壳聚糖介导CrmA基因治疗小鼠肝纤维化的研究
摘要：目的：探讨壳聚糖介导的CrmA对小鼠肝纤维化的治疗效果，以期为肝纤维化的基因治疗提供实验基础。方法：清洁级的75只雄性小鼠随机分为正常组、模型组、壳聚糖介导的CrmA组、壳聚糖介导的空载体组、壳聚糖组，每组15只。应用30％四氯化碳橄榄油溶液3ml／kg腹腔注射制备肝纤维化小鼠模型。治疗8周后，眼眶取血，检测血清的肝功能指标，并取肝组织做HE染色，观察各组小鼠肝脏的病理形态，Real TimePCR检测肝组织IL-1β、α-SMA、TGF—β1、TIMP-1表达量。结果：与模型组小鼠相比，壳聚糖介导的CrmA组小鼠的肝纤维化程度减轻，ALT、AST显著降低（P〈0．01），肝组织IL-1β、α-SMA、TIMP1、TGF-β1的表达明显减少（P〈0．05），而模型组、壳聚糖介导的空载体组和壳聚糖组均无显著性差异。结论：壳聚糖介导的CrmA能有效减轻肝纤维化小鼠的肝脏损伤和纤维化程度，为基因治疗肝纤维化提供了一种潜在的新思路和方法。抗IFITM1单克隆抗体的制备及检测
摘要：目的：制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1（interferon-induced transmembrane protein 1，IFITM1）的单克隆抗体，为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法：以结肠癌患者的癌组织为材料，提取总RNA，以RT—PCR扩增得到IFITM1 cDNA序列，经EcoR 和HindⅢ双酶切后，克隆入pGEX-4T-3进行原核表达并纯化得IFITM1-GST；以该融合蛋白免疫BALB／c小鼠，淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体；采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果：成功构建了1FITM1核表达载体，获得了IFITM1-GST重组蛋白；制备得到了1株抗IFITM1单克隆抗体，腹水ELISA效价为1：30000，抗体亚类为IgG1，可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论：获得了1株可用于ELISA、Westem-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1单克隆抗体2F—1，为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978—7．117．13344—9／R·13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。中药降脂方与阿托伐他汀代谢性相互作用的体外研究
摘要：目的：本研究旨在评估降脂中药复方2（Fang-2）及其6个饮片（虎杖、泽泻、甘草、苍术、厚朴和夏枯草）的水提物对肝脏细胞色素CYP3A4的抑制作用，及对阿托伐他汀的代谢性药物相互作用。方法：（1）应用中药标准化制备技术，制备降脂中药复方2及其6个饮片的水提物；采用超速离心法制备肝微粒体。（2）评价降脂中药复方2及其饮片对CYP3A4抑制作用。（3）评价降脂中药复方2及其饮片的水提物对阿托伐他汀的代谢的影响。结果：（1）体外实验的结果提示复方2的水提物显著地抑制了微粒体CYP3A4的活性，其IC50值为9．884mg／mL。虎杖水提物对微粒体CYP3A4的活性具有显著的抑制作用，其IC50值为0．5491mg／mL。（2）阿托伐他汀是首过代谢CYP3A4的底物，在肝脏微粒体中大于70％的母体被代谢，其体外清除率Clint和半数清除时间分别为41．10mL／mg／min和60．43分钟。降脂中药复方2水提物与肝微粒体孵育后，阿托伐他汀的首过代谢显著减慢。降脂中药复方2及其6个饮片水提取物对CYP3A4的抑制强度与避免阿托伐他汀首过代谢的潜力成正比。结论：本文首次应用体外方法研究了在临床上共同使用与PCI术后的阿托伐他汀和降脂中药复方2之间的代谢性相互作用，揭示了后者及其饮片通过抑制CYP3A4改善了前者的强烈的首过代谢，从而可能优化临床治疗方案。SIRT1过表达慢病毒稳转细胞系的构建及其对脂肪合成的影响
摘要：目的：通过油红O及BODIPY染色选取脂肪代谢理想的细胞模型，并运用高内涵仪器检测SIRT1高表达细胞系中脂肪的变化。方法：在L-02、HepG2、Huh7细胞中进行油红O和BODIPY染色，观察在不同油酸浓度下脂滴的生成情况；将构建成功的SIRT1过表达慢病毒载体GV166．SIRT1及空载体病毒GV166．Control感染L．02细胞，qPCR及Western．Blot检测感染细胞中SIRT1的表达水平；高内涵系统检测L-02SIRT1和L-02control细胞系产生的脂滴荧光强度，以确定油酸诱导的最佳浓度及最佳刺激时间。结果：通过油红O及BODIPY染色发现L-02细胞更适宜作为脂肪代谢的细胞模型；成功构建SIRT1过表达慢病毒载体GV166-SIRT1及空载体病毒GV166．Control，qPCR及Western．Blot检测显示转染病毒后SIRT1在细胞中的表达水平明显升高；在油酸刺激浓度0．4mM、诱导时间12h时，L-02SIRT1细胞中脂滴的荧光强度明显较L．02control为低。且这种差异达到最大化。结论：成功建立SIRT1过表达稳定转染细胞系，并证明高表达SIRT1能够抑制脂肪合成。大鼠酒精躯体依赖及动机行为研究
摘要：目的：诱导大鼠产生酒精依赖，观察大鼠产生的躯体依赖及行为学改变。方法：20只雄性SD大鼠，其中饮酒组和对照组各10只。通过6％（v／v）酒精溶液作为饮酒组大鼠唯一饮水来源共28d，测量血酒精浓度。根据旷场行为、戒断症状和强迫游泳等方法来判断是否成功诱导大鼠产生酒精躯体依赖及动机行为改变。结果：整个实验过程饮酒组大鼠血酒精浓度没有发生明显变化。饮酒组大鼠旷场测试中水平活动量在饮酒第7d比对照组显著降低（P〈0．05）；垂直活动量在饮酒第7、14d比对照组显著降低（P〈0．05）；饮酒组大鼠戒断2-48h酒精戒断评分均显著高于对照组（P〈0．01）且评分在戒断第6h最高；戒断24、48h的大鼠在强迫游泳中绝对不动时间比对照组显著延长（P〈0．05）。结论：大鼠持续饮用6％（v／v）浓度酒精溶液可以诱导出大鼠对酒精的严重躯体依赖和抑郁状态，并抑制大鼠在新奇环境中的活动能力和动机行为。NDRG2通过调控CD24影响肝癌细胞侵袭能力的研究
摘要：目的：阐明NDRG2（N-Myc downstream-regulated gene2）在肝癌细胞中对CD24的调控及其对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法：Western blot检测低转移性的肝癌细胞Huh7、高转移性的肝癌细胞系MHCC97h及正常人肝细胞系L-02中NDRG2和CD24的表达；通过腺病毒载体上调MHCC97h细胞中NDRG2的水平，或利用siRNA下调Huh7细胞中NDRG2的表达，检测CD24的变化以及细胞侵袭能力的改变。结果：MHCC97h细胞中NDRG2基因和蛋白的表达水平低于Huh7细胞，而CD24的表达水平高于Huh7细胞；在MHCC97h细胞中上调NDRG2可以抑制CD24的表达并抑制其侵袭能力，而在Huh7细胞中下调NDRG2的表达可以提高CD24的水平及细胞的侵袭能力。结论：NDRG2可能通过影响CD24参与调控肝癌细胞的侵袭能力。胆囊收缩素及受体基因多态性与精神分裂症的相关性研究
摘要：目的：探讨胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）基因、胆囊收缩素A受体（cholecystokininAreceptor。CCKAR）基因和胆囊收缩素B受体（cholecystokinin A recepmr，CCKBR）基因多态性与精神分裂症之间的相关性。方法：采用聚合酶链式反应．限制性片段长度多态性方法，对420例精神分裂症患者（病例组）和455例健康个体（对照组）三个基因的6个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNPs）位点（rs11571842、rs13069836、rs1800908、rs1800857、rs1042047、rs4758092）的多态性进行检测。并比较两组人群中基因型和等位基因频率分布的差异。结果：对照组6个SNPs位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinbere平衡（P〉0．05）；CCKAR基因rs1800857位点基因型频率分布在精神分裂症组与正常对照组间存在显著性差异（P〈0．000），病例组T等位基因频率显著高于对照组（P〈0．01）。结论：CCKAR基因多态性与精神分裂症相关，携带T等位基因的个体可能更容易患精神分裂症。睡眠剥夺对大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的影响
摘要：目的：颞下颌关节紊乱病是口腔科的一种常见病和多发病，精神心理因素是颞下颌关节紊乱病的一个主要病因。本文通过观察睡眠剥夺对大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的影响，探讨睡眠剥夺在颞下颌关节紊乱病发病中的作用。方法：35只Wistar大鼠，随机分为5组：睡眠剥夺1d组、5d组、9d组、正常对照组和大平台对照组。采用改良多平台睡眠剥夺法（modified multiple plat—formmethod，MMPM）建立大鼠SD模型，观察大鼠行为学及咀嚼肌肌电图的变化。结果：睡眠剥夺1d组和5d组在旷场实验水平得分和垂直得分上均高于对照组，而睡眠剥夺9d组均低于对照组；睡眠剥夺1d、5d和9d组在松弛状态和紧咬状态时颞肌前后束及咬肌的电位均明显高于对照组，且两侧无明显差别，同时，睡眠剥夺组双侧颞肌和咬肌的肌电图静息期较对照组显著延长。结论：睡眠剥夺可使大鼠行为学发生改变并对咀嚼肌肌电图造成影响，这可能是颞下颌关节紊乱病的病因之一，为我们对颞下颌关节紊乱病的预防和治疗提供了一定的理论指导。肺癌脑转移型A549／GFP-2细胞的筛选及其条件液对脑微血管内皮细胞的作用
摘要：目的：建立肺癌脑转移模型，筛选脑转移倾向细胞A549／GFP-2，探讨A549和A549／GFP-2条件液对脑微血管内皮细胞的作用，揭示肺癌脑转移的机制。方法：利用胸腔原位注射法筛选出A549脑转移细胞亚型A549／GFP-2，原代培养大鼠脑微血管内皮细胞，观察A549和A549／GFP-2细胞条件液对脑微血管内皮细胞增殖的影响和细胞内HIF-1α和VEGF表达的改变。结果：胸腔内原位种植较好地反应了临床肺癌脑转移的过程。不同浓度的A549和A549／GFP-2细胞条件液对脑微血管内皮细胞增殖的影响不同，低浓度（〈30％）对脑微血管内皮细胞有促进的作用；高浓度（〉60％）对脑微血管内皮细胞的增殖有不同程度的抑制作用，且有随浓度增加抑制作用增强的趋势。A549和A549／GFP-2细胞条件液能提高脑微血管内皮细胞内HIF-1α和VEGF的表达。结论：胸腔内原位种植是建立肺癌脑转移的稳定模型。肺癌脑转移与肺癌细胞在生长过程中分泌的HIF-1α和VEGF等细胞因子破坏了脑微血管内皮细胞的结构有关。周期性张应力刺激下成肌细胞钙网蛋白的表达及变化
摘要：目的：检测成肌细胞钙网蛋白（CRT）在循环拉伸应力刺激下的表达变化。方法：体外构建面颌部成肌细胞力学刺激模型。加力组以0．5赫兹的加载频率和10％细胞拉伸变形幅度对细胞进行加力培养1h，6h，12h，24h，运用实时荧光定量PCR技术跟Westem Blot技术分别检测在周期性张应力作用下成肌细胞CRT在基因水平及蛋白水平的表达变化。结果：当对细胞加力6h后，CRTmRNA及蛋白表达量开始增多，加力12h后CRTmRNA及蛋白表达量到达最多（P〈0．01），加力0h组与加力12h组之间差异有显著的统计学意义（P〈0．01）。结论：持续的周期性张应力刺激下CRTmRNA及蛋白表达增加。NEDD4L基因变异体与内蒙古地区蒙古族人群中高血压的相关分析
摘要：目的：探讨内蒙古地区蒙古族人群中NEDD4L基因多态性位点rs4149601（G／A）突变与高血压的相关性。方法：应用病例对照方法研究包头地区蒙古族高血压病个体308例及蒙古族血压正常个体454例。检测所有个体舒张压，收缩压。使用TaqManPCR技术进行rs4149601多态基因分型。结果：rs4149601多态基因型及等位基因分布在GG基因型、GA基因型、AA等位基因的频率在高血压组及对照组分别为54．7％，92．8％；11．4％及56．2％；71．4％，7．9％。rs4149601多态基因型及等位基因分布与对照组差异有显著性。应用多元logistic回归分析对性别、年龄进行校正后发现rs4149601多态基因与高血压病患病风险相关。结论：上皮细胞钠通道亚单位基因多态性（rs4149601）同内蒙古地区蒙古族人群高血压病发病有关。肝门部胆管癌临床诊断与放疗疗效分析
摘要：目的：探讨不同手术方式治疗肝门部胆管癌的效果及其对术后放疗的影响。方法：回顾性分析我科自2008年6月至2012年6月间收治的60例肝门部胆管癌患者的临床资料，根据手术方式不同，将所选病例分为两组，其中26例接受根治性切除术，34例患者采用姑息性手术进行治疗。对比不同手术方式下放疗后患者生存情况。结果：围手术期死亡1例。两组患者各有2例患者失访。随访的23例根治手术患者1、3、5年间的生存率为19（82．6％）、10（43．5％）、2（8．7％）；32例姑息性手术患者1、3、5年间的生存率为15（46．9％）、4（12．4％）、0（0％）。根治性手术后患者1、3、5年间的生存率显著性高于姑息性手术治疗的患者，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：通过术前影像学诊断，选择合理的手术方式，联合术后放疗，可有效延长肝门部胆管癌患者的生存时间。多种无创检查组合在冠心病诊断中的价值
摘要：目的：评价多种无创辅助检查组合对冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）辅助诊断价值，筛选有效的冠心病确诊和排除指标，初步确定优化的冠心病早期诊断策略。方法：回顾性分析6419例冠心病患者多项无创辅助检查结果（包括静息心电图、24小时动态心电图、负荷心电图、负荷核素心肌显像、16或64排CT冠状动脉成像），以冠状动脉造影阳性（至少一支主要冠状动脉或其主要分支的内径有≥50％的狭窄）为金标准，观察各种无创辅助检查组合对冠心病诊断的特异性、敏感性、误诊率、漏诊率、阳性预测值和阴性预测值。结果：多项无创辅助检查组合在冠心病的诊断中敏感性56．02-87．43％，特异36．13-87．61％，阳性预测值58．83．97．16％，阴性预测值30．21．73．36％，非介入手段中，敏感性和阴性预测值以动态心电图联合核素心肌灌注显像组最高，特异性和阳性预测值以动态心电图联合冠脉CT成像组最高。结论：辅助检查组合可作为无创性诊断、评价冠心病的重要方法，动态心电图可作为各级别医院冠心病筛查的基本及重要手段。11例恶性肿瘤继发性骨髓增生异常综合征病例分析
摘要：目的：分析恶性肿瘤继发骨髓增生异常综合征（MyelodysplasticSyndrome，MDS）病例资料，寻找肿瘤继发MDS关键致病因素，并为原发病治疗风险评估提供参考依据。方法：采用回顾性研究方法，查阅北京中医药大学东直门医院肿瘤血液科2007年1月．2012年4月MDS患者住院病例，区分原发、继发两种类型，并对继发性MDS病例资料进行综合分析。结果：按照MDS诊断标准，在明确诊断的75例患者中，原发性64例，肿瘤继发11例，占14．67％。11例患者均为中老年人群，其中，65岁以上老龄患者7例，占63．6％；70岁以上老龄患者5例，占45．45％。肿瘤继发MDS，尤其是老龄患者特征为严重合并症多，生存质量差，生存期短。致病原因有多方面因素，其中，放化疗联合应用可增加肿瘤继发MDS的风险性。结论：恶性肿瘤及其相关治疗易继发MDS，放化疗联合应用可增加其风险性；老龄患者继发MDS的机会明显增加，且预后不良。因此，对于老龄肿瘤患者要认真评估治疗受益和相关风险。青年妇女患宫颈癌的临床特点及预后分析
摘要：目的：探讨青年妇女患宫颈癌的临床特点并行预后分析。方法：选取2008年1月-2013年1月在我院接受治疗的青年妇女宫颈癌33例患者观察组，同期在我院接受治疗的大于35岁49例患者为对照组。对两组患者的发病相关因素及临床病理特征进行回顾性分析及对两组患者预后分析，随访患者5年内生存率及2年内复发率。结果：两组患者初次性行为差异无统计学意义（P〉0．05）；两组患者避孕方式与妊娠次数比较均有显著性差异（P〈0．05）；两组患者临床分期与宫颈形态无显著性差异（P〉0．05）；两组癌灶大小、病理分型、宫颈肌层浸润深度及盆腔淋巴转移具有显著性差异（P〈0．05）；观察组较对照组患者早期（Ⅰa—Ⅱa）与晚期（≥Ⅱb）的两年内复发率及五年生存率差异均有显著性差异（P〈0．05）。结论：青年妇女宫颈癌患者具有癌灶大、腺癌发病率高、宫颈肌层浸润深度≥1／2肌层和盆腔淋巴结转移阳性的临床特点。朊蛋白在结肠癌及结肠炎组织中的表达及其临床意义
摘要：目的：观察朊蛋白（PrPc）在正常结肠粘膜、结肠炎及结肠癌组织中的表达，并探讨其临床意义。方法：采用免疫组织化学法分别检测PrPc在正常结肠组织、结肠炎及结肠癌组织（各40例）中的表达，并分析其在结肠癌及结肠炎组织中的表达与患者性别、分化程度、TNM分期、淋巴结转移及炎症程度等临床特征间的关系。结果：PrPc在正常结肠及结肠癌组织中均有表达，在结肠炎中表达较低，在结肠癌组织中阳性表达率为60％（24／40），明显高于正常结肠组织的35％（14／40）及结肠炎组织的30％（12／40）（P〈0．05）。轻度结肠炎中PrPc的阳性表达率明显高于重度结肠炎，结肠癌中PrPc的表达与患者的肿瘤分级、分期显著相关（P〈0．05）。结论：PrPc在结肠癌中的表达增高，在结肠炎中表达较低，可作为临床判断结肠癌恶性程度及结肠炎炎症程度的重要参考指标。微创经皮肾镜碎石取石术治疗特殊肾结石的临床疗效观察
摘要：目的：研究微创经皮肾镜碎石取石术治疗特殊鹿角型或多发肾结石中的临床疗效和安全性。方法：回顾性分析2007年1月-2013年3月我院收治的37例采用微创经皮肾镜碎石取石术（PCNL）手术方式治疗的特殊鹿角形或多发肾结石患者的临床资料。结果：37例患者中，孤立肾9例、马蹄肾7例、海绵肾和多囊肾7例、儿童患者14例。成人结石直径（3．2±0．3）cm，儿童结石直径（2．2±0．2）cm。37例患者均一期单通道情况下顺利完成手术，单次手术成功率100％，结石清除率91．2％（34／37），平均手术时间（94±21．6）min，平均出血量（62±12．3）mL，术后1月复查B超提示肾脏积水减轻，肾脏功能血肌酐较术前降低，术后一月复查KUB提示3例肾脏下盏少量残留结石，4例患者出现术后低热症状。结论：采用PCNL治疗特殊鹿角形或多发肾结石的安全性好、结石清除率高、并发症较少。
