水通道蛋白在肺部疾病诊断治疗中的研究进展
摘要：水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）是一组构成水通道并与水通透性密切相关的细胞膜转运蛋白．广泛存在于动物、植物和微生物界。它的发现和研究在分子水平上进一步阐释了水跨膜转运的调节机制。从AQP的发现至今20余年间，有关它的研究越来越多，也越来越深入，尤其是在肾脏疾病及中枢神经系统疾病中。鉴于AQP对水分子跨膜转运的重要调节作用，肺作为存在水液交换的又一重要脏器．有关AQP对肺液体平衡的调节作用同样引起重视。本综述主要讨论了AQP与肺液体调节的相关性及其在肺部疾病诊疗中的最新研究进展及未来发展趋势。肝硬化营养支持治疗的研究进展
摘要：肝硬化患者常存在营养不良．营养不良与腹水、肝性脑病、感染等并发症及病死率有关。营养支持治疗可改善肝硬化患者的生存质量及临床预后。然而，在我国肝硬化的营养支持治疗并未引起临床医师足够重视，即使给予了一定的治疗．其主观性、随意性也较大。另外，营养风险筛查与营养评定本是营养诊疗的两个基本步骤，对下一步的营养支持治疗至关重要，但国内多数文献常将其混为一谈．许多临床医师更是如此。《手术风险评估表》预测切口感染的国外应用进展及国内应用启示
摘要：手术切口感染（surgical site infection．SSI）是院内感染的第三大常见原因。发生SSI并死亡的患者75％归因于SSI。在中国当前医疗模式下，控制SSI为医院提高经济效益的同时，更提高了医院的社会效益。《手术风险评估表》（以下简称NNIS）是国内外用来评估术后切口感染风险的较好工具，且在国外应用取得了一定进展，本研究拟对国外应用的进展及应用中出现的问题进行综述并提出NNIS在国内应用的启示，为国内优化NNIS、降低SSI的发病率提供依据．剔除Bcl-2基因对胃癌细胞HGC-27凋亡及5-氟尿嘧啶敏感性的影响
摘要：目的：探讨剔除Bcl-2表达对胃癌HGC-27细胞凋亡、增殖及5-氟尿嘧啶（5．Fu）敏感性的影响。方法：将HGC-27细胞分为5组：空白对照组、阴性对照组（对照siRNA）、干扰组（Bcl．2siRNA）、5-FU组（5-FU）、联合组（Bcl-2siRNA与5-FU）；通过流式细胞术、MTT方法检测HGC．27细胞凋亡、增殖水平，用ELISA法测定半胱氨酸蛋白酶的活力及CytochromeC释放水平。结果：转染Bcl-2siRNA能提高HGC-27细胞凋亡率，降低肿瘤细胞的增殖率；相对于5-Fu单独处理组，转染Bcl-2siRNA与5-Fu联合组的细胞凋亡水平明显上升，细胞增殖率显著降低，Caspase-3和Caspase-9活力显著升高．cytOChromeC释放水平亦显著增加（P〈0．01）。结论：剔除Bcl-2基因能诱导HGC-27细胞凋亡，抑制胃癌细胞增殖．增强5-FU的敏感性。miR-21对ADAMTS-1的调节在肺纤维化体内外实验中的研究
摘要：目的：探讨miR-21在肺纤维化模型中对ADAMTS-1表达水平的调节作用。方法：（1）建立博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型和构建体外肺纤维化模型，应用qRT-PCR检测miR-21表达水平，Westernblot法观察ADAMTS-1蛋白的表达。（2）通过体外转染miR-21相似剂（mimics）及抑制剂（inhibitors）至NIH3T3细胞，Westemblot法检测ADAMTS-1蛋白的表达。结果：（1）在小鼠肺纤维化模型中，与空白对照组比较。博来霉索处理后的3个时间点，小鼠肺组织miR-21表达明显上调，而ADAMTS-1蛋白表达明显下调（P〈0．01）。（2）在构建体外肺纤维化模型中，NIH3T3细胞经5μg／L的TGF-β1刺激后，ADAMTS-1蛋白表达下调，miR-21表达量明显上调（P〈0．01）。（3）对NIH3T3细胞转染miR-21相似物及抑制荆后实验结果显示，高表达mR-21后，NIH3T3细胞ADAMTS-1蛋白表达下调．反之亦然。结论：（1）体内外实验证实，肺纤维过程中miR-21表达上升，ADAMTS-1蛋白表达下降。（2）miR-21可负调控细胞ADAMTS-1的表达水平。缝隙连接蛋白43参与灯盏生脉胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
摘要：目的：观察灯盏生脉胶囊（DZSM）对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的影响及机制。方法：采用大脑中动脉栓塞（MCAO）的方法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。分为假手术组、MCAO组、DZSM组、甘珀酸（CBX）组、DZSM＋CBX组。各组于再灌注后48h评估大鼠神经功能缺损评分、梗死体积．测定Caspase-3表达量，MCAO组分别于再灌注后3、12、24、48h观察缝隙连接蛋白43（Cx43）表达变化情况，再灌注后48h比较各组cx43表达量。结果：DZSM、CBX和DZSM＋CBX组再灌注48h神经功能缺损评分、脑梗死体积、Caspase-3表达量均低于MCAO组（P〈0．05）。再灌注后各时间点Cx43表达量均升高（P〈0．05），DZSM、CBX和DZSM＋CBX组Cx43表达量较MCAO组低（P〈0．05），CBX与DZSM＋CBX组Cx43表达量较DZSM组低（P〈0．05）。结论：DZSM可减轻MCAO大鼠神经功能缺损评分．减少梗死体积，下调Caspase-3表达量，其机制可能与抑制cx43表达有关。小干扰RNA沉默Nanog基因对人肺腺癌A549细胞迁移及侵袭能力的影响
摘要：目的：观察小干扰RNA（siRNA）沉默Nanog基因对人肺腺癌A549细胞迁移及侵袭能力的影响。方法：将A549细胞分为空白对照组（A549）、阴性对照组（siNC）及实验转染组（siNanog）。以脂质体Lipofectamine2000将Nanog基因特异性siRNA转染A549细胞；以逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）和West．ernblot方法检测特异性siRNA对Nanog基因在mRNA和蛋白水平沉默效果；以细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测干扰Nanog基因前后A549细胞迁移及侵袭能力的改变。结果：RT-PCR及Westernblot分别显示A549．siNanog组细胞中Nanog基因mRNA及蛋白表达（0．40±0．06及0．50±0．03）较siNC对照组（0．97±0．03及0．85±0．02）明显下降（P〈0．05）；细胞划痕及Transwell侵袭实验分别显示A549-siNanog组细胞迁移能力及侵袭能力[（57±0．04）％及69．60±17．14]较siNC对照组[（95±0．02）％及209．60±15．40]明显降低（P〈0．05）。结论：Nanog-siRNA能有效抑制A549细胞Nanog基因表达，降低人肺腺癌A549细胞迁移及侵袭能力．Nanog．siRNA可有效调控A549细胞恶性生物学行为。干扰高迁移率族蛋白A2的表达对NB4细胞裸鼠种植瘤生长的影响
摘要：目的：建立裸鼠体内NB4／ShHMGA2细胞种植瘤模型。探索稳定敲低高迁移率族蛋白A2（HMGA2）的表达对白血病细胞生物学形状的影响。方法：每组5只4。5周龄的BALB／c裸鼠．经4Gy60C0照射后腋窝皮下分别接种8×10^6个NB4／ShHMGA2、NB4／ShControl细胞（对照组），观察成瘤性。3周后处死裸鼠。免疫组化法检测NB4细胞种植瘤组织切片中Ki．67蛋白的表达水平。结果：NB4／shHMGA2及对照细胞在裸鼠腋下均成瘤，NB4／ShHMGA2细胞肿瘤生长速度明显慢于对照组，NB4／ShHMGA2细胞与对照组瘤体体积分别为（1484．25±156．342）和（3228．674±285．64）mm^3，差异有统计学意义（P〈0．05）：NB4／ShHMGA2细胞与对照组瘤块重量分别为（650．46±85．12）和（2135．33±198．05）mg，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化检测显示NB4／ShHMGA2细胞组种植瘤组织切片Ki-67蛋白表达水平低于对照组。结论：敲低HMGA2的表达在体内可抑制白血病细胞的增殖。舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
摘要：目的：评价舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤是否具有保护作用，并探讨其可能的机制。方法：雄性SD大鼠30只，随机分为5组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）、舒芬太尼低剂量组（SL组）、舒芬太尼高剂量组（SH组）和舒芬太尼＋渥曼青霉素组（WM组）。于再灌注前，各组分别注入以下药物：SL组予生理盐水及舒芬太尼1μg／kg．SH组予生理盐水及舒芬太尼3μg／kg，WM组予渥曼青霉素15μg／kg及舒芬太尼1μg／kg，S组及I／R组予生理盐水。于再灌注末，采集动脉血检测血浆c-rnI浓度；取心脏测定缺血危险区（AAR）和梗死区（IS）体积。结果：与S组相比，其余四组cTnI浓度均明显升高（P〈0．01）；与I／R组比较，SL组、SH组cTnI浓度及IS／AAR均明显降低（P〈0．01），WM组cTnI浓度明显降低（p〈0．01）；与SL组比较，SH组cTnI浓度及IS／AAR均明显降低（P〈0．01），WM组均明显升高（P〈0．01）。结论：舒芬太尼后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，该保护作用与P13K相关信号通路的激活有关。重组人Bcl2及Ercc1基因腺病毒的构建及对肺癌细胞凋亡的影响
摘要：目的：通过RNA干扰技术沉默B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl2）和切除修复交叉互补基因1（Erccl）并观察对肺癌细胞株增殖的影响。方法：分别设计特异性沉默Bcl2和Erccl的短发夹RNA序列，并克隆到腺病毒骨架载体上形成重组腺病毒质粒。将质粒转染到HEK293细胞中，包装和扩增形成完整高滴度的重组腺病毒，将腺病毒感染人肺癌H460细胞株，流式细胞术检测抑制Erccl和Bcl2基因后肺癌细胞凋亡变化。结果：通过酶切鉴定，证实重组腺病毒载体构建成功．PCR鉴定扩增出1200bp的目的条带，病毒滴度为5×10^11／mL。流式细胞术检测结果显示，AdsiBcl2-Erccl组细胞凋亡率比单基因干扰组增高。结论：成功构建干扰Bcl2和Erccl的重组质粒及重组腺病毒。同时沉默Bcl2和Erccl可以促进肺癌细胞凋亡。小肠囊袋征合并肿瘤并发肠套叠1例
摘要：患者男．63岁．因“便血1d”于2015年1月26日入院。患者缘于1d前在无明显诱因出现便血，色暗红，总量约为800mL，伴恶心、头晕，无呕吐，无明显腹痛。无发热等症状，为进一步诊治，门诊以“消化道出血”收住入科。发病以来，患者精神可，大便时有头晕，无乏力，无咳嗽、咳痰，无心慌、胸闷、气短，近期体重无明显下降，小便正常。大鼠肺炎链球菌脑膜炎Occludin的变化及其意义
摘要：目的：研究肺炎链球茵脑膜炎中紧密连接的主要结构蛋白咬合蛋白（Occludin）在脑组织内表达的变化特点．探讨细菌性脑膜炎中血脑屏障的变化。方法：采用肺炎链球菌Ⅲ型菌株和等量的生理盐水脑池内注射．建立3周龄大鼠细菌性脑膜炎模型和生理盐水对照组，用免疫组化染色、Westernblot技术，分别于感染后24h、48h、5d后检测Occludin在脑组织内的表达。结果：（1）Loeffler的神经行为学评分，24h、48h与5d时造模组评分与生理盐水对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）Occludin的表述，肺炎链球茵感染后24h大鼠脑组织Occludin的表达明显降低，与生理盐水对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）：48h后降至最低，与生理盐水对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；5d表达较48h上升，但仍低于生理盐水对照组（P〈0．05）。结论：细菌感染中枢神经系统后，Occludin表述下降且有先下降后增高规律。提示Occludin参与了感染性脑水肿的发生、发展过程。骨癌痛大鼠延髓胶质细胞活化标志物表达的变化及意义
摘要：目的：研究延髓头端腹内侧核团胶质细胞活化标志物在骨癌痛大鼠中表达的变化及意义。方法：雌性SD大鼠随机分为正常组（N组）、假手术组（S组）和骨癌痛组（BCP组）。癌细胞接种前后不同时点对各组大鼠进行痛阈检测和胫骨X线检查，并于相应时点取延髓组织。定量PCR检测小胶质细胞活化标志物整联蛋白alphaM（ITGAM）、分化抗原簇14（C014）和Toll样受体4（TLR4）及星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）mRNA表达。结果：与N组和S组比较，BCP组机械痛闽显著降低，ITGAM、CD14和TLR4及GFAPmRNA从接种后第7天开始表达增加，并持续至接种后21d（P〈0．05）。X线片显示BCP组术后胫骨注射部位可见逐渐加重的骨质破坏。结论：骨癌痛大鼠延髓头端腹内侧核团胶质细胞活化标志物表达上调，该核团胶质细胞活化可能参与了骨癌痛发病机制。恒温滚环扩增技术检测肠道病毒71型
摘要：目的：建立一种三向连接构造（three．wayjunctionformation，3WJ）组合引物介导的滚环扩增技术（primergeneration—rollingcircleamplification，PG—RCA）检测肠道病毒71型（EV71）。方法：根据EV71VP1基因保守区设计3WJ模板T、3WJ引物P以及环状探针CP前体。对EV71进行恒温滚环扩增，检测患者咽拭子中EV71。结果：建立的新的滚环扩增技术能检测到amol级的合成RNA，检测临床标本时特异性强、敏感度好。结论：3WJ组合PG-RCA恒温滚环扩增技术检测肠EV71特异性强、敏感性好、不需昂贵的PCR荧光检测仪，便于基层医院开展。ExoQuick提取人血清外泌体方法改良及比较
摘要：目的：优化经ExoQuick提取人血清中外泌体（exosome）的方法以获得高质量exosome，并与超速离心法进行比较。方法：分别采用ExoQuick试剂盒及其改良方法、超速离心法提取人血清exosome。利用透射电镜进行形态学观察；2，2-联喹啉-4，4-二甲酸二钠（BCA）法进行蛋白定量；Westernblot检测exosome表面标志物CD63；十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS．PAGE）分析蛋白表达差异。结果：3种方法均可提取到血清exosome．电镜下观察到圆形或椭圆形膜性囊泡结构：ExoQuick试剂盒法及其改进方法提取所得样本浓度显著高于传统超速离心法（P〈0．05）；SDS—PAGE显示3种方法提取样本蛋白表达强度及丰度存在差异；Westernblot表明3种方法提取exosome均表达其表面特异性标志物CD63．且合同浓度蛋白的情况下，ExoQuick试剂盒法及改良法其CD63含量明显高于传统超速离心法。结论：3种方法均能提取血清中exosolne．ExoQuick试剂盒法及改良方法提取exosome效率更高．同时改进方法能够有效地去除提取样品中的杂蛋白。羟考酮缓释片转换为芬太尼贴剂出现呼吸抑制1例
摘要：患者男，42岁。2年前行乙状结肠癌根治术。术后病理：肿瘤位于乙状结肠．大小3．6cm×4．0cm，为溃疡型中低分化腺癌，肿块切缘阴性，肿瘤侵出浆膜，周围脂肪组织内结节形成。送检腹膜结节为癌结节。自检肠周淋巴结1／7枚见癌转移。后病灶进展，腹部CT提示：乙状结肠术后改变，周围局部肠系膜轻度增厚、粘连，左上腹小肠系膜间隙、髂总动脉分叉之间、吻合口周围多个软组织结节影．最大直径22cm．转移病灶考虑。体外γ-干扰素释放试验在儿童结核病密切接触者筛查结核病的作用
摘要：目的：探讨体外γ-干扰素释放试验（IGRA）在儿童结核病密切接触者结核病筛查的可行性。方法：对我院儿科门诊就诊185例儿童结核病密切接触者采用IGRA检测，对其与结核病诊断相关性进行分析。结果：IGRA阳性组中．儿童结核病密切接触者PPD强阳性率（PDD≥15mm）为50．9％，明显高于IGRA阴性组的9．1％（x^2=37．263，P〈0．00）；IGRA阳性组中，儿童结核病密切接触者发病率为30．2％，明显高于IGRA阴性组的3．0％（x^2=28．928，P〈0．00）；IGRA在儿童筛查结核病敏感性为80．0％，特异性为77．6％：联合TST检测其敏感性达到95．0％。结论：对儿童结核病密切接触者开展IGRA筛查，可提高患者发现率和减少儿童结核病密切接触者影像学筛查。造影剂流速对前列腺癌MR动态增强扫描效果的影响
摘要：目的：通过分析造影剂注射流速对不同病理分级前列腺癌（PCa）动态对比增强MR（DCE．MRI）灌注指标的影响，从而确定最佳的注射流速。方法：使用3．0TGE磁共振扫描仪对经组织病理学证实且心肾功能正常、体质指数（BMI）≤25kg／mz的70例PCa患者行肝脏快速容积采集序列（LAVA）多期动态增强扫描，其中35例患者动态增强造影剂的注射流速为2．5mL／s，其余35例患者动态增强造影剂的注射流速为5．0mL／s．通过GEAW4．3工作站进行数据处理获得外周带癌区信号强度-时间（SI-T）曲线，计算出达峰时间（Tmax）、最大强化程度（SImax％）和最快强化率（Rmax），并分别分析造影剂不同注射流速对动态增强灌注指标的影响。结果：造影剂注射流速2．5mL／s与5．0mL／s的两组PCa患者不同病理分级低危组（G1eason评分〈7分）、中危组（Gleason评分：7分）、高危组（G1eason评分〉7分）三组Tmax的均值分别为（19．89±2．76）S、（15．42±1．68）s；（16．91±2．34）S、（12．88±1．73）s；（14．13±1．81）s、（10．20±1．42）s，两组PCa的Tmax的比较差异均有统计学意义（t=4．61，3．10，3．25，P〈0．01）。两组PCa的SImax％的均值分别为（1．45±0．17）％、（1．51±0．27）％；（1．62±0．12）％、（1．84±0．18）％；（1．86±0．16）％、（2．11±0．28）％，两组SImax％的比较差异均有统计学意义（t=-2．44，-4．55，-5．16，P〈0．05）。两组PCa的Rmax的平均值分别为（6．29±2．62）％、（7．64±4．09）％；（8．92±4．21）％、（10．24±9．09）％；（10．85±2．89）％、（12．43±3．51）％，两组Rmax的比较差异均有统计学意义（t=-4．07，-3．85，-8．68，P〈0．01）。造影剂注射流速5．0mL／s的PCa患者较注射流速为2．5mL／s的PCa患者动态增强灌注指标Tmax缩短．SImax％、Rmax升高。结论：造影剂注射
