miRNA-152表达与NSCLC对顺铂耐药的关系及其机制研究
摘要：目的研究微小RNA-152（miRNA-152）在非小细胞肺癌（NSCLC）顺铂（DDP）耐药过程中的作用机制。方法实时荧光定量逆转录PCR（qRT-PCR）检测NSCLC细胞株A549及其DDP耐药株A549/DDP细胞内的miRNA-152水平。通过转染miRNA-52模拟物（miRNA-152mimic）以提高A549/DDP细胞内的microRNA-152水平。MTT试验、倒置相差显微镜技仪和流式细胞术观察上调miRNA-152对细胞增殖及凋亡的影响,同时采用qRT-PCR和Western blot技术观察细胞内Bcl-2及核转录因子-κB（NF-κB）水平变化。结果 A549/DDP细胞中存在miRNA-152的低表达,Bcl-2及NF-κB的高表达。上调miRNA-152后,DDP造成的A549/DDP细胞增殖抑制率和凋亡率显著高于未上调miRNA-152的细胞,差异有统计学意义（P〈0.05）。此外,miRNA-152mimic转染可显著降低A549/DDP细胞中的Bcl-2及NF-κB表达。结论低miRNA-152表达可能引起NSCLC对DDP的耐药,miRNA-152可能通过调节Bcl-2及NF-κB的水平介导NSCLC细胞对顺铂的敏感性。重组人乳铁蛋白对幽门螺杆菌抑菌作用的实验研究
摘要：目的评估重组人乳铁蛋白（rhLF）对幽门螺杆菌（H.pylori）的抑菌作用及其对细胞毒素相关蛋白A（CagA）、尿素酶（Ure）和胃黏膜白细胞介素8（IL-8）的影响。方法测定最低抑菌浓度（MIC）和不同药物浓度对H.pylori增殖的影响。通过实时定量PCT和Western blot检测rhLF对H.pylori CagA和Ure的mRNA和蛋白表达的影响。动物实验,144只BABL/c小鼠,分为4组,标准三联＋rhLF组（A组）、rhLF组（B组）、标准三联组（C组）、生理盐水组（D组）,组织病理学苏木素-伊红（HE）染色观察不同分组间胃黏膜炎性反应,ELISA法检测各组胃组织IL-8水平。结果 MIC为0.5mg/mL,且rhLF抑制细菌生长增殖呈现浓度依赖性过程。rhLF能降低H.pylori主要毒力因子CagA、Ure mRNA和蛋白的表达。A组胃黏膜组织炎症积分和匀浆液IL-8水平与B、C、D组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 rhLF抑制H.pylori生长及增殖,并不同程度抑制H.pylori主要毒力因子CagA、Ure mRNA及蛋白的表达,削弱该菌的致病性,同时降低小鼠胃黏膜IL-8水平,减轻H.pylori相关性胃黏膜炎性反应。电针复合七氟烷麻醉对断尾大鼠急性应激反应调控的影响
摘要：目的探讨不同穴位电针刺激复合七氟烷麻醉对断尾大鼠急性应激反应调控作用的影响。方法健康成年雄性SD大鼠50只,体质量280~320g,分为正常组（Ⅰ组）、模型组（Ⅱ组）、七氟烷吸入组（Ⅲ组）、七氟烷吸入加体针组（Ⅳ组）和七氟烷吸入加耳针组（Ⅴ组）,每组10只。Ⅰ组不作处理置于氧流量30%的混合气体玻璃箱中（流量2L/min）,Ⅱ组断尾后置于氧流量30%的混合气体玻璃箱中（流量2L/min）,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组断尾后置于含体积分数为2%的七氟烷麻醉箱中（流量2L/min）,Ⅳ组持续刺激双侧＂足三里＂穴30min（刺激参数3V,3Hz,2ms）,共4次,每次间隔30min,Ⅴ组刺激双侧＂耳尖＂穴,刺激参数及时间同Ⅳ组。各组治疗方法结束后,处死各组大鼠,取断颈血采用ELISA测促肾上腺皮质激素（ACTH）和外周血皮质酮（CORT）水平。采用Western blot法测定下丘脑组织c-fos蛋白的表达水平。结果与Ⅰ组相比,Ⅱ组血清ACTH、CORT水平、下丘脑c-fos蛋白表达明显升高（P〈0.01）;与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠外周血ACTH、CORT水平均有所下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;Ⅲ组与Ⅳ组的ACTH和CORT水平差异无统计学意义（P〉0.05）;Ⅴ组的ACTH水平与Ⅲ组相比明显下降（P〈0.05）,Ⅴ组CORT水平与Ⅳ组相比明显下降（P〈0.05）。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组c-fos表达与Ⅱ组相比均降低（P〈0.05）,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组3组组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论七氟烷吸入复合电刺激＂耳尖＂穴治疗时,对应激的作用优于单纯的七氟烷治疗和七氟烷复合电刺激＂足三里＂穴。电针复合吸入全身麻醉对应激的调控机制可能与下丘脑调节室旁核c-fos蛋白分泌并影响下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴有关。神经元特异性烯醇化酶和U266细胞株对破骨样细胞作用的研究
摘要：目的探讨神经元特异性烯醇化酶（NSE）和人多发性骨髓瘤细胞U266对人破骨样细胞（OLC）功能的影响。方法采用正常人外周血单个核细胞加用细胞核因子κB受体激治蛋白配体（RANKL）＋巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的方法诱导培养OLC;实验分3组,NSE组：将6孔培养板中培养14d的OLC,分别加入100ng/mL重组人NSE培养24、48、72h;共培养组：将6孔Transwell小室下室中培养14d的OLC,各上室分别加入1×105/孔U266细胞进行共培养24、48、72h;对照组：单独培养的OLC。通过实时荧光定量PCR比较NSE和U266细胞株对OLC的RANKL、扩胃蛋白（OPG）、IL-6和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）mRNA转录水平的影响。结果共培养组、NSE组和对照组RANKL、OPG、IL-6mRNA在OLC均不表达;与对照组相比,共培养组、NSE组的TRAP mRNA表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;TRAP mRNA表达水平的升高尤其以48h和72h明显。结论本试验中OLC表达TRAP,NSE是促进骨髓瘤骨病中OLC分化和成熟的因素,提示NSE能增强OLC的活性。基于多靶点防治AD策略的候选新药脑智复的药理作用及其机制研究
摘要：目的评价脑智复多靶点防治阿尔茨海默病（AD）的作用。方法雌性小鼠去势后30d,海马内注射Aβ1-42和鹅膏蕈氨酸（IBO）以复制AD模型,次日将造模小鼠分为模型组、脑智复低剂量组、脑智复中剂量组、脑智复高剂量组及吡拉西坦组并相应给药,每天灌胃1次,连续4周,另设假手术组（对照组）进行跳台、Morris水迷宫及生化指标的检测。结果与对照组比较,模型组小鼠跳台试验中的潜伏期显著缩短（P〈0.05）,错误次数增加（P〈0.05）,在水迷宫中寻找逃逸平台的逃避潜伏期延长（P〈0.05）,进入逃逸平台的次数减少（P〈0.05）,在逃逸平台周围游泳的路程、在有效区域内的游泳时间及路程减少（P〈0.05）;脑组织的丙二醛水平明显升高,乙酰胆碱水平及超氧化物歧化酶活力明显下降（均P〈0.05）。脑智复高、中剂量组中上述指标显著改善。结论脑智复具有体内多靶点防治AD的作用。基于多靶点防治AD策略的候选新药脑智复的药理作用及其机制研究
电场对内皮祖细胞迁移行为及形态的影响
摘要：目的探讨外加电场对体外培养的内皮祖细胞（EPCs）迁移行为及形态的影响。方法将体外培养的3~4代EPCs分别用场强为0mV/mm（Ⅰ组）、100mV/mm（Ⅱ组）、200mV/mm（Ⅲ组）和300mV/mm（Ⅳ组）的直流电场加以持续刺激3h,活细胞工作站实时记录细胞迁移轨迹及形态变化,分析外加电场对EPCs迁移行为及形态的影响。结果Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ组细胞向阳极定向迁移,Ⅰ组细胞显示随机运动。电刺激3h时,细胞轨迹迁移速率（Vt）、位移速率（Vd）、电场方向迁移速率（Vx）分别为：Ⅳ组[（98.86±6.00）、（63.78±2.81）、（63.15±2.88）μm/h]、Ⅲ组[（88.06±8.83）、（35.90±1.22）、（34.20±1.57）μm/h]和Ⅱ组[（42.28±2.25）、（13.29±0.37）、（12.39±0.51）μm/h],均显著高于Ⅰ组的[（37.39±2.42）、（6.99±0.31）、（4.62±0.40）μm/h],均P〈0.01,且Ⅲ组细胞Vt、Vd、Vx均显著高于Ⅱ组、Ⅰ组（均P〈0.01）。EPCs在电场刺激下发生明显的形态变化,细胞外观变得狭长,逐渐与电场方向平行排列。结论外加直流电场可诱导EPCs向阳极迁移并加快其迁移速率,且对EPCs的形态有明显影响。脊髓损伤犬模型的建立及激光多普勒血流测定仪评价的意义
摘要：目的探讨激光多普勒血流测定仪（LDF）在建立的急性犬脊髓损伤模型中的评价作用。方法将15只比格犬分为A、B、C组。通过改良的脊髓损伤数控装置,采用不同的撞击和压迫时间,建立不同的急性脊髓损伤犬模型。A组为1.2m/s＋5mm＋5mm＋15mns,B组为1.2m/s＋5mm＋5mm＋10mns,C组为对照组。应用LDF分别测量3组脊髓损伤模型的脊髓血流（SCBF）图,通过脊髓坏死面积测量评估两组模型犬的病理学改变。结果 LDF测量3组脊髓损伤模型的SCBF图结果显示,A组模型SCBF量降低最明显,A组损伤程度明显重于B、C组,差异有统计学意义（P〈0.05）。运动诱发电位显示,SCBF的下降程度与预后及运动功能密切相关。结论通过LDF可有效判断急性脊髓损伤的程度和SCBF的情况,在动物实验和临床领域有较好的应用前景。奇魅植物酵素对小鼠酒精性肝损伤保护作用的研究
摘要：目的探讨奇魅植物酵素对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法用连续灌服酒精的方法建立小鼠酒精性肝损伤模型,将60只雄性昆明小鼠分为5组：空白对照组,模型组,低剂量组、中剂量组、高剂量组（模型组基础上分别加5、25、50mL/kg奇魅植物酵素）。连续灌胃9周后,测定各组小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。测定各组小鼠肝组织中丙二醛（MDA）、三酰甘油（TG）、还原性谷胱甘肽（GSH）、乙醇脱氢酶（ADH）及乙醛脱氢酶（ALDH）的活性,以及肝指数的变化及肝组织病理学观察。结果成功建立小鼠酒精性肝损伤模型;与模型组比较,各剂量组的奇魅植物酵素均可有效地降低血清中AST、ALT及肝组织中TG水平,提高ADH、ALDH、GSH水平。此外,病理学观察结果与酶学变化相一致。结论奇魅植物酵素对小鼠酒精性肝损伤有一定的保护作用。迈瑞BS-820全自动生化仪性能评价
摘要：目的对广州地区基层医院正在使用的迈瑞BS-820全自动生化仪进行性能评价,验证其性能是否满足临床需要。方法根据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）推荐的EP5-A2、EP6-A、EP7-A2、EP-17A文件和《中华人民共和国医药执业标准》YY/T0654-2008文件,采用16个常规生化项目对迈瑞公司BS-820全自动生化仪检测系统的精密度、线性范围、抗干扰能力、灵敏度及携带污染率进行性能评价。结果 BS-820系统所进行的评价分析结果显示,所有项目的精密度实验结果均为合格。15个生化项目在测试范围内都表现出良好的线性关系,相关系数r≥0.997 9。16个生化项目中,总胆红素（TBIL）、总蛋白（TP）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿素（UREA）、钙（Ca）8个项目的抗胆红素、TG和血红蛋白干扰能力符合或高于厂家宣称的抗干扰能力,其余的8个项目有1~3种抗干扰能力低于厂家宣称。16个生化项目的空白限（LOB）均小于厂家宣称的LOB。谷氨酸（Glu）的携带污染率为0.02%,低于0.50%。结论该仪器有良好的精密度、灵敏度,携带污染率低,线性范围理想,抗干扰能力基本能满足临床需求。适合中小规模检验科使用。呼吸内科不同区域下呼吸道感染耐药菌分布及耐药特征比较分析
摘要：目的探索昆明医科大学第一附属医院呼吸内科不同区域[门诊、病房,呼吸重症监护病房（RICU）]下呼吸道感染耐药菌株的分布构成及耐药特征,为临床抗菌药物的合理应用提供依据。方法采用K-B纸片扩散法和仪器法（VITEK-TWO）,按照美国临床与实验室标准化研究所（CLSI）2010年版标准判读结果,对昆明医科大学第一附属医院呼吸科门诊、病房、RICU患者送检的痰液、肺泡灌洗液标本通过细菌培养鉴定及药敏试验分离出的480株耐药菌株,用WHONET5.6软件对检测数据进行分析。结果该医院呼吸门诊、病房、RICU下呼吸道感染耐药菌分布构成前4位均以革兰阴性菌为主。肺炎克雷伯菌对多数抗菌药物的耐药率大于30%,对庆大霉素、左氧氟沙星、氨苄青霉素的耐药率大于50%,RICU与呼吸科门诊和病房相比差异有统计学意义（P〈0.05）。亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星抗菌活性较强,其耐药率小于20%。大肠埃希菌对11种常用抗菌药物在呼吸科门诊、病房与RICU的耐药率相似。产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的多重耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0.05）,产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率小于10%。铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、喹诺酮类、氨基糖甙类在呼吸科门诊和病房仍保持较高的抗菌活性,但RIIU的耐药率大于54%（P〈0.05）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率在RICU和病房明显高于呼吸科门诊,分别为70.4%、64.6%和46.2%。RICU检出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对利福平耐药率明显高于呼吸科门诊和病房（P〈0.05）。结论呼吸科门诊、病房和RICU的耐药菌分布构成及耐药率均有明显差异,临床医师除了熟悉本地区耐药菌分布及耐药率监测情况外,还应掌握本单位各科室不同区域耐药菌的耐药率情况,才能正确�2型糖尿病肾病患者尿足细胞标志蛋白和血管内皮生长因子水平与氧化应激的相关性
摘要：目的探讨2型糖尿病（T2DM）并发不同程度肾病患者尿足细胞标志蛋白（PCX）和血管内皮生长因子（VEGF）水平变化,及其与氧化应激的关系。方法 186例T2DM患者按照24h尿清蛋白排泄率（UAER）分为单纯T2DM组（SDM组,62例）、微量组（NA组,60例）、大量组（MA组,64例）,另取24hUAER正常者作对照（NC组,60例）。分别检测PCX、VEGF、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）和丙二醛（MDA）水平。结果与其他3组比较,MA组VEGF、PCX及MDA水平最高（P〈0.01）,SOD和GSH-px水平最低（P〈0.01,P〈0.05）。VEGF、UAER、HbA1c是尿PCX的独立危险因素。结论糖尿病肾病患者尿PCX及血VEGF与氧化应激相关,氧化应激与足细胞的损伤密切相关。前列地尔治疗早期糖尿病肾病疗效及安全性观察
摘要：目的探讨前列地尔治疗糖尿病合并慢性肾病疗效及安全性,为临床治疗提供参考。方法选择2013年9月至2015年1月84例早期糖尿病合并慢性肾病患者,按照患者自愿原则分为观察组与对照组,观察组44例,对照组40例。对照组使用依帕司他联合吡格列酮治疗,观察组在对照组基础上联合前列地尔治疗,比较两组患者治疗有效率、血肌酐、尿素氮、尿清蛋白排泄率、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）及不良反应。结果观察组治疗有效率为93.18%,明显高于对照组（80.00%）,差异有统计学意义（χ2=4.251,P=0.005）;观察组与对照组治疗后CRP与IL-6相比治疗前均有显著改善,差异有统计学意义（P〈0.05）,观察组治疗后CRP[（0.45±0.05）mg/L]与IL-6[（0.72±0.11）μg/L]改善明显优于对照组[（1.05±0.14）mg/L、（1.25±0.24）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组与对照组治疗后尿素氮、尿清蛋白排泄率、TNF-α、内生肌酐清除率相比治疗前均有显著改善,差异有统计学意义（P〈0.05）,观察组治疗后尿素氮、尿清蛋白排泄率、TNF-α、内生肌酐清除率分别为（6.41±1.12）mmol/L、（41.12±4.46）μg/min、75.54±6.64）ng/L、（92.94±8.24）%,改善明显优于对照组[（7.39±1.05）mmol/L、（91.48±7.31）mmol/L、（111.42±7.69）ng/L、（81.55±9.54）ng/L],差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组不良反应发生率为18.18%,对照组为17.50%,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论前列地尔治疗糖尿病合并慢性肾脏病疗效好,利于改善尿清蛋白排泄及炎症水平,安全性高,值得临床推广应用。高强度聚焦超声治疗子宫肌瘤和子宫腺肌病后盆腔黏连情况分析
摘要：目的初步探讨高强度聚焦超声（HIFU）治疗子宫肌瘤和子宫腺肌病后是否会导致盆腔黏连。方法收集明确诊断的子宫肌瘤及子宫腺肌病患者1 672例,根据是否进行HIFU手术,将其分为非HIFU组（1 560例）、HIFU组（112例）。根据盆腔黏连评分细则,对患者盆腔黏连情况进行分度评分,将结果进行统计学处理。结果两组盆腔黏连情况及盆腔黏连分度比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。对可能引起黏连的相关因素进行单因素分析,发现患者年龄、既往有子宫内膜异位症病史、手术史、盆腔炎病史、病灶大小、痛经史对盆腔黏连有影响,差异有统计学意义（P〈0.05）。而在多因素相关性分析中,HIFU组各因素均被排除（P〉0.05）,非HIFU组中,手术史及盆腔炎病史与盆腔黏连发生具有相关性（P〈0.05）。结论 HIFU治疗子宫肌瘤和子宫腺肌病不会引起盆腔黏连。磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎实效性分析
摘要：目的探讨磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎的临床效果,为临床治疗提供参考。方法选择2011年1月至2015年1月160例病毒性心肌炎患儿,按照数字表法随机分为对照组与观察组,各80例。对照组使用果糖二磷酸钠、维生素C、辅酶Q10、利巴韦林等对症治疗,观察组在对照组基础上,联合使用磷酸肌酸钠及心肌康颗粒治疗,比较两组患者临床效果、心电图改善、心肌酶水平及肌钙蛋白I（cTnI）水平变化。结果观察组治疗有效率为87.50%,明显高于对照组的70.00%,差异有统计学意义（χ2=7.320,P=0.004）;观察组心电图改善有效率为90.00%,明显高于对照组的75.00%,差异有统计学意义（χ2=6.234,P=0.005）;两组患者治疗后比治疗前天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、磷酸肌酸酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、羟丁酸脱氢酶（HBDH）、cTnI均有明显改善,差异有统计意义（P〈0.05）,观察组治疗后AST、CPK、LDH、CK-MB、HBDH、cTnI分别为（29.98±4.66）U/L、（184.41±5.97）U/L、（314.25±9.84）U/L、（22.29±2.98）U/L、（268.37±8.64）U/L、（0.13±0.04）μg/L,与对照组[（33.49±4.98）U/L、（196.49±6.71）U/L、（328.64±11.14）U/L、（26.53±3.44）U/L、（298.68±10.64）U/L、（0.25±0.05）μg/L]比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎临床效果显著,值得临床推广应用。2型糖尿病患者臂踝脉搏波传导速度与颈动脉内膜中层厚度及斑块的关系
摘要：目的探讨2型糖尿病患者臂踝脉搏波传导速度（baPWV）与颈动脉内膜中层厚度（IMT）及颈部动脉斑块的关系,并分析引起动脉硬化的相关危险因素。方法收集426例2型糖尿病患者,进行baPWV、颈部动脉超声检查、生化指标检测及相关危险因素的记录。分析baPWV与IMT的相关性。并根据baPWV结果分为正常组与异常组,对两组的IMT、颈部动脉斑块及相关危险因素进行比较。结果两组危险因素中糖尿病病程、收缩压、舒张压、脉压、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、动脉硬化危险因素个数等比较差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;而年龄、腹围、BMI、尿酸、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、糖化血红蛋白的比较差异无统计学意义（P〉0.05）。两组颈部动脉超声斑块检出率差异无统计学意义（P〉0.05）,而两组斑块平均数量比较差异有统计学意义（P〈0.01）,异常组明显多于正常组;IMT正常率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,正常组明显高于异常组。两组IMT值比较,差异仍有统计学意义（P〈0.01）,异常组较正常组明显增厚。对baPWV与IMT进行相关性分析结果显示：IMT与baPWV呈正相关关系（r=0.228,P〈0.05）。结论动脉弹性降低的2型糖尿病患者可能伴有颈IMT明显增厚、斑块数量明显增多。结合baPWV及颈部动脉超声检查可更好地进行颈动脉硬化的评估。家族性偏瘫性偏头痛CACNA1A基因新突变的研究
摘要：目的探索家族性偏瘫性偏头痛（FHM）与CACNA1A基因突变的关系。方法通过提取一家系患者和健康人及1 000例健康对照组DNA进行CACNA1A基因测序研究,并进行生物信息学分析。结果位于CACNA1A基因的8号外显子的新突变位点（c.1168A〉G）导致天门冬酰胺替换为天冬氨酸（N390D）。结论CACNA1A基因突变N390D是新发现的引起FHM的致病突变因素。后路椎弓根螺钉内固定治疗寰枢椎骨折脱位的临床体会
摘要：目的探讨经后路椎弓根螺钉内固定治疗寰枢椎骨折脱位临床疗效。方法选取2011年6月至2013年12月在该院接受治疗的寰枢椎骨折脱位患者19例,经后路切开复位椎弓根螺钉内固定术。术后定期复查X线片了解骨折脱位矫正和后路植骨融合。参照日本骨科学会（JOA）评分评估神经功能。结果患者植骨全部融合,内固定无松动,无断钉、断棒发生,JOA评分由术前（7.35±2.39）分改善至术后（13.21±2.53）分,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论后路寰枢椎椎弓根螺钉内固定治疗上颈椎损伤疗效满意。
