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摘要:目前,外周血中循环肿瘤细胞(CTC)作为“液态活检”的主要研究对象,正成为癌症研究中最热门的领域之一。CTC被认为肿瘤侵袭的标志物,其检测方法也越来越被重视。CTC独特的分子特性能帮助我们更好的推断肿瘤转移情况,评估治疗疗效。本文综述了近年来关于CTC的生物学特性以及CTC在胃癌中的最新研究进展,并探讨了CTC在胃癌个体化治疗方面的应用及挑战。
摘要:目的 探讨丙酮酸激酶剪接体M1型(PKM1)和M2型(PKM2)在不同慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞中的表达情况及意义。方法 收集南昌大学第二附属医院确诊的伊马替尼(Imatinib,IM)敏感(n=23)和IM耐药(n=7)CML患者外周血或骨髓,采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测IM敏感CML细胞系K562、IM耐药CML细胞系K562/G01及30例临床样本中PKM1和PKM2表达水平。结果与K562细胞相比,K562/G01细胞中PKM2/PKM1的比值明显升高;IM耐药CML患者PKM2/PKM1的比值较IM敏感者显著上调。结论 PKM发生异常剪接可能与CML细胞IM耐药相关。
摘要:目的 探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,h ESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法 将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定h ESC-MSCs表面标志物,对间充质干细胞进行三系分化诱导,利用透射电镜、Izon q Nano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小,Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物,观察h ESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果 成功诱导形成h ESC-MSCs,并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性,CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性;h ESC-MSCs通过诱导完成成骨、成脂和成软骨分化;h ESCMSCs-Exo为粒径在40~100nm的囊泡,表达特异性的表面标志物CD9、CD63和CD81;体外促进HMEC-1的增殖和迁移。结论 h ESC-MSCs-Exo作为一种生物活性囊泡,能够促进血管内皮细胞的增殖和迁移;h ESC-MSCs-Exo来源无限,可为临床组织损伤的修复治疗提供丰富的干细胞外泌体来源。
摘要:目的 调查江西地区人群人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)DRB1的基因多态性及其分布特点,为江西地区提供完整准确的遗传学数据。方法 应用PCR-SBT(polymerase chain reaction sequence-based typing,聚合酶链反应-直接测序)法对江西地区汉族人群中1002名健康、无关个体进行HLA-DRB1基因高分辨分型。结果 1002份样本中检出HLA-DRB1的基因型191个,基因型比例最高为DRB1*0901/DRB1*1501,占样本量的4.391%;检出等位基因27个,比例最高的等位基因及对应频率分别为:DRB1*0901(11.028%)。结论 江西地区汉族人群HL A-DRB1基因具有中国汉族人群共有的遗传特征,但也有本地区自身的分布特点。
摘要:目的 探讨mi R-320a在人结肠癌细胞中的生物学行为,并初步阐明mi R-320a对癌基因FOXQ1的靶向调控机制。方法 采用q RT-PCR检测结肠癌细胞中mi R-320a和FOXQ1的表达;用mi R-320a mimics转染结肠癌细胞株HTC-116;采用CCK-8法、克隆形成试验检测mi R-320a对结肠癌细胞增殖的影响,采用Transwell小室分析mi R-320a对结肠癌细胞侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因和Western Bloting验证mi R-320a对FOXQ1的靶向调控作用。结果 QRT-PCR结果显示mi R-320a mimics明显上调mi R-320a在HCT-116细胞中的表达;CCK-8法和克隆形成试验显示上调mi R-320a表达显著抑制结肠癌细胞增殖;Transwell试验表明上调mi R-320a可抑制HCT-116结肠癌细胞侵袭;蛋白印迹实验显示上调mi R-320a降低FOXQ1蛋白在结肠癌细胞中的表达,双荧光素酶报告基因试验进一步确认mi R-320a可以调控FOXQ1的表达。结论 过表达mi R-320a可以抑制结肠癌细胞增殖、侵袭,这种抑制作用是通过靶向调控FOXQ1来实现的。
摘要:目的 通过对江西省2013年至2015年急性弛缓性麻痹病例病原学监测,为证实江西省消灭脊髓灰质炎提供准确的、可靠的科学依据。方法 采用L20B、RD细胞继续脊髓灰质炎病毒分离,脊髓灰质炎毒株通过ITD方法进行型内鉴定,若为复合型毒株再经过血清中和实验分单型后,送至国家脊髓灰质炎实验室进行序列测定。结果 2013年至2015年共接收1058份AFP病例粪便标本,其中有28份分离出脊髓灰质炎病毒,83份分离出非脊髓灰质炎肠道病毒,分离率分别为2.65%,7.84%;接收AFP病例接触者粪便标本57份,分离出脊灰病毒2份和非脊灰肠道病毒7份,平均分离率分别为3.51%,12.28%;在2013年分离出一例疫苗衍生株病例,未发现脊灰野病毒。结论 江西省脊髓灰质炎病毒学监测处于较高的水平,江西省2013年至2015年急性弛缓性麻痹病例病中未发现脊灰野病毒,但检出VDPV,提示我们要警惕疫苗株的变异,应继续加强监测。
摘要:目的 运用逆转录多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism,RT-PCR-RFLP)快速鉴别2015年麻疹疫苗株病毒。方法 用RT-PCR-RFLP方法检测两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本是否含有AflⅡ酶切位点鉴别麻疹疫苗株病毒,同时对标本进行N基因羧基末端450个核苷酸进行序列测定分析,在基因层面进一步证实,以验证RT-PCR-RFLP方法。结果 RT-PCR-RFLP方法鉴定的结果为两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本均能被AflⅡ酶切开,N基因序列测定结果为两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本为麻疹疫苗株病毒A基因型。结论 首次为江西省麻疹疫苗株病毒提供实验室证据。
摘要:目的 对本实验室BC-5310全自动血液分析仪测定血液常规检测项目的结果进行不确定度评定。方法 通过对BC-5310测定血液常规检测项目测量过程中WBC、RBC、HGB、PLT四个检测项目分析,确定并简化测量不确定度的来源包括:复现性、采血方法不同、放置时间、携带污染率和方法偏移等。并量化各不确定度分量,确定合成不确定度与扩展不确定度。结果 取k=2时,包含概率P=95.45%,4个项目高、中、低水平静脉血和末梢血扩展不确定度分别:U(WBC)=(静脉:±0.89、±0.44、±0.25;末梢:±1.21、±0.63、±0.37)×109/L,U(RBC)=(静脉:±0.24、±0.16、±0.09;末梢:±0.60、±0.33、±0.20)×1012/L,U(HGB)=(静脉:±9.12、±3.55、±1.89;末梢:±16.37、±9.74、±4.47)g/L,U(PLT)=(静脉:±55.79、±24.77、±12.80;末梢:±60.33、±34.87、±18.34)×109/L。结论有助于提高实验室检测水平,可使来自不同实验室的结果或同一实验室不同时期的结果具有可比性。