乳酸堆积和二氯乙酸钠对肝癌细胞凋亡及bax、bcl-2表达和caspase-3活性的影响
摘要：目的：探讨乳酸堆积和二氯乙酸钠（OCA）对肝癌细胞（HepG2）凋亡和bax、bcl-2表达及caspase-3活性的影响。方法：通过体外培养HepG2，建立稳定的体外培养模型，配制成终浓度分别为0mmol／L、1．0mmol／L、2．0mmol／L、4．0mmol／L、8．0mmol／L的乳酸培养液以及在不同浓度乳酸组中加入终浓度为10^-3mmol／LDCA培养液与HepG2共同培养，其中以0mmol／L乳酸组为对照组。采用MTT法检测乳酸对HepG2的抑制率，流式细胞仪检测乳酸和DCA对HepG2的凋亡百分率，用Real-time PCR法测定bax及bcl-2mRNA的表达，用免疫荧光法检测caspase-3的活性。结果：乳酸对HepG2的IC50值为13．6mol／L，与对照组比较，随着乳酸浓度的增加，HepG2凋亡率增加，baxmRNA表达升高，bcl-2mRNA的表达降低，caspase-3活性增加，其中1．0mmol／L乳酸组与对照组比较（P〉0．05），2．0mmol／L，4．0mmol／L和8．0mmol／L乳酸组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。加入DCA后．HepG2凋亡减少，2．0mmol／L乳酸＋DCA组、4．0mmol／L乳酸＋DCA组、8．0mmol／L乳酸＋DCA组与同浓度的乳酸组比较，baxmRNA表达减少（P〈0．05），bcl-2mRNA表达增加（P〈0．05），caspase-3活性减低（P〈0．05）。结论：乳酸可诱导HepG2凋亡，且随着乳酸浓度的增高，HepG2的凋亡率增加，其机制可能是通过对bcl-2及baxmRNA表达的改变以及激活caspase-3活性而实现，DCA可以降低HepG2凋亡，对乳酸堆积造成的HepG2凋亡有抑制作用。幼龄犬髁突囊外损伤对髁突及下颌骨生长发育的影响
摘要：目的：研究幼龄犬髁突不同形式的囊外损伤对髁突局部及下颌骨生长发育的影响。方法：20只6月龄中华田园犬随机分为五组，除空白对照组外。分别建立幼龄犬单侧髁突颈部骨折、髁突颈部骨折后内固定、髁突颈部骨膜损伤及髁突颈部骨皮质损伤四种动物模型，饲养12w及24w后通过头颅CT三维重建测量的方法观察其对下颌骨对称性及生长量的影响，并通过组织学染色观察髁突局部生长中心的微观改变。结果：①仅单侧髁突颈部骨折组在损伤早期对下颌骨及髁突发育产生了影响，使损伤侧髁突颈部形态变短变粗，下颌骨长度也较对侧减小，但髁突及颈部的局部适应性改建会逐渐抵消这些影响，24w时下颌骨已不存在骨性不对称，但功能性原因仍能导致颏点出现向患侧的偏斜。②其余三种损伤形式在实验设定的观察期内对髁突及下颌骨的生长发育影响不犬，但单侧髁突颈部骨折后内固定组在24w时也出现了下颌骨的功能性偏斜。③各种损伤形式对髁突及下颌骨生长发育的远期影响有待进一步实验证实。结论：生长发育期犬髁突囊外损伤对髁突及下颌骨生长发育的影响不大。HAV病毒液的3种浓缩方法比较
摘要：目的：对HAV病毒液的3种常见浓缩方法进行分析比较，为HAV病毒研究及规模化疫苗生产提供参考。方法：使用MILLIPOREPELLICON超滤、PEG6000沉淀、蔗糖．甘油垫三种方法对纯化HAV病毒液进行浓缩，用ELISA方法对浓缩液进行抗原滴度检测，计算不同浓缩方法的回收率。结果：HAV病毒液经过7次超滤循环浓缩，平均回收率为86％；PEG浓缩方法回收率平均72．5％；蔗糖．甘油离心浓缩方法平均回收率53．3％。结论：蔗糖／甘油超离心法，集纯化浓缩一体，适用于样品量较少，需要高浓度样品的试验；PEG浓缩得率适中，操作简单，应用范围较广；超滤膜浓缩在大规模疫苗生产或样品量较大时适用，但需控制样品浓度及浓缩倍数不能太高。以免样品损失。齿状突几何参数、骨密度与生物力学性质的相关性研究
摘要：目的：齿状突骨折是颈椎的严重损伤，其中大部分需要行前路螺钉内固定术治疗，齿状突的几何参数对螺钉的选择起决定性作用，其骨密度则影响螺钉对骨质的把持力，齿状突固有的生物力学性质对齿状突骨折固定效果进而对骨折愈合有较大影响，基于以上考虑，本课题分析并比较了几何参数、骨密度与生物力学性质的相关性，评价其指导临床应用的意义。方法：将15例经福尔马林浸泡的国人枢椎标本剔除周围软组织，分别测量并分析各个标本的几何参数、骨密度以及扭转刚度、剪切刚度、拉伸刚度等生物力学性质的特点，并比较它们之间的相关性。结果：齿状突为一椭球形结构，难以容纳两枚内固定螺钉，齿状突的几何参数、骨密度和生物力学性质之间没有相关性。结论：临床上在对齿状突骨折采用螺钉内固定前需要了解齿状突的解剖结构并据此选取适当尺寸的螺钉，应根据齿状突基底部的横径选择螺钉的直径，根据基底部到前唇的距离选择螺钉光滑段的长度，根据枢椎高度选择螺钉长度，齿状突的几何参数、骨密度和齿状突的生物力学性质之间并无相关性，并不能根据齿状突几何参数、骨密度来预测其生物力学强度进而预测内固定的初始稳定性。FOXO3a过表达对内皮祖细胞周期相关蛋白的调控
摘要：目的：观察FOXO3a（forkhead box O3a）的活性改变对内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）增殖和细胞周期相关蛋白表达的影响。方法：将携带突变激活FOXO3a基因的腺病毒载体Ad-TM（triple mutant）-FOXO3a和阴性对照腺病毒载体Ad-GFP体外感染人脐血来源的EPCs。观察EPCs形态学改变，CCK-8分析转染后EPCs增殖情况，Western blot检测FOXO3a蛋白、细胞周期相关蛋白p27^kip1以及CDK2的表达水平。结果：构建了的2种腺病毒相关载体被成功转染。形态学改变方面，Ad-TM—FOXO3a组EPCs细胞生长缓慢，集落不明显；Westem blot和CCK-8结果显示，Ad-TM—FOXO3a转染组与阴性对照组相比，EPCs增殖被抑制，FOXO3a与p27^kip1蛋白过表达，CDK2表达下调。结论：FOXO3a可能通过上调p27kip1蛋白表达，下调CDK2表达，以抑制EPCs增殖。甲胎蛋白异质体分离方法的优化
摘要：目的：优化现有的甲胎蛋白异质体（AFP-L3）分离和检测方法，找到一个最有效的AFP-L3的提取方法，为今后的AFP—L3研究奠定前期基础。方法：应用北京热景生物技术公司的甲胎蛋白异质体（AFP—L3）亲和吸附离心管，通过改变亲和介质使用量和洗脱液体积的配伍梯度变化来优化实验流程，排除提取AFP-L3的影响因素，分离血清中的AFP—L3，并用罗氏公司的甲胎蛋白检测试剂盒检测分离的效果。结果：发现在不改变亲和介质体积的情况下，随着洗脱液体积的减少AFP-L3回收浓度逐渐增加，且在75ul洗脱液时能够获得最高AFP-L3回收浓度。结论：成功地优化了北京热景生物技术公司的甲胎蛋白异质体（AFP—L3）亲和吸附离心管及其配套试剂的使用方法。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978—7．117—13344—9／R·13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。表达CD19^＋CD56^-的多发性骨髓瘤浆细胞免疫表型的鉴别
摘要：目的：研究多发性骨髓瘤患者浆细胞和对照组正常浆细胞免疫表型，有效地识别表达CD19^＋CD56^-的多发性骨髓瘤恶性浆细胞。方法：采用四色流式细胞仪（BD，FACSCalibur）检测44例MM患者浆细胞以及25例健康骨髓捐献者正常浆细胞膜上的抗原表达。采用CellQuest软件分析结果。细胞膜表面抗原表达率大于20％定义为表达阳性。阳性率为表达阳性的患者及健康对照者所占百分比。结果：44例MM患者浆细胞免疫表型表达频率为：CD^138＋;97．72％（43／44）、CD38^＋：100％（44／44）、CD56^＋：63．64％（28／44）、CD19：84．09％（37／44）、CD200^＋：77．27％（34／44）、CD28^＋：38．64％（17／44）；25例对照组正常浆细胞免疫表型表达频率为：CD138^＋：100％（25／25）、CD38^＋：100％（25／25）、CD56^＋-：100％（25／25）、CD19^＋：96％（24／25）、CD200^＋：0％（0／25）、CD28^＋：0％（0／25）。在44例MM患者中，9％（4／44）患者表达CD19^＋CD56^-，利用CD200检测4例表达CD19^＋CD56^-的患者，有3例患者伴有CD200阳性表达，可与正常浆细胞鉴别。结论：CD200有利于鉴别表达CD19＋CD56-MM恶性浆细胞与正常浆细胞。人结合珠蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和鉴定
摘要：目的：克隆人结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）cDNA，并在大肠杆菌中表达和鉴定。方法：从Hela细胞中分离总RNA，采用RT-PCR方法获得人Hp cDNA，分别克隆至原核表达载体pET-32a和PGEX-4T-1，转化至大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达，并进行SDS—PAGE及Western blot鉴定。结果：成功构建了高效原核表达质粒PET-32a-Hp和PGEX-4T1-Hp；Western印迹结果表明，经IPTG诱导，在大肠杆菌中表达了分子量约30kD和37kD的目的蛋白；表达产物经Ni2^＋-NTA离子交换树脂纯化，纯度〉90％。结论：在E．coli成功表达和纯化了人Hp融合蛋白，为进一步开发人Hp诊断试剂打下基础。福尔马林致痛对大鼠降钙素基因相关肽的影响
摘要：目的：研究福尔马林致病后大鼠脊髓和背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）内降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）的时空变化规律，为探讨CGRP在伤害性信息传递中的机制和作用提供实验依据。方法：选取健康成年正常SD大鼠54只随机分为生理盐水对照组和福尔马林实验组；实验组为右侧足底皮下给予0．1mL5％福尔马林后，分别存活15min、30min、1h、3h、6h、12h、24h和72h（n=6），免疫组化结合图像分析技术观测CGRP在脊髓腰段及L4～6DRG的表达变化。结果：正常DRG、脊髓前角和后角内CGRP有一定的基础表达。福尔马林致病后3hDRG的CGRP表达上升，12h～24h迭峰值，72h基本降低到正常；福尔马林致痛后6h脊髓后角CGRP的表达上调，24h达到高峰，72h降低至正常；脊髓前角CGRP未见明显变化。结论：福尔马林致痛引起DRG和脊髓的CGRP的表达呈现一定的时空模式，可能是其参与伤害性信息传递的机制之一。胰高血糖素样肽l对脂多糖诱导的血管内皮细胞炎性反应的影响
摘要：目的：探讨胰高血糖素样肽1（glucagon like peptide 1，GLP-1）对脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）诱导的血管内皮细胞（VEC）炎性反应的影响。方法：以体外培养的人动脉VEC为研究模型，将细胞分为四组（对照组、LPS刺激组、LPS±GLP-1组、GLP-1组），Rhodamin-Phalloidin检测肌动蛋白骨架F-actin分布，用苏木素-伊红（HE）染色观察细胞间连接的形态特征，用示踪剂Rhodamine Bisothiocyanate-Dextran检测VECs单层通透性变化改变，酶联免疫吸附实验检测细胞分泌白介素（IL）-6和IL-8的变化。结果：GLP-1（100nM）可减少LPS（1μg／mL）刺激后细胞肌动蛋白骨架F-actin应力纤维的形成，并抑制LPS刺激后细胞间连接的中断。Rhodamine B isothiocyanate-Dextran细胞通透性检测结果显示：GLP-1可明显降低LPS刺激引起的VEC通透性增加[由（2．57±0．19）×10^-5cm／s降至（2．10±0．18）×10^-5cm／s，P〈0．05]。此外，GLP-1可抑制LPS刺激后VEC中炎性细胞因子IL-6和IL-8的表达[分别由（42130±6522）pg／ml降至（27478±5096）pg／ml和（18376±1561）pg／ml降至（14414±927）pg／ml，均P〈0．05]。结论：GLP-1可对抗LPS刺激引起的VEC炎症反应和细胞通透性增加．改善LPS诱导的内皮细胞炎性损伤。硫胺素、核黄素和烟酰胺对大鼠体重增长及脂代谢影响的实验研究
摘要：目的：B族维生素以辅酶的形式参与糖、脂肪和蛋白质代谢，本文观察硫胺素、核黄素和烟酰胺补充对高脂饲料诱导大鼠肥胖的影响。方法：采用预防肥胖模型法，2×2×2析因设计分为8组：高脂对照组（F0组），高脂＋硫胺素（F1组），高脂＋核黄素（F2组），高脂＋烟酰胺（F3组），高脂＋硫胺素＋核黄素（F4组），高脂＋硫胺素＋烟酰胺（F5组），高脂＋核黄素＋烟酰胺（F6组），高脂＋硫胺素＋核黄素＋烟酰胺（F7组），每组12只大鼠，给予高脂饲料喂养，同时硫胺素（100mg／kgbw／d）、核黄素（100mg／kgbw／d）、烟酰胺（250mg／kgbw／d）灌胃，另设正常对照组（C组）12只，普通饲料喂养，自来水灌胃，15周后，分析其体重、摄食量、体脂重量、血脂等实验前后的变化情况及各组动物之间的差别。结果：经过15周喂养后，高脂喂养大鼠体重比正常对照组平均增加了15．7％；而补充烟酰胺（F3）及联合硫胺素（F5）或核黄素（F6）以及三者联合补充（F7）组高脂喂养大鼠与高脂对照组（F0）相比，体重分别降低了35．0％，30．0％，30．1％和30．6％（P值均小于0．05）；甚至比正常对照组大鼠平均体重分别下降了22．8％，17．0％，17．0％和17．7％（P值均小于0．05）；而补充核黄素或和硫胺素组大鼠体重没有明显增加或降低（P值均大于0．05）。血脂分析结果显示高脂喂养并联合补充核黄素或／和烟酰胺和／或硫胺素组大鼠血清CHOL和LDL水平明显低于高脂对照组；而高脂喂养并联合补充烟酰胺（F3）及联合硫胺素（F5）或核黄素（F6）以及三者联合补充（F7）组大鼠LDL／HDL比值分别0．29、0．26、0．25和0．26，明显低于F0组的0．37（P值均小于0．05）。结论：大剂量烟酰胺可有效地调节血脂水平和控制肥胖大鼠的体重增长，而核黄素及硫胺素对控制肥胖大鼠脑创伤后caspase-3的过度表达与细胞凋亡的关系
摘要：目的：探讨大鼠脑创伤后海马神经组织中casepase-3表达及其在细胞凋亡中的机制。方法：雄性Wistar大鼠72只随机分成对照组和创伤组。用Marmarou方法造成大鼠重型弥漫性颅脑创伤，采用免疫组织化学检测海马CA1区神经细胞casepase-3蛋白表达情况，原位细胞DNA断裂检测末端标记（TUNEL）法观察大鼠海马CA1区神经细胞凋亡动态变化。同时行TUNEL与caspase-3双标染色。结果：对照组海马区神经细胞casepase-3未见明显表达，创伤组海马CA1区神经细胞casepase-3表达在伤后3小时开始升高，伤后3天达高峰（P〈0．01），伤后7天下降明显。对照组海马区未见TUNEL阳性细胞，创伤组海马区TUNEL阳性细胞伤后3小时开始增多，伤后3天达高峰（P〈0．01），伤后7天下降。可见创伤组TUNEL染色与caspase-3免疫染色双标阳性的细胞伤后6小时细胞数量逐渐增多，于伤后3天达高峰（P〈0．01），伤后7天双标阳性细胞数量下降。Casepase-3表达与TUNEL阳性细胞明显相关（P〈0．01）。结论：大鼠脑创伤后casepase-3的过度表达是影响大鼠脑创伤后神经细胞凋亡原因之一，抑制casepase-3活性表达对神经组织起保护作用。颞部Gillies切口在颧骨复合体骨折手术中的应用
摘要：目的：颞部Gillies切口在颧骨复合体骨折手术中的应用效果。方法：运用颞部Gillies切口治疗25例病人颧骨复合体骨折，观察手术进路，显露术区，在直视下行颧骨骨折复位内固定术。结果：25例患者应用此术式均可显露骨折区域，满足颧骨复合体骨折的手术显露需要，而且与常规颧骨复合体骨折（头皮冠状切口）手术相比，减小了出血及损伤神经的可能。结论：颞部Gillies切口在颧骨复合体骨折手术中优于其它手术路径，值得临床推广。非索非那定治疗变应性鼻炎的随机对照试验的Meta分析
摘要：目的：评价非索非那定治疗变应性鼻炎的疗效及其安全性。方法：计算机检索SCI，Pubmed，Elsevier，Cochrane图书馆，知网，万方数据库，维普数据库中关于非索非那定治疗变应性鼻炎的随机对照试验，同时追索纳入文献的参考文献。检索年限均从建库检索到2013年12月。由两名评价员独立筛查文献，对纳入的文献进行质量评价并提取文献，对符合质量标准的随机对照试验（RCT）进行Meta分析，比较非索非那定组和安慰剂组鼻部症状评分、血清中白三烯浓度、生活质量评价、症状改善率和安全性评估。统计学分析采用RevMan5．2软件。结果：共纳入9个RCT。患者口服非索非那定片30mg／d，120mg／d，180mg／d后可有效改善变应性鼻炎患者的症状，可降低患者鼻部症状评分、血清中白三烯浓度；有效提高生活质量，降低患者总的生活质量评分（P均〈0．05）。非索非那定不良反应的发生率与安慰剂组相似，不良反应发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：患者口服非索非那定片30mg／d，120mg／d，180mg／d后可以有效缓解患者的症状，改善患者的生活质量，且不良反应发生率与对照组相近。基于非索非那定较好的有效性和安全性，故可以广泛应用于临床，更加有效的缓解变应性鼻炎患者的症状。大肠息肉的危险因素分析
摘要：目的：探讨大肠息肉在人群中的年龄、性别、病理类型的分布，并探讨体质量指数、吸烟饮酒、血脂水平、相关疾病、饮食习惯及运动状况对大肠息肉发生的影响。方法：选择2011年4月至2013年4月在海军总医院进行电子结肠镜检查的542例患者，将结肠镜检查发现大肠息肉并住院治疗的患者纳入息肉组，将内镜检查无明显异常的患者纳入对照组。比较两组患者的体质量指数、吸烟饮酒、血脂水平、相关疾病、饮食习惯及运动状况等。结果：大肠息肉人群中男性多于女性，40岁以上高发，超重及肥胖者达55．56％；经常饮酒、较少进食蔬菜、水果、粗纤维食物、运动量少及患有高脂血症、高血压、糖尿病、脂肪肝、胆系疾病者易发大肠息肉。结论：高体质量指数、吸烟、高血脂水平、相关疾病、不良饮食习惯、运动量小是大肠息肉发生的危险因素。益生菌治疗结肠癌患者术后化疗相关性腹泻的效果观察
摘要：目的：探讨益生菌对结肠癌术后患者化疗相关性腹泻（CID）的治疗效果，为临床提供依据。方法：选择我院2011年1月-2013年6月结肠癌术后化疗并有CID患者85例，根据治疗方法分为对照组和观察组，其中对照组41例，按照常规治疗，观察组44例，在对照组基础上应用益生菌治疗；观察指标主要为患者平均腹泻持续时间、腹泻治疗效果以及不良反应。结果：观察组总有效率为93．18％（41／44），高于对照组78．05％（32／41）（P〈0．05）；观察组腹泻持续时间为2．91±0．17d，低于对照组4．86±0．24d（P〈0．05）；两组治疗后不良反应比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：采用益生菌可以缩短CID持续时间，提高疗效，改善患者生活质量。甲状腺次全切除术与甲状腺全切除术治疗结节性甲状腺肿的疗效对比分析
摘要：目的：研究申状腺次全切除术与甲状腺全切除术治疗结节性甲状腺肿的临床疗效。方法：选取2011年1月至2012年12月我院收治的84例结节性甲状腺肿患者，随机分为甲状腺次全切除术组（A组）和甲状腺全切除术组（B组），比较分析两组患者围手术期指标、治疗效果及并发症发生情况。结果：A组镇痛剂使用量、手术时间、术中出血量及住院时间少于B组，差异有统计学意义（P〈0．05）。A组和B组有效率差异无统计学意义（P〉0．05），A组复发率高于B组，差异有统计学意义（P〈0．05）。并发症发生率A组低于B组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：甲状腺次全切除术与甲状腺全切除术治疗结节性甲状腺肿疗效相似，甲状腺次全切除术复发率更高，但并发症发生率更低。
