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摘要:结核病一直是威胁人类健康的全球性公共卫生问题,耐多药结核病的蔓延、结核/HIV双重感染的流行、人口流动的加剧等使结核病控制面临更为严峻的挑战。更为值得关切的是结核病基础研究薄弱,迄今为止我们还未弄清结核杆菌如何致病,自卡介苗以后没有研制出更为有效的新型疫苗,近50年没有开发出1种抗结核新药,主要利用"涂片+培养+X线检查"这种效率不高的结核病主体诊断模式依旧没有改变,严重阻碍了人类控制结核病的进程!在本专题中,有对重视和加强结核病基础研究的激情呼吁,有对结核病基础研究现状的评述和未来发展的展望,有目前鲜见同类文献的研究报道,我们热切地希望通过这个专题能使结核病的基础研究得到更多的关注,并期待有更多的突破!
摘要:患者女,62岁,因吐词不清1周于2009年2月14日入院。患者1周前无明显诱因出现吐词不清。自觉说话费力,无头痛头昏、恶心呕吐,无晕厥,无肢体抽搐、麻木、活动障碍,无吞咽困难,无大小便障碍。
摘要:结核病是发展中国家较为严重的传染病之一,我国结核病疫情和耐药情况相当严重。自柯赫发现结核分枝杆菌以来,科学界一直将有效疫苗、药物和诊断技术作为其研究的重要目标,目前又面临耐多药结核病(MDR-TB)、结核病与HIV双重感染等新难题。分子生物学的诞生与迅猛发展,
摘要:1998年,由Cole等[1]完成的结核杆菌全基因组测序研究论文的发表,标志着对结核杆菌的研究进入后基因组时代。以双向电泳、生物质谱和生物信息学等为核心技术的蛋白质组学则开启了后基因组时代的研究之门。
摘要:目的:探索复苏因子E(RpfE)-DNA疫苗的小鼠免疫效果。方法:利用真核表达载体PCDNA3.1构建PCDNA3.1-RpfE重组质粒。将SPF级BALB/C小鼠随机分为5组,即空质粒组、RpfE质粒组、BCG组、生理盐水组、空白对照组,于0、3、6周先后3次免疫小鼠,在第3次免疫后3周,心脏取血ELISA方法检测血清RpfE IgG抗体效价、干扰素γ(IFNγ)水平;并行脾淋巴细胞培养,以RpfE蛋白刺激淋巴细胞,CCK-8法检测淋巴细胞增殖指数、ELISA方法检测上清诱导IFNγ和白介素12(IL-12)产生水平,乳酸脱氢酶试验检测小鼠脾细胞毒性T淋巴(CTL)杀伤效应。结果:(1)RpfE质粒组小鼠血清中RpfE抗体水平明显高于其他各组(P〈0.001);RpfE质粒组IFNγ水平明显高于空质粒组、生理盐水组、空白对照组和BCG组(P〈0.01或P〈0.05)。(2)RpfE质粒组具有较强的刺激淋巴细胞增殖作用,CCK-8实验表明其增殖指数高于其他各组(P〈0.05);上清ELISA检测表明IFNγ和IL-12产生水平也高于其他各组(P〈0.05)。(3)RpfE质粒组脾淋巴细胞特异性CTL杀伤性与其他各组比较有统计学意义(P〈0.05)。结论:RpfE-DNA疫苗可诱导小鼠的免疫应答,具有良好的体液和细胞免疫原性。
摘要:目的:初步分析gyrB基因扩增用于结核分枝杆菌复合群(MTC)快速鉴定的可行性。方法:采用特异性引物进行分枝杆菌标准株和临床株的gyrB基因扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳观察聚合酶链反应(PCR)结果。结果:15株各种分枝杆菌标准株中,结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌均扩增出1184bp目的片段,而其余分枝杆菌PCR结果为阴性;94株分枝杆菌临床株中,60株MTB和10株牛分枝杆菌扩增阳性,而其他分枝杆菌(包括6株脓肿分枝杆菌、5株偶发分枝杆菌、4株龟分枝杆菌、3株鸟分枝杆菌、3株胞内分枝杆菌、2株耻垢分枝杆菌、1株堪萨斯分枝杆菌)均扩增阴性。结论:采用针对MTC的特异性引物进行gyrB基因扩增能快速、准确地鉴别MTC和非结核分枝杆菌。
摘要:目的:了解结核病患者血清小RNA(sRNA)的表达特征及其编码基因的染色体分布,以探讨结核病发生、发展的调控机制。方法:应用离心柱层析法提取血清总RNA,采用Solexa深度测序技术对结核病患者和健康人群血清sRNA进行测序,对长度10~30nt的sRNA的表达进行分析;并将测得的所有sRNA序列与人类基因组进行比对,确定其在人类染色体上的定位。结果:对27例结核病患者和25例健康对照者血清sRNA进行了检测与分析,在10~30nt长度范围内,结核病患者不同长度血清sRNA的表达丰度呈近似正态分布,健康人群则呈明显的负偏态分布;结核病患者血清sRNA编码基因主要位于染色体chr17、chr8、chr22、chr9、chrun-g1000220的正义链和chr11、chr8的负义链上,健康人群血清RNA编码基因主要位于染色体chr17、chr22、chrun-g1000220的正义链和chr8的负义链上。结论:结核病患者有其特定的血清sRNA表达谱,其编码基因亦呈现特定的染色体分布。
摘要:目的:探讨直接检测痰液标本MPB64蛋白作为结核病快速诊断方法的可能性。方法:对65例肺结核病患者和72例非结核病患者的痰液标本同时进行痰涂片染色抗酸菌检查、实时荧光定量PCR检测结核杆菌DNA和免疫胶体金法检测MPB64蛋白,比较分析3种方法的检测结果,并依据临床诊断对MPB64蛋白检测结果进行诊断方法学评价。结果:MPB64蛋白检测法与涂片染色、荧光定量PCR检测结果的符合率均为60.58%;MPB64蛋白检测的敏感度、特异度、准确度分别为58.46%、69.44%和64.23%,其敏感度显著高于涂片染色法的27.69%与荧光定量PCR法的35.38%,但其特异度和准确度则低于涂片染色法(100%、65.69%)与荧光定量PCR法(98.61%、68.61%)。结论:采用免疫胶体金法直接检测痰液标本中MPB64蛋白对结核病的诊断具有较高的敏感度,可以作为筛查检测手段;但特异度相对较低,可否作为一种结核病快速诊断方法值得进一步研究。
摘要:目的:比较分析结核性胸膜炎患者血清与胸腔积液蛋白质组的异同,为探讨结核性胸膜炎的发生机制和寻找诊断标志物提供实验依据。方法:采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)处理分析样本、应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,以蛋白质/多肽质荷比(m/z)区分不同的蛋白质/多肽,对5例结核性胸膜炎患者血清与胸腔积液蛋白质组进行描述性分析。结果:(1)在5例患者血清中检测到134种血清蛋白质/多肽,其中76种在胸腔积液中未出现;在5例患者胸腔积液中检测到269种蛋白质/多肽,其中211种在血液中未出现。(2)在5例患者血液中均检测到m/z分别为2660、3191、4208、5903、7764、9287等6种蛋白质/多肽;在5例患者胸腔积液中均检测到m/z分别为2416、2660、2900、2940等4种蛋白质/多肽;在5例患者血液和胸腔积液中均检测到m/z为2660的蛋白质/多肽。结论:结核性胸膜炎患者胸腔积液蛋白质组远比其血清蛋白质组复杂,对其进行深入研究有助于明晰结核性胸膜炎的发生机制和寻找诊断标志物。
摘要:目的:探讨荧光定量PCR检测结核杆菌DNA的拷贝数与涂片抗酸染色镜检阳性程度的相关性。方法:对可疑结核病患者的124份痰样本同时进行荧光定量PCR检测和涂片抗酸染色镜检,按涂片抗酸染色镜检结果阴性(-)、可疑(±)、1+、2+、3+、4+分类,对荧光定量PCR检测结核杆菌DNA的拷贝数进行统计分析。结果:98例涂片阴性痰样本中,24例样本荧光定量PCR检测阳性,结核杆菌DNA拷贝数多为102~103数量级;26例痰涂片阳性样本中,24例样本荧光定量PCR检测阳性,2例检测阴性,结核杆菌DNA拷贝数多为103~104数量级,和涂片阳性程度基本呈正相关。结论:荧光定量PCR检测结核杆菌DNA与涂片抗酸染色镜检阳性程度有较好的相关性,可以作为临床诊疗较为可靠的实验方法。
摘要:患者女,32岁,藏族,以"间断性下腹疼痛1年,加重1个月"为主诉入院。入院1年前患者出现下腹部疼痛不适,右下腹明显,伴腹胀、恶心呕吐,排气排便正常,无发热、寒战,无腹泻、黑便,无黄疸等伴随症状,未行诊治。
摘要:异位骨化(heterotopic ossification)是指关节周围软组织中出现成熟的板层状骨的现象,也称关节周围骨化或关节周围新骨形成。其主要特点是在软组织中钙化骨迅速形成,可引起复杂性区域疼痛综合征、关节僵硬、神经嵌压、骨质疏松、压迫性溃疡等并发症。异位骨化常分为4种类型,
摘要:淋巴管畸形,通常被称为"淋巴管瘤"或者"囊状水瘤",为常见的小儿良性肿瘤,与血管瘤都是脉管先天畸形,同属错构瘤,具有畸形和肿瘤双重性。起因于淋巴管发育不良即先天性的淋巴管扩张、增生。
摘要:颅缝早闭又称为颅缝骨化症或狭颅症,是一种颅骨先天发育障碍性疾病,因其颅骨不能随生长发育而长大可导致颅骨变形和脑功能障碍[1],是一种较常见的先天性颅面畸形,表现为患儿出生时或出生后2~3个月即出现某条颅缝或多条颅缝的早闭,
摘要:患者男,63岁。因白细胞高、脾大,3年前在我院经骨髓活检及淋巴结病理确诊为慢性淋巴细胞白血病B期,初始给予瘤可宁口服,1年后持续高热,周身淋巴结增大脾脏进行性肿大,考虑疾病进展,抗炎同时给予氟达拉滨+CHOP化疗4疗程,体温正常,
摘要:目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养人牙髓细胞增殖活性的影响。方法:以改良组织块培养法体外获得人牙髓细胞,以细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)研究bFGF在不同浓度(1.0、5.0、10.0和50.0ng/mL)、不同时间(1、2、4和7d)作用下,牙髓细胞增殖活性的变化。结果:bFGF在1.0~50.0ng/mL浓度下可促进体外培养人牙髓细胞的增殖(P〈0.05),bFGF促进牙髓细胞增殖的最低显效浓度为1.0ng/mL,最佳显效浓度为10.0ng/mL。从第2天起,bFGF可诱导体外培养人牙髓细胞增殖(P〈0.05),bFGF诱导牙髓细胞增殖在第4天即可达到高峰(P〈0.01)。结论:bFGF可诱导体外培养人牙髓细胞增殖,该诱导作用具有剂量依赖性和时间效应。
摘要:目的:观察不同乳腺癌细胞系中干细胞样细胞的分布特点。方法:采用免疫细胞化学双染法,检测乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-468、MDA-MB-231中干细胞样细胞标志MUC-1/ESA、CD44/CD24的表达情况。结果:MCF-7细胞系MUC-1-/ESA+细胞的表达率为100%、CD44+/CD24-为2%;MDA-MB-468细胞系MUC-1-/ESA+细胞的表达率为35%、CD44+/CD24-为5%;MDA-MB-231细胞系MUC-1-/ESA+细胞的表达率为1%、CD44+/CD24-为85%。结论:不同乳腺癌细胞系可能具有不同的干/祖细胞体系。
摘要:目的:探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人肺腺癌细胞A549的杀伤效应。方法:以人肺腺癌细胞A549为研究对象,电镜观察用药前后A549细胞形态,应用CCK-8法检测BPE对A549细胞增殖的影响,用流式细胞术检测BPE对A549细胞周期和凋亡的影响。RT-PCR检测bax/bcl-2基因表达。结果:BPE对A549细胞增殖有抑制作用,在一定浓度范围内,呈量-效关系,当BPE浓度为1000μg/mL时,A549细胞增殖的抑制率达到最高,为76.54%。透射电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集或边聚,胞浆内出现空泡,并有凋亡小体出现。流式细胞仪检测结果显示A549细胞周期比例分布出现变化,G0/G1期细胞比例呈下降趋势,而S期和G2-M期比例则上升;随着时间的延长,细胞凋亡率上升。RT-PCR检测显示BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因实现的。结论:BPE可抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞的凋亡。