#抗铜菌株，26^#驯化菌株的Fe^2＋氧化能力明显增强：在含0．25mol／L Cu^2＋的9K培养基中能在84h内完全氧化其中的Fe^2＋。为了提高驯化菌的稳定性，将驯化后的26^#菌株用紫外线进行诱变。研究结果表明：驯化诱变对菌种的改良有重要的作用，诱变后菌株的生长性能稳定，氧化活性进一步提高，26^#驯化诱变菌在0．25mol／L Cu^2＋存在的条件下完全氧化9K培养基中Fe^2＋的时间约为60h，对Fe^2＋氧化能力明显强于驯化菌及野生菌。

现代生物医学进展杂志论著

淋巴细胞发育相关基因在鼻腔NK／T细胞淋巴瘤中表达的研究511-515

摘要：目的：探索鼻腔NK／T细胞淋巴瘤（N-NK／T-L）中淋巴细胞发育相关基因的表达及意义。方法：通过对EOMES，ETS-1和MEF基因进行克隆、探针制备和组织芯片制备，对25例N-NK／T-L以及同部位11例B细胞淋巴瘤（BCL）、6例T细胞淋巴瘤（TCL）、3例正常脾组织和5例慢性炎性鼻黏膜组织进行了原位杂交检测。结果：EOMES、ETS-1、MEF基因在N-NK／T-L、BCL、TCL、脾和鼻粘膜中均有表达，但阳性率和表达强度不同。EOMES基因在N-NK／T-L的表达强度与BCL和TCL间有差异，MEF基因在N-NK／T-L的表达阳性率和强度与TCL间有差异，而ETS-1基因在N-NK／T-L与对照组间的表达无差异。T-bet、EOMES和MEF基因在N-NK／T-L的表达具有相关性。结论EOMES和MEF基因在N-NK／T-L中高表达，可能在该肿瘤发生和组织坏死中起重要作用，而ETS-1基因在N-NK／T-L和对照组中普遍表达，提示其可能在淋巴造血系统的发育和功能中起基础性的共同通路。

软骨多糖诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡的实验研究516-520

摘要：目的：研究软骨多糖诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及其作用机理。方法：选用MCF-7人类乳腺癌细胞系体外培养，应用MTT法检测细胞生长抑制率，TUNEL法检测细胞凋亡率，HE染色法观察细胞形态学改变，流式细胞仪检测细胞周期的变化，免疫荧光方法检测BCL-2CBAD及波形蛋白Vimentin的表达率。结果：软骨多糖对MCF-7细胞体外生长具有明显的抑制作用，且呈时间和浓度依赖性；软骨多糖可诱导MCF-7细胞发生凋亡并伴随有凋亡小体出现等形态学变化；软骨多糖促进BCL-2蛋白的表达水平下降，BAD表达水平上升，及Vimentin的降解。结论：软骨多糖能够在体外诱导MCF-7细胞凋亡，是一种新型的抗乳腺癌活性物质。

缺氧复氧心肌细胞中HSP90对AKT表达的调控作用521-524

摘要：目的：研究新生大鼠缺氧复氧心肌细胞中热休克蛋白90（HSP90）的表达对AKT表达的影响，探讨HSP90在P13K／AKT信号通路中的作用。方法：建立新生大鼠心肌细胞缺氧复氧模型，通过运用HSP90阻断剂Geldanamycin（GA），分别以MTT法检测心肌细胞的活力、透射电镜观察心肌细胞超微结构改变、Westem印迹法分析大鼠心肌细胞中HSP90表达变化与总AKT蛋白的相关性。结果：缺氧复氧心肌细胞中HSP90和AKT表达量均有明显升高，阻断HSP90后，AKT表达量明显下降，此时心肌细胞活力明显下降，细胞超微结构受损明显。结论：AKT对缺氧复氧引起的心肌细胞损伤有内源性保护作用，此作用的发挥与HSP90和AKT的结合密切相关，HSP90对缺氧复氧中的心肌细胞AKT表达有显著影响。

迷迭香酸抗穿透支原体脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的作用研究525-528

摘要：目的：探讨迷迭香酸对穿透支原体脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的保护作用。方法：以穿透支原体脂蛋白损伤RAW264．7细胞为模型，用MTT法检测细胞存活状况，DN断化分析观察穿透支原体脂蛋白对RAW264．7细胞DNA降解的影响，碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：7．5mg／L穿透支原体脂蛋白可引起RAW264．7细胞存活率降低，出现细胞凋亡特征性“DNA梯带”，流式细胞术检测细胞出现凋亡亚G1期峰，凋亡率为31．9％；100μmol／L迷迭香酸预处理1小时后可以升高RAW264．7细胞的存活率，凋亡细胞特征性的梯状梯带消失，细胞凋亡亚G1期峰消失，并使RAW264．7细胞的凋亡率下降为7．9％。结论：迷迭香酸有抗穿透支原体脂蛋白诱导RAW264．7细胞凋亡的作用。

一种简单快速克隆IL-6信号转导相关基因的方法529-532

摘要：细胞因子作用于受体时的一个重要结果是诱导基因表达。为了克隆与IL-6诱导相关的基因，我们利用一个快速的改良DD-PCR方法，分离并检测了IL-6诱导和未诱导的U937细胞的差异表达基因。用三个完全变性的6-mer引物进行反转录，用2或3个较长的随机引物进行PCR扩增，扩增产物很在2％琼脂糖凝胶电泳上分离，之后回收差异片段并直接用于克隆和测序。在研究中，获得了7个不同的EST，序列分析表明其中2个EST可能是与细胞信号转导相关的新基因片段；反向Northern杂交证实它们是与IL-6作用相关的差异表达基因。

兔角膜缘干细胞体外分离、培养和生物学鉴定的实验研究533-536

摘要：目的：通过体外培养兔角膜缘干细胞，观察其生物学特性，建立兔角膜缘干细胞的体外培养方法。方法0．25％胰蛋白酶消化角膜缘组织，用含15％胎牛血清的DMEM和F12（1：1）的培养液（DF）对兔角膜缘干细胞进行体外培养，形态学观察，培养的细胞早期使用AE1／AE3、晚期使用AE5角蛋白特异的单克隆抗体）作细胞免疫化学鉴定。结果：原代培养细胞48h后开始贴壁，部分细胞由圆形变为卵圆形或长梭形；10～14d形成单层，细胞呈圆形、卵圆形，类角膜上皮细胞；细胞传到第5代左右开始出现老化状态；免疫细胞化学染色：培养的细胞早期AE1／AE3呈阳性而少部分细胞AE5呈阳性，培养的细胞晚期AE5呈阳性。结论：本实验初步建立了一套兔角膜缘干细胞的体外培养方法。

5-Aza-CdR对人胃癌细胞株生物学行为及RASSF1A mRNA表达的影响537-540

摘要：目的：观察不同浓度的5-氮-2’-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28生长及RASSF1A mRNA表达的影响。方法：分别以0．4μmol／L、1．6μmol／L、6．4μmol／L、25．6μmol／L、102．4μmol／L浓度的5-Aza-CdR处理人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28，MTT比色法测定72h时间段的吸光度值、计算抑制率，流式细胞仪检测5-Aza-CdR对胃癌细胞株生长周期及凋亡的影响，RT-PCR检测5-Aza-CdR处理前、后抑癌基因RASSF1A mRNA的表达。结果：5-Aza-CAR抑制体外培养人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28生长，呈浓度依赖性；5-Aza-CdR能有效诱导BGC-823、SGC-7901、MKN-28细胞凋亡；RT-PCR检测人胃癌细胞株SGC-7901、MKN．28无RASSF1A mRNA表达，经5-Aza-CdR处理后基因重新表达，BGC-823处理前后RASSF1A mRNA均有表达。结论：新型抑癌基因RASSF1A与胃癌的发生相关，5-Aza-CdR能抑制胃癌细胞株的增殖，并促进凋亡，其机制可能与RASSF1A基因的重新表达有关。

膳食甘油二酯对SD大鼠食欲及下丘脑神经肽Y基因表达的影响541-543

摘要：目的：研究膳食甘油二酯对SD大鼠食欲和下丘脑神经肽Y基因表达的影响。方法：将大鼠随机分成三组：5％（wt）甘油三酯组（对照组），20％（wt）甘油三酯组（TG组）和20％（wt）1，3-甘油二酯组（DG组）。大鼠喂养10w，每天记录进食量，每周称体重，于第10周末处死大鼠，称体重和内脏脂肪，计算脂体比，测定血糖、血脂和各种激素水平，RT-PCR的方法检测大鼠下丘脑神经肽YmRNA表达水平。结果：高甘油二酯组与高甘油三酯组比较，改善体重的增加及内脏脂肪的积累，降低大鼠血糖、血甘油三酯（TG）、胰岛素水平，同时降低犬鼠下丘脑神经肽YmRNA的表达水平。结论：甘油二酯降低脂肪积累和改善血脂水平的可能机制是改变下丘脑有关控制食欲的基因表达．进而影响了脂肪代谢的平衡。

侧脑室注射共轭亚油酸（CLA）对大鼠糖脂代谢的影响544-547

摘要：目的：观察侧脑室注射共轭亚油酸（Conjugated linoleic acid，CLA）对SD大鼠糖脂代谢的影响及其可能的机制。方法：向正常SD大鼠侧脑室内注射共轭亚油酸（CLA），分别于注射后2、4、8、12、24小时采血，试剂盒法测血糖、胰岛素、瘦素、血甘油三脂、血胆固醇、血高密度脂蛋白。48小时后处死，分离动物的脂肪（皮下、内脏、肾周、睾周）进行称重，计算体脂比。结果：与对照组相比，侧脑室注射CLA48小时后，大鼠脂体比、皮下脂肪、睾周脂肪均下降。术后2-12h血糖降低，血清胰岛素浓度也降低，而且持续的时间较长（48h）。侧脑室注射CLA对脂代谢有影响，2h时血清甘油三酯升高、胆固醇降低、4h时高密度脂蛋白升高。结论：共轭亚油酸能够通过中枢神经系统调节外周糖脂代谢，这可能与其能减轻体重的机制有关。

中草药饲料添加剂对真鲷（Pagrosomus major）幼鱼生长和非特异性免疫的影响548-551

摘要：设计中草药配方分别以1％、2％、3％剂量分粉剂和汁剂的方式添加到基础饲料中，连续投喂真鲷幼鱼2个月。分三个阶段（每20天一阶段）测定鱼体的增重、饵料系数、血液中的NBT阳性细胞和血清中的溶茵酶的活力。结果表明，中草药添加剂能够极显著地影响真鲷幼鱼的生长、血液中NBT阳性细胞数和血清中的溶茵酶的活力（p〈0．01）。且两种添加方式均在第二、三阶段比对照组出现了极显著的差异，且均以2％的添加剂量效果为最佳。