HPLC检测肠灌流模型中PMP衍生化葡寡糖含量的方法学建立
摘要：目的：建立肠灌流模型中1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化葡寡糖含量的检测方法,并进行方法学考察。方法：采用HPLC法测定,色谱条件为,色谱柱：phenomenexC18（250×4.60mm,5μm）;流动相：100mMNaAc/乙腈（梯度洗脱）;流速：1.0mL·min-1;紫外检测波长245nm;进样量：20μL;柱温：40℃。结果：PMP衍生化葡寡糖在此色谱条件下获得良好分离,肠灌流液、血浆样品及酚红对10种化合物的检测均无影响。结论：该方法准确可靠,重复性良好,为寡糖的吸收研究提供了技术支持。硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中对ɑ-SMA与细胞周期影响的实验研究
摘要：目的：探讨硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中对α-SMA与细胞周期的影响。方法：将大鼠肝星状细胞株HSC-T6分为8组：空白组（B组,HSC-T6）;对照组（C组,B组＋500μmol/L Fe-NTA）;NaHS组（N1：C组＋20μmol/L NaHS;N2：C组＋100μmol/L NaHS;N3：C组＋200μmol/L NaHS）;格列苯脲组（G1：C组＋20umol/LGLBN;G2：C组＋200umol/LGLBN;G3：C组＋700umol/LGLBN）。用免疫组化的方法定性测定α-SMA,用流式细胞仪测定细胞周期。结果：24h的细胞DNA含量S期对照组和空白组有明显差异（41%vs58.6%,P〈0.05）,给与NaHS后,细胞DNA含量S期N1、N2和N3组与对照组均有明显差异（62.0%,66.8%,72.8%vs58.6%均P〈0.05）,给与GLBN处理后,细胞DNA含量S期G1、G2和G3组与对照组均有明显差异（38.6%,34.8%,32.5%vs58.6%均P〈0.05）,各项指标结果与给与NaHS处理后结果相对应,各组与相对应组比较均有明显差异（P〈0.05）。24h的免疫组化照片显示对照组和空白组有明显差异,给与GLBN后,G2组与G3组与对照组有明显差异,给与NaHS后,N1,N2,N3组均与对照组,G1,G2,G3组有显著差异。结论：氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用,可抑制肝纤维化的发生发展。川芎、白芷萃取物下调大鼠硬脑膜COX-2及PGE2的表达
摘要：目的：观察川芎、白芷提取物对实验性偏头痛大鼠模型COX-2及PGE2表达的影响,为都梁软胶囊治疗偏头痛提供实验依据。方法：48只健康成年Sprague-Dawley大鼠随机平均分为3组（每组16只）：阳性对照组（M组）、空白对照组（CO组（）生理盐水加10%DMSO,1ml/100g灌胃三天）;实验组（CBM组（）川芎白芷提取物,15mg/kg灌胃三天）。除空白对照组外,各组电刺激三叉神经节30min。刺激完毕取硬脑膜测定待测物质。免疫组化、蛋白质印迹（WB）法观察大鼠脑膜COX-2的表达,酶联免疫吸附法（Elisa）观察脑膜中PGE2含量的变化。结果：与CO组相比,M组、CBM组的脑膜COX-2蛋白表达、阳性颗粒数和PGE2含量显著增加（p〈0.05）。与M组相比,CBM组COX-2蛋白表达、阳性颗粒数及PGE2的含量显著降低（p〈0.05）。结论：川芎、白芷提取物可以抑制脑膜中COX-2、PGE2表达,推测这可能是川芎白芷控制偏头痛急性发作的重要机制之一。茶多酚抑制肺鳞癌细胞裸鼠移植瘤的实验研究
摘要：目的：探索茶多酚对肺鳞癌细胞的抑制效应及相关机制。方法：以肺鳞癌PC10为研究对象,进行裸鼠成瘤实验。观察茶多酚对裸鼠成瘤的影响。应用免疫组织化学方法检测细胞凋亡相关Bcl2和Caspase3和增殖相关蛋白PCNA的表达,应用TUNNEL法检测细胞凋亡。结果：茶多酚可抑制裸鼠移植瘤的生长。茶多酚可促进促凋亡蛋白caspase3表达并抑制抑凋亡蛋白Bcl2表达,并抑制增殖细胞核抗原的表达。TUNNEL实验结果提示茶多酚可促进PC10细胞凋亡。结论：茶多酚可抑制肺鳞癌移植瘤生长,与促进癌细胞凋亡和抑制细胞增殖有关。小鼠骨髓源性树突状细胞的体外扩增、鉴定及生物学特性研究
摘要：目的：对树突状细胞体外大量扩增及树突状细胞的临床应用提供理论基础。方法：以重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）、重组小鼠白介素-4（rmIL-4）和重组小鼠肿瘤坏死因子-α（rmTNF-α）体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,流式细胞术分析细胞表面分子,并应用混合淋巴细胞反应检测其刺激T淋巴细胞的增殖能力。结果：经体外诱导培养第2天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,DC成熟,具有典型的形态,同时DC可以显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖。结论：体外诱导培养可以获得大量小鼠骨髓来源的DC,可广泛应用于临床实验及实验研究。关于2010年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展,本刊经研究决定于2010年继续开展＂生物医学＂优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公证与公平性,编辑部现将有关事项通知如下：氯化钴对小鼠NIH3T3细胞增殖和凋亡的影响
摘要：目的：观察氯化钴（Cocl2）对体外培养的小鼠NIH3T3细胞增殖和凋亡的影响。方法：首先利用MTT法和流式细胞术检测不同浓度Cocl2对小鼠NIH3T3细胞增殖及凋亡的影响。然后利用免疫印迹检测HIF-1α和凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果：（1）MTT结果显示,低于250μmol/L的Cocl2作用NIH3T3细胞24h对细胞的增殖活力影响不大,当浓度增加到500μmol/L以上时会明显抑制细胞的增殖活力。（2）流式细胞仪检测结果显示低浓度Cocl2（≤250μmol/L）并不会引起NIH3T3细胞明显的凋亡和坏死,增加浓度（≥500μmol/L）会导致细胞早期凋亡和坏死增加。3）不同浓度Cocl2作用NIH3T3细胞24h均可诱导细胞中HIF-1α表达上调,同时Bax/Bcl-2的比值增高。结论：高浓度Cocl2可以抑制小鼠NIH3T3细胞增殖,促进凋亡发生。绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养
摘要：目的：建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法：以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/＋囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞（MEF）为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果：获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论：本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。风疹病毒（RV）包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达
摘要：目的：表达风疹病毒（RV）E1特异肽段的重组融合蛋白。方法：经过双酶切鉴定和测序鉴定的阳性重组质粒载体pGEX-2T/E1-N,转化到感受态大肠杆菌BL21后,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导其表达,并对诱导条件进行优化。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化重组融合蛋白,SDS-PAGE鉴定。结果：用IPTG可以诱导E1特异肽段的重组融合蛋白表达,37℃诱导时,最佳诱导剂浓度为1mmol/L,最佳诱导时间为4h。诱导温度从37℃降至16℃时,重组融合蛋白以可溶性形式表达,用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化获得了纯化的重组融合蛋白。结论：利用原核表达系统可以获得纯化的风疹病毒E1特异肽段的重组融合蛋白。实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的视神经损害
摘要：目的：探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的视神经损害以及将其作为视神经炎模型的可能性。方法：取MOG35-55多肽和完全弗氏佐剂制备成抗原乳剂免疫C57BL/6小鼠,并在腹腔内注射2次百日咳杆菌,建立EAE模型。在EAE疾病高峰时,观察小鼠视神经炎的发生率及病理学改变。结果：模型组12只小鼠中有10只从免疫后第12天开始陆续起病,约在第17~19天达到疾病高峰,发病率为83.3%;而对照组未出现任何神经功能受损的症状。HE染色结果显示模型组的视神经组织中有大量的炎症细胞浸润,动物视神经炎的发生率为83.3%,其炎症评分为2.1±0.8分,与对照组相比均有统计学意义。LFB染色可见模型组的视神经有明显的脱髓鞘改变,病灶内可见炎症细胞浸润;而对照组小鼠的视神经未见明显异常改变。结论：借助EAE建立视神经炎模型是可行的,这为深入探讨视神经炎的发病机制提供了理想的动物平台。茶叶不同提取成分降血糖作用的研究与比较
摘要：目的：探讨茶多糖、茶多酚、茶色素对血糖的降低作用。方法：用链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病小鼠模型。提取茶多糖,茶多酚,茶色素,作用于糖尿病小鼠。通过葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）测定血糖含量,研究并比较各成分的降血糖作用。结果：茶多酚,茶色素具有明显的降血糖作用,茶多糖的降血糖作用不明显。结论：茶多糖,茶多酚,茶色素均具有降血糖的作用。COPD大鼠模型气道MMP-9和TIMP-1表达的研究
摘要：目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型气道的表达。方法：Wistar大鼠25只随机分为COPD模型组和正常对照组,采用单纯被动吸烟法建立COPD大鼠模型,以酶联免疫吸附法（ELISA）测定两组大鼠血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中MMP-9和TIMP-1的表达水平。结果：COPD组血清及BALF中MMP-9和TIMP-1的表达明显高于正常组（P〈0.05和P〈0.01）;COPD组血清及BALF的MMP-9/TIMP-1低于正常组血清及BALF的MMP-9/TIMP-1,差异有统计学意义（P〈0.05）;COPD组和正常组BALF中MMP-9和TIMP-1水平高于血清中MMP-9和TIMP-1水平,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：MMP-9和TIMP-1平衡失调参与了COPD的发病,调节MMP-9和TIMP-1的平衡可能是治疗COPD的新方法。缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子在胰腺癌中的表达及意义
摘要：目的：研究胰腺癌组织中缺氧诱导因子1alpha（Hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor,FGF）的表达并探讨其意义。方法：Western blot法检测22例胰腺癌及癌旁组织中HIF-1α、VEGF和FGF蛋白的表达,分析HIF-1α与VEGF、FGF之间的相关性以及与性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期之间的关系。结果：HIF-1α、VEGF和FGF在胰腺癌组织中的蛋白表达水平明显高于胰腺癌周组织（P〈0.01）,HIF-1α与VEGF、FGF之间的表达具有显著相关性（P〈0.01）。HIF-1α的表达与胰腺癌的TNM分期、肿瘤大小和淋巴结转移有关（P〈0.01）,VEGF和FGF的表达与胰腺癌的肿瘤大小和淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论：HIF-1α可以上调VEGF和FGF的表达,在胰腺癌的发生、发展中起着重要作用。葛根素对脂多糖导致的大鼠急性肺损伤组织中水通道蛋白-1的影响
摘要：目的：观察葛根素对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1（AQP1）表达、病理形态学、湿干比等的影响,探讨其对急性肺损伤的保护作用。方法：健康Wistar大鼠36只,采用腹腔内注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）法复制急性肺损伤动物模型。将大鼠随机分为盐酸对照组（对照组）、LPS损伤组（损伤组）和葛根素＋LPS组（葛根素组）。结果：光镜下见对照组肺泡结构清晰,肺泡腔及支气管腔未见明显炎细胞及渗出物。LPS组镜下可见肺组织水肿,表面可见暗红色点、片状出血,大量炎性细胞浸润,肺泡间隔明显增厚,葛根素＋LPS组损伤较LPS组明显减轻。LPS组湿干比较对照组增高,葛根素组湿干比较LPS组降低。LPS组AQP1蛋白表达较对照组减少,葛根素组肺组织AQP1蛋白表达较LPS组明显增加。结论：葛根素对脂多糖所致的大鼠急性肺损伤具有保护作用。灵芝多糖对2型糖尿病大鼠模型的治疗作用
摘要：目的：研究灵芝多糖对链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠降糖降脂作用。方法：采用高糖高脂饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素诱导建立2型糖尿病大鼠模型,分组给予不同剂量灵芝多糖4周,观察血糖及血生化指标。结果：灵芝多糖三个剂量组降糖作用显著,随着剂量增大,降糖作用增强,且均能显著降低胆固醇和低密度脂蛋白;与阳性对照药物相比,灵芝多糖各剂量组降低血脂作用均弱于格列本脲。结论：灵芝多糖对STZ诱导的2型糖尿病大鼠有一定的降低血糖、胆固醇和甘油三酯作用。Neuritin对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝作用的研究
摘要：目的：探讨Neuritin对大鼠脊髓损伤后神经元突起再生的作用。方法：分为Neuritin组,His组和假手术组。使用改良Allen’s打击法打击Neuritin组和His组大鼠T10或T11节段脊髓。Neuritin组和His组经蛛网膜下腔置管局部连续给予Neuritin和His蛋白（6ug/d）一周。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,经蛛网膜下腔置空管而部损伤脊髓。术后6h、3d、7d、14d、28d、56d分别观察：①运动功能评分（BBB评分）观察大鼠后肢运动功能恢复情况;②HE染色观察脊髓组织形态学变化;③免疫组织化学染色和Westernblotting检测损伤段脊髓神经中丝蛋白（NF200）的修复与再生。结果：①BBB评分,Neuritin组和His组在一周内没有明显差别,但Neuritin组和His组的评分均低于假手术组,从术后第14d,实验组评分明显高于对照组（P〈0.05）;②HE染色可见损伤段脊髓出血、坏死及炎性细胞浸润;③免疫组化检测,Neuritin组的NF200平均光密度值（IOD/AREA）较His组明显增高（P〈0.05）;Western blotting检测的NF200灰度值（GMD）较His组明显增高（P〈0.05）。结论：持续外源性Neuritin能促进大鼠脊髓损伤后伤区神经元突起的再生,并能促进大鼠后肢运动功能的康复。血脂康胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂及C反应蛋白的影响
摘要：目的：探讨血脂康胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂及血清C反应蛋白的影响。方法：健康成年大鼠24只,随机分成假手术组（Sham组,n=8）,动脉粥样梗化模型组（AS组,n=8）,血脂康治疗组（XZK组,n=8）。4w后,测定血液流变学参数,用自动生化分析仪测定总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清CRP水平。结果：与Sham组相比,AS组和XZK治疗组大鼠全血的切粘度、血清的TC、TG、LDL-C、CRP水平升高（均P〈0.05）;与AS组比较,XZK治疗组大鼠全血的切粘度、血清的TC、TG、LDL-C、CRP水平降低（均P〈0.05）。结论：血脂康胶囊能降低动脉粥样硬化大鼠血清TC、TG、LDL-C,可能机制之一是通过降低血清C反应蛋白的水平。CD133在胰腺癌中的表达及临床意义
摘要：目的：探讨CD133在胰腺癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法,检测71例胰腺癌和10例正常胰腺组织中CD133的表达。分析CD133在胰腺癌中的表达与临床病理特征和预后之间的相关性。结果：CD133在胰腺癌中的表达的阳性率64.79%明显高于正常胰腺组织中的10%。胰腺癌中CD133的表达率随着临床TNM分期的增加而明显增高（P〈0.05）。胰腺癌中CD133的表达率在有淋巴结转移中为71.4%（20/28）明显高于无淋巴结转移中的23.3%（10/43）（P〈0.05）。CD133的表达与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、神经浸润、切缘、病理学分级无显著相关性（P〉0.05）。CD133高表达者的中位生存期明显短于低表达者（9.1个月vs23.9个月,P〈0.05）。结论：胰腺癌中CD133的高表达与TNM分期高及淋巴结转移有关。CD133高表达与胰腺癌预后差有关。CD133在胰腺癌的发展、转移及预后中可能发挥重要作用,可作为临床评价胰腺癌生物学行为及评估预后的指标之一。
