糖尿病肝脏基因表达谱代谢学分析
摘要：目的：探讨糖尿病患者肝脏与正常对照肝脏基因表达谱的变化,并进行代谢通路生物信息学分析。方法：应用Affymetrix的Human Genome U133A array芯片检测糖尿病肝脏组织（n=2）和正常对照肝脏组织（n=2）的基因表达谱变化,通过DAVID分析平台对芯片监测到的表达上调的基因进行KEGG通路分析,并用RT-PCR验证部分基因的表达情况。结果：以比值大于2或小于-2为准,共有492条基因明显上调,820条基因明显下调;在差异表达明显的前20位基因中,涉及氧化应激、免疫炎症反应和脂代谢。KEGG代谢通路分析显示：该差异表达基因谱符合2型糖尿病的发病机制,其差异表达明显基因的代谢通路涉及胰岛素信号通路、脂代谢、补体和凝血系统、糖代谢、粘附功能和细胞因子和受体的相互作用,RT-PCR证实差异表达明显基因SOD2mRNA和CRPmRNA确实表达明显上调。结论：糖尿病肝脏与正常肝脏组织基因表达谱的变化在代谢通路上主要表现为在糖、脂代谢和胰岛素信号通路、补体和凝血系统等的改变,肝脏在糖尿病发病机制中的作用可能与其参与糖脂代谢和胰岛素的作用异常有关。家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合杂合突变分析
摘要：目的：对1例临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症（FH）先证者及其核心家系成员进行基因检测分析,探讨患儿发病的分子病理基础。方法：收集先证者及父母血标本及临床资料,酚氯仿法提取基因组DNA,DNA直接测序方法检测低密度脂蛋白受体（LDL-R）基因18个外显子和启动子及载脂蛋白B（ApoB100）R3500Q位点,核苷酸序列分析结果与Gen Bank比对寻找突变。结果：（1）先证者三尖瓣轻度关闭不全,先证者父母双侧颈总动脉内-中膜增厚,先证者母亲左侧颈内动脉起始处后壁多发混合回声斑块（2）该家系排除ApoB100基因R3500Q突变;（3）先证者LDL-R基因第13外显子发生A606T和D601Y复合杂合突变,前者第1879位G→A碱基置换,导致丙氨酸改变为苏氨酸,后者为1864位G＆gt;T碱基置换,导致天冬氨酸改变为酪氨酸,其父为携带A606T突变的杂合子,其母为携带D601Y突变的杂合子。结论：先证者LDL-R基因存在A606T和D601Y复合杂合突变,它们分别来源于父系及母系遗传。乳腺癌荷瘤鼠99mTc-DOTANOC显像与生长抑素受体表达水平的相关性研究
摘要：目的：探讨乳腺癌荷瘤鼠模型中肿瘤组织中的生长抑素受体（SSTR）的表达水平与99mTc-DOTANOC显像的相关性研究。方法：配体交换法标记99mTc-DOTANOC,通过尾静脉注射乳腺癌荷瘤鼠模型,行99mTc-DOTANOC显像,勾画ROI计算肿瘤与对侧正常组织（T/NT）的放射性比值并测定肿瘤及主要脏器单位组织的放射性摄取百分值（%ID/g）,采用逆转录聚合酶反应（RT-PCR）检测肿瘤组织中各SSTR亚型mRNA的表达水平,对SSTR亚型表达水平与T/NT放射性摄取比值进行相关性研究。结果：99mTc-DOTANOC乳腺癌荷瘤鼠模型显像示肿瘤部位有较高的放射性浓聚,与对侧正常组织T/NT比值较高,4h达到2.41±0.21;99mTc-DOTANOC荷瘤鼠体内生物分布示药物在肿瘤部位有较高的摄取;RT-PCR示乳腺癌组织中有着丰富的SSTR表达,SSTR3和SSTR2亚型表达水平较高,两者mRNA的表达水平与荷瘤鼠显像T/NT比值呈正相关（两者分别r=0.94,r=0.81,P〈0.05）。结论：乳腺癌细胞株MDA-MB-435高表达SSTR2和SSTR3,其中SSTR3和SSTR2 mRNA表达水平与肿瘤组织对99mTc-DOTANOC的摄取呈正相关。第三代生长抑素类似物^99mTc—DOTANOC受体显像对乳腺癌有较好的影像诊断价值。靶向CD59的siRNA抑制人卵巢癌细胞A2780裸鼠移植瘤的实验研究（英文）
摘要：目的：通过体内动物实验研究CD59-siRNA对卵巢癌移植瘤CD59的沉默效应及其抑瘤作用,探讨CD59在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法：采用脂质体转染法将CD59干扰质粒（T组）和空质粒（V组）转染A2780细胞,获得稳定表达细胞株,将前两组A2780细胞和未转染（C组）的A2780细胞分别接种于裸鼠皮下建立肿瘤模型,通过绘制肿瘤生长曲线、RT-PCR和Western Blot研究其抑瘤效应及对CD59的沉默效应。结果：肿瘤生长曲线显示,与对照组相比,CD59干扰质粒转染组肿瘤生长明显受抑制（P〈0.05）。RT-PCR和Western Blot结果表明,干扰组的CD59mRNA及CD59蛋白与对照组相比显著降低（P〈0.05）。结论：动物实验表明,特异性沉默CD59基因的siRNA表达载体可以明显抑制CD59的表达及卵巢癌在体内的生长,进一步说明了CD59在肿瘤免疫逃逸中的作用。结直肠癌细胞CES2表达对CPT-11化疗敏感性的影响
摘要：目的：研究异常甲基化在调控结直肠癌细胞中CES2基因表达中的作用,并观察结直肠癌细胞内CES2表达与化疗敏感性的关系。方法：采用MSP检测八种结直肠癌细胞系中CES2基因启动子甲基化;荧光定量PCR和westernblot方法检测DAC去甲基化后CES2 mRNA及蛋白表达变化;采用MTT法,检测各型结肠癌细胞株对伊利替康的细胞毒性,计算IC50并分析其与CES2 mRNA表达的相关性。结果：CES2基因启动子在八种结直肠细胞株中均呈未甲基化状态,使用DAC处理后,CES2在其低表达的细胞株无明显增加,不同结直肠癌细胞株对CPT-11敏感性存在差异（P〈0.05）,其中LoVo细胞对CPT-11敏感性最低,RKO细胞对CPT-11的敏感性最高。结直肠细胞株内CES2表达与IC50呈负相关性（r=-0.58651,P〈0.01）。结论：甲基化不参与调控CES2基因的表达,CES2表达与CPT-11细胞毒性呈正相关。5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素对体外培养人宫颈癌细胞生长抑制作用的研究
摘要：目的：研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素（ADFMChR）体外抗宫颈癌作用。方法：台盼蓝染色细胞计数法测定ADFMChR对体外培养人宫颈癌细胞HeLa细胞和正常人脐静脉内皮HUVEC细胞增殖的影响；软琼脂克隆形成法及平皿克隆形成法测定ADFMChR对体外培养HeLa细胞的非锚定依赖性及锚定依赖性生长作用；PI染色流式细胞术（FCM）分析ADFMChR对HeLa细胞周期的影响。结果：ADFMChR抑制体外培养人宫颈癌HeLa细胞增殖和生长，呈剂量和时间依赖性。其效价强度高于先导化合物白杨素（ChR），而对正常人脐静脉内皮HUVEC细胞的毒性小；ADFMChR呈剂量依赖性抑制细胞集落形成；不同浓度的ADFMChR作用于HeLa细胞后，使细胞周期阻滞于G1期。结论：ADFMChR具有抑制宫颈癌HeLa细胞生长的作用 。平滑肌肌球蛋白轻链激酶N端删除载体的构建
摘要：目的：构建重组平滑肌肌球蛋白轻链激酶（myosin light chain kinase,MLCK）N端删除载体,为研究平滑肌MLCK的分子机制提供研究模型。方法：以重组质粒pCold/155为模板,根据其待删除序列（N端1-41个氨基酸）设计上下游引物,行PCR扩增。将扩增片段以Nde I/EcoR I双酶切,产物行琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因。将目的基因与载体连接,转化至大肠杆菌。筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序。结果：用Nde I和EcoR I双酶切重组质粒pCold/155,琼脂糖凝胶电泳显示得到约4.4kb载体和约3.4kb的MLCK片段。阳性克隆经测序证实MLCK的N端41个氨基酸序列已被成功删除。结论：成功构建了重组MLCK N端删除载体pCold/155/D41。关于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展,本刊经研究决定于2009年继续开展＂生物医学＂优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公正与公平性,编辑部现将有关事项通知如下：心肌缺血后处理中一氧化氮的变化
摘要：目的：研究心肌缺血再灌注与心肌缺血后处理两种因素下大鼠心肌一氧化氮（NO）的含量与一氧化氮合酶（niricoxide syn-thase,NOS）活性的关系。方法：采用健康雄性Wistar大鼠（n=12）建立离体心肌缺血再灌注损伤模型。采用高效液相色谱仪（HPLC）直接测定心脏灌流液中NO的含量。采用高效液相色谱仪（HPLC）测定瓜氨酸生成量计算心肌中NOS活性。使用紫外分光光度法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性。使用染色法计算心肌梗死面积。结果：平衡末,对照组NO含量与实验组NO含量差异无统计学意义（P〉0.05）;对照组平衡末NO含量与再灌注后NO含量差异无统计学意义（P〉0.05）;对照组再灌注后NO含量与实验组后处理后NO含量相比差异有统计学意义（P〈0.05）;实验组后处理后NO含量与平衡末NO含量相比显著升高（P〈0.05）。实验组后处理后心肌组织NOS活性明显高于对照组（P〈0.05）。实验组心肌释放的LDH活性显著低于对照组（P〈0.01）。与对照组比较,缺血后处理可减少心肌梗死面积（P〈0.05）。结论：缺血后处理时心肌细胞中NO生成量与NOS活性普遍高于缺血再灌注时。貂、狐、貉源犬瘟热病毒的分离鉴定与序列分析（英文）
摘要：采用能稳定表达犬信号淋巴细胞活性分子（SLAM）的Vero-DST细胞从发病貉、狐狸和水貂病料,分离获得5株病毒,经电镜形态观察、RT-PCR检测、理化特性测定和人工感染发病试验鉴定,均为犬瘟热病毒（CDV）,分别命名为HT-P（貉源）、THD1（貉源）、HD（貂源）、LN（貂源）和HB（狐源）。5个分离毒株TCID50为10-5.2～-7.3/ml;除鸡、鹅红细胞呈微弱阳性外,其余均未见血凝作用;对乳鼠的LD50分别为2×10-3.8～-4.8/ml,对实验兔无致病性,对貉有明显致病性作用。5株CDV H和N基因序列分析结果为5个分离株之间H基因nt序列同源性均达到97.5%以上,HT-P（貉源,山东青岛）与THD1（貉源,山东潍坊）的aa同源性为100%,二者与其他分离株间aa序列同源性为87.9%～99.1%;与chn等疫苗株基因nt序列和推导aa序列同源性普遍较低,分别为90.5～91.8和89.%～91.8%。5个分离株之间N基因nt序列同源性均≥94.5%,HT-P与THD1同源性最高（99.8%）,分离株之间aa序列除HT-P、THD1与HD（貂源,山东青岛）同源性较高（99.0%以上）外,其他．分离株之间同源性低。与chn等疫苗株nt序列同源性较低（90．9～93．5％）。此外，HD和LN（貂源，辽宁大连）发病区域相距较远，但具有较高的同源性，但与HB（狐源，河北沦州）具有相对较低的nt同源性，提示野毒株在易感动物上可能存在种属差异。分离毒株与疫苗株之间H和N蛋白基因差异，可能与CD免疫失败有关。用低聚PAAS热沉淀法提取血液超氧化物歧化酶
摘要：目的：通过对传统工艺的改进,探索简便快速的SOD提取分离方法,以适合大量制备的需要。方法：使用低分子量聚丙烯酸钠和氯化铜溶液作为分散剂和酶激活剂,经过溶血、热变、超滤浓缩、冷冻干燥等步骤,从猪血液中分离SOD。结果：新工艺分离出SOD的活力达到3000 u/mg以上,达到有机溶剂提取和高浓度盐析提取得到的活力水平,经SephadexG-75纯化后在SDS-PAGE上显示单一条带。结论：低分子量聚丙烯酸钠和氯化铜溶液可作为SOD提取的分散剂和酶激活剂,对大量制备该产品具有一定的参考价值。人耐药白血病细胞多药耐药基因-1小干扰RNA的构建及功能研究
摘要：目的：构建人耐药白血病细胞多药耐药基因-1小干扰RNA并研究其功能。方法：人工合成编码mdr1小发夹状双链RNA的DN段,与pSilencer4.1-CMV质粒连接构建RNAi真核表达载体,采用脂质体介导法转染人耐药白血病细胞K562/A,经潮霉素B筛选转基因阳性克隆细胞,RT-PCR和Western Blotting检测转基因细胞中mdr1基因的表达量,MTT法检测转基因细胞对阿霉素的敏感性。结果：RT-PCR结果显示,与未转基因组和阴性对照组比较,RNA干扰组mdr1基因在mRNA水平上表达量降低43.55%;Western Blotting检测显示,RNA干扰组mdr1基因在蛋白水平上表达量降低69.46%;MTT法检测显示mdr1干扰细胞对化疗药物柔红霉素的敏感性提高23倍。结论：mdr1小发夹状RNA可显著抑制K562/A细胞中的mdr1基因的表达,提高白血病细胞对化疗药物的敏感性,对白血病多药耐药性的逆转和白血病的治疗具有重要理论和实际意义。KA海马注射对大鼠学习和记忆的影响及雷公藤甲素的保护作用
摘要：目的：观察海人藻酸（Kainic acid,KA）海马内注射后大鼠学习记忆的变化及雷公藤甲素（TRP）对其的影响。方法：采用Morris水迷宫筛选空间学习记忆能力正常的SD雄性大鼠90只（200～220g）。将实验动物分为：右侧海马注射生理盐水后生理盐水灌胃对照组（NS＋NS）、右侧海马注射海人藻酸后生理盐水灌胃干预组（KA＋NS）、右侧海马注射海人藻酸后雷公藤甲素灌胃干预组（KA＋TRP）。动物分别存活1天、3天、5天、7天、14天,用Morris水迷宫检测各组动物空间位置记忆能力;尼氏染色法观察海马CA1区神经元数目和形态。结果：与NS组（NS＋NS）比较,KA组（KA＋NS）大鼠逃避潜伏期延长（P〈0.05）,跨越原平台次数减少（P〈0.05）;CA1区的神经元出现胞体肿胀、排列散乱等形态改变及神经元的丢失（P〈0.05）;TRP组（TRP＋KA）与KA组比较,大鼠的平均逃避潜伏期从第5天起缩短（P〈0.05）,跨越原平台次数增多（P〈0.05）,神经元形态好转,数目增多。结论：KA海马内注射,可以导致大鼠学习记忆功能障碍及神经元形态的改变;雷公藤甲素干预治疗,能够改善动物的学习和记忆能力,保护海马神经元。封面说明
摘要：这个图片设计,被编委会命名为＂和谐生命之光＂。 中国传统哲学认为,道生一,一生二,二生三,三生万物,世界的和谐是一种一分为二的对立统一,但世界同时又是不断向前发展的,因此背景采用带有金属色彩的变形太极图案,由一个中心点分两部分旋转生出整个奇妙的世界,既是对传统的传承,也体现了新的发展。太极图案首先代表了传统的中国文化,有中国特色,该图案也在奥运会开幕式展示中国传统文化时出现过;硫酸软骨素对慢性酒精中毒大鼠脑损伤的保护作用
摘要：目的：探讨硫酸软骨素对慢性酒精中毒脑损伤的作用及可能机制。方法：雄性Wistar大鼠60只随机分为6组，酒精模型组以剂量为8ml·kg^-1·d^-1 50％的酒精每天灌胃一次，纳洛酮药物组给予乙醇半小时后腹腔注射纳洛酮0．08mg·kg^-1·d^-1 ，硫酸软骨素低、中、高剂量干预组在酒精模型组的基础上分别给予硫酸软骨素50、100、150mg·kg^-1·d^-1 ，空白对照组给予等体积的蒸馏水，持续2周；第三周把50％的酒精的剂量递增为12mg·kg^-1·d^-1 ，持续灌胃6周。在第八周末实验结束后取血，分离血清，留取脑组织。HE染色观察各组大鼠神经细胞的变化。生化测定各组大鼠血清及脑组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH．PX）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及脂质过氧物终末产物丙二醛（MDA）；并测定脑皮质中β-内啡肽含量（B—EP）。结果：模型组大鼠大脑皮质和海马区神经元数量明显减少，神经细胞排列紊乱。硫酸软骨素中剂量组大鼠大脑皮质和海马区神经细胞排列层次较清晰。与酒精组相比较，硫酸软骨素中剂量组大鼠血清和脑组织匀浆中MDA含量明显降低（P〈0．01），脑皮质中β-内啡肽含量明显降低（P〈0．01）；GSH-Px含量及SOD活性显著升高（P〈0．01）。结论：硫酸软骨素对大鼠慢性酒精中毒脑损伤具有保护作用。猪腹部肠管火器伤后肠源性内毒素血症与胃损伤
摘要：目的：探讨腹部火器伤肠管穿透后胃的损伤性变化。方法：健康长白仔猪42头随机等分为对照组和腹部火器伤肠管穿透伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h实验组。测定各组动物血浆内毒素,光镜下观察各组胃的组织形态学变化。结果：实验组各组血浆内毒素水平均明显高于对照组,内毒素于伤后8小时出现高峰,伤后12小时仍维持在高峰值水平（P〈0.05）;伤后各组出现逐渐加重的胃粘膜下充血、水肿,12h、24 h组出现炎细胞浸润、浆膜下出血。结论：腹部火器伤肠管穿透后,胃损伤性变化随时间延长而加重;肠源性内毒素血症在火器伤后继发性胃损伤中可能起重要作用。《现代生物医学进展》被英国Global Health数据库收录
摘要：Global Health是英国国际农业与生物科学研究中心主办的、国际上权威的公共健康研究数据库。读者范围主要针对专业学术机构、研究人员、非政府组织、政策制定者、从业医师、健康机构专业人士及学生。该数据库填补了很多目前医学研究领域内的信息空白,提供最宽泛的内容覆盖面。Global Health在Ovid（奥维德技术）及SilverPlatter平台上均可获得。负载维生素D_3的海藻酸纳米粒抗佝偻病作用研究
摘要：目的：观察负载维生素D3海藻酸纳米粒和维生素D3的抗佝偻病作用。方法：36只SD大鼠随机分组为正常对照组、佝偻病模型组、负载VD3的自组装海藻酸钠纳米粒（sSAN-VD3）低剂量组（1.70 mg.kg-1.d-1含VD315.0μg）、sSAN-VD3高剂量组（4.2 mg.kg-.1d-1含VD337.5μg）、VD3低剂量组（15.0μg.kg-.1d-1）、VD3高剂量组（37.5μg.kg-.1d-1）6组,每组6只。正常对照组大鼠在通光条件下用正常饲料饲养,其余各组大鼠置于暗室中,并喂养缺乏维生素D3的饲料,同时各预防给药组按剂量连续灌胃给药35天。观察记录大鼠的体重变化,检测大鼠血清中25羟基维生素D（325-（OH）VD3）、血清骨碱性磷酸酶（Bone Alkaline Phosphatase,BAP）活性及股骨骨密度（Bone Mineral Density BMD）。结果佝偻病模型组大鼠喂养5周后体重明显低于正常对照组,血清BAP活性明显增高,血清25-（OH）VD3含量及股骨BMD则显著降低（P〈0.05）;与佝偻病模型组大鼠比较,各预防给药组大鼠体重及股骨BMD均有所增加,；sAN-VD3高、低剂量组和VD3高剂量组大鼠血清BAP活性降低，25-（OH）VD，水平明显升高，与模型组差异显著（P〈0．05）；与同剂量的VD，低剂量组比较，sSAN—VD3低剂量组大鼠的血清BAP、25-（OH）VD3及股骨BMD等三项指标均显示出更明显的抗佝偻病作用（P〈0．05）。结论：负载维生素D3海藻酸纳米粒和维生素D3均具有良好的抗佝偻病作用，以前者作用较强。
