腺病毒载体介导的HPV16E7基因沉默及其对宫颈癌CaSki细胞的影响
摘要：目的：构建利用RNA干扰技术沉默HPV16E7基因的腺病毒载体,并探讨其对人宫颈癌细胞系CaSki细胞增殖的影响,以及腺病毒载体在宫颈癌基因治疗中的可行性。方法：利用腺病毒载体介导的RNA干扰对CaSki细胞中HPV16E7蛋白的表达进行抑制。显微镜观察细胞病变情况。MTT实验用来检测腺病毒载体感染的CaSki细胞的增殖情况。结果：成功构建了用以介导CaSki细胞中HPV16E7基因沉默的腺病毒载体。腺病毒感染后的CaSki细胞发生典型病理变化,HPV16E7基因表达受到明显抑制,细胞分裂明显减慢。结论：腺病毒载体介导的RNA干扰能够特异性的沉默HPV16E7基因,抑制CaSki细胞的增殖,为腺病毒载体用于宫颈癌基因治疗的可行性提供了依据。模拟失重及高＋Gx对猕猴心肌超微结构、血浆内皮素-1及C-反应蛋白的影响
摘要：目的：探讨30天模拟失重后高＋Gx过载对猴猴心肌超微结构、血浆内皮素-1及C反应蛋白的影响,来研究模拟失重超重对心血管的影响,本实验为研究抗荷服和飞船轨道运行段应急返回超重医学提供实验数据。方法：15只雄性猕猴随机分为5组,即模拟失重组（对照组,A）,＋13 Gx/230 s组（B）,模拟失重超重组＋11 Gx/270 s（C）,模拟失重超重组＋13 Gx/230 s（D）和模拟失重超重组＋15 Gx/200 s（E）。动物放血处死,抽取血液测定血浆内皮素-1及C反应蛋白的含量,组织取材后经戊二醛固定,制成电镜标本,观察猴心肌超微结构的变化。结果：C组、D组和E组血浆内皮素-1及C反应蛋白含量较A组升高,有统计学意义（P〈0.05）,C、D、E组之间无统计学意义（P〉0.05）。D组血浆内皮素-1及C反应蛋白含量较B组升高,有统计学意义（P〈0.05）。电镜下A组可见线粒体双层膜结构清晰,线粒体嵴清晰;B、C、D组部分线粒体出现双层膜结构消失,嵴数量减少;E组线粒体出现水肿、空泡样变,肌节断裂。结论：（1）失重后超重＋13 Gx可引起心肌轻微损伤,失重后超重＋15 Gx心肌损伤严重,且损伤程度随着＋Gx值的增加而加重。（2）失重后超重比单纯超重心肌损伤严重。（3）本实验为超重耐力研究和提出科学合理的飞船轨道运行段应急返回超重医学提供实验支持。小鼠慢性高眼压模型下视网膜神经节细胞的损伤
摘要：目的：通过巩膜外静脉烧烙术建立慢性高眼压模型,研究小鼠慢性高眼压状态下视网膜神经节细胞的凋亡情况。方法：取C57BL/6J小鼠30只,3只作为空白对照组,其余27只右眼为实验眼,左眼为对照眼。术前用iCare眼压计测量眼压,按巩膜外静脉烧烙法建立慢性高眼压模型,术后用iCare眼压计每日监测眼压。分别取空白对照组6眼,术后1 w、4 w造模成功的小鼠各8只16眼眼球,石蜡切片行Tunel法,荧光显微镜下采集图像。小鼠眼压的组间比较采用t检验。结果：给予巩膜外静脉烧烙术后1d、1 w、4 w小鼠慢性高眼压眼眼压（11.15±0.98、10.65±0.95、10.35±1.05）与对照眼（6.40±0.95、6.35±1.05、6.50±1.15）相比,差异有统计学意义（t=10.77～18.08,P〈0.001）。Tunel法结果显示,正常小鼠空白对照组未见明显凋亡的视网膜神经节细胞。慢性高眼压组术后1 w、4 w可见Tunel阳性表达。而对照组术后1 w及4 w均未见Tunel阳性表达。结论：巩膜外静脉烧灼法能诱导出持续的肯定的小鼠慢性高眼压模型,慢性高眼压状态下小鼠视网膜神经节细胞发生凋亡,细胞凋亡是小鼠慢性高眼压状态下视网膜神经节细胞损伤的主要方式。核心蛋白聚糖对慢性哮喘小鼠气道和肺血管胶原沉积的影响
摘要：目的：研究核心蛋白聚糖（decorin）对哮喘小鼠气道及肺血管胶原沉积的影响。方法：30只雌性昆明系小鼠随机分为对照组、慢性哮喘组及decorin干预组,每组10只。慢性哮喘组和decorin干预组小鼠第0、7、14d腹腔注射卵蛋白（OVA）致敏;第22d始雾化吸入2.5%OVA溶液激发哮喘,每次30min,每周3次,连续8周;decorin干预组小鼠每次OVA激发前2h腹腔注射decorin（0.25mg.kg-1）干预;对照组全部以生理盐水代替。末次激发24h后处死小鼠。酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定小鼠血清和肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1（TGF-β1）水平;苏木精-伊红（HE）染色及Masson三色染色观察肺组织切片病理改变及胶原沉积;图像分析软件测定气道血管胶原沉积。结果：慢性哮喘组血清及BALF中TGF-β1水平显著高于对照组（P均〈0.01）,而decorin干预组较慢性哮喘组明显降低（P均〈0.01）;慢性哮喘组气道壁胶原沉积厚度及肺血管壁胶原沉积厚度显著高于对照组（P均〈0.01）,而decorin干预组上述改变较慢性哮喘组明显减轻（P均〈0.01）。结论：Decorin干预可减轻哮喘小鼠气道及肺血管胶原沉积。γ分泌酶抑制剂对肝血窦内皮细胞的影响
摘要：目的：在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂（DAPT）对肝血窦内皮细胞活性的影响。方法：首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次用不同浓度的DAPT（15μmol/L、45μmol/L、75μmol/L）处理细胞,然后通过MTT检测细胞增殖情况、Real time PCR检测相关分子改变。结果：在体外条件下DAPT对肝血窦内皮细胞的增殖起到促进作用,这种促进作用随着DAPT浓度的增加相应的增加;DAPT能够导致肝血窦内皮细胞Notch信号下游分子Hes1表达下调,VEGF信号中VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调。结论：γ分泌酶抑制剂（DAPT）通过抑制肝血窦内皮细胞Notch信号,引起肝血窦内皮细胞表面VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调显著增加肝血窦内皮细胞的活性。多孔自凝固磷酸钙/纤维蛋白1：1比例血管化的分析研究
摘要：目的：观察复合纤维蛋白的多孔自凝固磷酸钙的理学性能及体内血管化情况,探讨其各组份对材料生物学特性的影响,为其临床应用提供实验数据。方法：1）采用凝固时间测定和电镜观察材料表面和断面等方法对复合支架材料构造和理学性能进行分析;2）将24只新西兰白兔随机分为3组,每组8只,分别在每只实验兔腰背筋膜下植入1：1、CPC两种比例材料各一枚。术后2、4、8周进行取材,对材料及其周围组织进行组织学观察、微血管情况定量分析。结果：1）CPC/FG复合支架材料以1：1（g/ml）混合后,与单纯的CPC相比,初凝时间延长,而终凝时间没有明显的统计学差异;电镜观察发现多孔自凝固磷酸钙复合了纤维蛋白胶之后,纤维蛋白胶分布均匀贯穿多孔自凝固磷酸钙晶体之间,并将其紧密相连;2）术后2周材料外周可见幼稚的微血管。1：1组高于CPC组（P〈0.05）。4周微血管密度达到高峰,相对于2周时有明显差异。1：1组高于CPC组（P〈0.05）。8周时微血管密度相对4周没有显著差异。各组微血管密度与4周时没有明显变化（P〉0.05）。结论：复合支架材料具有合适的凝固时间和较好的结构,纤维蛋白胶及其降解产物影响复合材料在体内的微血管密度,使复合材料血管化能力提高,其可作为细胞载体和骨缺损修复支架材料应用于临床和实验中。PAI-1基因4G/5G多态性与中国地区原因不明习惯性流产的Meta分析
摘要：目的：探讨PAI-A基因4G/5G多态性跟中国地区原因不明习惯性流产的关系。方法：采用Stata10.0对所有纳入结果进行异质性检验,敏感分析,影响分析和发表偏移检验。结果：6篇文章共540名病例和672名对照纳入研究。敏感性分析之后,4G/5G多态性跟习惯性流产明显相关（显性模型OR=1.934,95%CI=1.355-2.760,隐性模型OR=1.657,95%CI=1.142-2.405）,共显性模型OR=1.604,95%CI=1.309-1.965）。结论：PAI-1基因4G/5G可能与中国地区原因不明习惯性流产有关。但仍然需要更多的实验证实。川芎嗪对PC12细胞氧糖剥夺后细胞内抗超氧阴离子能力和过氧化氢的影响
摘要：目的：探讨川芎嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）对PC12细胞氧糖剥夺/复氧复糖损伤后细胞内抗超氧阴离子能力和过氧化氢（H2O2）的影响。方法：建立PC12细胞氧糖剥夺（Oxygen-Glucose Deprivation,OGD）模型,复氧复糖给予不同浓度（0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24μmol/L）的川芎嗪,培养24 h后行MTT和LDH的检测。采用四甲基偶氮唑（Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT）比色检测细胞生存率,并检测细胞内抗超氧阴离子能力和过氧化氢。结果：氧糖剥夺可明显降低PC12细胞活性（55.05%）,而川芎嗪可以显著提高PC12细胞活性,其作用呈现一定的剂量-效应相关性。复氧复糖后给予0.16μmol/L川芎嗪可以提高PC12细胞的活性到75.38%。氧糖剥夺/复氧复糖后6 h、24 h,TMP组（川芎嗪组）抗超氧阴离子能力明显高于OGD组（模型组）（P〈0.05）,而H2O2的含量TMP组明显低于OGD组（P〈0.05）。结论：川芎嗪可能提高抗超氧阴离子能力,减少H2O2的产生,从而减轻PC12细胞氧糖剥夺/复氧复糖损伤,具有较好的治疗作用。天然牛黄对MODS大鼠保护作用的实验研究
摘要：目的：肠道内的消化酶在MODS发生发展过程中起着关键的作用,有研究发现非结合型胆红素可以灭活胰蛋白酶和糜蛋白酶。基于非结合型胆红素对消化酶的灭活作用,本研究主要探讨非结合型胆红素含量丰富的天然牛黄对多器官功能障碍综合症大鼠的保护作用。方法：通过腹腔注射无菌石蜡酵母多糖混悬液的方法制作MODS大鼠模型。观察天然牛黄对MODS大鼠的生理状态,生命体征,血气分析,多指标系列生化检测,二胺氧化酶水平,以及心肺肝肾重要脏器病理组织学检查的变化及影响。结果：天然牛黄治疗组大鼠生命体征,血气分析结果,生化指标,血清DAO水平与MODS模型组比较,体温、心率、呼吸检测结果显著降低;pH、PaO2、SO2、AB、BE值升高,PaCO2值降低;LDH、ALT、Cr值减少;DAO水平降低,均有显著差异（P〈0.05）,且心肺肝肾等组织病理变化也有明显改善。结论：天然牛黄能明显恢复石蜡酵母多糖混悬液造模方法引起的MODS大鼠生理状态,生命体征,能有效改善MODS大鼠脏器功能及病理形态,对MODS大鼠具有脏器保护作用。其机制可能是非结合型胆红素灭活消化酶所致,待进一步研究。脑深部电刺激自身给药大鼠伏隔核区△FosB的表达
摘要：目的：对吗啡依赖大鼠实施双侧伏隔核脑深部电刺激（NAc-DBS）,分析NAc区△FosB的表达变化,为NAc-DBS治疗药物依赖提供分子生物学证据。方法：18只大鼠随机分为三组,包括DBS组（n=6,实施颈静脉插管和电极植入手术,吗啡给药,DBS）,Sham组（n=6,实施颈静脉插管和电极植入手术,吗啡给药）,Control组（n=6,实施颈静脉插管和电极植入手术,给予生理盐水）,观察DBS组大鼠在高频电刺激期（160 Hz,1 h/d,7 d）的觅药行为变化,然后进行取脑,切片,免疫组化染色,观察伏隔核区△FosB的表达。结果：成瘾大鼠在高频电刺激期,觅药行为明显减少;免疫组化染色后观察到DBS组大鼠NAc区△FosB的表达相对于Sham和Control组明显减少。结论：双侧NAc-DBS抑制吗啡成瘾大鼠的觅药行为以及NAc区△FosB的表达,证实△FosB可能是慢性成瘾转换机制的关键分子的观点。周期性张应力对大鼠髁突软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响
摘要：目的：在成功构建髁突软骨细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,探讨周期性张应力对髁突软骨细胞主要细胞外基质（Ⅱ型胶原）合成的影响。方法：本研究采用FX-5000T应力加载系统对体外培养的第3代大鼠髁突软骨细胞分别施加1 h、6 h、12 h和24 h的周期性张应力,应力刺激强度为10℅1 HZ。加力完成后即刻收集加力细胞,提取细胞总RNA反转录成cDNA,应用RT-PCR技术检测髁突软骨细胞主要细胞外基质Ⅱ型胶原（type-Ⅱcollagen,Col-Ⅱ）mRNA的表达变化情况。结果：与对照组（0 h组）相比,加力1 h时Col-Ⅱ的表达增加,但无统计学意义;加力6 h时Col-Ⅱ表达显著增加（P〈0.05）;加力12 h时Col-Ⅱ表达开始下降;当加力至24 h时表达量显著降低（P〈0.05）。结论：周期性张应力可以影响髁突软骨细胞主要细胞外基质的合成,在一定范围内随加力时间的延长基质合成逐渐增强;进一步延长加力时间,基质的合成受到明显抑制。2型糖尿病患者Pentraxin-3与尿白蛋白相关性的研究
摘要：目的：研究2型糖尿病患者Pentraxin-3和尿蛋白的相关性,以及糖尿病肾病患者中PTX3临床上所起的作用。方法：选取我院2010年4月-2012年6月间进行诊治的230例2型糖尿病患者,通过对白蛋白的排泄率进行测定,将其分为三组,分别是正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组以及临床白蛋白尿组,分别对三组患者的血糖、血脂、γ-谷氨酰转移酶、PTX3以及HS-CRP进行测量。结果：对PTX3水平测量时,微量白蛋白尿组明显比正常白蛋白尿组高（P〈0.01）,临床白蛋白尿组PTX3水平显著高于其它两组（P〈0.01）,PTX3与UAER呈正相关。各组患者的年龄、TG、HS-CRP、FPG、GGT比较,差异显著有统计学意义（P〉0.05）。结论：患者白蛋白尿和PTX3关系密切,因此测定PTX3的水平有助于早期对糖尿病肾病进行诊断,PTX3的水平尤其对2型糖尿病肾病患者是一个重要的衡量因素。肥厚型心肌病的临床特征及治疗分析
摘要：目的：探讨肥厚型心肌病（hypertrophic cardiomyopathy,HCM）的临床特征及治疗方法。方法：回顾性分析我院2008年6月至2012年3月收治的85例经心脏超声或左室造影证实为肥厚型心肌病患者的临床特征及治疗方法和预后。结果：85例肥厚型心肌病患者的临床症状主要表现为胸闷、气短50例（58.8%）;心前区疼痛21例（24.7%）;心前区不适7例（8.2%）;乏力2例（2.4%）;心悸2例（2.4%）;剑突下疼痛1例（1.2%）;发现心电图异常前来就诊2例（2.4%）。其中心尖肥厚型心肌病（apical hyper-trophic cardiomyopathy）30例（35.3%）;合并冠心病4例（血管狭窄小于70%）（4.8%）、心肌桥（myocardial bridge,MB）11例（12.9%）、冠状动脉粥样硬化症4例（4.8%）、冠状动脉粥样硬化症合并MB4例（4.8%）、冠心病合并MB3例（3.5%）。67例患者服用β-受体阻滞剂（78.8%）,4例患者同时服用β-受体阻滞剂及钙离子拮抗剂（4.8%）,4例患者服用钙离子拮抗剂（4.8%）,1例患者服用可达龙（1.2%）,1例患者同时服用β-受体阻滞剂及可达龙（1.2%）,8例患者因心率慢,未服用药物（9.6%）。临床随访1～30（平均15.2±4.5）个月,临床症状均明显缓解。结论：HCM症状不典型,β-受体阻滞剂和钙离子拮抗剂在治疗肥厚型心肌病方面疗效肯定。超声引导下注射凝血酶治疗医源性股动脉假性动脉瘤的临床观察
摘要：目的：评价超声引导下注射凝血酶治疗股动脉假性动脉瘤的安全性和疗效。方法：选择2011年5月至2012年10月在我院行冠状动脉介入治疗术后出现股动脉假性动脉瘤的患者共13例,其中男性5例,女性8例,年龄平均70.2±5.6岁。所有患者均植入冠状动脉支架,术后1-3天经彩色超声明确诊断为股动脉假性动脉瘤,首先采用压迫法治疗无效,在超声实时引导下,利用穿刺架精确定位,18G PTC针穿刺假性动脉瘤,瘤体内分次注射凝血酶100-400IU的方法治疗。结果：13例患者利用凝血酶注射封堵法均成功治愈股动脉假性动脉瘤,其中8例注射1次成功,另外5例注射2次成功,未发生过敏、血栓形成、感染及出血等并发症。次日及出院前复查超声无复发病例,随访3个月至1年未再复发。结论：超声引导下注射凝血酶治疗股动脉假性动脉瘤具有微创、快速、经济、安全、疗效确切、复发率低的优点,值得临床进一步研究和推广。放疗联合肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床效果分析
摘要：目的：探讨放疗联合肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床效果。方法：选取2009年2月至2011年2月入住我院的60例已确诊且不能进行手术切除的Ⅲ、Ⅳ期原发性肝癌患者,采用三维适形放疗（3D-CRT）联合肝动脉化疗栓塞（TACE）治疗。结果：近期疗效有效率为76.67%。0.5、1、2年的生存率分别为87.4%、65.2%、38.7%。平均生存时间为25.6个月。结论：将放疗联合肝动脉化疗栓塞应用到原发性肝癌的治疗中,能够有效地控制患者病情,提高患者生活质量,延长患者生存期,对于不能进行手术治疗的中晚期患者具重要的实践与运用价值,值得推广。人工全髋关节置换术中Delta陶瓷的界面选择
摘要：目的：Delta陶瓷较Forte陶瓷在材料复合方面进步明显,并采用了36 mm大直径球头的设计,其组成的界面具有耐磨性好,关节活动度大,稳定性佳,不易脱位等优点,适合年轻及活动量大的患者,但其价格较其他界面更为高昂。观察采用Delta陶瓷-陶瓷界面与Delta陶瓷-高交联聚乙烯界面假体行全髋关节置换术的患者术后效果的差异。方法：选取2009年10月-2012年10月在我院选择Delta陶瓷-高交联聚乙烯界面行全髋关节置换术的35例患者（A组）,以同期在我院选择Delta陶瓷-陶瓷界面26例行全髋关节置换术的患者（B组）作为对照。通过随访影像学复查,以及术后Harris功能评分进行临床效果的评价。结果：所有患者均得到随访,随访时间6个月到2年。所有患者在影像学方面,未发现松动下沉,脱位以及碎裂等现象。假体周围未见骨溶解所致透亮线形成以及异位骨化。两组患者行人工全髋关节置换术后Harris评分较术前均有显著提高,但两组之间无显著差异。结论：Delta陶瓷作为最新一代的生物陶瓷,其优异性能毋庸置疑。采用Delta陶瓷-陶瓷界面及Delta陶瓷-高交联聚乙烯界面在短期内未见明显差异,其中长期效果仍有待进一步随访观察。带状疱疹并发神经痛患者危险因素的相关研究
摘要：目的：探讨带状疱疹患者并发神经痛患者的相关危险因素。方法：采用回顾性分析的方法,对我院100例合并带状疱疹后神经痛（PHN）患者年龄、性别、患病后初诊日、急性期发作频度、急性期疼痛程度、疱疹部位、疼痛的性质等进行统计,并进行多因素Logistic相关分析。结果：不同年龄、性别、及疼痛评分间PHN患病率间差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。而患病后初诊日及急性期发作频度、不同疱疹部位的PHN患病率、不同疼痛性质的PHN患病率差异无统计学意义（P〉0.05）。Logistic相关分析显示,年龄、性别、不同疼痛程度与PHN患病率存在一定的相关性,相关P值分别为0.003、0.002、0.005,均P〈0.01。结论：年龄、性别、不同疼痛程度可影响PHN的发生。针对急性期PHN患者,应早发现,早治疗,提高患者生活质量。晚期卵巢高级别浆液性腺癌术后血CA125下降情况与残余病灶大小关系的研究
摘要：目的：探讨血清CA125测定对评估卵巢高级别浆液性腺癌术后血CA125下降情况与残余病灶大小关系的价值。方法：回顾性研究卵巢高级别浆液性腺癌IIc-IV期患者62例,按照瘤体减灭术后残余病灶大小分为3组,A组为术后残余病灶〉1cm,B组为≤1cm者,C组为肉眼未见病灶者,查阅术前、术后第1次化疗后血CA125值。结果：C组下降百分比与B组、A组相比有统计学差异（分别为P=0.024,P=0.002）。结论：术后残余病灶大小不同的患者血CA125下降情况不同,在关于肿瘤标志物的研究中将肉眼未见病灶组单独列出研究有很大的必要性。
