基于高通量测序数据构建斑马鱼隐性遗传突变筛选系统
摘要：目的：针对斑马鱼高通量测序数据,通过一系列质量控制和突变过滤,构建一套有效隐性遗传突变筛选系统。方法：A）经过与斑马鱼参考基因组比对,利用GATK获得初始的VCF格式突变信息。B）使用perl语言编写本地脚本,对突变信息进行过滤,注释等。C）通过绘制纯合突变点分布图,找出突变富集区域。整合以上步骤,构建出一套针对斑马鱼高通量测序数据的遗传性突变筛选系统。结果：对获得的突变位点进行了一系列的质量控制,定位到具体染色体上的特定区域,并且对获得的突变进行了功能上的注释。结论：本过滤筛选系统能有效控制检测的假阳性率,对斑马鱼致病性的隐性突变位点筛查提供有力参考。CGRP和NPY在大鼠股骨闭合骨折愈合不同阶段的变化及意义
摘要：目的：探讨交感神经分泌的神经肽Y（NPY）和感觉神经分泌的钙基因相关肽（CGRP）在体内骨折愈合的不同阶段的变化及意义。方法：选择6-8月龄的雄性大鼠,建立大鼠的股骨闭合骨折模型,术后2、4、8、12周取材。进行扫描电镜,免疫组织荧光染色和血清Elisa检测。结果：1骨折愈合不同时期感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY都有表达,且其含量有先增加后减少的趋势,并在骨折后8周含量达到最高。2骨折愈合不同阶段的大鼠血清感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY均呈上升趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）,且NPY的含量比CGRP的含量高。骨折后2-4周,CGRP含量增加较快;骨折后4-8周NPY含量增加较快。结论：骨折愈合的不同阶段,感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY含量先升后降,对不同阶段的骨形成及骨吸收产生影响。原矛头蝮蛇毒毒性及恢复规律
摘要：目的：对原矛头蝮（P.mucrosquamatus）的毒性及其恢复规律进行考察,增进对该蛇毒性的认识。方法：用该蛇连续攻击小鼠,用梯度剂量蛇毒对小鼠进行腹腔注射,统计死亡率,以折算绝对毒性和半数致死量。对毒性耗竭个体,在梯度时间间隔采集蛇毒,以考察毒性恢复规律。结果：原矛头蝮在2 h内可导致6只小鼠死亡。蛇毒对小鼠的半数致死量为12.204μL/Kg。毒性耗竭后,在间隔21天所获得蛇毒的容积达到最大值即190μL,湿重为149.7 mg。结论：毒蛇在攻击猎物时,并不一次性排完毒腺中的所有毒液,随着攻击次数的增多,毒腺中毒液量逐步减少直至耗竭。其毒液量的恢复需要约3周时间,期间,单次排毒量逐渐增加,干物质的含量也基本呈递增趋势。就单次最大排毒量而言,原矛头蝮高于竹叶青、蝮蛇和银环蛇。其单位剂量毒性高于五步蛇和竹叶青。PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网（NETS）形成的方法及其结构的研究
摘要：目的：建立佛波酯（PMA）诱导人中性粒细胞NETS形成的方法,并研究NETS的结构组成。方法：提取人中性粒细胞,使用10、30、90 n M的PMA分别刺激细胞2、3、4 h,采用核酸染料sytox green染色后,通过共聚焦显微镜检测和比较各组NETS的形成情况,并通过活性氧（ROS）探针对NETS进行荧光染色,对弹性蛋白酶（Elastase）、髓过氧化物酶（MPO）和组蛋白H3（Histone H3）进行免疫荧光染色。结果：PMA低于30 n M刺激细胞4 h都不会产生NETS,90 n M刺激3 h就会形成NETS,使用90 n M刺激中性粒细胞4 h后,其形成的NETS含量最高,显著高于30 n M刺激4 h及90 n M刺激3h（P〈0.05）。免疫荧光染色结果显示NETS结构上含有大量ROS和Elastase,含有少量MPO,几乎不含Histone H3。结论：90 n M PMA刺激中性粒细胞4 h可促进NETS形成,其含有大量ROS和Elastase。转铁蛋白修饰磁性纳米粒的制备及其体外抗肿瘤活性研究
摘要：目的：本研究旨在构建一种转铁蛋白修饰负载阿霉素（DOX）的磁纳米粒靶向递药系统,以提高阿霉素作用的靶向性。方法：采用化学共沉淀法制备转铁蛋白修饰负载阿霉素的磁性纳米粒（DOX@MNP）,采用zeta电位及纳米粒度分析仪测定DOX@MNP的粒径及其zeta电位,透析法评价DOX@MNP的体外释药特征。通过MTT实验,研究DOX@MNP与游离DOX对A549细胞的细胞毒性,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察A549细胞对DOX@MNP与游离DOX的摄取情况。结果：DOX@MNP的释药具有p H依赖性。MTT实验结果显示,DOX@MNP与游离DOX具有相当的细胞毒性;激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测结果显示A549细胞对DOX和DOX@MNP的摄取没有明显差异。结论：本文构建了一种转铁蛋白修饰包载阿霉素的磁纳米粒,体外结果显示其具有与游离DOX相当的细胞毒性,为进一步进行体内实验奠定了基础。乳酸杆菌脂磷壁酸通过下调脂筏中Lck激酶水平抑制大鼠肝脏Kupffer细胞TLR4通路
摘要：目的：探讨保加利亚乳酸杆菌脂磷壁酸（Lipoteichoic Acid of Lactobacillus bulgaricus,LBG-LTA）是否能下调细胞膜脂筏中的淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶（Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase,Lck）,进而抑制大鼠肝脏Kupffer细胞Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）通路。方法：分离培养10只雄性Wistar大鼠的Kupffer细胞;培养LBG并制备LBG-LTA;有或无LBG-LTA、脂筏裂解剂甲基-β-环糊精（methyl-β-cyclodextrine,MβCD）、Lck抑制剂PP2分别预处理情况下,以脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激Kupffer细胞,提取各组细胞的膜-浆蛋白及核蛋白,蔗糖密度梯度离心法提取膜-浆蛋白中的脂筏及非脂筏组分,Western blot检测脂筏及非脂筏组分中TLR4、TANK结合激酶1（TANK binding kinase-1,TBK1）、Lck及核蛋白中的核因子B（nuclear factor-κB,NF-κB）,酶联免疫吸附法检测培养上清中的肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白介素1β（interleukin-1β,IL-1β）。结果：LPS上调的TLR4、Lck主要在脂筏内（与对照孔脂筏相应数值之比为0.95 0.23 vs 0.0120.0023,1.05 0.26 vs 0.022 0.0052,P均〈0.05）,TBK1主要在非脂筏组分中（与对照孔非脂筏组分数值之比1.02 0.21 vs 0.0480.011,P〈0.05）,核蛋白中的NF-B及培养上清中的TNF-α和IL-1β亦明显升高（与对照孔相应数值之比为0.78 0.16 vs 0.0760.014,189.2 27.1 vs 5.62 0.82,131.6 18.8 vs 7.24 1.14,P均〈0.05）。与MαCD或PP2一样,LBG-LTA也明显抑制LPS的作用（LTA＋LPS孔脂筏中TLR4、Lck与LPS孔相应数值之比为0.15 0.036 vs 0.95 0.23,0.17 0.052 vs 1.05 0.26,非脂筏组分中TBK1与LPS孔的比较为0.25 0.062 vs 1.02 0.21,NF-B、TNF-α及IL-1β与LPS孔相应数值之比为0.17 0.035 vs 0.78 0.16,32.2 4.37 vs189.2 27.1,23.4 3.29 vs 131.6 18.8,P均〈0.05）。结论：LBG-LTA下调大鼠Kupffer细胞膜脂筏中的Lck,进而抑制其TLR4通路。CERKL的过表达在人类视网膜变性疾病中的作用及其临床意义
摘要：目的：研究基因CERKL过度表达与色素性视网膜炎的关系及其临床治疗意义。方法：应用RT-PCR分析、比较基因序列CERKL的转录产物的结构差异。利用序列CERKL过表达的转化与细胞溶解,获得不同的CERKL蛋白,检测其体外磷酸化酶活性。结果：CERKL转录得到四种转录子,两个较长的CERKLa、CERKLb,两个较短的CERKLc、CERKLd。四种转录蛋白在体外酶活性实验中均没有产生酶解产物C1P,在300μM H2O2氧化条件下,转录子CERKL能有效抑制细胞凋亡,其24 h相对PARP清除率明显低于12 h相对PARP清除率（P〈0.01）。但在400μM H2O2氧化条件下其未能表现出抑制细胞凋亡的作用。结论：色素性视网膜炎有可能是基因CERKL转录时其终止子因无义突变导致缺陷,进而发生选择性转录,并由CERKL较长变异体（CERKLa、CERKLb）的缺失或CERKL较短变异体（CERKLc、CERKLd）毒性引起的。红景天苷通过PINK1-Parkin通路在MPP^＋诱导的SH-SY5Y细胞中维持线粒体形态和功能
摘要：目的：研究红景天苷（Salidroside,Sal）对在MPP＋诱导SH-SY5Y细胞线粒体形态和功能的影响及其机制。方法：采用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT）检测细胞活性,Mito Tracker Red CMXRos进行线粒体染色,四甲基罗丹明乙酯（Tetramethylrhodamine ethyl ester,TMRE）检测线粒体膜电位,Western blot检测PINK1和Parkin蛋白表达水平。结果：单纯Sal处理24 h对细胞活性、线粒体形态和MMP无影响（P〉0.05）。MPP＋（500μM）处理SH-SY5Y细胞24 h后,与正常组比较,细胞活性、MMP水平均降低,线粒体长度减短（P〈0.01）,并发生碎片化。Sal（25μM）预处理24 h可以显著抑制MPP＋诱导的细胞活性降低（P〈0.01）,并维持线粒体长度和增加MMP水平（P〈0.01）。而且,Sal（25μM）预处理24 h可以显著恢复MPP＋诱导的PINK1和Parkin蛋白表达水平下降（P〈0.01）。结论：体外实验证实Sal可以保护MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞活性降低、线粒体形态和功能异常,而PINK1-Parkin通路可能是其机制之一,为进一步临床开发Sal治疗PD的新药提供实验依据。叶酸-聚乙二醇-阿霉素连接物及其制剂稳定性研究
摘要：目的：考察叶酸-聚乙二醇-阿霉素连接物（FA-PEG-hyd-DOX）及其制剂在不同实验条件下的稳定性,为其开发应用奠定基础。方法：参照2010版《中国药典》二部附录XIXC《原料药与药物制剂稳定性试验指导原则》,将DOX、FA-PEG-hyd-DOX连接物原料及其冻干粉制剂置于高温、高湿、强光照环境中,不同时间对样品的DOX质量百分含量、熔点、外观性状等指标进行考察分析。结果：DOX在高温、高湿、强光照环境中放置10天后,DOX质量百分含量分别为31.95%、66.36%和61.27%,熔点分别为195℃、194℃和194℃。FA-PEG-hyd-DOX连接物在高温、高湿、强光照环境中放置10天后,DOX质量百分含量分别为2.71%、3.85%和3.14%,熔点范围分别为169-175℃、170-175℃和170-175℃。FA-PEG-hyd-DOX冻干粉制剂在高温、高湿、强光照环境中放置10天后,DOX质量百分含量分别为3.80%、5.76%和4.80%。结论：FA-PEG-hyd-DOX连接物原料的稳定性高于DOX,FA-PEG-hyd-DOX甘露醇冻干粉制剂的稳定性高于其原料药。激光辅助孵化对冻融第三天胚胎囊胚培养后移植结局的影响
摘要：目的：探讨实施激光辅助孵化对冻融的第三天胚胎进行囊胚培养后移植妊娠结局的影响。方法：回顾性分析冻融第三天胚胎行囊胚培养和移植的542例患者的临床资料,其中164例接受激光辅助孵化（LAH组）,378例没有进行激光辅助孵化（NLAH组）,比较两组患者的胚胎种植率、着床率、临床妊娠率及流产率。结果：LAH组和NLAH组患者的年龄、不孕年限、体重指数、解冻胚胎数目、存活胚胎数目、移植胚胎数目比较均没有显著性差异（P〉0.05）,LAH组的临床妊娠率高于NLAH组,流产率低于NLAH组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。LAH组中≤30岁患者的着床率和临床妊娠率均高于NLAH组中≤30岁患者,而流产率则较低;LAH组≤30岁,30~34岁以及〉34岁患者的流产率均分别低于NLAH组,但差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：激光辅助孵化并没有明显改善冻融第三天胚胎囊胚培养后移植的临床结局。米库氯铵用于全麻手术40例的临床分析
摘要：目的：观察米库氯铵分别复合七氟醚、丙泊酚用于全麻手术的肌松效果和安全性,以及对米库氯铵剂量的影响。方法：选择妇科手术患者40例,随机分为七氟醚组和丙泊酚组。诱导期单次静注米库氯铵,肌松开始恢复时开始泵注,手术结束前约20 min停药。记录诱导起效时间、无反应期,停止泵注米库氯铵后TOF比值恢复至25%、50%、75%、90%时间、恢复指数,维持期米库氯铵平均泵注速度、平均追加次数。结果：S组有2例、P组有1例出现轻度皮肤潮红,P组有1例插管时出现轻度呛咳,血压、心率未见明显异常,插管条件均满意。两组诱导起效时间、无反应期、恢复指数无统计学差异,停药后TOF比值恢复至25%、50%、75%、90%时间S组长于P组,差异有统计学意义。S组维持期米库氯铵平均泵注速度、平均追加次数小于P组,差异有统计学意义。结论：米库氯铵用于全麻诱导及维持,肌松满意,恢复迅速,安全性值得肯定。与丙泊酚相比,七氟醚对米库氯铵的需要量大约可以减少20%～30%,丙泊酚对米库氯铵剂量的具体影响有待进一步研究。股骨短缩截骨全髋置换术治疗青年Crowe Ⅳ型髋关节发育不良
摘要：目的：总结股骨短缩截骨结合全髋关节置换术治疗青年Crowe Ⅳ型髋关节发育不良（DDH）的近期疗效。方法：2009年1月至2015年1月期间我院收治的22例（24髋）青年Crowe Ⅳ型髋关节发育不良患者,其中男4例（5髋）,女18例（19髋）,年龄17～27岁,平均22岁。记录患者术前、术后髋关节功能Harris评分、髋关节疼痛VAS评分和下肢长度差异。收集患者临床及影像学资料。结果：22例患者均获随访,随访时间6～72个月,平均38个月。截骨端均骨性愈合,愈合时间3～6个月,平均3.2个月。Harris评分由术前（43.2±2.7）分改善至（95.3±2.8）分,效果显著（P〈0.01）,髋关节疼痛VAS评分由术前（6.0±1.0）分改善至（1.0±0.5）分,疼痛明显缓解（P〈0.05）,下肢长度差异由术前（55.5±15.5）mm减少至（16.5±5.5）mm,显著改善（P〈0.01）。术后2例合并坐骨神经麻痹,但6个月内症状完全缓解,6例遗留轻度跛行。随访期间均无假体翻修,未发现材料与宿主的生物相容性反应。结论：股骨短缩截骨全髋置换术治疗青年Crowe IV型髋关节发育不良的近期疗效满意,术中综合考虑软组织松解程度与短缩截骨方式及长度可有效的解决患者肢体短缩、避免神经血管损伤及改善患者术后髋关节功能。美国《化学文摘》（2014年）收录本刊入库论文1030篇
摘要：根据中国高校科技期刊研究会对外联络委员会、中国科学技术期刊编辑学会国际交流工作委员会国际检索系统咨询部（http：//www.cessp.org.cn/ch/index.aspx）日前所公布的统计结果显示,2014年美国《化学文摘（网络版）》共收录本刊《现代生物医学进展》论文入库1030篇,糖尿病患者的MPV、脂联素水平与冠心病的关系
摘要：目的：研究糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）患者血小板体积（mean platelet volume,MPV）和血清脂联素水平与冠心病的关系。方法：选取研究对象共150例分为三组,其中101名糖尿病患者根据冠脉造影结果分为：A组（糖尿病合并冠心病组）共72人,B组（糖尿病非冠心病组）共29人。对照组为排除糖尿病且冠脉造影正常者共49人。入院次日检测空腹血常规（含MPV）,应用ELISA法检测各组血清脂联素水平。应用Gensini评分系统评估冠状动脉的狭窄程度。结果：A组和B组的脂联素水平均低于对照组（P〈0.05）,且A组脂联素水平低于B组（P〈0.05）。A组与B组MPV水平均高于对照组（P〈0.05）,且A组MPV水平高于B组（P〈0.05）。相关性分析显示Gensini评分与脂联素水平负相关（r=-0.59,P〈0.001）,Gensini评分与MPV正相关（r=0.56,P〈0.001）。结论：脂联素、MPV与糖尿病合并冠心病的发生显著相关,而脂联素可能通过拮抗糖尿病患者血小板活性程度,延缓心血管并发症的发生。缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚的疗效及对心功能的影响
摘要：目的：通过探讨缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者的疗效及对心功能的影响,为临床治疗提供依据。方法：选择2010年1月~2014年12月我院收治的高血压伴左心室肥厚患者共120例,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组。对照组患者给予氨氯地平,观察组患者缬沙坦联合氨氯地平治疗,治疗6个月后,观察两组患者舒张压（DBP）、收缩压（SBP）、心率（HR）、室间隔厚度（IVST）,左室后壁厚度（LVPWT）、左室舒张末期内径（LVDd）和左室重量指数（LVMI）。结果：治疗后,两组患者SBP、DBP和HR均较治疗前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者SBP、DBP和HR均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后,两组患者IVST、IVPWT、LVDd和LVMI均较治疗前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者IVST、IVPWT、LVDd和LVMI均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者,能够降低患者血压、逆转左心室肥厚,改善患者心功能,疗效优于氨氯地平单独治疗,值得临床推广应用。活血化瘀通络法联合针刺治疗对糖尿病下肢血管病变的影响
摘要：目的：探讨活血化瘀通络法联合针刺辅助治疗对糖尿病下肢血管病变（DLEAD）影响。方法：收集我院DLEAD患者90例,随机分为实验组1、实验组2和对照组。对照组予DLEAD基础治疗。实验组1在对照组基础上予以活血化瘀法中药治疗。实验组2在实验组1基础上加针刺治疗。对三组患者治疗前、治疗后进行FBG、P2h BG、Hb Alc测定,血清IL-6、ET-1水平测定及PAg T%、踝肱指数ABI测定。结果：1治疗后三组FBG、P2h BG、Hb Alc均下降,两组实验组较对照组均改善更明显,且实验组2下降更明显,差异有统计学意义（P〈0.05）;2治疗后三组IL-6、ET-1及PAg T%均下降,两组实验组均比对照组改善更明显,实验组2下降更明显,差异有统计学意义（P〈0.05）;3治疗后三组ABI均有所改善,两组实验组均更明显改善,且实验组2 ABI上升更明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：活血化瘀联合针刺治疗,可调节血清IL-6、ET-1水平,降低PAg T%,改善ABI,可有效提升DLEAD患者临床疗效,改善其预后,对提高患者生活质量有重要意义。三种药物联合治疗假丝酵母菌性阴道炎的临床疗效评价
摘要：目的：研究克霉唑阴道片、硝夫太尔制霉素阴道软胶囊联合定君生栓治疗复发性假丝酵母菌性阴道炎的临床疗效,为临床治疗提供依据。方法：选取2014年9月到2015年6月我院就诊的复发性假丝酵母菌性阴道炎患者60例,按照随机数字表法将患者分为实验组和对照组,每组30例,实验组给予克霉唑阴道片、硝夫太尔制霉素阴道软胶囊联合定君生栓治疗,对照组给予克霉唑阴道片和定君生栓治疗,治疗前检测所有患者病原菌分布情况,治疗后随访3个月,分析两组临床疗效和不良反应。结果：细菌培养结果共分离出158株假丝酵母菌,其中白色假丝酵母菌最多,占66.46%;实验组总有效率为93.33%,显著高于对照组的76.67%,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;两组不良反应发生率比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：克霉唑阴道片、硝夫太尔制霉素阴道软胶囊联合定君生栓治疗复发性假丝酵母菌性阴道炎具有较好的临床疗效,且无明显不良反应。血液透析联合血液透析滤过对患者营养及微炎症指标的影响
摘要：目的：探讨血液透析（HD）联合血液透析滤过（HDF）对维持性血液透析（MHD）患者营养及微炎症指标的影响。方法：选择2005年12月到2014年12月在我院接受治疗的140例MHD患者,随机分为HD组（n=70）和HD＋HDF组（n=70）。比较两组患者治疗前后营养不良-炎症评分（MIS）、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素6（IL-6）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PA）、血红蛋白（Hb）、握力（HS）、肱三头肌皮褶厚度（TSF）的变化。结果：治疗后,HD＋HDF组患者MIS明显降低,ALB、PA、Hb、HS、TSF明显升高（均P〈0.05）,且各指标改善程度均优于HD组（均P〈0.05）;治疗后,HD＋HDF组患者相比于治疗前和HD组治疗后,CRP、IL-6明显降低（均P〈0.05）。结论：HD联合HDF较单纯HD能更好的改善患者营养状态,减轻微炎症反应。
