血清后人血管平滑肌细胞表型转化与microRNAs表达间关系的研究
摘要：目的：研究去血清诱导人血管平滑肌细胞发生表型转化与microRNAs表达间的关系。方法：采取人血管平滑肌细胞克隆株HITASY，培养人血管平滑肌细胞（VSMCs）。用去血清的方法处理人血管平滑肌细胞，使VSMCs由去分化表型向分化表型转化，通过蛋白印迹法观察平滑肌细胞中分化标记物蛋白的变化，同时用实时定量PCR法检测细胞中相关microRNA的表达。结果：①去血清处理组与无去血清处理组比较，平滑肌细胞分化标记物（SM-α-actin、calponin）表达显著性增加，而通过SM-α-actin、ealponin的蛋白表达量显著增加，提示血管平滑肌细胞向分化表型转化（P〈0．05）；②同时去血清处理组与无去血清处理组比较，Mir-649、Mir-944表达量显著增加，Mir-140、Mir．361表达量显著减少（P〈0．05）。结论：Mir-649、Mir-944、Mir-140、Mir-361在血管平滑肌细胞表型转化中有关键性作用。二苯乙烯苷对H202诱导血管内皮细胞ICAM-1及VCAM-1表达的影响
摘要：目的：通过研究二苯乙烯苷（TSG）对H20：诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达的影响，探明二苯乙烯苷抗氧化保护内皮细胞的作用机制。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，实验分为空白对照组、H20：组、辛伐他汀组、TSG组，运用逆转录聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验分别检测ICAM-1及VCAM-1mRNA与其蛋白的表达。结果：200μmol·L。的H202作用内皮细胞24h后。ICAM．1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平均明显上调，与空白对照组比较，差异有显著性（P〈0．01）。而在200μmol·L。的H202作用前用1μmol·L^-1二苯乙烯苷预处理体外培养人脐静脉内皮细胞4h，结果显示二苯乙烯苷能抑制H2O2诱导的内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的mRNA和VCAM-1的蛋白水平表达，与H2O2组比较差异有显著性（P〈0．01）；而ICAM-1的蛋白表达水平与H202组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；辛伐他汀组ICAM-1和VCAM-1的mRNA及其蛋白水平表达降低，与H20：组比较差异均有显著性（P〈0．01）。实验结果表明二苯乙烯苷可抑制H2O2诱导的内皮细胞粘附分子ICAM-1、VCAM-1表达。结论：二苯乙烯苷可通过降低细胞粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达保护氧化应激引起的人脐静脉内皮细胞损伤。生物降解可吸收形状记忆聚合物的生物相容性研究
摘要：目的：我们利用经美国FDA批准成为临床使用材料的聚己内酯为主要原料，发明了一种可吸收的形状记忆聚合物，添加的辅料偶联剂为烃氧基硅烷；多官能团单体选自含2个到3个烯键的有机酯，如季戊四醇三烯酸酯等；填料选用含有活性钙离子的化合物，如磷酸氢钙等，均为生物相容性良好，且可吸收的材料（专利号：200610023175）。通过体外细胞学实验，对该生物降解可吸收记忆聚合物的生物相容性进行评价。方法：实验采用3T3细胞进行原代及传代培养，然后将细胞接种到两组载体上一生物降解可吸收记忆聚合物组和裸皿培养组。建立不同的3T3细胞培养系统。利用绘制细胞生长曲线、MTT比色及3H-胸腺嘧啶（3H．TdR）掺入方法观察体外培养3T3细胞在生物降解可吸收记忆聚合物载体上的活力、增殖及DNA合成情况，研究生物降解可吸收记忆聚合物载体的生物相容性。结果：在生物降解可吸收记忆聚合物和裸皿中培养时，3T3细胞的活力、增殖和代谢等生物学特性无明显差别。结论：体外细胞学实验表明这种生物降解可吸收记忆聚合物具有良好的生物相容性。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978—7．117．13344—9／R13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。Ghrelin抑制H202诱导的肺泡上皮A549细胞中IL-8的产生
摘要：目的：通过细胞培养的方法，初步研究了生长激素释放肽Ghrelin在氧化应激相关的肺泡上皮细胞炎症反应中的作用。方法：首先是用双氧水（H202）刺激A549细胞建立肺泡上皮细胞炎症反应模型，分别加入不同浓度的Ghrelin及普通培养基培养A549细胞。用酶联免疫吸附技术（ELISA）从蛋白水平检测上清液中IL-8的含量，采用逆转录聚合酶链反应技术（RT—PCR）检测炎性细胞因子IL．8mRNA的表达。结果：H2O2可以使A549细胞IL-8蛋白的释放及IL-8mRNA的表达明显升高（P〈0．05），而用Gllrelin干预后IL．8的释放及IL-8mRNA的表达被抑制，明显低于单纯H2O2刺激的模型组（P〈0．05），且随着浓度的增加Ghrelin的这种抑制作用逐渐增强。结论：分别从蛋白水平和基因水平证明了Ghrelin能够抑制H202诱导的肺泡上皮A549细胞中IL-8的产生，由此推测Ghrelin可能能够抑制以COPD、支气管哮喘为代表的氧化应激相关的肺部炎症反应。不同组织来源的细胞建立诱导多能干细胞系的研究
摘要：目的：比较不同组织来源的细胞生成iPS细胞的效率，获得高效制备iPS细胞的组织类型。方法i通过四种逆转录病毒（0CT4／S0x2尿u14／c．MYC）转染羊水细胞、绒毛细胞和皮肤成纤维细胞，建立不同组织来源的iPS细胞系。结果：我们建立了羊水、绒毛细胞和皮肤细胞三个不同组织来源的iPS细胞系，并对其多能性基因Oct4、Nanog以及分子表面标记Tra-1-60以及体外分化为三个胚层能力进行鉴定，发现利用羊水细胞建立iPS细胞的效率显著高于绒毛细胞和皮肤细胞。结论：羊水细胞可能是制备iPS细胞的理想细胞类型。槲皮素对UVB辐射HaCaT细胞膜流动性的影响
摘要：目的：基于过量UVB照射角质形成细胞HaCaT所致细胞膜流动性变化，探讨植物单体槲皮素（Qu）对细胞光应激的保护机制。方法：体外培养HaCaT细胞，分别加入25μg／mL、50μg/mL、100wμg/mL的Qu，孵育后更换培养基，以30mJ／cm2UVB剂量进行照射，Dio荧光探针标记细胞膜，激光共聚焦显微镜下观察其膜流动性的变化。结果：紫外照射组细胞膜流动性扩散系数D及荧光恢复率R最低；50μg/mL药物组荧光恢复率明显优于25wg／mL药物组，100μg/mL药物组略优于50μg/mL药物组，与正常组无显著性差异。结论：一定浓度范围内Qu对UVB所致的细胞膜的流动性损伤具有明显的保护作用（P〈0．05），并与剂量成正相关性。封闭Skp2基因表达对大肠癌LS-174T细胞裸鼠皮下移植瘤生长与转移抑制的研究
摘要：目的：建立人大肠癌Ls-174T细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，应用Skp2基因特异性siRNA重组腺病毒治疗，观察其在体内对肿瘤生长和转移的影响，并探讨其相应的作用机制。方法：将大肠癌LS-174T细胞以5×10^6个／只接种于雌性裸鼠右侧腋窝皮下，待平均瘤体积长至50-150mm3时筛选成模动物分组给药，分别给予重组腺病毒pAD-Skp2／siRNA5×10^8和5×10^9p削只瘤内注射，阳性组给予今又生5×10^pfu／只瘤内注射，另设空病毒对照组。每周给药2次，连续4周，以安乐死时肿瘤体积大小和重量来评价治疗效果。然后用Western Blot检测肿瘤组织中Skp2、p27kipl、c-myc、Bcl-2的表达，用免疫组化法检测肿瘤组织中MMP-2的表达。结果：安乐死时阴性对照组平均肿瘤体积与空病毒对照组生长情况基本一致（P≥0．05）；今又生组平均肿瘤体积明显小于模型组（P≤0．05）；pAD—Skp2／siRNA低、高剂量组平均瘤体积均显著低于模型组（P≤0．01），且有剂量依赖性。今又生组瘤重抑制率为58．16％，pAD—Skp2／siRNA低、高剂量组瘤重抑制率分别为75．59％、86．45％。Skp2蛋白表达在模型组、空病毒对照组和今又生组均有较强表达，而在pAD—Skp2／siRNA低剂量和高剂量组均未见表达；而p27kipl仅在pAD．Skp2／siRNA低剂量和高剂量组有表达，其余三组均未见其表达；c-myc和bcl-2表达趋势一致，均在模型和空病毒对照组有表达，而在今又生组和pAD—Skp2／siRNA两个剂量组均表达明显减弱。模型组和空病毒对照组有棕黄色阳性表达，而今又生组和pAD．Skp2／siRNA两个组均未检测到MMP-2阳性表达。结论：在高转移性大肠癌LS-174T裸鼠移植瘤模型中，封闭Skp2基因可以抑制肿瘤的增殖和转移，其作用机制与细胞周期调控、细胞凋亡中的c-myc和bcl-2以及基质金属蛋白酶MMP，2相关。关键间：Skp2；siRNA；大肠癌细胞LS-174[^18F]标记表皮生长因子受体抑制剂显像剂全自动合成方法
摘要：目的：[^18F]标记表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR—TKI）正电子显像剂在指导肿瘤分子靶向治疗中具有非常重要的作用。本文目的是找到一种全自动、适合日常使用的[^18F]标记EGFR-TKI正电子显像剂的全自动合成方法。方法：采用一步法合成[^18F]EGFR-TKIPET显像剂。首先合成4-[^18F]氟苯胺基，然后合成4-[^18F]氟苯胺基-6,7-二甲氧基喹唑啉。结果：整个合成过程大约60分钟，产率25％．35％（未校正），放化纯度〉95％。结论：本文建立了一种适合临床日常应用的[^18F]EGFR-TKIPET显像剂的全自动合成方法。该方法对于进一步开发新型[^18F]标记的表皮生长因子受体抑制剂PET显像具有重要价值。新型噻唑并三嗪类化合物R001抑制ERK1／2磷酸化的抗肿瘤作用
摘要：目的：探讨噻唑并三嗪类化合物R001对ERK1／2磷酸化的影响及其抗肿瘤活性。方法：采用基于U20S．EGFP细胞的荧光分析法和MTT法检测化合物R001对U20S-EGFP-4F12G和U20S、T47D、SKOV3、MCF7等其他肿瘤细胞增殖的影响；采用电子显微镜观察化合物R001对MCF7、T47D、U20S—EGFP-4F12G和SKOV3等多种肿瘤细胞株增殖的抑制作用；采用流式细胞术检测化合物R001对MCF7、U20S—EGFP-4F12G和SKOV3等多种肿瘤细胞周期的影响；采用免疫印迹法检测检测化合物R001对ERK1／2磷酸化的影响。结果：基于U20S—EGFP细胞的荧光分析法显示。化合物R001抑制U20S—EGFP-4F12G细胞增殖的IC50值为11．58IxM；MTT法显示，化合物R001对U20S、T47D、SKOV3、MCF7等多种肿瘤细胞增殖的影响具有剂量依赖性；电子显微镜观察显示，化合物R001可以引起MCF7、SKOV3和U20S—EGFP．4F12G三种肿瘤细胞的数量和形态变化；流式细胞术显示，化合物R001可将MCF7、U20S—EGFP-4F12G和SKOV3等肿瘤细胞阻断在s期；免疫印迹试验显示，化合物R001可以有效抑制SKOV3和U20S细胞中ERK1／2的磷酸化。结论：噻唑并三嗪类化合物R001通过抑制ERK1／2磷酸化而发挥抗肿瘤作用。双斑蟋触角传入神经纤维在脑内投射分布研究
摘要：目的：研究昆虫触角感受器传入神经末梢在脑内投射的空间布局，揭示触角感觉信息传入的神经结构。方法：使用氯化镍神经元示踪标记技术，对双斑蟋触角感受器传入神经纤维进行可视化标记，观察研究触角传入神经末梢在脑内的走行形态及分布规律。结果：双斑蟋触角感受器传入神经纤维进入中脑后大量的神经末梢终止在同侧的触角叶和触角机械感觉运动中枢，部分神经纤维向前走行，其神经末梢终止在前脑，还有部分神经纤维向后下行，经同侧神经索，其神经末梢终止在食道下神经节。结论：双斑蟋触角感受器传入神经纤维进入脑后主要投射到触角叶和触角机械感觉运动中枢，少部分投射到前脑和食道下神经节。这种多重投射模式可能在双斑蟋嗅觉信息传递整合、触角运动调节、味觉和摄食活动等方面发挥重要作用。IL-23、IL-12在克罗恩病肠粘膜的表达及意义
摘要：目的：探讨克罗恩病患者结肠粘膜组织中IL-23、IL-12的表达及其与疾病严重程度的相关性。方法：选取中南大学湘雅医院2005年4月-2011年3月经确诊的30例克罗恩病患者手术标本，对照选取30例结肠癌患者手术切除之正常结肠组织。实验设CD病变肠段组、CD正常肠段组及对照组3组。用免疫组织化学方法检测结肠内IL-12、IL-23的表达，分析IL-23、IL-12的表达与CD的疾病临床严重程度（CDAI）和内镜下肠黏膜损伤程度（CDEIS）的相关性。结果：IL-12的表达：CD病变肠段组、CD正常肠段组、对照组阳性率无统计学意义（P值〉0．05）。IL-23的表达：CD病变肠段组阳性率高于CD正常肠段组，CD正常肠段组高于对照组，差异均有统计学意义（P值〈0．05）。结论：IL-12在CD患者肠粘膜中不升高，而IL-23在CD表达明显升高，提示IL．23在CD粘膜免疫损伤中发挥-定作用，对CD的诊断有-定的参考价值。姜黄素壳聚糖微球的制备及其在体内外释放度的研究
摘要：目的：研究响应面法优化姜黄素壳聚糖微球制备的工艺参数，提高姜黄素的溶出度。方法：采用离子交联法制备姜黄素缓释微球，以微球的载药量和包封率为考察指标，采用星点设计考察配制壳聚糖的醋酸浓度、药物载体的比例以及交联剂浓度对微球制备工艺的影响，对结果进行二次多项式拟合，并根据最佳数学模型进行预测。结果：姜黄素壳聚糖微球最优制备工艺参数为：醋酸的浓度为1％，载体药物比例为0．83，交联剂的浓度为0．15％，载药量和包封率的预测值和理论值偏差分别为0．47％和3．2％。结论：响应面法优化姜黄素壳聚糖微球制剂处方具有很好的预测性，体内外药物释放度研究表明，最优条件下制备的微球可以在提高姜黄素溶出度的前提下缓慢释放达12h。黄芪注射液对2型糖尿病动物模型KKAy小鼠脑微血管病变的影响
摘要：目的：观察黄芪注射液对2型糖尿病动物模型KKAy小鼠脑微血管病变的影响，探讨黄芪注射液对糖尿病脑血管病变的保护作用。方法：饲养至14周龄的雄性KKAy小鼠随机分成模型组和黄芪注射液治疗组（每日腹腔给药，剂量为3mL／kg），同龄雄性C57BL／6J小鼠作为对照组。血糖仪测量20、24、28周龄时各组小鼠的空腹血糖水平。28周龄时处死各组小鼠，放射免疫法检测血清6-酮-前列腺素-F1α（6-Keto-PGF1α）和血栓素B2（TXB2）的含量。透射电子显微镜观察脑组织超微结构变化。结果：模型组KKAy小鼠从20周龄开始血糖水平明显高于正常组小鼠（P〈0．01）；黄芪治疗组小鼠从20周龄开始血糖水平明显高于正常组小鼠（P〈0．01），但低于模型组小鼠（P〈0．05或P〈0．01）。模型组小鼠血清6-Keto—PGF1α水平较正常组降低（P〈0．01），TXB2含量增高（P〈0．01）；与模型组相比，黄芪注射液治疗组小鼠6-Keto—PGF1α水平升高（P〈O．01），TXB：含量下降（P〈0．01）。透射电镜显示模型组小鼠神经细胞胞核染色质疏松，线粒体肿胀，粗面内质网缩小，核糖体减少；治疗组小鼠以上病变明显改善。结论：黄芪注射液可以有效改善2型糖尿病动物模型KKAv小鼠脑微血管病变，保护神经细胞结构。梓醇对鱼藤酮所致小鼠脑线粒体损伤的保护作用
摘要：目的：研究梓醇对鱼藤酮所致小鼠脑线粒体损伤的保护作用。方法：小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。模型组腹腔注射鱼藤酮21d；治疗组先注射鱼藤酮21d，后用梓醇治疗10d。测定小鼠中脑、纹状体和皮层中线粒体复合酶I、谷胱甘肽（GSH）、乳酸脱氢酶（LDH）活性、膜电位、活性氧（Ros）的含量。结果：梓醇能够提高小鼠复合酶I活性，增加GSH的含量，减少膜电位的丢失和活性氧的生成，抑制LDH的释放。结论：梓醇对鱼藤酮损伤小鼠脑线粒体具有保护作用。不同产地麦冬’H—NMR指纹图谱研究
摘要：目的：建立不同产地中药麦冬1H—NMR指纹图谱，为麦冬及其提取物质量控制提供依据。方法：采用1H-NMR建立不同产地麦冬甲醇提取物的指纹图谱。结果：7个样品的主要化学成分糖、脂肪族、皂苷和高异黄酮的氢信号峰有高度的相似性，但不同麦冬品种、不同产地，1H—NMR指纹图谱有较大的差异，可以此区分。结论：1H-NMR指纹图谱不但可以鉴定不同麦冬品种，还可以区分不同产地的麦冬。免疫组化在肝癌诊断中的应用
摘要：目的：探讨免疫组化在肝癌诊断中的作用。方法：遴选我院178例肝癌患者，其中PHC组90例，继发性肝癌组88例和90例健康人作为对照。测定每组AFP、AFU、SF和CA19—9的检测水平以及各项标志物联检的水平。结果：PHC组各项值明显呈阳性，正常对照组均呈阴性，继发性肝癌组居中。PHC组AFP的阳性检出率为78．89％，AFU的阳性检出率为65．56％，sF的阳性检出率为53．33％，CA19—9的阳性检出率为58．89％，各项联检的阳性检出率为95．56％。结论：AFP、AFU、SF和CA19-9联合检测能大大提高肝癌的检出率，有助于PHC的早期诊断和治疗。常规腹腔镜器械下经脐单孔腹腔镜胆囊切除术
摘要：目的：前瞻性分析常规腹腔镜器械下的经脐单孔腹腔镜胆囊切除术。方法：2009年3月至2009年7月，入选18例胆囊疾病患者行经脐单孔腹腔镜胆囊切除术。该手术使用常规腹腔镜器械及经脐部同一小切口的三个穿刺套管。结果：18例患者（男性5人，女性13人）均没有中转为常规多孔腹腔镜或开放手术。患者平均年龄39岁（25—53岁），平均手术时间69min（45-115min）。无明显失血或并发症发生。患者平均术后住院天数为1．7天（1。3天）。术后患者满意度为100％。术后2周，患者脐部切口几乎不可见。结论：常规腹腔镜器械下经脐单孔腹腔镜胆囊切除术是可行的。它能够在没有专门器械及额外费用的情况下实施。
