哺乳动物NMDA受体NR3亚基的比较基因组学研究
摘要：目的：通过比较基因组学方法对哺乳动物NR3亚基进行分析，探讨其种间功能及结构差异，并预测其功能。方法：应用人类NR3A和NR3B所编码氨基酸序列作为检索探针，通过TBLASTN检索数据库，并应用生物软件进行进化分析及序列对比。结果：共检索到30个哺乳动物NR3A及NR3B基因，其中28个具有完整CDS。进化树显示相同种属均形成独立分支，与人类相似度越高的物种进化距离越近，氨基酸种间比较显示邻接半胱氨酸序列及loopl结构保守性较好，而富含脯氨酸序列在灵长类和啮齿类存在差异。结论：NR3A亚基在人类和啮齿类可能存在功能差异，应用动物模型进行实验应考虑差异可能带来的影响，此外，可推断哺乳动物间NR3亚基富含半胱氨酸序列及loopl结构产生的生理过程及功能相似。高血压合并动脉粥样硬化与血管紧张素原相关性的研究
摘要：目的：探讨高血压合并动脉粥样硬化与血管紧张素原的相关性。方法：30只雄性16周龄SHR大鼠随机均分为SHR组和SHR合并AS组，另设15只同龄雄性WKY大鼠作为正常血压对照组即WKY组。SHR合并AS组饲以高脂饲料并辅以大剂量VitD3灌胃建立高血压动脉粥样硬化大鼠模型，SHR组和15只同龄雄性WKY大鼠均饲以标准饲料。各组大鼠分别于0、6、12周时光镜、电镜下评估血管病变，全自动生化分析仪检测血脂水平，并采用ELISA法检测血清AGT、AngII浓度。结果：SHR血清AGT、AnglI浓度显著高于WKY大鼠（P〈0．05）。存在AS病变的SHR合并AS组，血清AGT、AngII浓度明显高于无AS病变的SHR组，且随着AS病变严重性的增加，血清AGT、AngII浓度亦增加（P〈0．05）。结论：抑制AGT的表达可能为高血压患者中AS的防治提供一种新的方法。Egr-1基因与肿瘤腺癌放射敏感性关系的研究
摘要：目的：研究Egr-1基因在2种腺癌细胞A549和Hela放射前后的表达变化及对放射敏感性的影响。方法：培养肺腺癌A549细胞和宫颈腺癌Hela细胞，分别提取4Gyx射线照射前及照射后不同时间点的细胞的总RNA行荧光定量PCR（FQ-PCR）检测Egr-1表达水平；收获4GyX射线照射前及照射后不同时间点的细胞处理行流式细胞术检测其凋亡；对照射不同剂量的细胞继续培养10-14天，进行克隆形成计数，计算克隆形成率及存活分数。结果：FQ-PCR结果显示，放射后Egr．1基因表达水平在2种细胞中均明显升高且于放射后1h达到峰值，A549细胞的峰值明显高于Hela细胞；流式细胞术检测结果显示，A549细胞凋亡明显高于Hela细胞；克隆形成实验结果显示，A549细胞存活分数明显低于Hela细胞。结论：Egr-1基因在不同腺癌细胞表达水平不同并影响其放射敏感性。模拟微重力导致人脐静脉内皮细胞微管骨架重构及增殖的影响
摘要：目的：观察模拟微重力（MMG）致人脐静脉内皮细胞（HUVECs）微管骨架结构的改变，并对MMG作用后细胞的增殖等功能进行评价。方法：酶消化法原代培养HUVECs，随机分为2D．clinostat干预的MMG培养组与NG对照培养组，均培养48h；倒置显微镜下观察细胞形态，细胞计数及流式细胞术分析细胞增殖、凋亡及细胞周期变化。结果：所培养的HUVECs细胞并经流式细胞术鉴定证实；MMG干预48h使大量的微管蛋白发生解聚，微管的网状结构已经模糊不见，随之代替的是崩解的微管小聚体；MMG可使HUvECs增殖明显抑制，细胞周期抑制于G2／M期（G2／M：MMG，27．6％；NG，18．1％；P〈0．05），然而细胞并没有发生明显凋亡。结论：MMG可显著影响HUVECs的形态与细胞骨架结构并抑制其增殖功能，HUVECs的增殖抑制可能与紊乱的微管结构密切相关。低强度超声促进放疗后犬下颌种植体骨结合的实验研究
摘要：目的：探讨放射线损伤犬的下颌骨行种植术后，低强度超声是否对其周围骨组织结合具有促进作用。方法：建立下颌骨放射线损伤的动物模型，并运用低强度超声对其进行治疗，通过Micro—CT、拔出实验等观察低强度超声治疗组（实验II组）与未用低强度超声治疗组（实验I组），并与对照组对比，所得数据进行统计学分析。结果：成功的建立了放射线损伤的动物模型；实验II组骨小梁的各项指标均好于实验I组；拔出实验结果显示，实验II组拔出力值明显大于实验I组。统计结果显示各组之间的差异具有显著性的意义（P〈0．05）。结论：低强度超声对放射线照射后种植体周围的骨组织具有较好的修复作用利用免疫组织化学及蛋白质组学对树莓提取物抑制大鼠肝癌机制的研究
摘要：目的：探讨树莓预防大鼠原发性肝癌增殖抑制和凋亡诱导作用，寻找树莓预防大鼠原发性肝癌的特异性蛋白质靶点。方法：利用二乙基亚硝胺（DEN）建立大鼠原发性肝癌动物模型；通过免疫组织化学方法研究树莓提取物对于大鼠原发性肝癌的预防效果和形态学变化，利用蛋白质组学研究树莓预防大鼠原发性肝癌的特异性蛋白质靶点。结果：树莓提取物能抑制PCNAJVEGF的表达，抑制细胞增殖，并诱导细胞凋亡。蛋白质组学差异分析表明：成瘤组大鼠血清在蛋白质峰2597．93M／Z，4513．88M／Z上与高剂量树莓干预组大鼠血清具有显著性差异（P〈0．05）。结论：树莓提取物可以抑制肝癌细胞PCNA的表达，从而抑制肝癌细胞的增殖；还可以诱导肝癌细胞凋亡；蛋白质峰2597．93M／Z及4513．88M／Z所表达蛋白为其特异性作用靶点。雷帕霉素对低氧下HL-60细胞的低氧调控信号分子表达的影响
摘要：摘要目的：通过小分子化合物氯（CoCt2）模拟的低氧环境，分析低氧下及其雷帕霉素（RPM）作用下人急性髓细胞白血病细胞HL．60的低氧调控信号分子表达的变化；方法：常规方法复苏、传代、培养HL-60细胞，培养细胞进入对数生长期后用于实验。低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组分别用含2001xmol／LCoCl2、2001xmol／LCOCl2／20nmol／LRPM、20nmol／LRPM的1640培养基处理生长状态良好的细胞，对照组细胞用1640培养基培养，各组置培养箱以37℃、5％CO2培养，并于处理后24h、48h、72h收集细胞用于检测；采用实时荧光定量PCR方法检测低氧诱导因子（HIF-1α）、内皮细胞生长因于（VEGF）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及GAPDH在转录水平的表达；结果：①与各时段对照组相比，低氧模拟组HIF-1α表达随时间逐渐增加，72h明显上调；与常氧雷帕霉素处理组各时段比较，低氧雷帕霉素处理组HIF-1α表达早期（24h）相对下调，后期相对上调；②．与对照组比较，各处理组mTOR表达均下调，低氧雷帕霉素处理组在早期（24h）下调显著；与常氧雷帕霉素处理组比较，低氧雷帕霉素处理组mTOR各时段的表达均相对下调；③与对照组各时段相比，低氧模拟组VEGF的表达在早期显著上调，但后期呈下调；常氧雷帕霉素处理组各时段VEGF的表达下调，与其比较，低氧雷帕霉素处理组各时段均呈相对下调。结论：常氧和低氧下RPM作用HL-60细胞后VEGF、mTOR的mRNA均表达下调，RPM可在低氧环境下增强了这种下调表达作用。高糖环境对Mü ller细胞谷氨酸转运体及谷氨酰胺合成酶表达的影响
摘要：目的：研究高糖环境对原代培养新生7天SD乳鼠视网膜Muller细胞谷氨酸转运合成系统的影响及其可能机制。方法：新生7天SD乳鼠视网膜Muller细胞原代培养并模拟高糖环境构建乳鼠视网膜muller细胞体外高糖环境模型。处理分为3组：对照组，高糖组，高糖＋白藜芦醇干预组。培养时间为24h，通过westernblot等检测方法，对照观察各组Muller细胞谷氨酸转运体（GLAST）、谷氨酰胺合成酶（GS）的表达情况。结果：模拟高糖环境可以造成新生SD乳鼠视网膜Muller细胞谷氨酸转运体（GLAST）表达的降低（0．225foldVScontrol，P〈0．05），并导致其表达的谷氨酰胺合成酶（GS）表达水平的显著降低（0．653foldVScontrol，P〈0．05）；而干预药物白藜芦醇作用后可明显逆转新生SD乳鼠Mu ller细胞谷氨酸转运体（GLAST）（1．133foldvSHGgroup，P〈0．05）、谷氨酰胺合成酶（GS）（1．720foldVSHGgroup，P〈0．05）等蛋白的表达水平。结论：模拟高糖环境可以影响视网膜M0ller细胞谷氨酸转运体（GLAST）、谷氨酰胺合成酶的表达，其结局可能导致视神经细胞因谷氨酸堆积而导致的兴奋性毒性，白藜芦醇能提高Mcjller细胞谷氨酸转运体（GLAST）、谷氨酰胺合成酶表达，从而保护视神经细胞。IFN—α对人脐带间充质干细胞粘附分子表达的影响
摘要：目的：本研究旨在观察不同浓度IFN-α对体外培养人脐带问充质千细胞表面粘附分子表达变化的影响。方法!采用组织块移行法培养人脐带间充质干细胞（Humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hucMSCs），并进行干细胞表面抗原、成骨和成脂鉴定。向P3代hucMSCs加入不同浓度的IFN-α，24小时后收集细胞，应用流式细胞仪检测CD44、CD49d、CD54、CD58、CD62p、CD62L、CD102及CD106等八种粘附分子的表达情况。结果：①生理状态下，CD106、CD62P、CD62L和CD102阳性表达率极低（均〈1％），CD54表达最高，为41．58％，经IFN-α干预后，CDl02、CDl06、CD62L、CD62p阳性表达率略有升高，但总体变化不明显（均〈5％）。②CD49d、CD54、CD58阳性表达率与IFN-α呈浓度依赖性，最高达（66．36＋2．48）％、（76．26＋1．85）％、（47．78＋O．44）％；CD44在浓度为3×103U／ml时阳性表达率最高，为（49．81±3．25）％，且干预组与对照组、各组间比较差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：炎症因子IFN-α可显著提高hucMSCs表面CD54、CD58、CD44、CD49d的阳性表达率，但对CD102、CD106、CD62P和CD62L作用不明显。精参颗粒的主要药效学实验研究
摘要：目的：研究精参颗粒的补益（改善气虚和血虚作用）、抑茵、抗炎及镇痛作用，同时探讨并确定其量效和时效关系。方法：采用“气虚”、“血虚”、“气血双虚”和“耳廓肿胀”、“足肿胀”、“子宫炎症”小鼠、大鼠模型及体内、外的抗菌试验，观察精参颗粒灌胃给药不同剂量和不同时间对各模型病证的影响。结果：①3．0g/kg、5．0g/kg和7．0g像g精参颗粒灌胃14天可显著提高“气虚”小鼠游泳耐力（P〈0．01），对萎缩的胸腺、脾脏、肝脏具有促进恢复的作用（P〈0．05或P〈0．01）；②中、高剂量精参颗粒对小鼠“血虚”和大鼠“气血双虚”证所致的红细胞（RBc）、血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、体重下降具有显著升高作用（P〈0．05或P〈0．01），其中对大鼠“气血双虚”证的作用随给药时间延长而增强；③对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌，中、高剂量精参颗粒具有明显抑制和抗感染作用（P〈0．01）；④中、高剂量精参颗粒对小鼠和大鼠各炎症有显著的抗炎作用（P〈O．05或P〈0．01），其中对大鼠子宫炎的作用随给药时间延长而增强；⑤中高剂量精参颗粒能显著提高小鼠热板所致的痛阈（P〈0．01）；明显降低冰醋酸所致的扭体次数（P〈0．05或P〈0．01）；表明精参颗粒具有镇痛作用。结论：①精参颗粒具有改善“气虚和血虚”等病证、抑制和抗细菌感染、抗炎及镇痛作用；且其作用呈现较好的量效及时效关系。②按小鼠（5．0g／kg）和大鼠（3．5眺g）有效剂量计算，并结合临床用药的可操作性，拟推荐精参颗粒临床成人日用剂量为一次12g（1包），一日3次。⑧根据动物实验的时效关系，结合慢性盆腔炎临床反复发作和治疗周期较长的特点，拟推荐临床用药4周为一疗程。慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者血清干扰素γ水平的检测及临床意义
摘要：目的：探讨血清干扰素-γ（IFN-γ）在慢加急性重型乙型病毒性肝炎（acute．on．chronihepatitisBloverfailure，ACHBLF）发病中的作用，旨在为ACHBLF的诊治提供理论参考。方法：采用ELSIA法测定30例ACHBLF患者和30例CHB患者血清IFN-γ水平，采用全自动生化仪检测肝功能常规指标。结果：AcHBLF组IFN-γ水平显著高于CHB组，相比较有显著性差异（P〈0．05）；ACHBLF组TBIL、ALT水平显著高于CHB组，相比较有显著性差异（P〈0．05）；ACHBLF组PTA水平显著低于CHB组，相比较有显著性差异（P〈0．05）；ACHBLF患者的IFN．叮水平与TBIL呈显著正相关（r=0．818，P〈0．01），与PTA呈显著负相关（r=0．529，P〈0．05），而与ALT无明显相关性（r=0．172，P〉0．05）。结论：IFN-γ参与ACHBLF的发病，并且是ACHBLF病情严重程度的重要指标之一。曲美他嗪对肺动脉栓塞所致右心衰竭的保护作用
摘要：目的：评价曲美他嗪（TrimetazidineTMZ）对肺动脉栓塞所致右心衰竭的保护作用，及其对MMP-2，MMP-9和TIMP-1mRNA在右心室中表达的影响。方法：雄性wistar大鼠随机分为三组：右心衰竭组（RHF）左侧股静脉注射1％玻球微粒3mV100g；等量生理盐水注射为对照组（CON）；曲美他嗪治疗组（TMZ）为肺动脉栓塞后给TMZl0mg／kg／天。6周后各组大鼠首先进行经胸超声评价右心功能后取材进行病理学检测，以及RT—PCR检测右心室MMP-2，MMP-9，TIMP-1mRNA表达水平。结果：RHF组大鼠超声检测发现右心室内径扩大并伴有三尖瓣反流，三尖瓣环收缩期峰值位移下降（TAPSE）；Masson染色显示右心室纤维化增加；RTPCR结果显示MMP-2，MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平明显升高；经TMZ治疗组大鼠右心室内径减小，TAPSE增加，而MMP-2，MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平下降。结论：曲美他嗪能够抑制右心室纤维化，改善右心功能，可能与调节MMP-2，MMP-9和TIMP-1表达水平有关。胃癌肝转移术中射频消融治疗的临床意义
摘要：目的：评估胃癌根治术同时性射频消融治疗在治疗胃癌肝转移的临床意义。方法：收集2008年1月至2010年12月19例胃癌肝转移患者，合计转移灶33个，转移灶小于4厘米，且合计不超过4个转移灶。射频消融治疗在术中超声引导下完成。Kap-lan—Meier法分析无病生存期，无肝转移生存期及总生存期。对临床病理学因子及肝转移相关因子采用Log-rank法Cox风险比例模型解析。结果：中位无病生存、无肝转移生存及总生存期为355，394及488天。有3例患者获得长期的无复发生存。单因素分析显示，较早的T分期、N分期，较少的转移灶数量，较小的转移灶直径与良好的预后相关。多因素分析提示，病灶数量与病灶直径为独立预后因子。结论：肝转移射频消融治疗安全性好，对单发的小于4cm转移灶，以及多发病灶合计直径小于4cm者射频消融治疗较为适用，可有显著生存获益。部分患者可迭临床治愈。对于胃癌肝转移的合适病例，射频消融治疗值得推广。超声造影在肝癌分级应用中的前瞻性研究
摘要：目的：利用超声造影研究高分化和低分化肝癌患者的肿瘤血流灌注情况，探讨超声造影在肝癌分级的诊断价值。方法：选择我院原发性肝癌（HCC）患者65例并根据活检肝细胞癌病变和肿瘤分级不同分为A组37例（高分化组）和B组28例（低分化组），对两组患者行超声造影检查，分析超声造影的血流灌注状态。结果：A组与B组病灶的到达时间（AT）、峰值时间（TTP）和峰值强度（PI）均存在显著的差异性（tAT=7．266，PAT=0．000；tTTP=5．966，PTTP=0．000；tPI=8．219，PPI=0．000）。A组与B组间的病灶增强时间（1）、增强斜率（2）、清除时间（3）、清除斜率（4）具有差异，并且差异具有统计学意义（t1=7．266，PI=0．000；t2=317，P2=0．000；t3=8．880，P3=0．000；t4=6．178，P4=0．000）。结论：超声造影可作为一种新型的肝癌分级方法，对于早期诊断肝癌和获得肿瘤分级具有很大的临床价值。比较老年与中青年二尖瓣腱索断裂的超声心动图特征和规律性
摘要：目的：比较老年二尖瓣腱索断裂（RMCT）患者与中青年RMCT患者的临床表现以及超声心动图特点，为老年RMCT患者的诊断和治疗提供依据。方法：选择年龄〉60岁的老年RMCT患者53例定义为老年组，年龄〈60岁的中青年RMCT患者57例定义为中青年组，使用经胸超声心动图（TTE）和经食道超声心动图（TEE）测量各组的心腔尺寸，观察二尖瓣活动形态以及腱索断裂的部位和程度，记录瓣膜的返流情况。结果：老年组中风心病仅占5．66％，而中青年组风心病患者占50．88％，差异有统计学意义（X2=27．221，P=0．000）。老年组多合并有多种慢性疾病，其中合并高血压者占83．02％，合并冠心病者占60．38％，合并2型糖尿病者占37．74％，均高于中青年组，其中合并高血压的差异有统计学意义（X2=-31．459，P=0．000）。老年组中心功能Ⅳ级的比例远高于中青年组，差异有统计学意义（X2=10．489，P=0．001）。老年组全心扩大、肺动脉高压的例数显著高于中青年组，差异有统计学意义（全心扩大：XZ=11．376，P=0．001；肺动脉高压：X2=-20．362，P=0．000）。老年组中二尖瓣细小腱索断裂的例数多于中青年组，差异有统计学意义（x2=9．799，P=0．002），粗大腱索断裂的例数少于中青年组，差异有统计学意义（x2=11．118，P=0．001）。结论：合并有高血压、冠心病以及糖尿病等基础疾病的老年RMCT患者，应定期进行超声心动图的检查，同时给予合理的治疗，以降低心衰的发病率。不同血液透析方法对终末期肾病患者钙磷代谢的影响
摘要：目的：观察不同血液透析方法对终末期肾病患者钙磷代谢的影响。方法：以120例终末期肾病患者为例，比较3种透析方式：血液透析、血液透析滤过、高通量血液透析（各40例）对终末期肾病患者的钙磷代谢及甲状旁腺素的影响。结果：3组透析方法中，HFHD、HDF组治疗前后血钙、磷含量差异有统计学意义，血钙升高，血磷、甲状旁腺素得到较好的清除（P〈0．05）。结论：HFHD、HDF透析使低钙血症改善，血清磷、PTH下降显著。这说明HF，HD、HDF透析对改善钙磷代谢紊乱有积极作用，能有效预防甲旁亢。64排CT血管造影在脑动静脉畸形诊断中的价值
摘要：目的：探讨64排CT血管造影（computedtomography angiographycTA）对脑动静脉畸形（cerebral arefiovenousmalformation，AVM）的诊断价值。方法：16例AVM患者，均行64排螺旋CT血管造影检查，使用多种重建方法，由两名有经验的医生对畸形血管团进行分析。结果：16例均为单发瘤巢，16例AVM均显示了大小不等的畸形血管团及供血动脉和引流静脉，其中，2例同时伴脑出血（12．5％），3例有出血后软化灶形成（18．75％），16例发现有供血动脉31支，16例发现有明确的引流静脉21支。结论：64排CTA安全．快速．结合多种重建方法．可以清晰显示AVM的供血动脉、瘤巢．引流静脉．为临床治疗提供了可靠的信息．洛铂与紫杉醇联合治疗晚期卵巢癌的临床观察
摘要：目的：观察洛铂与紫杉醇联合化疗治疗晚期卵巢癌的近期疗效及不良反应。方法：50例晚期卵巢癌（Ⅲ期或Ⅳ期）患者，其中26例患者采用洛铂＋紫杉醇静脉化疗，其中洛铂30mg／m2，d1天，紫杉醇135～175mg／m。dl天。24例患者采用顺铂＋紫杉醇静脉化疗，其中顺铂25mg／m2，d1-3天，紫杉醇135～175mg／m。dl天，2～4个疗程观察疗效。结果：26例洛铂组患者中，完全缓解7例，部分缓解8例，稳定9例，进展2例，有效率为57．7％。24例顺铂组患者中，完全缓解5例，部分缓解8例，稳定6例，进展5例，有效率为54．2％。主要毒副反应为骨髓抑制、骨骼酸痛、神经毒性和脱发。结论：洛铂联合紫杉醇治疗晚期卵巢癌疗效较好，毒副反应可以耐受。
