慢病毒载体介导RNAi稳定抑制XIAP表达及对胰腺癌细胞增殖、凋亡影响的实验研究
摘要：目的：探讨运用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）的抑制效率及对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响,建立XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株。方法：应用pGCSIL-PUR慢病毒载体构建针对XIAP的ShRNA载体,转染包装细胞293T,收集病毒上清转染胰腺癌细胞系SW1990,经嘌呤霉素（puromycin）筛选并扩大培养得到稳定克隆;实时荧光定量PCR和western-blot免疫印迹检测癌细胞内XIAP的表达;四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖;caspase 3/7活性测定和DAPI染色检测细胞凋亡。结果：成功构建3个XIAP-ShRNA慢病毒载体（X1、X2、X3）及XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株,对XIAP的抑制效率均达70%以上;MTT检测显示X1、X3稳定抑制XIAP后胰腺癌细胞增殖明显减慢,但caspase 3/7活性及细胞凋亡并没有明显增加。结论：慢病毒载体介导的靶向XIAP的RNAi可有效抑制XIAP表达,降低胰腺癌细胞的增殖能力;成功建立的XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株为进一步研究打下基础。培养海马神经元网络对刺激位置的群体编码
摘要：目的：探讨培养的海马神经元网络对外界刺激信息的群体编码机制。方法：本文利用多电极阵列对培养海马神经元网络进行多位点刺激及同步记录,运用线性统计方法分析网络中各点对刺激的响应规律,以及聚类算法分辨网络对不同位置刺激的响应。结果：各记录位点在刺激后100ms内的响应放电频率与距刺激点的空间距离线性无关、与记录/刺激位点的自发活动相关系数呈弱线性相关,与刺激前100ms内的自发放电频率呈线性关系。进一步实验结果表明刺激不同位点时自发放电频率与响应放电频率线性关系的斜率和截距不同。不同位点刺激时的自发-响应数据能够通过聚类进行区分,并且自发-响应放电频率的线性相关系数越大分类的正确率越高。药理实验结果表明,该线性相关系数在APV阻断NMDA受体后减小,而在CNQX阻断AMPA受体后相关系数增大。结论：培养的海马神经元网络中的神经元对刺激的响应放电频率与其自发放电频率线性相关,该群体响应特征可以用来实现对刺激位置的编码,并且NMDA受体的存在是维系该群体响应特征的因素之一。IGF2基因组印迹系统人重组腺病毒载体的构建与鉴定
摘要：目的：构建携带IGF2印迹系统的腺病毒载体,并验证其在肿瘤细胞及正常细胞中的功效,为IGF2印迹在肿瘤靶向治疗中的应用提供理论基础。方法：将人源的IGF2印迹系统启动子H19、增强子enhancer及甲基化区域CTCF克隆至穿梭质粒pDC-312中构建IGF2基因印迹系统,从pDC-315-EGFP质粒中扩增出EGFP片段插入到构建好的IGF2印迹系统中,然后与腺病毒骨架Ad5通过脂质体Lipofectamine 2000介导共转染HEK293细胞,包装成有感染能力的腺病毒Ad-H19-CTCF-enhancer-EGFP,命名为Ad-EGFP;构建好的腺病毒分别感染IGF2基因印记保持的细胞MCF-7和GES-1及IGF2基因印迹丢失的细胞HRT-18,荧光显微镜下观察EGFP在三种细胞中表达的差异。结果：转染腺病毒载体的HEK293细胞表达EGFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,EGFP在HRT-18细胞中有大量表达,在MCF-7和GES-1细胞中不表达或仅有少量表达。结论：成功构建了携带IGF2基因印迹系统的腺病毒载体,证明其在IGF2基因印迹丢失的肿瘤细胞中特异性的表达,在正常细胞及IGF2基因印迹保持细胞中不表达,为IGF2基因印迹系统应用于肿瘤细胞的靶向治疗提供了理论基础。新疆维吾尔族人寻常型银屑病与HLA-Cw＊0602等位基因的关联研究
摘要：目的：寻找新疆维吾尔族人银屑病与HLA-Cw＊0602等位基因的相关性。方法：运用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）法,检测新疆维吾尔族人200例寻常型银屑病患者和200例健康对照的HLA-Cw＊0602等位基因频率,分析携带该基因的银屑病患者与其家族史的相互关系。结果：①病例组HLA-Cw＊0602等位基因频率较对照组显著升高（73%vs24%,X2=108.551,OR=10.171,95%可信区间6.410～16.140,P=0.000）,且无性别差异;②携带HLA-Cw＊0602等位基因的银屑病患者发病年龄早于不具有该等位基因的患者（80.2%vs28.6%,X2=10.256,OR=0.950,95%可信区间0.920～0.981,P=0.001）;③有银屑病家族史患者携带HLA-Cw＊0602等位基因的频率与无银屑病家族史的患者无显著意义（X2=0.000,OR=0.986,95%可信区间0.252～3.860,P=1.000）。结论：新疆维吾尔族银屑病患者与HLA-Cw＊0602等位基因高度关联,且携带该等位基因的银屑病患者易发生早发型（发病年龄≤40岁）银屑病,但不能确定有家族倾向性。液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布
摘要：目的：建立同时测定大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布的液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）方法,研究这两种药物联合应用的药代动力学。方法：大鼠尾静脉注射阿霉素和塞来昔布,眼眶取血并抗凝,离心分离血浆,采用乙酸乙酯提取血浆中的阿霉素和塞来昔布,N2吹干乙酸乙酯,残留物用50μL甲醇溶解,取20μL用于LC/MS/MS分析。结果：用LC/MS/MS法检测大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布的线性范围为1-800ng/mL,日内、日间精密度（RSD）均小于15%,检测血浆低、中、高三个浓度（8、50、500ng/mL）阿霉素的回收率分别为101.2%、95.1%和91.4%,检测血浆低、中、高三个浓度（8、50、500ng/mL）塞来昔布的回收率分别为105.6%、106.8%和93.7%。大鼠尾静脉注射5.8mg/kg阿霉素和3.8mg/kg塞来昔布的半衰期分别为2.3h和3.6h,曲线下面积分别为670ng·h·mL-1和1480ng·h·mL-1。结论：建立的方法灵敏、准确、快速,适用于阿霉素和塞来昔布的药代动力学研究。昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与培养
摘要：目的：建立稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系。方法：取不同胎龄的小鼠分离原代胚胎成纤维细胞,观察不同胎龄小鼠对分离和培养效果的影响。结果：从不同胎龄小鼠均分离得到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5～14.5d;传代时在室温下消化单层贴壁细胞可随时控制消化时间,效果良好。结论：从13.5～15.5d胎龄小鼠胚胎分离培养胚胎成纤维细胞效果最佳。脑缺血损伤后BMSCs移植及GAP-43表达在脑神经修复中的作用
摘要：目的：探讨大鼠脑缺血/再灌注损伤后骨髓间基质干细胞颅内移植及生长相关蛋白-43（GAP-43）表达在中枢神经再生中的作用机制。方法：成年健康雄性Wistar大鼠260只,随机分为对照组、假手术组各6只,再灌注组48只。再灌注组采用线栓法制备大鼠脑缺血/再灌注模型,根据缺血/再灌注时间细分为再灌注3h、8h、16h、24h、3d、7d、19d和21d8个时间点各6只,缺血时间均为1h;细胞移植随机分为对照组和移植组各36只,移植时间细分为16h、24h、3d、7d、19d和21d6个时间点各6只;跑台运动训练随机分为模型组和运动组各24只,训练时间细分为3d、7d、19d和21d4个时间点各6只;水迷宫试验随机分为对照组、再灌注组和康复组各24只,训练时间细分为3d、7d、19d和21d4个时间点各6只。另4只大鼠作为细胞移植的供体。采用免疫组织化学方法检测TUNEL和GAP-43在皮层区、海马齿状回阳性细胞中的表达,用TTC法观察皮层及海马梗死灶的改变。按照Bederson评分标准进行神经行为检测及功能评分。结果：缺血/再灌注3h点TUNEL阳性细胞增加,24h点达高峰,21d时仍维持较高水平表达;GAP-43阳性细胞缺血/再灌注3h点在两区表达增加,19d点达高峰;21d时降至最低。梗死灶于再灌注8～16h点开始逐渐形成,3d点梗死面体积最大,随后梗死面积逐渐缩小,21d时恢复趋于正常。再灌注组缺血8h～16h点行为症状加重,24h～19d点症状逐渐改善,21d时症状恢复到正常水平。结论：脑缺血后骨髓间充质干细胞移植激发GAP-43特异性表达有效地促进了中枢神经再生,并介导了神经功能的恢复。 还原《中国期刊引证报告（扩刊版）》《现代生物医学进展》
摘要：本刊讯《中国期刊引证报告（扩刊版）》是依托中囝科学技术信息研究所国家工程技术数字图书馆”知识服务”系统，在”万方数据--数字化期刊群”基础上，结合中国科技论文与引文数据库（CSTPCD），以我国正式出版的各学科6108种中英文期刊（其中，社会科学类期刊2028种，自然科学类期刊4080种；英文版期刊165种）为统计源期刊，暂不包括少数民族语种期刊和港、澳、台地区出版的期刊。骨皮质核DNA分析在法医学中的应用研究
摘要：目的：为探讨在白骨化案件的骨皮质中提取到一定质和量的可供核DNA分析的DNA模板,本文从受环境因素和生物因素影响较小的骨皮质中有效地提取到了核DNA,并成功地进行DNA分析,进行个人识别和亲子鉴定。方法：采集10根无关个体胫骨骨皮质,分别用有机法、Chelex-100法、有机法结合Chelex-100法、有机法结合磁珠纯化柱法4种方法提取骨皮质核DNA,用常规荧光标记复合STR基因分型法成功分析骨皮质核DNA,获得满意STR基因座分型。结果：有机法能提取到骨皮质核DNA,进行STR分型时部分样本图谱峰值不均衡;仅用Chelex-100法提取的核DNA得不到STR分型结果或出现较多的等位基因缺失;有机法结合Chelex-100法、有机法结合磁珠纯化柱法提取的核DNA均能成功进行STR分型,没有等位基因的缺失,其中有机法结合磁珠纯化柱法提取的核DNA检测成功率最高。结论：骨皮质中能提取到核DNA,可以成功地进行DNA分析。关于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展，本刊经研究决定于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公正与公平性，编辑部现将有关事项通知如下：Doxy对大鼠动脉内膜损伤后MMP-1表达影响的研究
摘要：目的：观察动脉内膜损伤后基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的表达变化,探讨Doxy和MMP-1对动脉内膜损伤后再狭窄的影响。方法：建立大鼠颈总动脉损伤模型,治疗组用多西环素30mg·kg-·1d-1干预,免疫组化测定损伤动脉中MMP-1的表达,弹力纤维染色观察损伤动脉内膜面积、管腔面积的情况。结果：①MMP-1阳性指数于损伤后3d表达最高,以后逐渐减少,28d时达最低值,Doxy治疗组MMP-1表达的阳性指数3d,7d,14d均低于手术组（P〈0.01）,而28d则与手术组无明显差别（P〉0.05）。②内膜面积自术后7d开始增加,28d后达最高值,管腔面积自术后7d开始减少,28d后达最低值。Doxy治疗组14d及28d内膜面积明显小于手术组,管腔面积明显大于手术组,具有显著差异（P〈0.01）。结论：动脉内膜损伤后MMP-1强烈表达,Doxy可以显著降低血管损伤后前2周MMP-1的表达,提示它可能防治动脉内膜损伤后再狭窄而不需长期给药。《现代生物医学进展》被英国Global Health数据库收录
摘要：GlobalHealth是英国国际农业与生物科学研究中心主办的、国际上权威的公共健康研究数据库。读者范围主要针对专业学术机构、研究人员、非政府组织、政策制定者、从业医师、健康机构专业人士及学生。该数据库填补了很多目前医学研究领域内的信息空白，提供最宽泛的内容覆盖面。GlobalHealth在Ovid（奥维德技术）及Silver Platter平台上均可获得。依达拉奉联合巴曲酶对沙土鼠缺血-再灌注神经保护作用的影响
摘要：目的：探讨巴曲酶不同用药次数联合依达拉奉对沙土鼠缺血再灌注（I/R）损伤后脑保护作用的影响。方法：42只沙土鼠,随机分为I/R组,假手术组,对照组,依达拉奉联合巴曲酶组（分3个亚组）。采用双侧颈总动脉夹闭5min后再通建立沙土鼠脑I/R损伤模型。联用组注射依达拉奉（10mg/kg）,12h1次,同时注射巴曲酶（8BU/kg）,q.o.d,分别给药3次、5次、7次;对照组注射等量依达拉奉,同时注射生理盐水,剂量同巴曲酶,q.o.d,共7次;I/R组、假手术组注射等量生理盐水。检测各组沙土鼠CA1区凋亡细胞率及脑组织超氧化物岐化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果：①联用组CA1区凋亡细胞率明显少于I/R组和对照组（均P〈0.05）;联用≥5次各组CA1区凋亡细胞率明显少于联用3次组（P〈0.05）;②脑组织SOD活力和MDA含量：联用组和对照组与I/R组比较差异有显著性（均P〈0.05）;联用≥5次各组与联用3次组和对照组比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：依达拉奉联合巴曲酶显著减少缺血再灌注脑损伤后神经细胞凋亡,增强缺血脑组织SOD活力、降低MDA含量,且随联用巴曲酶用药次数增加（〉3次）从而具有更强的脑保护作用。人工寒潮对高血压大鼠P-选择素的影响
摘要：目的：探讨人工寒潮对易卒中型肾血管性高血压大鼠（RHRSP）血小板活化影响。方法：健康雄性Sprague Dawley（SD）随机分成三组：高血压组、假手术组、正常对照组,高血压组大鼠按双肾双夹法复制成RHRSP模型;用鼠尾测压仪（HX21型）经尾动脉测量收缩压,肾动脉狭窄术前测量1次,术后每4周测量1次,观察12周,分别与对照组和假手术组比较;12周末对每只大鼠放入人工寒潮箱进行人工寒潮,4小时后舌下静脉取血约2ml。流式细胞仪检测RHRSP全血中p-选择素（CD62p）表达阳性率,取脑组织进行病理学检查。结果：不同时期各组全血中CD62p表达阳性率比较：a.方差分析结果表明：高血压组CD62p表达阳性率显著高于其它2对照组（P〈0.01）;b.CD62p表达阳性率、随血压的升高而逐渐增多,与高血压大鼠MAP成正相关关系;c.t检验结果表明：高血压组CD62p表达阳性率在经历人工寒潮后较前显著升高（P〈0.01）。结论：高血压大鼠的CD62p表达阳性率较对照组明显增高,在人工寒潮后CD62p表达更高。封面说明
摘要：这个图片设计，被编委会命名为“和谐生命之光”。 中国传统哲学认为，道生一，一生二，二生三，三生万物，世界的和谐是一种一分为二的对立统一，但世界同时又是不断向前发展的，因此背景采用带有金属色彩的变形太极图案，由一个中心点分两部分旋转生出整个奇妙的世界，既是对传统的传承，也体现了新的发展。太极图案首先代表了传统的中国文化，有中国特色，该图案也在奥运会开幕式展示中国传统文化时出现过；豚鼠膀胱Cajal样细胞在高糖环境中的形态学变化
摘要：目的：观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态学变化。方法：应用酶解法分离培养豚鼠膀胱Cajal样细胞,分为无糖组、正常对照组（葡萄糖浓度5mmol/L）、高糖组（葡萄糖浓度分别为15、30、60mmol/L）,通过光学倒置显微镜及c-kit抗体染色后激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果：葡萄糖浓度分别为30、60mmol/L组较无糖组、正常对照组（5mmol/L）及15mmol/L组细胞数量减少,差异有统计学意义（P〈0.05）,蛋白标记后显示蛋白染色部位减少,有核着色迹象。结论：高糖环境可导致Cajal样细胞的形态异常,数量减少,可能引起其功能学的改变,提示其可能是糖尿病膀胱病变的的影响因素。锌对染汞孕鼠胚胎毒性的影响及其机理研究
摘要：目的：探讨妊娠期补锌对染汞孕鼠胚胎发育毒性的保护作用。方法：建立孕鼠动物模型,应用不同剂量的氯化甲基汞（0.01、0.05、2.00mg/kg.d）及5.00mg/kg.d硫酸锌于妊娠6～9天连续灌胃,蒸馏水灌胃为对照组,观察孕鼠及胚胎的汞毒性及硫酸锌的影响。应用ICP-MS法测定各组胎鼠脑组织汞含量;Westernblot法检测各组胎鼠脑bcl-2蛋白表达情况;TUNEL法检测各组胎鼠脑细胞凋亡情况。结果：各组均未发现死胎、吸收胎及畸形胎;0.01、0.05mg/kg.d氯化甲基汞对孕鼠及胎鼠生长发育没有明显的抑制作用;2.00mg/kg.d氯化甲基汞可以明显抑制孕鼠体重增长及胎鼠身长、体重及尾长的增长（P〈0.05）,但对孕鼠产仔数、胎窝总重及胎盘总重没有明显的影响,0.05mg/kg.d、2.00mg/kg.d氯化甲基汞组胎鼠脑组织汞含量较对照组明显升高（P〈0.05）,bcl-2蛋白表达明显下降（P〈0.05）,脑细胞凋亡较对照组明显升高（P〈0.05）;应用硫酸锌预处理后,氯化甲基汞对孕鼠及胚胎的毒性作用明显降低（P〈0.05）,胎鼠脑组织汞含量较染汞组明显降低（P〈0.05）,bcl-2蛋白表达明显升高（P〈0.05）,胎鼠脑细胞凋亡明显降低（P〈0.05）。结论：孕期补锌可以降低氯化甲基汞对孕鼠胚胎的毒性作用,其机制与锌通过升高bcl-2蛋白的表达而抑制细胞凋亡有关。反义uPAR质粒对AA大鼠滑膜VEGF影响的初步研究
摘要：目的：初步探讨反义uPAR质粒对在佐剂关节炎大鼠滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：40只雄性SD大鼠,其中8只为正常对照组,其余32只建立完全弗氏佐剂（CFA）诱导的大鼠AA模型,15日后将造模成功的大鼠随机分为3组,每组8只,为模型对照组、空质粒治疗组、重组质粒治疗组,后2组踝关节腔内分别注射空质粒及重组反义uPAR表达质粒,观察大鼠的一般情况、关节炎指数,关节滑膜大体变化及免疫组化法检测踝关节滑膜uPAR,VEGF的表达。结果：重组质粒治疗组关节炎指数明显低于模型对照组及空质粒治疗组（p〈0.01）。uPAR和VEGF定位于滑膜组织细胞质,uPAR及VEGF表达结果,重组质粒治疗组明显低于模型对照组、空质粒治疗组（p〈0.01）。反义uPAR表达质粒可以显著抑制大鼠滑膜组织uPAR、VEGF的表达。结论：反义uPAR表达质粒对AA大鼠滑膜血管翳及VEGF表达的抑制作用,可为类风湿性关节炎的基因治疗提供理论依据。
