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摘要:一般的蛋白质对接程序能够提供大量的待选构象,但其中仅含有少量的正确构象。现在对接的主要工作在于如何从这些大量构象中挑出正确构象。我们先前的研究工作证明蛋白质界面比非界面表面具有更高的能量。在这里,我们使用由Chen等人提出的一个用于检验、设计对接程序的蛋白质复合物标准库中的非抗原一抗体复合物,将侧链能量运用到对接中,并比较了侧链能量和残基配对倾向性、残基组成倾向性、残基保守性在对接中的表现。单独使用这四项的正确构象的平均百排分位排序分别为:38.6±19.6、26.3±20.8、22.7±16.6和37.8±26.1,但是对于个别蛋白,侧链能量的表现要优于其它的三个参数。我们将四个参数综合起来考虑,发展了一个新的打分函数,平均百排分位排序为22.2±7.8,并且提高了筛选效率。
摘要:在倡导环保和节能的现代工业中,生物选矿以能耗低,工艺简单,环境污染少等优点日益受到人们的关注。选矿菌种的筛选和培养是生物选矿中至关重要的一个环节。为了掌握细菌的生长特性,提高生物选矿的效率,本文对作者筛选到的脱硅细菌B.mucilaginosusLv1-2的生长和培养条件进行了研究。实验结果表明,该菌的生长速度快,接种后约36h进入生长对数期,60h进入稳定期。最适培养条件是:温度30℃,起始pH值为7.5,摇床转速为220rpm。细菌的浓度随装液量的增加而降低。能利用多种碳源和氮源,最佳碳源是葡萄糖,氮源为硫酸铵。
摘要:目的:研究survivin和caspase-3蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况,分析二者的作用机制及相关性。方法:采用免疫组化KIT染色法,检测survivin和caspase-3在60例NSCLC组织和20例正常肺组织中的表达情况。结果:肺癌组织中的survivin阳性表达率(61.67%)明显高于正常肺组织(5%);Ⅲ期的survivin阳性表达率(76.92%)明显高于Ⅰ+Ⅱ期(50%);均有显著性差异(P〈0.05);而与年龄,病理类型,组织分化程度,淋巴结转移情况无关。肺癌组织中caspase-3阳性表达率(43.33%)明显低于正常组织(85%);高+中分化组的caspase-3阳性表达率(58.06%)明显高于低分化的(27.59%);鳞癌组织中的caspase-3阳性表达率(56.25%)高于腺癌组织(28.57%);均有显著性差异(P〈0.05);而与年龄,TNM分期,淋巴结转移情况无关。结论:survivin在非小细胞肺癌中表达上调,而caspase-3却下降,且二者的表达呈负相关,提示survivin可能参与肺癌的发生发展,且抑制caspase-3的激活而抑制凋亡;caspase-3的失活可能导致肿瘤细胞的增殖。
摘要:目的:研制人乳头瘤病毒(HPV)E1蛋白抗体,并运用于组织病理学免疫组织化学检测。方法:通过基因重组、原核表达并纯化HPV E1蛋白片段;经免疫兔制备多克隆抗体,并经免疫印迹及基因转染鉴定特异性;免疫组织化学法检测13例宫颈病变中E1蛋白,经原住杂交验证。结果:将PCR扩增的E1蛋白保守功能域(第362—456aa)基因片断重组于原核表达载体pEK-318的6×His标签下游,经诱导表达和亲合层析,纯化出14kD His—E1蛋白。制备的多克隆血清经免疫印迹法检测显示不仅可与His—E1蛋白结合,也与HeLa细胞内源性及基因转染表达的天然E1蛋白反应。运用免疫血清检测7例宫颈尖锐湿疣和6例宫颈上皮内瘤病(CIN)Ⅲ级病例显示:7例宫颈尖锐湿疣6例为阳性染色。阳性反应主要分布于病灶中挖空细胞的胞核。同时6例CINⅢ级病变全部阳性,着色主要为非典型增生鳞状上皮细胞核。为了确定上述病例中E1蛋白免疫组化检测的准确性。运用原住杂交法进行了验证。结果显示:7例宫颈尖锐湿疣均为HPV6/11型杂交阳性。6例CINⅢ级病变全部为HPV16型杂交阳性.显色部位与免疫组化基本一致。结论:本研究结果显示研制的HPV E1蛋白抗体可以用于病理组织学HPV病毒检测。
摘要:本文将简单节杆菌3-甾酮-1-脱氢酶基因克隆到分泌表达载体pWB980上,并转入枯草芽孢杆菌WB600中,得到重组芽孢杆菌菌株。重组芽孢杆菌表达出的目的蛋白的分子量为55KDa,分光光度法检测到胞内和胞外可溶性部分的酶活分别为110±0.5mU和15±0.6mU每毫克蛋白,对甾体底物4-AD的转化率为45.3%,比出发菌简单节杆菌提高了将近10倍。
摘要:现有的医用红外热像技术几乎都采自体表,为了提高诊断准确性,必须进一步确定体表温度分布与体内热源间的关系。基于人体内部传热机制和人体与环境的传热机制,推导出稳态下均质(各向同性)组织的表面温度分布与内部球状热源之间的关系,通过模拟计算可验证结论的准确性。
摘要:目的:探讨VEGF-D(血管内皮生长因子-D)及其受体VEGFR-3(血管内皮生长因子受体-3)在乳腺癌淋巴道转移中的作用和意义。方法:采用免疫组化二步法检测90例乳腺癌组织中VEGF—D/VEGFR-3的表达。结果:(1)VECF—D阳性率在淋巴结转移组为82%(41/50)显著高于未转移组37.5%(15/40),(P〈0.01)。VEGFR-3阳性率在淋巴结转移组为84%(42/50)显著高于未转移组42.5%(17/40),(P〈0.05),且VEGF—D与VEGFR-3表达显著相关,(P〈0.05)。(2)VEGF—D表达与年龄、肿瘤大小、病理分型、临床分级、ER、PR无关,与CerbB-2表达显著相关,(P〈0.05)。结论:VEGF—D/VEGFIR-3的表达与乳腺癌淋巴道转移有关,VEGF—D可能促进了乳腺癌淋巴管的生成。
摘要:EEG是由大脑产生的非线性时间序列,体现出混沌行为。近年来迅速发展的非线性动力学理论为脑电信号分析开创了一个新的领域。本文综述了近年来非线性动力学在脑电信号研究中(睡眠阶段,麻醉深度,认知过程,精神分裂,痴呆及癫痫)的进展,以期对脑神经动力学有更好的理解。
摘要:目的:研究体外不同诱导条件下大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的潜能。方法:取Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓,分离培养MSCs,采用第二代或第三代MSC8,以5-氮杂胞苷(5-aza)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及两者联合作用,作为分化诱导剂,连续观察三周,相差显微镜下观察其形态变化。免疫细胞化学方法鉴定心肌特异性蛋白T(Troponin T,cTnT)、连接蛋白43(Connexin43)、α-横纹肌动蛋白(α-Sarcomevic Actin)的表达,应用半定量RT—PCR技术分析Nkx2.5、GATA-4、TGF-?等相关调控基因在分化过程中的表达。结果:免疫细胞化学显示cTnT、Connexin43、α-Sarcomeric Actin诱导前无表达,单纯bFGF诱导组及对照组未发现cTnT、Connexin43、α-Sarcomevic Actin染色阳性细胞,单纯5-aza诱导组诱导后上述三种蛋白阳性细胞表达比例分别为22%、28%、32%,5-aza与bFGF联合诱导组诱导后上述三者阳性细胞表达比例分别为28%、33%、40%,联合诱导组诱导后细胞阳性率明显高于单纯5-aza诱导组,两组相比较差异有显著性意义(P〈0.05)。RT—PCR检测结果显示,GATA-4、Nkx2.5、TGF—β在诱导前的MSCs有低表达,单纯5-aza诱导组及5-aza与bFGF联合诱导组诱导后3周,这三种基因有较强的表达,单纯5-aza诱导组诱导检测结果显示,GATA-4、Nkx2.5、TGF—β在诱导前的MSCs有低表达,单纯5-aza诱导组及5-aza与bFGF联合诱导组诱导后3周,这三种基因有较强的表达,单纯5-aza诱导组诱导前后相比较,差异有显著性意义(P〈0.05),5-aza与bFGF联合诱导组诱导前后相比较,差异也有显著性意义(P〈0.05),单纯5-aza诱导组与5-aza和bFGF联合诱导组诱导后两组之间相比较,差异亦有显著性意义(P〈0.05),表明单纯5-aza诱导及5—aza与bFGF联合诱导均可使MSCs向心肌细胞转化,联合诱导可以使更�
摘要:目的:观察接种肿瘤细胞不同时间,给予当归补血汤的抗肿瘤作用。方法:建立荷瘤小鼠(EL-4瘤株)动物模型.当归补血汤煎剂灌胃。观察肿瘤大小和小鼠生存时间。结果:肿瘤接种当日给药组和肿瘤直径0.3cm组与空白对照组比较肿瘤生长速度显著减慢(p〈0.05),生存时间显著延长(p〈0.05);肿瘤直径0.6cm组与空白对照组比较肿瘤生长速度无差异(p〉0.05),生存时间无明显延长(p〉0.05);且不同时间用药组比较,各观测指标差异显著(p〈0.05)。结论:预防性及肿瘤早期单独应用当归补血汤治疗有一定疗效。
摘要:目的:探讨牡蛎糖胺聚糖(O—GAG)对血管内皮细胞损伤的保护作用,观察它对损伤的血管内皮细胞内一氧化氮(NO)、丙二醛(iDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响。方法:采用人脐静脉内皮细胞株ECV304体外培养的方法,建立过氧化氢(H2O2)诱导的内皮细胞损伤模型,噻唑蓝(MTT)比色法观察牡蛎糖胺聚糖对血管内皮细胞增殖活性的影响,硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法和硝基苯肼法分别检测细胞内NO的含量、细胞培养液内MDA的含量和LDH的活性。结果:模型组较正常对照组细胞增殖活性明显降低(P〈0.01)。与模型组相比,经牡蛎糖胺聚糖预处理的各保护组(除10μg/ml)细胞增殖活性明显增加(P〈0.05,P〈0.01),NO的含量增加,MDA的含量和LDH的活性降低(P〈0.01)。牡蛎糖胺聚糖(100、200μg/ml)对于正常的内皮细胞有促增殖作用(P〈0.05)。结论:牡蛎糖胺聚糖对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能与增加细胞NO含量、减少MDA生成和LDH释放有关。牡蛎糖胺聚糖对正常血管内皮细胞在一定剂量范围内有促增殖作用.
摘要:目的:探讨肿瘤坏死因子(Tumer necrosis factor,TNFα)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在大肠癌中的表达及其与肿瘤病理分级、Dukes分期的关系。方法:大肠癌组织50例,大肠腺瘤20例,正常组织20例,采用免疫组化二步法对标本切片进行染色。结果:TNFα、VEGF在癌组织中表达明显高于正常组织和腺瘤,三者之间差异显著(P〈0.05)。VEGF表达与病理分级、Dukes分期呈正相关性,而TNFα表达则相反(P〈0.01)。TNFα与VEGF在癌组织中的表达呈负相关。(P〈0.01)。结论:TNFα及VEGF的检测可作为大肠癌预后估计的客观指标。
摘要:目的:研发消糜阴道泡腾片新药,遴选最佳配方工艺技术参数。方法:采用正交试验设计及酸碱源分别制粒的方法,研究酸碱源比例、片剂含药量、润湿剂浓度、片剂硬度对泡腾片质量的影响。结果:酸碱源比例为1.25:1、片剂含药量为50%、润湿剂浓度为85%、片剂硬度为3—4kg/mm^2时消糜阴道泡腾片的pH值、发泡量、崩解时限检测合格,产品质量稳定。结论:配方工艺适合制备消糜阴道泡腾片。
摘要:目的:研究新鲜肺癌组织的DNA含量。方法:采用流式细胞术对30例新鲜肺癌组织和5例正常对照组组织制成的单细胞悬液进行了DNA含量分析。结果:肺癌组G0/G1、S、G2/M各时相比率和细胞增殖指数以及DNA指数与对照组存在显著性差异(P〈0.01)。结论:肺病变组织细胞DNA的流式细胞术分析是判定肺部肿瘤恶性化的敏感指标。
摘要:分化型甲状腺癌(Differentiated thyroid carcinoma,DTC)在其病程演变过程中,分化程度较低的复发或转移灶摄^131I能力降低而对^18F-脱氧葡萄糖(Fluoredeoxyglucose,FDG)摄取增多。因此,依赖于^131I和FDG显像的两种不同机制,正电子发射型断层成像(Positron Emission Tomography,PET)探测非功能性DTC复发或转移灶兼具定位诊断、敏感性及特异性都高的优点。因此。DTE患者随访期间,对甲状腺球蛋白阳性(Thyroglobulin positive,TG+)(在促甲状腺激素刺激作用下TG〉10μg/L或在促甲状腺激素被抑制作用下TG〉2μg/L)或TG阴性(TG negative,TG-)但TsAb〉200U/mL,且131I-诊断剂量全身显像阴性(Diagnostic whole—body scanning negative,dWBS-)的高危患者(Ⅲ期或Ⅳ期患者)是进行^18F—FDG PET显像的指征。同机融合显像设备PET/CT、PET/MRI具有更高的敏感性和分辨率,为病灶的定性和定位,提供更准确的信息。
摘要:目的:利用血氧水平依赖性功能性磁共振成像(BOLD-fMRI)技术及非金属MRI专用眼镜,分析探索屈光不正对儿童大脑皮层视觉功能区神经元活动的影响。方法:以1.5T磁共振成像系统采集8例屈光不正眼儿童屈光矫正前后枕叶视皮层兴趣区BOLD—fMRI数据,及8例正常眼凸透镜离焦前后枕叶视皮层兴趣区BOLD—fMRI数据,进行对比分析,比较屈光不正眼及其矫正后、正常眼及其离焦后皮层视觉功能区神经元活动的不同,分析其改变特点及原因。结果:屈光不正眼儿童矫正屈光后皮层视觉功能区神经元活动范围明显增加(P〈0.05);正常眼离焦后皮层视觉功能区神经元活动范围明显减小(P〈0.05)。结论:屈光不正会明显降低儿童皮层视觉功能区的神经元活动。屈光不正患儿应尽早配镜矫正,以免影响视觉皮层功能发育。
摘要:目的:观察超滤在小儿先心病手术体外循环中肺保护效果。方法:随机抽取先心病患者28例,分为超滤组14例,对照组14例,于体外循环(CPB)前,主动脉开放后恢复机械通气10min,对照组体外循环结束后10min(超滤组改良超滤后10min)三个时点分别监测血细胞压积(HCT)、气道阻力、C3a、CAa、肿瘤坏死因子(TNF—α)变化,观察比较补体激活引发炎性介质对肺损伤的程度。结果:超滤组C3a、CAa、TNF-α上升不明显,对照组有所上升,超滤组气道阻力明显下降,HCT增高,监测结果两组有明显差异。结论:体外循环中应用超滤技术能减轻炎性介质对肺损伤程度,并能降低术后并发症的发生。
摘要:目的:探讨长效干扰素(IFN)α-2a联合乙肝舒康胶囊治疗病毒性慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒治疗的临床疗效。方法:94例CHB患者随机分为3组,分别接受单纯护肝药物治疗、长效干扰素,及长效干扰素联合珍珠草乙肝舒康胶囊治疗,疗程24周。观察血清HBV—DNA及HBsAg、HBeAg的阴转情况。结果:长效干扰素组及联合治疗组的抗病毒疗效与对照组相比,疗效均优于对照组(P〈0.05),且联合治疗组的HBV—DNA的复制水平下降率及HBsAg阴转率均高于长效干扰素组。结论:长效干扰素与乙肝舒康胶囊有协同抗病毒作用,且疗效优于单用长效干扰素治疗。