PPRV受体信号转导淋巴细胞激活分子V区功能蛋白的表达及活性分析

作者:王耀杰; 吴锦艳; 陈妍; 王光祥; 尚佑军; 赵兴绪; 张勇

摘要:信号转导淋巴细胞激活分子(SLAM)是小反刍兽疫病毒(PPRV)感染宿主的主要细胞受体,其N端V结构域的表达活化可以启动PPRV的入侵感染。本试验选用Slam/V结构域作为功能靶标进行表达,并分析其活性。分离山羊外周血淋巴细胞,提取其基因组RNA,应用RT—PCR方法扩增山羊SLAM/V基因,构建原核表达载体pGEX-6P-1/Slam/V。将获得的重组质粒pGEX-6P-1/Slam/V转化BL21(DE3)感受态细胞,通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和验证。结果显示,IPTG诱导浓度为0.1mmol/L、37℃,诱导14h时,靶标蛋白表达量最高,融合蛋白相对分子质量约为39800,且主要以包涵体形式存在。经山羊抗人SLAM蛋白多克隆抗体识别鉴定,证实其具有良好的免疫反应活性。本试验为建立稳定表达山羊SLAM/V功能区的阳性细胞克隆及PPRV侵染路径研究奠定了基础。

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关键词:
  • 小反刍兽疫病毒
  • 信号转导淋巴细胞激活分子
  • 表达
  • 活性分析

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期刊名称:中国兽医学报

期刊级别:北大期刊

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杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国教育部
主办单位:吉林大学
出版地方:吉林
快捷分类:科学
国际刊号:1005-4545
国内刊号:22-1234/S
邮发代号:12-105
创刊时间:1981
发行周期:月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:1
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