基于生物信息学技术筛选影响胶质母细胞瘤化疗敏感性相关基因的研究
摘要：目的：应用生物信息学技术筛选影响胶质母细胞瘤（GBM）化疗敏感性的相关基因。方法：对2批胶质瘤患者BIOSTAR基因芯片进行分析。通过随访完善临床资料，筛选芯片中胶质母细胞瘤患者生存期长、短两组间的差异基因，明确差异基因参与的功能和通路，并构建与烷化剂相关基因的信号传导网络，结合芯片数据、患者预后和信号传导网络，筛选GBM化疗敏感性的相关基因。结果：两组芯片中间差异基因有503条。2批芯片的差异基因主要参与62项基因功能，主要参与31条信号传导通路。通过对差异基因功能、通路，烷化剂信号转导网络的分析，得到影响胶质母细胞瘤化疗敏感性的核心的差异基因IFNGR2、IL8、ITGA5、TNFRSF1B。结论：通过严谨的实验设计和科学的统计学判别，结合患者完整的生存资料，本研究成功地应用生物信息学技术对基因芯片的大量数据进行挖掘和分析，并筛选出了可能影响GBM患者预后和化疗药物敏感性的基因，为进一步功能实验和患者个体化治疗奠定了基础。乙型肝炎病毒RT区变异及其与基因型分布的关系
摘要：目的：探讨大样本乙型肝炎病毒（HBV）感染患者RT区耐药位点变异的流行情况，及各耐药位点变异与HBV基因型的关系。方法：采用P区测序法对1117例慢性乙型肝炎患者的血清病毒进行P区测序、进化树分型。结果：RT区耐药位点变异发生率与基因型关系密切，在基因型C患者中的变异发生率远远高于基因型B患者（P=O．000）。Rt180、rtM204V、rtM204I、rt181、rt213位点变异均与基因型c有关（P〈O．05）。主要的三种变异类型rt180＋rtM204V、rtM204I、rt180＋rtM204I间基因型分布存在显薯差异（P=0．003）。不同HBeAg状态下，耐药变并的发生有显著差并（P=O．020），特别是rt181和rt236位点变畀。结论：HBV基因型影响RT区耐药变异发生率及变异类型。且耐药变异发生率也与HBeAg状态有关。心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的CREG蛋白表达载体的构建及鉴定
摘要：目的：构建心肌特异性α-肌球蛋白重链（α—myosin heavy chain，α—MHC）启动子启动E1A基因阻遏子（cellular repressor of E1A—stimulated genes，CREG）和增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）融合的真核表达载体。绿色荧光蛋白作为报告基因，方便在心肌细胞中直接观察CREG蛋白的表达，为心肌特异性转CREG基因动物模型制备提供载体。方法：用BamHI和EcoRI双酶切pcDNA3．1myc—His／hCREG质粒得到CREG基因，亚克隆入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-N1中，构建pCREG-EGFP-N1；根据Genebank中公布的α-MHC基因的启动子序列，人工合成pUC57-α-MHC启动子基因序列，经AseI和NheI双酶切得到启动子α—MHC，亚克隆入pCREG—EGFP-N1中替代原CMV启动子，构建pα-MHC-CREG—EGFP-N1，测序鉴定。用脂质体法将该质粒转染体外培养的小鼠原代心肌细胞，荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达；Western blot检测CREG蛋白的表达。结果：成功构建pα—MHC—CREG-EGFP-N1质粒，酶切及测序结果正确；成功转染入原代培养小鼠心肌细胞，在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达，Westem blot检测到CREG蛋白的表达。结论：重组质粒pα-MHC—CREG—EGFP-N1体外转染入原代培养小鼠心肌细胞后，目的基因能够在心肌细胞中有效表达，检测方法简便可靠，为下一步建立心肌细胞特异性表达CREG的过表达转基因小鼠、深入探讨CREG在心肌疾病发生中的生物学功能研究奠定了基础。微量失血对左肝外叶切除＋定容失血性休克大鼠生存率的影响
摘要：目的：观察在大鼠左肝外叶切除＋定容失血性休克模型制作过程中微量失血对最终大鼠生存率的影响。方法：45只SD大鼠按不同的放血比例分为三组，以Wigger改良法建立左肝外叶切除＋定容失血性休克模型，严格标化放血前的各项手术操作和观测指标，比较三组大鼠最终生存率的差异。结果：在分别按2．4ml／100g（A组）、2．5ml／100g（B组）、2．6ml／100g（C组）比例定容失血的大鼠模型中，各组大鼠生存率分别为：A组66．67％，B组42．86％，C组7．69％，A、B两组与C组大鼠的生存率相比较存在明显差异（P〈0．05）。结论：即使是0．1ml／100g的微量失血对于该模型大鼠的生存率也是有显著影响的，这一点在大鼠的定容失血性休克模型实验中是不应被忽视的。牛磺胆酸钠在大鼠急性胰腺炎模型中的半数致死量（LD50）研究
摘要：目的：通过使用不同浓度的牛磺胆酸钠（Tc）建立急性胰腺炎（AP）模型，观察相应的死亡率，进而计算其半数致死量。方法：使用不同浓度的TC（0％（wt／v1）、1％、2％、3％、4％、5％、9％）观察AP造模72小时后各组的死亡率。同时分析TC浓度与组织病理评分、血清淀粉酶和外周血细胞变化的相美性。结果：TC的卓数致死量为3．409％。并且，TC的浓度与组织病理评分、血清淀粉酶和外周血细胞变化密切相关。结论：TC所致AP造模的最佳剂量为3．409％。胰岛素样生长因子-1受体（IGF—IR）在乳腺癌组织中的表达及其临床意义初探
摘要：目的：检测分析胰岛素样生长因子-1受体（IGF-IR）在乳腺癌组织中的表达状况及其临床意义。方法：应用半运用半定量RT-PCR方法分析84例乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中IGF—IR基因mRNA的表达水平，并分析其表达与患者临床病理特征及预后之间的关系。结果：乳腺癌组织中IGF-IR基因mRNA表达水平显著高于癌旁乳腺组织，二者具有统计学差别（P〈0．001）。乳腺癌组织中IGF-IR基因mRNA表达水平与肿瘤组织分化程度及乳腺癌患者的TNM分期和淋巴结转移情况显著相关（P值分别是0．005，0．025和0．041）。另外，高表达IGF-IR的乳腺癌患者的五年总体生存率（38．3％）显著高于低表达IGF-1R的患者（49．7％；P=0．009）。多因素COX模型分析结果表明：IGF-IR基因mRNA表达水平是乳腺癌患者的一个独立预后分子（HR=2．78，95％CI：1．94-3．94，P=0．041）。结论：IGF-IR基因表达水平上调在乳腺癌发展过程中起着重要的作用。IGF-IR基因mRNA表达水平有望成为临床乳腺癌患者预后判断的一个重要分子标志物。抗日本血吸虫pVAX1／SjHGPRT·SDISP多价疫苗的构建方法探讨
摘要：目的：探讨抗日本血吸虫生殖产卵编码基因多价疫苗pVAX1／SjHGPRT·SDISP的构建方法并从基因与蛋白水平验证该构建方法是否成功。方法：分别以pcDNA3．0／SjHGPRT、pcDNA3．0／SjSDISP为模板，设计引物扩增SjHGPRT、sjSDISP，采用overlap方法扩增全长SjHGPRT·SDISP。将纯化后的产物sjHGPRT·SDISP以及pVaxl质粒采用KpnI和XbaI双酶切，1％低熔点胶回收目的DN段以及酶切后Pvaxl载体片段双胶连。连接产物转化至DH5a细胞。挑选阳性克隆采用双酶切以及测序方法从基因水平鉴定是否构建成功。将构建产物免疫观察动物，采用免疫组化方法从蛋白水平鉴定疫苗pVAX1／SjHGPRT·SDISP是否构建成功。结果：酶切方法以及测序结果均显示重组质粒的插入序列分别与目的基因完全一致，昆明小鼠肌肉组织酶免疫组织化学染色显示免疫组小鼠肌细胞中呈现较强的棕黄色颗粒，而阴性对照组肌细胞呈阴性。结论：真核重组质粒pVAX1／SjHG—PRT·SDISP构建成功，且在昆明鼠肌肉细胞内能够获得良好的表达。超微七味白术散对菌群失调小鼠的疗效研究
摘要：目的：研究超微七味白术散对抗生素引起的菌群失调小鼠的疗效。方法：将70只小鼠随机分为7组，以灌胃生理盐水建立对照组，以灌胃氨苄西林、头孢拉定、盐酸林可霉素复合抗生素构建菌群失调小鼠模型，以七味白术散传统汤剂及超微全量、1／2量、1／4量、1／8量治疗，通过粪便判断疗效。结果：七味白术散超微药剂与传统汤剂均能治疗抗生素引起的小鼠茵群失调，且超微七味白术散1／2量对小鼠的治疗效果已能达到传统汤剂水平。结论：超微七味白术散对菌群失调小鼠具有良好的治疗效果，与传统药物相比具有节约药材的价值。蛋白激酶C在血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞收缩中的作用
摘要：目的：研究蛋白激酶C（pkc）在血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞（GMC）收缩中的作用。方法：人肾小球系膜细胞系用于全部实验。应用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激蛋白激酶C抑制剂白屈菜红碱（CHE）处理或来处理的系膜细胞。利用激光扫描共聚焦显微镜测细胞内钙离子浓度。结果：①膜细胞经AngⅡ诱导后，细胞出现明显的大幅度起始钙离子浓度升高（vs．control，p〈0．05，n=16）⑦膜细胞经CHE预处理后减少AngⅡ诱导的GMC钙离子浓度（vsAngⅡ，p〈O．05，n=16）。结论：①血管紧张素Ⅱ诱导系膜细胞收缩。②蛋白激酶C参与血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞的收缩过程。外源促性腺激素处理后鸡产蛋及孵化研究
摘要：目的：探讨促卵泡素（FSH）对低产期肉用种母鸡在产蛋数量和孵化的影响，寻求较佳的用于提高低产期母鸡产蛋的激素剂量。方法：本试验采用同种激素不同剂量的处理方式，比较实验组和对照组产蛋量和孵化情况。结果：注射不同剂量的激素对鸡的产蛋有一定的影响，实验组一的平均产蛋数与对照组接近，其它四组均显著低于对照组（P〈0．05），孵化率与健雏率与对照组无显著差异（P〉0．05）。结论：小荆量激素处理对鸡产蛋量没有太大的影响，但大剂量会引起鸡生殖系统萎缩，激素处理对受精卵孵化及雏鸡生长并无负面影响。大剂量乙酰半胱氨酸对高龄患者慢性阻塞性肺病合并肺间质纤维化急性加重期的干预作用及机制初探
摘要：目的：观察大剂量乙酰半胱氨酸（NAC）对高龄患者慢性阻塞性肺病（COPD）合并肺问质纤维化（PIF）急性加重期的干预作用，并对干预机制进行初步探讨。方法：年龄大于80岁COPD合并PIF患者18例，分为对照组（8例）和观察组（10例），对照组给予常规治疗，观察组在对照组治疗基础上给予口服乙酰半胱氨酸颗粒600mg／次，3次／d，连用30天，观察两组治疗前后临床症状、肺功能指标（FVC、FEV1、FEV1／FVC）、动脉血氧分压（PaO2）、血液中细胞因子（IL-2和TNF—α）和影像学的变化。结果：观察组治疗总有效率和细菌培养转阴率显著升高（P〈0．05）；两组治疗后FVC、FEV1、FEV1／FVC、PaO2均较治疗前显著上升（P〈0．05），血液中IL-2和TNF—α较治疗前显著下降（P〈0．05）；组间比较存在显著性差异（P〈0．05）；观察组治疗后胸部CT见感染明显控制。结论：在常规治疗基础上合用大剂量NAC可以有效治疗急性加重期COPD合并PIF的老年患者，机制可能与抑制炎性因子表达、减少细菌在呼吸道内的附着有关。慢性髓细胞白血病急变期MICM分型回顾性分析
摘要：目的：探讨慢性髓细胞白血病急变期（CML-Be）患者的细胞形态学（M）、免疫学（I）、细胞遗传学（C）和分子生物学（M）的特征及应用价值。方法：对38例CML．BC患者的MICM分型进行回顾性分析。结果：以FAB分型为基础的形态学确诊率达94．7％；免疫分型结果为：38例CML-BC中CML-AML占71．0％，其中37．0％伴淋系表达；CML-ALL占23．7％，均为B细胞性，其中66．67％伴髓系表达；CML-MAL（混合性白血病）占5．3％，均为B系和髓系混合表达；CD34＋26例（68．4％），cD7＋10例（26．3％），均与CD34共表达。细胞遗传学结果显示：CML特征性Ph染色体检出率为94．3％（36／38），附加异常染色体检出率为60．5％（23／38），发生频率较高的类型是＋Ph、＋8和i（17q）；FISH检测BCR／ABL融合基因阳性率为100％，der（9）缺失占14．7％。RT—PCR检测20例患者BCR／ABL融合基因均为阳性，其中b2a2型（12／20），b3a2型（8／20），1例（1／20），b2a2和b3a2双阳性（1／20）。结论：CML—BC是造血干细胞疾病，原始细胞分化阻滞在早期阶段，预后差。MICM分型对CML-BC的诊断、治疗和预后判断均有重要价值。孕妇孕前体重指数与妊娠期糖代谢异常发病相关性的研究
摘要：目的：探讨孕前体重指数与妊娠期糖代谢异常发病及其临床特点的关系。方法：采用病例一对照研究的方法，对孕期在我院进行健康保健确诊为糖代谢异常并已完成分娩的孕妇130例作为病例组，同时随机抽取同期分娩的260例糖代谢正常孕妇作为对照组。用Logistic回归模型对孕前体重指数进行单因素分析；计算其相对危险度。结果：病例组孕妇孕前BMI指数大于25者占80．77％，明显高于对照组的（19．23％），差别有统计学意义（X2=30．469，P〈0．05）。logistic回归结果显示相对于BMI小于25者。BMI〉25组发生糖代谢异常的相对危险度是3．90，95％CI为2．23—6．41。结论：孕妇孕前体重指数是妊娠期糖代谢异常的独立危险因素，因此孕前控制体重指数是降低孕期糖代谢异常发生的关键因素。心理干预对非小细胞肺癌患者免疫功能及心理状态的临床研究
摘要：目的：研究心理干预对非小细胞肺癌患者免疫功能及心理状态的影响。方法：70例NSCLC患者随机分为治疗组（Tl=36）和阳性对照组（n=34），另设正常对照组（n=30），治疗组进行心理干预，阳性对照组和正常对照组不给予干预，30天后，计算患者的EORTCQLQ—C30积分并测定T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋指标。结果：治疗组患者干预后的生存质量（一般情况、躯体功能、社会功能等）及CD3＋、CD4＋、CD8＋含量较干预前均有差异（P〈0．01或P〈0．05），治疗组患者干预后的生存质量及CD3＋、CD4＋、CD8＋含量较阳性对照组干预后均有差异（P〈0．01或P〈0．05）。结论：心理干预对非小细胞肺癌患者的心理状态有积极作用，同时能提高患者的免疫力。枕大孔区减压环枕筋膜松解术治疗CMⅠ-SM的疗效分析
摘要：目的：回顾分析枕大孔区减压环枕筋膜松解术治疗Chiari畸形Ⅰ型合并脊髓空洞症（CMⅠ—SM）的疗效及其适应症。方法：随访71例行枕大孔区减压环枕筋膜松解术治疗的CMⅠ-SM患者，回顾手术疗效，利用多因素Logistic回归分析探讨病程时间（A）、是否伴有后颅窝畸形（B）、是否有增厚的环枕筋膜（C）及减压后脑脊液搏动情况（D）与疗效的关系，继而推断枕大孔区减压环枕筋膜松解术的适应症。结果：本组患者症状改善49例，占73．1％；稳定15例，占22.4％；恶化3例，占4．5％。A、B与疗效不具有统计学意义；C、D与疗效具有统计学意义。结论：枕大孔区减压环枕筋膜松解术是治疗CMⅠ-SM较为合理的术式；术中观察有增厚的环枕筋膜和（或）减压后脑脊液搏动改善良好可作为选择该术式的适应症。乳腺分型及乳腺厚度与全数字化乳腺X线摄影曝光条件及平均腺体剂量的关系
摘要：目的：探讨不同乳腺分型（Ⅰ型（脂肪型）、Ⅱ型（致密型）、Ⅲ型（中间型）、Ⅳ型（导管型））、不同乳腺厚度与全数字化乳腺X射线摄影曝光条件（kV、mms）、平均腺体剂量（mGy）之间的关系。方法：回顾性分析2009年9月-2010年6月间采用德国Siemens公司MAMMOMAT Novation DR全数字化乳腺摄影系统、自动曝光控制模式下摄影所获得的2000例头尾位和内外侧斜位乳腺片，分析7840幅Ⅰ级乳腺照片中不同乳腺分型、不同乳腺厚度的曝光条件、平均腺体剂量，以研究乳腺分型及乳腺厚度与全数字化乳腺X线摄影曝光条件及平均腺体剂量的关系。结果：当乳腺厚度相同时，Ⅱ型（致密型）乳腺的曝光条件及平均腺体剂量最大，Ⅳ型（导管型）次之，Ⅲ型（中间型）再次之，Ⅰ型（脂肪型）乳腺的曝光条件及平均腺体剂量最小。无论何种乳腺分型，随着乳腺厚度的增加，全数字化乳腺X射线摄影曝光条件及平均腺体剂量随之增加。结论：乳腺分型及乳腺厚度与全数字化乳腺X射线摄影曝光条件及平均腺体剂量关系密切，乳腺腺体组织越致密、厚度越厚，其曝光条件及平均腺体剂量就越大。血浆IIA分泌型磷脂酶A2水平与冠脉支架术后再狭窄关系
摘要：目的：测定稳定型冠心病患者支架植入术（percutanous coronary intervention，PCI）前血浆IIA分泌型磷脂酶A2（group IIA secretory phospholipase A2，IIA-sPLA2）的水平，以探讨该酶与冠脉支架术后再狭窄的可能关系。方法：稳定型冠心病行PCI患者63例，非冠心病患者39例，健康正常对照组42例，分别取外周静脉血测定血浆IIA-sPLA2酶浓度。PCI患者6个月后复查造影。结果：PCI患者术前该酶浓度显著高于正常对照组（P〈0．05），支架内再狭窄率34．9％，再狭窄（restenosis，RS）患者支架术前该酶水平与无再狭窄患者该酶水平无统计学差异（P〉0．05）。结论：PCI患者术前血浆IIA-sPLA2酶浓度显著高于正常对照组，但可能与支架术后再狭窄无关。GRP78在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮组织中的表达
摘要：目的：检测葡萄糖调节蛋白78（glucose—regulated proteins78，GRP78）在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达，研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法：取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织，其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在，用免疫组化的方法，检测GRP78在3种不同组织中表达的情况，分析G史P78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果：GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7．8％、85．6％、47．8％，GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义（P〈0．01）。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者，年龄较阳性者大；GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论：GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色，检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。
