ORP8与SPAG5相互作用并影响细胞周期
摘要：目的：筛选与氧化固醇结合蛋白相关蛋白8（Oyxterol binding protein related protein 8,ORP8）相互作用的蛋白质,为揭示ORP8在细胞中的功能及其机制提供线索,并根据相互作用蛋白质初步探索ORP8的功能。方法：构建重组诱饵质粒pGBKT7-ORP8m,利用GAL4酵母双杂交系统筛选人Universal cDNA文库,筛选出与ORP8相互作用的蛋白质,通过GSTPull-down以及免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation,Co-IP）验证蛋白质相互作用,并通过流式细胞仪检测过表达ORP8对HepG2细胞周期的影响。结果：酵母双杂交筛选得到了精子相关抗原5（Homo sapiens sperm associated antigen 5,SPAG5）,体外GSTpull-down和Co-IP实验确证了ORP8-SPAG5的相互作用,流式细胞术显示ORP8过表达后与空载体相比,人肝癌细胞系HepG2的S期细胞数增加,G1期细胞数减少。结论：SPAG5是与ORP8相互作用的蛋白质,ORP8过表达影响人肝癌细胞系HepG2的细胞周期,可能通过SPAG5起作用。ORP8-SPAG5的相互作用为进一步研究ORP8在肝细胞中的功能及其机制提供了有用的线索LC-MS/MS法测定人血浆中伊伐布雷定浓度及药动学
摘要：目的：建立人血浆中伊伐布雷定的液相色谱-质谱-质谱联用测定方法,研究健康人体药代动力学。方法：以地西泮为内标物,采用液相色谱-质谱-质谱联用法,电喷雾电离源选择性正离子峰检测。测30名健康志愿者单剂量口服盐酸伊伐布雷定片的体内血药浓度,获得药动学参数。结果：伊伐布雷定在0.101-101 ng·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.998）,最低检测浓度为0.101 ng·mL-1。高、中、低浓度的方法提取回收率分别为93.2%、86.6%、87.5%,日内、日间精密度RSD均小于15%。结论：LC-MS/MS方法灵敏度高,专属性强,准确,简便,适用于盐酸伊伐布雷定片的人体药代动力学研究。赤芍总苷抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞增殖的影响
摘要：目的：研究赤芍总苷体外抗氧化活性及对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响。方法：采用DPPH法测定赤芍总苷体外清除DPPH自由基及抗氧化活性,根据清除率曲线,确定EC50值;采用MTT法考察赤芍总苷对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖的影响,确定起效剂量,并考察其量效关系。结果：赤芍总苷对DPPH自由基具有较强清除作用,其对DPPH的清除率的回归方程为y=7.4432x＋0.6111（r=0.9967）,EC50值为6.64 mg/L;赤芍总苷对HSC-T6的增殖具有明显的抑制作用,给药浓度为1.152mg/mL时,其对HSC-T6细胞增殖的抑制率可达39.240%。结论：赤芍总苷具有较强的抗氧化活性,对肝星状细胞的增殖有一定抑制作用。尘螨变应原Derf1真核表达载体的构建及转染CHO细胞
摘要：目的：构建尘螨变应原Der f1真核表达载体,转染真核细胞并进行蛋白表达。方法：根据Genebank中Der f1基因的核酸序列（AB034946）,设计引物,采用PCR法,从保存的JM109工程菌中扩增Der f1编码基因,克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-his A上,以脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选,进行稳定表达细胞株的筛选和鉴定。结果：将目的基因Der f1成功连接到pcDNA3.1/myc-hisA-Derf1并转染CHO细胞,获得稳定表达的CHO细胞株。结论：成功构建了尘螨变应原Der f1真核表达载体,并转染CHO细胞表达蛋白质。石墨化炭/炭复合材料＋羟基磷灰石涂层（C/C＋HA）复合骨植入材料研究
摘要：目的：通过建立兔股骨缺损的动物实验模型,对采用等温化学气相沉积法和等离子喷涂技术所制备的石墨化炭/炭复合材料＋羟基磷灰石涂层（C/C＋HA）复合骨植入材料进行骨植入实验的的生物相容性进行评价,探索该复合材料作为植入机体骨组织的可行性依据。方法：采用骨科钻在实验动物股骨髁上钻孔的方法建立骨缺损的动物实验模型,将待研究比较的实验材料分别植入实验动物的股骨髁内,持续观察8周,在术后第2、4、8周时应用X线照片、组织学染色和扫描电镜技术,分别观察所研究材料在机体内对骨缺损愈合及其对机体的影响,进行组间比较和相关性分析。结果：石墨化炭/炭复合材料＋羟基磷灰石涂层（C/C＋HA）复合骨植入材料的骨植入实验生物相容性良好,材料与骨组织结合牢固,界面中成骨细胞生长明显,且炭颗粒脱落现象少,未见炎症细胞浸润。植入动物体内的材料在植入期未引起机体局部的炎症浸润反应且表面脱落的碳颗粒在机体组织中也未引起局部严重的炎症反应。在实验动物植入材料后的连续8周观察期中,组织学观察显示：表面涂有HA的炭/炭复合材料对骨组织形态改建上表现良好,其与骨组织接界处所形成的纤维结缔组织膜层厚度明显比未涂HA的材料要小,与骨组织结合更为紧密和牢固;碳颗粒出现脱落游离的现象明显减少。结论：在炭/炭复合材料表面涂以HA生物涂层对骨的形态改建和促进骨小梁生长等方面具有良好的作用,是一种具有发展潜力的骨修复材料。大黄素降糖及改善脂质代谢的实验研究
摘要：目的：探讨大黄素对2型糖尿病模型db/db小鼠血糖及血脂水平的影响。方法：4周龄16只db/db雄性小鼠随机分为治疗组和对照组,每组8只;治疗组经灌胃每天给予100mg/kg大黄素;对照组灌胃给予相仿体积的生理盐水,开始10天每天算进食量,每周测空腹血糖及体重1次,连续干预8周,干预前及实验结束前1周测胰岛素耐量,干预结束后于颈动脉取血测血脂水平（HDL-C、LDL-C、TG、TC）。结果：①大黄素干预不影响db/db小鼠的进食量,与对照组比较,P〉0.05;②大黄素可显著减轻db/db小鼠体重,与对照组比较,P〈0.05;③大黄素可改善db/db小鼠胰岛素敏感性,降低小鼠的空腹血糖水平,与对照组比较,P〈0.05或P〈0.01;④大黄素可降低db/db小鼠血TG、TC、LDL-C水平,P〈0.01。结论：大黄素可有效地改善db/db小鼠的糖脂紊乱状态,其降糖及改善血脂代谢机制值得进一步深入研究。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117-13344-9/R.13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。Pmscv-Ubc9逆转录病毒表达载体的构建及产毒细胞系的建立
摘要：目的：构建含Ubc9的逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系,深入研究SUMO化修饰的作用。方法：聚合酶链反应（PCR）扩增获取目的基因Ubc9,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVneo,形成重组质粒pMSCV-Ubc9;脂质体法将pMSCV-Ubc9转染逆转录病毒包装细胞PT67;G418筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒感染NIH3T3细胞。结果：限制性酶切和测序鉴定证实Ubc9正确插入逆转录病毒表达载体。G418筛选获得稳定产毒的抗性细胞克隆,收获病毒能有效感染NIH3T3细胞。结论：携带Ubc9基因的重组逆转录病毒表达载体pMSCV-Ubc9构建成功,转染PT67细胞后包装出重组逆转录病毒,进而筛选获得了能转录表达Ubc9的产毒细胞系PT67-Ubc9。改良CCI大鼠痛行为学检测与损伤区自发放电活动再观察
摘要：目的：应用改良CCI模型研究外周神经损伤后痛觉过敏和自发放电各自特征及相互关系。方法：雄性SD大鼠,随机分为CCI组和Sham组,分别于术前1天和术后1、4、7、9、11、14天测定机械刺激缩足反射阈值和热缩腿反射潜伏期,同时选取术侧机械刺激缩腿反射阈值低于4g或者术侧和健侧热缩腿反射潜伏期差异大于2s的CCI模型大鼠观察术后4-14天损伤区自发放电活动。结果：神经纤维损伤后,机械痛敏和热痛敏随时间表现为逐渐增强,同时在损伤区观察到三类放电模式：整数倍放电﹑阵发放电和周期放电。结论：术后大鼠机械痛阈和热痛阈逐渐降低,机械痛敏的产生和损伤区自发放电活动关系密切,不同的放电模式可能代表不同的传入信息。食管鳞癌组织中的神经纤维分布
摘要：目的：探讨食管鳞癌组织中神经纤维的分布情况。方法：应用免疫组化ABC法,探查手术切除的食管鳞癌组织里S100及GAP-43阳性神经纤维的分布情况,并分析其与患者临床病理参数的关系。结果：相对于正常组织,食管鳞癌组织中存在相当数量的S100及GAP-43阳性神经纤维（束）不规则地分布于肿瘤细胞之间,且S100阳性纤维密度大于GAP-43阳性纤维密度;统计分析显示肿瘤组织中纤维密度与患者的肿瘤大小、淋巴结转移相关。结论：食管鳞癌组织中确实存在神经纤维分布,并对肿瘤发展起一定作用。以乳突切迹和翼钩为基点的侧颅底分区方法
摘要：目的：探讨以乳突切迹和翼钩为基点的侧颅底分区新方法。方法：在乳突切迹后缘、翼钩、枕骨大孔前缘中点和颧根四个结构间相互连线,区分侧颅底并测量连线的长度。结果：乳突切迹与侧颅底重要结构的关系密切,切迹后缘与翼钩连线和正中线将侧颅底分成内、外侧两个大的三角区,每个区再分成前后两个三角区共四个三角区,即腭和颞下三角、咽三角、关节和听三角、血管神经三角,其中血管神经三角的三边长度左右侧分别为（74.52±5.47）mm和（74.66±5.41）mm、（59.77±3.84）mm和（59.67±3.56）mm、（42.23±3.11）mm和（42.48±2.60）mm。结论：本研究提供了新的侧颅底分区方法,且血管神经三角的区域划分更为科学,为临床侧颅底手术入路和定位提供了解剖学参考。昆布（海带）对高脂血症大鼠血脂的调节作用和机制
摘要：目的：探讨昆布（海带）在实验性高脂血症大鼠中的降血脂作用和机制。方法：健康雌性Wistar大鼠40只,应用高脂饲料喂养方法建立高脂血症动物模型,海带粉饲料喂养干预治疗。生化法检测大鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）水平。硫代巴比妥酸法和硝酸还原酶法分别检测脂质过氧化物丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量,黄嘌呤氧化酶法和化学比色法分别测定超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。结果：经海带干预治疗后,动物血清TG、TC和LDL水平较模型组显著降低、HDL水平显著升高（P〈0.05）。治疗组动物血清和肝组织MDA和NO水平显著低于、而SOD和GSH-PX活性均显著高于模型组（P〈0.05）。结论：海带可能影响TG、TC、LDL和HDL等组分的代谢,通过增强抗氧化SOD和GSH-PX的活性,降低体内MDA和NO的水平,发挥调节血脂水平的作用。经口咽入路行枕骨大孔扩大术的解剖学基础研究
摘要：目的：对枕骨斜坡骨性结构及周围毗邻关系的解剖学测量,为经口咽入路行枕骨大孔扩大术提供详尽的解剖学数据及理论依据。方法：①选取成人干燥颅骨标本40例,分别测量斜坡颅底内面、颅底外面的长度;斜坡咽结节处宽度、斜坡最小厚度、中部厚度和最大厚度;斜坡与水平面的夹角;颈动脉管外口内缘、颈静脉孔内外口内缘、破裂孔内外口内缘、舌下神经内外口内缘、寰枕关节内缘与斜坡中线的距离。②选取完整头颈部标本20例,观察斜坡与周围血管神经的毗邻关系。结果：①斜坡颅底内面长（40.1±2.5）mm,外面长（28.2±3.1）mm;斜坡中部宽度（18.8±2.5）mm,;最小厚度（6.8±2.3）mm,;中部厚度（9.8±2.2）mm,最大厚度（11.5±1.7）mm;咽结节至枕骨大孔前缘距离（12.8±1.5）mm。②斜坡与水平面的夹角（46.8±4.5）°。③颈动脉管外口内缘距离斜坡中线（26.1±3.1）mm,颈静脉孔内口内缘距离斜坡中线（21.8±2.5）mm,颈静脉孔外口内缘距离斜坡中线（25.1±2.7）mm,破裂孔内口内缘距离斜坡中线（10.5±2.9）mm,破裂孔外口内缘距离斜坡中线（11.8±2.5）mm,舌下神经管内口内缘距离斜坡中线（13.8±2.3）mm,舌下神经管外口内缘距离斜坡中线（21.1±2.3）mm,寰枕关节内缘距离斜坡中线（10.5±2.3）mm。④斜坡上部距离后方基底动脉（7.6±1.0）mm,距离后方脑桥（8.3±1.2）mm,斜坡中部距离后方延髓脑桥沟（13.5±1.7）mm,斜坡下部距离后方延髓（6.5±0.8）mm。⑤斜坡上部与后方硬脑膜之间间隙为（1.8±0.2）mm,斜坡中部与后方硬脑膜之间间隙为（1.3±0.1）mm,斜坡下部与后方硬脑、脊膜之间间隙为（1.3±0.1）mm。⑥在斜坡开骨窗的宽度为20mm,高度为15mm,深度为6mm,可以满足经口咽入路枕骨大孔扩大术的要求,并有可靠的安全性。结论：本研究通过对斜坡骨性结构及周围毗邻关系的测量与观察,为临床�凋亡诱导因子在姜黄素诱导的大鼠肺成纤维细胞凋亡中的作用
摘要：目的：研究姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响,探讨凋亡诱导因子（AIF）在肺成纤维细胞凋亡中的作用。方法：将体外培养的肺纤维化大鼠成纤维细胞,分别于不同浓度的姜黄素（5、10、20、40μM）和caspase-3抑制剂Z-DEVD-fmk（20μM）孵育,观测细胞生长状态变化。MTT检测成纤维细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western-Blot测定凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达及核转位结果：流式细胞术检测细胞凋亡,5～40μM姜黄素处理12 h,其凋亡率呈浓度依赖,对照组相比,差异显著;而抑制caspase-3并不能完全阻止细胞凋亡。Western-Blot结果显示,姜黄素处理组出现凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达与核转位,抑制caspase-3活性后未检测出AIF表达结论：姜黄素可抑制肺成纤维细胞增殖,其诱导大鼠肺成纤维细胞凋亡,可能与线粒体释放AIF有关。姜黄素对肝癌细胞HepG2的抗癌作用及P21WAF1/CIP1表达的影响
摘要：目的：探讨姜黄素对肝癌HepG2细胞抗癌作用及相关周期蛋白依赖激酶抑制因子P21WAF1/CIP1表达的影响。方法：体外培养肝癌HepG2细胞,用MTT法检测姜黄素对HepG2细胞的抑制作用,以RT-PCR方法检测HepG2细胞中P21WAF1/CIP1mRNA的表达,用免疫细胞化学检测其P21WAF1/CIP1蛋白的表达。结果：姜黄素呈时间剂量性抑制HepG2细胞的生长,并显著上调HepG2细胞中P21WAF1/CIP1mRNA和蛋白的表达。结论：姜黄素能抑制HepG2细胞的生长,并上调其中P21WAF1/CIP1的表达。重大灾害中救援军人心理应激干预的原则与方法
摘要：军人作为一个特殊群体,要经常参与各种重大灾害的救援工作。这些重大灾害容易诱发部分军人产生异常心理应激反应,对军人个体心理和群体心理产生负面影响。本文主要分析了救援军人心理应激反应产生的原因、表现和发展过程,然后提出心理干预的原则和程序,最后重点探讨了心理干预的方法措施。应用新型静脉剥脱导管单次与分次手术治疗双下肢单纯性静脉曲张的疗效对比
摘要：目的：对比分析应用新型静脉剥脱导管单次与分次手术治疗双下肢单纯性静脉曲张的疗效。方法：采用严格的纳入和排除标准选取我院2007年8月至2010年8月收治的双下肢单纯性静脉曲张患者53例,以接受采用法国Gamida公司新型静脉剥脱导管的大隐静脉高位结扎加剥脱手术次数不同分为两组。单次手术组：（28例）患者一次性接受双侧手术;分次手术组：（25例）患者接受单侧手术,1月后再入院接受对侧手术。结果：分次手术组两次手术时间总和较单次手术组手术时间长（P=0.034）,而两组在术中失血量上无明显差异（P=0.550）。两组临床治愈率及出现并发症的几率相当（P〉0.05）,但分次手术组的住院时间及住院费用均明显高于单次手术组（P〈0.001）。结论：应用新型静脉剥脱导管单次手术剥脱双下肢单纯性静脉曲张的疗效与分次手术相当,但在经济方面单次手术显示出明显的优势,值得推广。老年患者24小时食管pH监测的护理
摘要：目的：探讨和总结老年人24小时食管pH监测的有效的护理方法。方法：我病区自2010年6月到2010年12月接受24小时食管pH监测的患者共50例,分为老年组（≥60岁）和非老年组,采用使用电池的动态pH监测仪进行监测。结果：本研究的50例老年患者中,46例置管一次成功,4例因咽部敏感给予2%的利多卡因10ml咽下后第二次均置管成功。本组检查后无一例造成咽部及胃部的损伤,无误吸等并发症发生。结论：24小时食管pH监测是一种安全、简便、无创伤、客观的检查技术,通过动态pH监测,可检测有无胃食管反流,并算出食管真正接触到反流胃酸的时间。正确的操作方法及细致到位的护理可减少老年患者检查时的痛苦,并有效预防并发症的发生。
