茶叶CHS基因表达特性及其与儿茶素积累的关系

作者:施婧; 张雪; 张媛媛; 林晓蓉; 李斌; 陈忠正

摘要:本研究用高效液相色谱法(HPLC)测定两种茶叶的儿茶素含量,通过RT-PCR克隆英红9号(YH)和南昆山毛叶茶(MY)的CHS基因进行比对分析,借助烟草瞬时表达技术对基因表达蛋白进行亚细胞定位;结合生物信息学分析选取特定肽段经人工合成后作为抗原制备CHS基因特异抗体;用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和Western blot技术测定比较两种茶叶CHS基因在转录、翻译水平的差异,并对比分析了两种茶叶间儿茶素含量差异与相应CHS基因表达的关系。结果表明:YH和MY中的儿茶素含量分别为181.51 mg/g和106.02 mg/g,前者显著高于后者并达到1.71倍;两种茶叶中所克隆的CHS基因具有单核苷酸差异但编码相同的氨基酸序列,其表达蛋白亚细胞定位于细胞质、细胞膜和细胞核;制备的CHS蛋白兔源抗体效价为1∶80000;CHS基因在YH中的表达无论在转录水平还是在翻译水平均显著高于MY,前者分别是后者的3.9倍和1.7倍,两种茶叶中CHS合成酶基因在转录、翻译水平的表达均与其对应的儿茶素积累水平一致。实验研究证明,茶叶儿茶素积累水平与其合成通路关键酶基因CHS的表达呈正相关。

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关键词:
  • 茶叶
  • 儿茶素
  • 查尔酮合成酶
  • 基因表达
  • 蛋白表达

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期刊名称:食品工业科技

期刊级别:北大期刊

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杂志介绍:
主管单位:中国轻工业联合会
主办单位:北京一轻研究院有限公司
出版地方:北京
快捷分类:工业
国际刊号:1002-0306
国内刊号:11-1759/TS
邮发代号:2-399
创刊时间:1979
发行周期:半月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:1.31
综合影响因子:1.94