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实用医学 2016年第17期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

实时三维超声心动图评价冠心病左心房功能的应用及进展2777-2779

摘要：左心房（left atrium，LA）在协调心脏整体功能方面发挥着重要作用，其功能在心动周期的不同阶段分别表现为储存功能、管道功能以及辅助泵功能。实时三维超声心动图（real—timethree．dimensionalechocardiography．RT-3DE）可重建心脏三维立体结构，近年来应用其评价LA功能成为研究热点。冠心病患者左室舒张功能不全的早期就已出现LA大小和功能的改变．有效及准确地评价冠心病LA功能的改变对于早期制定临床干预措施、评价治疗效果及估测预后等方面具有重要的临床意义。本文就RT-3DE评价冠心病LA容量及功能的应用及研究现状作一综述。

祝贺《实用医学杂志》连续3年进入谷歌学术中文期刊统计指标前100名2779-2779

摘要：日前，谷歌学术（Google Scholar）了2016版期刊排名（2016version of Scholar Metrics）。《实用医学杂志》h5指数为25，h5中值为29，位列中文期刊排名前100种期刊之第69位。在这100种出版物中，医药卫生类期刊共24种，《实用医学杂志》居于第14位。本刊此次入选是继2014年入选Google学术统计指标之100种中文热门期刊之后的连续3年入选。

实用医学杂志基础研究

MiR-124对鼻咽癌细胞株上皮间充质转化和放疗敏感性的影响2780-2783

摘要：目的：研究miR-124对鼻咽癌细胞株上皮间充质转化（epithelial—mesenchymaltransitions．EMT）和放疗敏感性的影响。方法：转染miR-124mimic或inhibitor入鼻咽癌细胞株，划痕实验检测miR-124对鼻咽癌EMT影响：细胞转染成功24h后x线照射，检测细胞株中Caspase-3活性及凋亡细胞比例；EdU方法检测放疗后细胞增殖能力；Westernblot检测信号通路蛋白。结果：划痕实验结果显示miR-124能抑制鼻咽癌细胞株EMT。Caspase-3活性检测结果提示．miR-124过表达细胞株接受放疗后Caspase-3活性显著上升（P〈0．01）。流式细胞仪结果显示，miR-124能增加细胞株放疗后凋亡。EdU结果显示。miR-124能抑制放疗后细胞的增殖。Westernblot结果表明过表达miR-124的细胞株接受放疗后，P-Akt含量显著下降。结论：miR-124可能通过Akt信号通路抑制鼻咽癌细胞株EMT，增加其放疗敏感性。这为鼻咽放疗增敏提供了新的可行的研究方向。

蟾毒灵抑制NF-κB引起人食管癌细胞凋亡2784-2787

摘要：目的：观察蟾毒灵对人食管癌ECAl09细胞生长的影响，探讨蟾毒灵抑制食管癌细胞抗肿瘤作用的可能机制。方法：CCK-8法测定蟾毒灵对人食管癌ECAl09细胞增殖的影响；流式细胞术检测蟾毒灵对细胞凋亡的影响；Westernblot法检测蟾毒灵作用于人食管癌ECA109后，NF-κBp65，ERK，P—ERK1／2及Caspase-3、C1eavedCaspase-3．PARP、CleavedPARP蛋白表达的变化情况。结果：蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞有明显抑制增殖的作用。并呈现出时间和浓度依赖性；蟾毒灵能诱导ECAl09细胞凋亡；蟾毒灵能使ECA109细胞中凋亡相关蛋白CleavedCaspas-3及CleavedPARP蛋白表达随着药物浓度的增加而明显增加，P-ERKl／2．NF-κBp65蛋白的表达随着药物浓度的增加而减少。结论：蟾毒灵可显著抑制人食管癌ECAl09细胞的增殖，促使肿瘤细胞凋亡．其作用机制可能与抑制ERK／NF-κB通路有关。

尿毒清联合替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制2787-2790

摘要：目的：研究尿毒清颗粒联合替米沙坦对糖尿病大鼠肾组织的保护作用及机制。方法：40只雌性Wistar大鼠随机分为：正常对照组（NC）、糖尿病大鼠组（DM）、尿毒清组（ND）、联合用药组（LH）。DM、ND、LH三组建立1型糖尿病大鼠模型．给予相应的药物干预12周后处死大鼠，检测生化指标，免疫荧光双标检测肾脏血管紧张素受体（AT）与脂联素受体（AdipoR）形成二聚体的表达，免疫印迹法检测单核细胞趋化因子（MCP-1），转化生长因子-β（TGF-β）的表达水平判断肾小管受损情况。结果：1．AdipoRl与AT1、AdipoR2与AT2可形成异源二聚体，DM组受体间二聚体表达有上调，ND组与LH组表达明显下调；2。MCP-1与TGF-β在DM组大鼠肾脏中表达明显上调，ND组、LH组则明显下调。结论：尿毒清与替米沙坦联合用药显著下调DM大鼠肾脏组织内TGF—B与MCP-1的表达，其护肾机制可能与干预AdipoR与AT二聚体相关。

Aurora激酶抑制剂VX-680对未分化甲状腺癌细胞增殖的影响2791-2794

摘要：目的：研究Aurora．A激酶抑制剂VX-680对未分化甲状腺癌8305C细胞增殖的影响．并探讨其相关机制。方法：采用MTT法检测VX=／-680对8305C细胞增殖活性的影响；利用免疫荧光化学方法检测甲状腺癌细胞在药物作用下Aurora—A、Bax和Bcl-2的表达变化。结果：随药物浓度增加甲状腺癌细胞生长受到明显抑制（P〈0．05）；随作用时间延长，药物的抑制作用也增强（P〈0．05）。48h细胞免疫荧光结果显示400nmoL浓度处理的8305C细胞，Aurora—A激酶和Bcl．2蛋白表达明显降低（P〈0．05）．Bax蛋白量变化不明显（P〉0．05）。结论：VX-680通过抑制Aurora—A表达，抑制细胞有丝分裂，同时通过抑制Bcl-2表达，导致Bcl-2／Bax比例失衡，诱发细胞凋亡。VX-680是未分化甲状腺癌的一种非常有潜力的靶向抑制剂。

祝贺《实用医学杂志》10件作品获第四届广东省期刊优秀作品奖2794-2794

摘要：近日，广东省期刊协会公布了第四届广东省期刊优秀作品评选结果，《实用医学杂志》在本届期刊优秀作品评选中收获颇丰，共有10件作品获奖，其中一等奖2件、二等奖3件、三等奖5件。

丹参注射液对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及羟脯氨酸表达的影响2795-2799

摘要：目的：探讨丹参注射液对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及羟脯氨酸表达的影响。方法：转化生长因子β1（TGF．B1）诱导人胚肺成纤维细胞增殖；四甲基偶氮唑蓝法检测丹参注射液对人胚肺成纤维细胞数的影响；免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原表达；流式细胞仪检测细胞凋亡：比色法观察羟脯氨酸表达。结果：（1）TGF-β1（0、2．5、5、10、20、40μg／L）可剂量依赖性地上调人胚肺成纤维细胞的细胞数。丹参注射液可剂量依赖性下调人胚肺成纤维细胞光密度值。（2）TGF-β1（10μg／L）干预人胚肺成纤维细胞24、48h时，增殖细胞核抗原表达明显上调，与同时间点对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。但丹参注射液预处理后，未发现增殖细胞核抗原表达下调。（3）流式细胞仪检测结果显示，丹参注射液预处理后，与TGF-β1组相比，细胞凋亡率增加（P〈0．05）。（4）丹参注射液可下调人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸表达，与TGF-β1组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：丹参注射液可靶向人胚肺成纤维细胞，通过促进其凋亡、下调羟脯氨酸表达影响气道重塑。

过氧化物酶增殖体激活受体-γ辅助激活因子1在OLETF大鼠肝脏糖代谢中的作用2799-2802

摘要：目的：通过观察OLETF大鼠肝脏组织过氧化物酶增殖体激活受体-γ辅助激活因子1（PGC-1）表达的变化，初步探讨其在2型糖尿病肝糖代谢中的作用。方法：OLETF大鼠为实验组。同龄LETO大鼠为对照。在8、18和28周龄行OGTY试验．测血糖、胰岛素和血脂，Westernblot方法测定肝组织中PGC-1、PEPCK、UCP2的蛋白水平。结果：（1）OLETF大鼠从8周起体重明显高于对照组，18、28周龄时OGTF2hBG和TG水平均明显升高，28周龄时空腹胰岛素水平升高，胰岛素敏感指数降低。（2）OLETF大鼠肝脏组织中PGC-1蛋白表达18、28周时低于对照组，28周时PEPCK表达高于对照组，而UCP2表达低于对照，差异有统计学意义。结论：OLETF18周龄后表现出2型糖尿病病理特点，OLETF大鼠肝脏PGC-1、PEPCK及UCP2蛋白表达水平的变化，提示PGC-1可能在2型糖尿病的肝糖代谢中起重要作用。

人博卡病毒重组蛋白表达及间接酶联免疫法检测的建立2803-2806

摘要：目的：原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白VP2，并建立间接酶联免疫法，用于病毒感染的检测。方法：本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段，克隆至表达载体pET28a中，转化到菌B121（DE3），经过诱导产生融合蛋白，使用Westernblot检测，并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果：重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确．并可与人博卡病毒IgG阳性血清发生特异性反应，建立的间接酶联免疫法最佳抗原包被浓度为2mg／mL，血清的最佳稀释倍数为1：200。封闭以1％BSA封闭效果最佳，酶标二抗的最佳工作稀释度为1：4000．工作时间最佳为1h，该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接ELISA方法Cut—off值为0．1．灵敏度为92％，特异性为98％，与对照试剂检测结果的符合率为97％。结论：原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法，为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。

慢病毒干扰TNF—α对脊髓损伤大鼠Caspase-3和Bcl-2表达的影响2807-2812

摘要：目的：采用慢病毒抑制炎症因子TNF—α的表达，观察凋亡相关因子Caspase-3和Bcl-2、Bax在脊髓损伤大鼠损伤段的表达变化，探究在脊髓损伤中TNF-α与Caspase-3、Bcl-2、Bax的相互关系。方法：采用Allen法制备脊髓钝挫伤模型：GeneMANIA生物信息学方法预测TNF—α与Bcl-2的关系。用慢病毒包装的RNA，构建TNF．0l的RNA干扰模型；TNF-α的表达被抑制后，用QRT—PCR检测Caspase-3和Bcl-2mRNA的表达。用免疫组织化学技术检测Caspase．3和Bcl-2、Bax蛋白质的定位分布，用SPSS17．0进行统计分析。结果：脊髓钝挫伤后SD大鼠双后肢截瘫，无法自行排便排尿。慢病毒干扰TNF-α后QRT—PCR结果显示，Caspase-3表达显著减少（P〈0．05），Bcl-2表达下降，但是没有显著变化（P〉0．05）。免疫组织化学实验结果显示在脊髓白质和灰质的神经元和神经胶质细胞中观察到Caspase-3、Bcl-2、Bax的免疫阳性反应细胞，并与QRT-PCR变化结果相同。结论：在脊髓损伤后的大鼠体内TNF．仪能有效调控Bcl-2和Bax的比值，进而调节Caspase-3的表达，最终可能影响凋亡而作用于脊髓损伤后的功能恢复。

伴放线放线杆菌对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响2813-2816

摘要：目的：研究伴放线放线杆菌对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。方法：采用细胞计数法分析伴放线放线杆菌对干细胞增殖的影响。应用免疫细胞化学法检测干细胞表面标记物和骨桥蛋白的表达．RT．PCR法检测C—myc、Klf4、Coll和Runx2mRNA的表达，利用试剂盒检测干细胞碱性磷酸酶的变化，分析伴放线放线杆菌对干细胞干性和成骨分化的影响。结果：伴放线放线杆菌与干细胞按照1克隆：1细胞比例共培养后，细胞增殖明显增加；两者共培养后，干细胞CD44、CD166和骨桥蛋白均呈阳性表达，C—myc、Klf4、Runx2和Coll mRNA表达明显增加，碱性磷酸酶活性仍较强。结论：伴放线放线杆菌在体外促进人骨髓间充质干细胞增殖，增强干细胞干性，但却不影响干细胞的成骨分化潜能。

C／EBP同源蛋白-10在缺血缺氧诱导人主动脉平滑肌细胞迁移中的作用2817-2820

摘要：目的：探讨人主动脉血管平滑肌细胞（T／GHA-VSMC）在缺血缺氧时内质网应激蛋白CHOP-10的表达与细胞迁移的关系。方法：将传代培养的T／GI-IA．VSMC分为正常对照组及缺血缺氧组。缺血缺氧组又分为CHOP-10基因沉默组以及阿托伐他汀干预组；24h后采用RT-PCR和Westernblot法检测细胞中CHOP-10的表达；ELISA法检测细胞培养液中MMP-9及MMP．2的浓度；Transwell趋化小室测试细胞迁移情况。结果：与正常对照组相比，缺血缺氧组CHOP-10表达明显升高（P〈0．01），细胞培养液中MMP-9及MMP-2的浓度明显增加（P〈0．01），且细胞迁移率也显著增加（P〈0．01）。而CHOP-10基因沉默或用阿托伐他汀干预后，MMP-9及MMP-2的分泌减少，且显著抑制细胞的迁移率（P〈0．01）。结论：缺血缺氧可引起人VSMC内质网应激，通过上调CHOP-10的表达及基质金属蛋白酶的分泌促进细胞迁移：而下调CHOP-10或阿托伐他汀干预可能影响通过CHOP-10的表达减轻内质网应激抑制细胞迁移。

实用医学杂志临床研究

TLR5rs5744168基因多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎的相关性2821-2825

摘要：目的：探讨基因TLR5R392X（C〉T）（rs5744168）多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎（ANCA相关性小血管炎，AAV）的相关性。方法：利用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法（PCR．RFLP）来鉴定120例AAV患者和212例正常人的TLR5R392X基因型．并收集资料进行分析。结果：（1）两组TT型均缺失．AAv组CC、CT型频率分别为82．50％、17．70％，对照组分别为88．68％、11．32％，C和T等位基因分布频率AAV组为91．25％、8．75％，对照组为94．34％、5．66％，两组基因型及等位基因分布频率比较差异无统计学意义（P〈0．05）。（2）AAV组中两种基因型血沉、尿蛋白定量等水平比较差异有统计学意义（P〈0．05），CC型较高。（3）将单因素进行二元Logistic回归分析，发现TLR5R392X基因多态性对AAV患病风险无关联，总胆固醇与AAV发病有关联。结论：TLR5R392X基因可能与广西AAV患者的遗传易感性不相关，可能与其血沉、尿蛋白定量等水平存在关联。

新生儿肝内胆汁淤积症患者21例质谱检测结果2825-2828

摘要：目的：分析希特林蛋白患儿血Met、Phe、Tyr、Arg、Cit、Orn、Ser、Thr、C0、C2、C3、C14、C14：1、C16、C16：1、C18、C18：1及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸的水平分布，探讨各指标在新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）患者诊断中的应用价值。方法：2011年5月至2015年5月期间，本筛查中心共确诊21例患儿，将其作为观察组，同时随机抽取100例正常儿童为对照组，分析两组血串联质谱Met、Phe、Tyr等指标及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4．羟基苯丙酮酸的水平，比较其差异性。结果：较正常对照组，观察组血Met、Phe、Tyr等多种指标及尿气相质谱4．羟基苯乳酸、4．羟基苯丙酮酸检测结果偏高，Orn／Cit结果偏低，差异均有统计学意义，而c2和Cit／Arg检测结果有升高趋势，但差异无统计学意义。结论：NICCD患儿存在生化指标代谢异常，血串联质谱及尿气相质谱检测对患儿的诊断具有重要意义。

TMSG-1和CyclinD1在食管鳞癌的表达及临床病理意义2829-2833

摘要：目的：探讨肿瘤转移抑制基因-1（TMSG-1）及细胞周期素D1（CyclinD1）在食管鳞癌（ESCC）中的表达及其与患者预后的关系。方法：采用SP免疫组化染色法检测136例ESCC及13例正常食管黏膜组织中TMSG-1及CyclinD1蛋白的表达情况，分析二者与ESCC患者临床病理指标及预后的相关性。结果：（1）TMSG-1与CyclinD1在ESCC中的阳性率分别为52．2％、65．4％，在正常食管黏膜中的阳性率则分别为100．00％、23．1％，差异具有显著性。（2）TMSG．1及CyclinD1的异常表达均与ESCC组织学分级、TNM分期及淋巴结转移相关。（3）TMSG-1及CyclinD1在ESCC的表达呈负相关。（4）TMSG-1、CyclinD1均是影响ESCC术后生存的独立因素。结论：TMsG-1与CyclinD1的异常表达在ESCC的发生、发展中可能起协同作用，可作为较为理想的肿瘤标志物辅助判断患者预后并指导临床治疗。

外伤性枯草杆菌性眼内炎临床分析2833-2836

摘要：目的：总结外伤性枯草杆菌性眼内炎的临床特征，探讨早期诊治的措施。方法：回顾性总结分析2003年1月至2013年12月中山大学中山眼科中心眼外伤科收治的枯草杆菌性眼内炎的22例（22眼）患者的临床资料。结果：22例患者，合并眼内异物存留15例，角膜浸润15例，眼眶蜂窝组织炎7例。接受伤口缝合眼内抗生素注射7例，单纯玻璃体手术7例，玻璃体手术联合硅油填充8例。11例无光感．11例光感～0．05，3例眼内容剜除。22株枯草杆菌菌株对妥布霉素、庆大霉素、头孢哌酮、左氧氟沙星及氧氟沙星敏感。年龄、角膜浸润和眼内异物存留是枯草杆菌眼内炎预后不良的危险因素（P〈0．05）．硅油填充是预后较好的保护因素（P〈0．05）。结论：以角膜伤口为中心的环状浸润，前房脓血样积液是枯草杆菌眼内炎的典型体征。庆大霉素、妥布霉素、头孢哌酮、左氧氟沙星和氧氟沙星是治疗枯草杆菌眼内炎有效抗生素，及早进行玻璃体手术联合硅油填充是挽救视功能最有效的方法。

复杂性胎盘植入的临床特点和围术期管理2837-2840

摘要：目的：探讨复杂性胎盘植入的临床特点、围术期处理，有效降低母婴的不良围产期结局。方法：回顾分析2013年1月至2015年12月广州医科大学附属第三医院收治的复杂性胎盘植入25例的，J盘床特点，并按围术期处理分组为术前行输尿管置管组9例及无置管组16例：常规子宫切除组17例与经后路子宫切除组8例，比较其手术时间、产后出血、输血量、膀胱损伤或输尿管损伤率、转入ICU率和住院时间。结果：出现孕期反复的无痛性阴道流血者占76％，分娩前出血者占56％。产前诊断17例（占68％）。术前行膀胱镜检查＋双侧输尿管逆行置管或经后路子宫切除，手术时间较短、产后出血较少、减少输血量、无泌尿系损伤率、转入ICU率低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：复杂性胎盘植入要重视孕期的反复的无痛性阴道流血．提高产前诊断率。围术期处理是综合、有效、规范的多科参与，术前输尿管置管及经后路子宫切除术能有效降低母婴的不良围产期结局。