黄体酮对3T3-L1脂肪前体细胞成脂分化后细胞中UCP2基因表达的影响
摘要：目的：观察体外培养条件下3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化成的成熟脂肪细胞中解偶联蛋白2（UCP2）mRNA表达水平及黄体酮对其表达的影响。方法：体外培养3T3-L1脂肪细胞，在诱导3T3．L1脂肪细胞分化成熟后，经不同黄体酮浓度10μm／25μM／50μM／75μM/100μM刺激后，抽提总RNA，用RT—PCR检测UCP2mRNA的表达。结果：黄体酮会促进成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达，（P〈0．05）其中25μM浓度刺激下UCP2mRNA表达量最高。结论：体外培养中，黄体酮对成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达与调控具有一定的影响。顺铂诱导非洲绿猴肾细胞凋亡模型的建立
摘要：目的：建立常见凋亡诱导剂顺铂（Cisplatin）诱导非洲绿猴肾细胞（Vero）凋亡的模型，为进一步研究抗凋亡基因在细胞凋亡中的分子机理打下基础。方法：分别以不同浓度的顺铂处理Veto细胞48h，用噻唑蓝（MTT）比色法、Gimesa染色、流式细胞术检测，观察处理后细胞的生长活力和凋亡情况。结果：以未处理的细胞作为对照组，1、2、3、4,5μg／mL的顺铂处理的Vero细胞生存率分别为（79．02±6．10）％、（68．84±4．42）％、（56．66±4．07）％、（46．83±3．76）％、（29．04±5．93）％（P〈0．01）；经顺铂诱导后细胞形态学发生明显改变，出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征；流式细胞仪检测，0、1、2、3、4、5μg／mL的顺铂处理的Vero细胞后凋亡率分别为1．66％±0．19％、16．65％±1．26％、24．82％±1．03％、36．22％±1．04％、48．49％±1．24％、43．34％±1．17％（P〈0．01）。结论：本实验成功建立顺铂诱导非洲绿猴肾细胞凋亡模型，将有助于进一步探讨目的基因在Vero细胞凋亡作用的的分子机制。雷帕霉素对内皮细胞迁移和血管内皮生长因子表达的影响
摘要：目的：研究不同浓度的雷帕霉素对体外培养的人血管内皮细胞（rE）4移及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：用含10％胎牛血清的细胞培养基（DMEM）培养正常VE细胞，用10nM，50nM，100nM和200nM的雷帕霉素孵育vE细胞24h，Westernbloting测定雷帕霉素对VE中mTOR和VEGF表达的影响，Transwell迁移模型观察不同浓度的雷帕霉素对内皮细胞迁移影响。结果：①雷帕霉素可显著抑制VE的迁移，除了在100riM之外，基本呈浓度依赖性的。100nM雷帕霉素对VE迁移的抑制作用显著减弱（P〈0．01）。②雷帕霉素对mTOR和VEGF165的表达呈浓度依赖性的抑制；而VEGF121的表达则是先升高后降低，在100nM雷帕霉素时表达最高，远远高于该浓度雷帕霉素时VEGF165的表达，可以解释100nM雷帕霉素时VE迁移抑制显著减轻的现象。结论：雷帕霉素抑制了VEGF165的表达，并且其对VE迁移抑制的效应主要由VEGF165表达减少所介导。VEGF121的表达在一定雷帕霉素浓度范围内可显著上调，从而显著改善了雷帕霉素诱导的VEGF165表达减少所致的内皮细胞迁移抑制。藏红花素诱导人胶质瘤U251细胞内质网应激性凋亡的研究
摘要：目的：研究藏红花素对人胶质瘤U251细胞的促凋亡作用和可能的机制。方法：不同浓度藏红花素处理U251细胞后，MTT法检测细胞活力，TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果：①藏红花素显著抑制U251细胞的增殖，并诱导其发生凋亡。②藏红花素增加了U251细胞胞浆内钙离子的含量，并上调了内质网分子伴侣GRP78的表达。③藏红花素处理后的U251细胞内质网相关凋亡分子CHOP，Caspase-4，JNK活性明显增高。结论：藏红花素通过诱导内质网应激性凋亡抑制人胶质瘤U251细胞的增殖。SFRP4抑表达对HT-29细胞侵袭能力的影响
摘要：目的：观察SFRP4对HT29细胞侵袭转移能力的影响。方法：以HT29细胞为研究对象，SFRP4siRNA通过脂质体转染HT29细胞，westernblot检测HT29细胞中wnt、细胞核β—Catenin蛋白的表达、elisa法检测细胞培养上清MMP-2、MMP．9的含量，Transwell小室观察成的转移侵袭能力。结果：干扰SFRP4后能显著降低HT29细胞中Wnt、细胞核中B—Catenin蛋白的表达、细胞培养上清MMP-2、MMP-9的含量，（P〈0．01），降低HT29细胞的转移侵袭能力（P〈0．01）。结论：抑制SFRP4表达能抑制HT29细胞的转移侵袭，其机制可能与抑制HT29细胞wnt信号通路有关。黄芪皂苷Ⅳ对心肌缺血/再灌注损伤的保护及抗凋亡作用的研究
摘要：目的：探讨黄芪皂苷Ⅳ对大鼠心肌缺血／再灌注损伤的保护作用及抗凋亡作用。方法：研究黄芪皂苷Ⅳ对大鼠收缩压和舒张压的作用；建立大鼠心肌缺血／再灌注模型，在缺血前给予黄芪皂苷Ⅳ处理，观察心律失常的改变，测定血液中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的变化，检测计算凋亡心肌细胞百分比及对P-STAT1、P-STAT3蛋白表达的调控作用。结果：黄芪皂苷Ⅳ可降低大鼠收缩压和舒张压，心肌缺血／再灌注前，预先给予黄芪皂苷Ⅳ有抗心律失常作用，降低血液中LDH和MDA含量，提高SOD活性，降低凋亡心肌细胞百分比，显著增加P-STAT1蛋白表达而同时降低P-STAT3蛋白表达。结论：黄芪皂苷Ⅳ对心肌缺血／再灌注损伤具有一定的保护作用，减少心肌细胞凋亡，其机制可能与抑制P—STAT1，诱导P—STAT3表达有关。维吾尔药神香草调节哮喘大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱的实验研究
摘要：目的：观察维吾尔药（维药）神香草对哮喘大鼠模型神经内分泌免疫网络若干组分的影响。方法：取雄性健康Wistar大鼠50只，随机分为正常对照组，哮喘模型组，神香草低、中、高剂量治疗组。采用致敏和雾化的方法制备哮喘模型。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清中白介素-4（IL^4）、白介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）、皮质酮（CORT）水平；放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量；采用实时定量-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA表达水平。结果：哮喘反复发作时，大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴紊乱，哮喘大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血浆ACTH无明显变化，实验各组血清CORT水平升高（P〈0．05），神香草高剂量组血清CORT含量高于低剂量组（P〈0．05）。细胞因子IFN-γ无明显变化，IL-6、IL-4有下降趋势（P〈0．05）。结论：哮喘反复发作的大鼠存在NEI网络的紊乱；神香草可以增强下丘脑．垂体．肾上腺皮质（HPA）轴的功能，改善细胞因子的平衡。这些可能是其治疗哮喘的机制之一。脑电监测SD大鼠异氟醚全身麻醉模型的建立及脑电分析
摘要：目的建立脑电监测SD大鼠异氟醚全身麻醉模型并分析脑电监测结果。方法：随机选取SD大鼠20只，先行脑电电极置入术，术后使用密闭吸入麻醉动物行为学观察圆筒，观察异氟醚引起的麻醉诱导、维持、觉醒状态并记录诱导、觉醒时间。将记录的行为学结果对照典型脑电图波形改变判断麻醉深度。结果：实验SD大鼠均检测出脑电图，通过对照行为学观察发现动态脑电监、}测结果同异氟醚麻醉过程进展一致。在麻醉过程中SD大鼠出现典型的全身麻醉脑电循环。结论：动态脑电监测和SD大鼠行为学观察可以准确反应全身麻醉深度。姜黄素预防高原缺氧大鼠认知功能障碍的电生理机制
摘要：目的：探讨姜黄素（curcumin）预防高原缺氧大鼠认知功能障碍的电生理机制。方法：将30只成年雄性SD大鼠随机分为健康对照组、模型组（Model组）、姜黄索[按体重60rag／（kg·d）】治疗纽（curcumin组）。造模后，检测脑片水平的海马的LTP变化，并运用膜片钳技术检测海马CA1区神经元的电生理变化。结果（1）给予HFS刺激后各组均可诱发LTP并持续1h以上，与对照组比较模型组组HFS刺激后LTP明显被抑制（P〈0．05），姜黄素可减轻缺氧所致的LTP抑制（P〈0．05）；（2）高原缺氧使海马CA1神经元阈电位升高，动作电位（AP）数量减少，兴奋性降低，姜黄素干预可明显减轻高原缺氧对细胞神经元的抑制。结论：姜黄素可显著改善高原缺氧大鼠认知功能障碍，其可能机制是通过维持海马CA1细胞的兴奋性减轻高原缺氧对认知功能的损伤。头孢曲松神经保护作用的研究
摘要：目的：探讨头孢曲松通过抑炎通路发挥神经保护作用的机制。方法：45只雄性sD大鼠，随机分为3组（n=15），预处理组在大鼠大脑中动脉阻断（MCAo）前5d每日给予腹腔注射头孢曲松缓冲液（200mg／kg），观察局灶性脑缺血2h再灌注24h后，各组间大鼠神经行为学评分、脑梗死容积变化、小胶质细胞和IL-1β的数量变化。结果：再灌注24h后，头孢曲松预处理组可改善大鼠神经行为学评分和脑梗死面积（P〈0．05），小胶质细胞活化数量减少（P〈0．05），ELISA检测IL-1β分泌数量有显著下降趋势，但无统计学差异（P=0．18）。结论：头孢曲松可以部分抑制小胶质细胞活化，减少IL-1β释放发挥神经保护作用。姜黄素对高原缺氧大鼠认知功能障碍的预防作用
摘要：目的：探讨姜黄素（curcumin）对高原缺氧大鼠认知功能障碍的预防作用。方法：将30只成年雄性SD大鼠随机分为健康对照组、模型组（Model组）、姜黄素【按体重60mg／（kg·d）】治疗组（curcumin组）。采用Morris水迷宫实验方法检测缺氧后大鼠学习记忆功能变化，同时检测脑片水平的LTP变化。结果：（1）模型组大鼠寻找平台的潜伏期明显长于对照组，具有统计学意义（P〈0．05），姜黄素组寻找平台的潜伏期相对于模型组显著缩短（P〈0．05）。撤离平台后，模型组大鼠在平台所在象限的停留时间明显短于对照组（P〈0．05），姜黄素干预后大鼠在平台所在象限的停留时间较模型组显著延长（P〈0．05）。（2）给予HFS刺激后各组兴奋性突出后电位（fEPSP）斜率较前明显增加，均可持续1h以上，与模型组比较缺氧组HFS刺激后fEPSP斜率明显减小（P〈0．05），姜黄素可减轻缺氧所致的fEPSP斜率减小（P〈0．05）。结论：姜黄素可改善慢性缺氧大鼠认知功能障碍，但其具体机制尚有待于进一步研究。肌苷促进脑损伤后神经功能恢复的实验研究
摘要：目的：中枢损伤是目前致残率最高的疾病之一，肌苷对于神经损伤后功能恢复的促进作用已经成为研究热点，本研究拟建立一侧前肢瘫痪的大鼠脑外伤模型，证实肌苷治疗促进中枢损伤后上肢功能恢复的有效性，同时初步探索其机制。方法：建立一侧运动皮层冲击损毁的大鼠模型，通过肢体不对称实验、抓取实验等行为学观察证实其惠侧上肢功能受损，后在实验组进行肌苷药物14天，观察28天内上肢功能的恢复情况，与对照组作对比。证实其行为学上的有效性，同时对损伤侧大脑进行顺行BDA染色，探索其内在机制。结果：通过28天的观察发现经过肌苷治疗的的实验组大鼠肢体不对称实验、抓取实验等行为学评分明显好于隐性对照组，顺行BDA染色证实其有促进损伤周围健存皮层突触再生和代偿的作用。结论：肌苷可以促进中枢损伤后大鼠残存神经元得突触再生，使其大脑能在最大程度上代偿其丧失的功能，该药物可能会成为一种新的中枢损伤治疗的前体药物。青藤碱对慢性非细菌性大鼠前列腺炎大鼠炎症反应及P38Mapk信号通路的影响
摘要：目的：观察青藤碱对慢性非细菌性大鼠前列腺炎大鼠炎症反应及P38Mapk信号通路的影响。方法：将SD大鼠随机分为对照组、青藤碱高、低剂量组。对照组组给予生理盐水灌胃，青藤碱低、中、高剂量组分别给予青藤碱40,80、160mg／kg灌胃，28天后处死。realtimeRT-PCR法和westernblot法检测肿瘤组织中TNF-、IL-6rnR_NA和TNF-、IL-6、P—P38MAPK蛋白的表达。结果：青藤碱能明显降低慢性非细菌性大鼠前列腺炎大鼠前5,1腺组织中TNF-、IL-6mRNA和TNF-、IL-6、p-P38MAPK蛋白的表达。结论：青藤碱能抑制慢性非细菌性大鼠前列腺炎大鼠前列腺炎症反应，其机制可能与抑制P38MAP信号通路有关。刺五加胶囊对抑郁大鼠海马组织TH、TPH表达的影响
摘要：目的：探讨刺五加胶囊对抑郁大鼠海马组织TH、TPH表达的影响。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组和刺五加胶囊低、中、高剂量组，21d慢性轻度不可预见性应激刺激法（chronicunpredictablemildstress，CUMS）制备大鼠抑郁模型，对照组给予生理盐水1ml灌胃，刺五加胶囊低、中、高剂量组分别给予刺五加胶囊（300mg／kg，600mg／kg，1200mg／kg）灌胃，取大鼠海马组织。分别采用realtimeRT-PCR和westernblot方法观察大鼠海马组织酪氨酸羟化酶（TH）、色氨酸羟化酶（TPH）的表达。结果：刺五加胶囊低剂量组能明显升高海马组织中TH、TPHmRNA和蛋白的表达（P〈0．05），中、高剂量组能显著升高海马组织中TH、TPHmRNA和蛋白的表达（P〈0．01）。结论：刺五加胶囊能升高抑郁大鼠海马组织中TH、TPH的表达。CD105shRNA对激光诱导的脉络膜新生血管的干预作用及其机制
摘要：目的：观察CD105shRNA对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用，并初步探讨其作用机制。方法：40只BN大鼠单眼采用半导体激光建立CNV模型。随机取20只大鼠于建模后1天使用Pgenesil-eng2转染大鼠视网膜和脉络膜作为实验组。在建模后第14天行FFA检查，观察实验组与对照组视网膜激光斑的渗漏情况。各取5只实验组和5只对照组大鼠，行脉络膜铺片，检测并比较脉络膜新生血管渗漏面积。另32只BN大鼠任取一眼建立CNV模型，其中任取20只大鼠于建模后次日进行Pgen-esil—eag2转染，作为实验组。12只建模眼作为对照组，未建模眼作为空白对照组。于基因转染后1w，2w，3w和4w各取5只实验组大鼠和3只对照组大鼠眼球，获取每个时间点实验组、对照组和空白对照组的脉络膜组织。检测各组每个时间点CDl05和VEGF在mRNA水平的表达。结果：FFA显示光凝后第14天时，对照组的渗漏率为63．2％，实验组为24．6％。实验组的BN大鼠眼底渗漏点数较对照组少，渗漏强度较弱。两组间比较有显著性差异。脉络膜铺片结果显示：2周时对照组大鼠的CNV面积为（31．22±1．46）×10^3μm2，实验组大鼠的CNV渗漏面积为（14．46±0．82）×10^3μm2，两组间比较有显著性差异。RT—PCR结果显示：实验组VEGFmRNA及CDl05mRNA的表达变化规律与对照组相似，但各个时间点的表达量较对照组均明显下降，其中实验组VEGFmRNA于2w时的表达约为对照组的36．7％；实验组CD105mRNA在第2w时约为对照组的21．68％。结论：通过沉默CD105基因的表达可以抑制大鼠CNV的生成，下调VEGF的表达可能是其作用机制之一。CD105基因有望成为CNV的基础研究热点和临床治疗的新靶点。利用RNAi抑制PARs防治脑缺血性损伤的实验研究
摘要：目的：利用RNA干扰技术，通过重组腺病毒导入，抑制脑组织中PARs基因的表达，观察神经功能缺陷评分、缺血脑组织梗死体积的变化，为缺血性脑血管疾病的基因治疗提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠随机分组。以重组腺病毒介导的无序PARs基因shRN段、生理盐水进行干预，干预3天后以线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉永久闭塞模型，各组分别于线栓后24h、72h进行神经功能缺陷评分并断头取脑，应用4％TTC染色测脑梗死体积。结果：1．缺血后24h、72h同一时间点：①实验组分别与对照组、生理盐水组对比，神经功能缺陷评分明显降低（P〈0．05），脑梗死体积明显减小（P〈0．05）；②对照组与生理盐水组对比，神经功能缺陷评分、脑梗死体积无明显差异（P〉0．05）。2．各组组内缺血后24h、72h对比，神经功能缺陷评分、脑梗死体积各组均有明显差异（P〈0．05）。结论：重组腺病毒介导的RNAi能有效抑制脑组织中PARs基因的表达，缩小脑梗死体积，改善神经功能缺陷评分。对比分析多种介入途径治疗门静脉系统血栓的临床疗效
摘要：目的：对比分析多种介入途径治疗门静脉系统血栓的临床疗效。方法：收集从2001年1月至2009年3月经我科治疗的37例门静脉系统（包括门静脉、肠系膜上、下静脉及脾静脉）血栓形成患者，根据介入治疗途径的不同分为三组：A组（13例）行经TIPS途径门静脉行碎栓溶栓及置管溶栓术；B组（19例）行直接经皮穿肝门静脉碎栓和或置管溶栓术；C组（5例）行经肠系膜上动脉置管溶栓治疗。所有的患者术后定期随访1—12个月，复查CT或彩超了解门静脉系统的血流变化及临床症状恢复情况。结果：A组：经治疗出院时11例（85％）患者门静脉完全再通，；1例（8％）门静脉血流部分再通，1例（8％）术后第二天因出血死亡。术后随访1、3、6、12月门静脉通畅率分别为：85％，77％，77％，62％；所有患者的临床症状均明显缓解。B组：经治疗出院时7例（37％）门静脉完全再通，9例（47％）部分再通，3例（16％）因出血中止溶栓；随访1、3、6月、12月门静脉通畅率分别为：32％，26％，16％，16％。C组：经治疗出院时5例（100％）患者门静脉均未再通，通畅率为0％，术后随访1-3个月内4例患者I临床症状得到部分缓解。结论：经TIPS途径治疗后门静脉的再通率及临床症状改善均好于直接经皮穿肝及经肠系膜上动脉途径。经肠系膜上动脉置管溶栓法无法使已有侧支形成的门静脉主干复通，仅能一定程度缓解患者的临床症状。PTEN蛋白表达与前列腺癌病理分期的关系
摘要：目的：探讨PTEN蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学S-P方法，检测前列腺癌及良性前列腺增生组织中PTEN蛋白的表达。结果：PTEN蛋白表达阳性随肿瘤细胞病理分级、临床分期的增高，PTEN蛋白阳性表达率降低。结论：PTEN蛋白异常表达在前列腺癌的进展中有重要作用，检测PTEN蛋白的表达有助于判断病情及预后。
