SIRT1在TNF-α介导的肠上皮屏障破坏中的作用及机制研究
摘要：目的：观察沉默信息调节因子1（SIRT1）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）介导的肠上皮Caco-2细胞屏障功能破坏的影响并探讨其分子机制。方法将Caco-2细胞分3组处理：对照组、TNF-α100 ng/mL 24 h处理组（TNF-α组）及 TNF-α100 ng/mL 24 h处理＋白芦藜醇（Resveratrol）40μm预处理12 h组（TNF-α＋Res组）。分别检测跨上皮电阻（TER）、SIRT1及紧密连接蛋白：ZO-1、occludin的蛋白表达。结果对照组、TNF-α组、TNF-α＋Res组的 SIRT1蛋白相对表达量分别为0．81±0．02、0．43±0．04、0．60±0．03。3组的TER分别为（154．00±5．00）、（97．00±4．00）、（128．00±6．00）Ohm/cm2。TNF-α组 SIRT1的蛋白表达较对照组下降47．00％，TER降低37．00％，经白芦藜醇预处理使TER较TNF-α组升高32．00％。对照组、TNF-α组、TNF-α＋Res组的ZO-1和occludin蛋白相对表达量分别为0．62±0．06和0．57±0．03、0．23±0．05和0．33±0．04、0．41±0．03和0．50±0．02。TNF-α处理后紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达显著降低（P＜0．05），而白芦藜醇预处理可缓解该现象，蛋白表达较 TNF-α组分别升高78．00％、51．00％（P＜0．05）。结论 TNF-α处理条件下 SIRT1水平降低，而升高 SIRT1水平可增加肠道紧密连接蛋白 ZO-1、occludin蛋白水平的表达，从而减轻TNF-α对Caco-2细胞构成的上皮屏障功能的损伤。基质金属蛋白酶-2和血管内皮生长因子在喉癌中的表达及意义
摘要：目的：探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）在喉癌中的表达情况及临床意义。方法在全自动图像分析仪下采用免疫组化方法分别检测经临床及病理证实的54例喉癌、23例声带息肉和15例喉部正常黏膜组织的MMP-2、VEGF表达情况。结果喉癌组织中 MMP-2的表达率为72．22％（39/54），与声带息肉（47．83％）和喉部正常黏膜组织（40．00％）比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。VEGF在喉癌中的表达率为70．37％（38/54），与声带息肉（39．13％）和喉部正常黏膜组织（46．67％）比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。MMP-2、VEGF的表达与喉癌的临床分期、淋巴结转移及浸润深度均有一定相关性。结论 MMP-2和 VEGF可能共同参与喉癌的浸润和转移，与肿瘤的侵袭性生长有一定的关系。Tim-3在人肝癌细胞中的表达及其对细胞增殖与迁移能力的影响
摘要：目的：研究T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3（Tim-3）在人肝癌细胞系中的表达及其对肝癌细胞肿瘤生物学行为的影响。方法采用荧光实时定量PCR（FQ-PCR）和蛋白免疫印迹方法检测人正常肝细胞株 L02和肝细胞肝癌（HCC）细胞株 HepG2、SMMC7721中Tim-3在mRNA和蛋白质水平的表达。运用 siRNA转染技术沉默 Tim-3基因在 HepG2细胞株中的表达，免疫印迹筛选干扰效率最高的基因片段。MTT和细胞划痕实验检测沉默 Tim-3基因后对细胞增殖、迁移能力的影响。结果 FQ-PCR及免疫印迹方法检测显示，人 HCC细胞株 HepG2、SMMC7721中 Tim-3 mRNA和蛋白的表达均较正常肝细胞株 L02明显增高（P＜0．05）。转染Tim-3 siRNA后，肝癌细胞株 HepG2中 Tim-3蛋白水平表达明显降低。与对照组比较，细胞的增殖、迁移能力显著下降。结论 Tim-3 mRNA及蛋白水平在肝癌细胞株中表达明显升高，促进细胞的增殖、迁移。完善卒中绿色通道对提高急性缺血性卒中静脉溶栓率的影响
摘要：目的：观察该院卒中绿色通道建立并逐步完善后，对缩短急性缺血性卒中（AIS）患者自就诊至接受重组组织型纤溶酶原激活剂（rt-PA）静脉溶栓治疗时间（DNT）以及静脉溶栓率的影响。方法筛选2010年以来就诊于该院的3990例 AIS患者，对每年时间窗内到院患者人数进行统计，并对静脉溶栓率、DNT的变化趋势进行分析，比较卒中绿色通道建立前后及持续改进后DNT及溶栓率变化情况。结果该院 AIS患者时间窗内到院率明显低于国内发达地区水平，自2011年建立卒中绿色通道后，rt-PA静脉溶栓率实现零的突破，随着绿色通道的持续改进，2012年DNT的中位数缩短至60 min，2013年时间窗内就诊患者的 DNT中位数降至53．5 min，而时间窗内到院患者的rt-PA静脉溶栓率由2010年的0达到2013年的74．3％。结论该院通过逐步完善卒中绿色通道流程，加强急诊科、检验科及卒中小组协作，使患者自入院到接受静脉溶栓治疗时间逐年大幅度缩短，溶栓率大幅度增加。证明在院前延误严重地区，建立院内完善流畅的卒中绿色通道，是增加 AIS患者静脉溶栓率的必要措施。益智活动对老年人认知功能的影响
摘要：目的：观察参加益智活动对老年人认知功能的影响。方法在健康体检人群内进行抽样横断面调查和纵向随访研究。益智组92例（年龄大于或等于60岁），经常参加下列活动中任何一项或多项，持续时间达5年及以上：象棋、围棋、麻将、扑克、跳棋、书法、绘画及阅读等，参加的频率至少每周2次。筛选性别、年龄、文化程度匹配的健康体检者92例为对照组，对照组均不参加上述益智活动或偶尔参加，未达到前述标准。入选者均无基线认知功能损害，排除继续参加工作者。采用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）、简易精神状态评定量表（MMSE）、日常生活能力量表（ADL）、自制问卷调查等方法进行评定。1年后健康体检时，对两组人员再次使用上述量表进行评估，观察两组评分变化。结果入组时，两组人员 MoCA、MMSE、ADL评分差异均无统计学意义（P＞0．05）；1年后，益智组与对照组 MMSE、ADL评分比较差异无统计学意义（P＞0．05）。MoCA评分显示益智组有2例（2．2％）低于认知损害的临界值，对照组有6例（6．5％）低于认知损害的临界值，达到轻度认知功能损害（MCI）的标准，两组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论益智活动可能对预防老年人认知功能的下降有益，MoCA更适于轻度认知功能障碍的筛查。三维超声在评估盆腔器官脱垂老年女性患者肛提肌收缩功能中的应用
摘要：目的：探讨三维超声评估盆腔器官脱垂老年女性患者肛提肌收缩功能的应用价值。方法选择2011年7月至2013年2月该院妇科收治的盆腔器官脱垂老年女性患者58例，患者均接受经会阴三维超声检查及张力强度评分（Oxford Scale）。采集患者三维图像及数据，计算出膀胱颈移动度（D）、肛提肌裂孔长度（L）、水平成角（R）及面积（S）的变化值等参数数值，并对肛提肌Oxford Scale与三维超声参数的相关性进行分析。结果肛提肌Oxford Scale 0分2例，1分3例，2分10例，3分18例，4分20例，5分5例。三维超声参数D、L、R及 S值分别为（7．46±2．15）mm、（9．05±3．27）mm、（9．55±5．24）°和（16．43±2．58）％。对肛提肌 Oxford Scale与三维超声参数的相关性作进一步分析发现，肛提肌 Oxford Scale 与 S 值相关性最好（rs＝0．77，P＜0．01），其次为 L（rs＝0．72，P＜0．01）、R（rs＝0．69，P＜0．01）、D（rs＝0．64，P＜0．01）。结论三维超声能够较为客观地评估盆腔器官脱垂老年女性患者的肛提肌收缩功能。HLA-DRB1＊11基因多态性与口腔扁平苔藓易感性的Meta分析
摘要：目的：探讨人类白细胞抗原（HLA）-DRB1＊11基因多态性与口腔扁平苔藓（OLP）易感性的关系。方法计算机检索 PubMed、Embase、Cochrane library、Web of Science和中国生物医学文献数据库（CBM）、中国知网数据库（CNKI）、中文科技期刊全文数据库（VIP）、万方数据库。根据纳入与排除标准，收集相关研究，对纳入的文献依据 NOS量表进行质量评价，采用 Rev-Man5．2．5进行 Meta分析，合并效应量选择比值比（OR）及95％可信区间（95％CI），发表偏倚通过绘制漏斗图直观判断和采用Stata12．0做 Egger回归分析及Begg秩相关检验来检测。结果共纳入6篇文献，OLP组396例研究对象中93例检出 HLA-DRB1＊11，等位基因频率23．48％；健康对照组994例研究对象中196例检出 HLA-DRB1＊11，等位基因频率19．72％，合并分析时显示两组差异无统计学意义（OR＝1．07，95％CI＝0．59～1．94，P＞0．05），经 Egger回归分析和Begg秩相关检验未见明显发表偏倚。结论 HLA-DRB1＊11基因多态性与 OLP易感性未见明显相关性。后腹腔镜与经皮肾镜治疗复杂性输尿管上段结石疗效比较
摘要：目的：比较后腹腔镜输尿管切开取石术（RLU）与微创经皮肾镜取石术（MPCNL）治疗复杂性输尿管上段结石的安全性及疗效，探讨两种术式的适应证及技术要点。方法回顾性分析2009年3月至2012年9月54例复杂性输尿管上段结石患者的临床资料，31例采用 MPCNL治疗（MPCNL组），23例采用 RLU治疗（RLU组），比较两组患者的手术并发症和结石清除率。结果 RLU组与 MPCNL组的手术时间分别为（69．70±7．73）min vs．（46．50±7．09）min（t＝-11．436，P＝0．000）；术中出血量为（21．50±7．23）mL vs．（66．90±20．00）mL，MPCNL组显著高于RLU组（t＝9．94，P＝0．000）；术后3 d的结石清除率、术后高热发生率、术后尿漏发生率、住院时间等两组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 MPCNL与 RLU治疗复杂性输尿管上段结石都具有较高的安全性与疗效，RLU术中出血较少，但手术时间长。关节镜对膝关节不典型疼痛患者的诊断和治疗价值
摘要：目的：探讨关节镜在膝关节不典型疼痛患者的诊断和早期治疗中的临床应用价值。方法选取2011年8月至2013年1月收治入重庆医科大学附属第一医院骨科进行治疗的未明确诊断的膝关节疼痛患者74例，所有患者入院后给予 MRI、X线检查及膝关节镜诊断性探查并进行手术治疗。结果膝关节不典型疼痛关节镜探查结果显示：滑膜炎18例，前交叉韧带损伤12例，髌下脂肪垫肥厚11例，骨性关节炎23例，关节游离体10例。与术前比较，最后1次随访患者 VAS疼痛评分显著降低（t＝4．72，P＜0．05），Lysholm膝关节功能评分明显提高（t＝8．77，P＜0．05），关节镜手术治疗前、后差异有统计学意义（P＜0．05）。结论关节镜对诊断膝关节不典型疼痛至关重要，为指导临床诊断和治疗提供了明确依据。慢性肾病维持性血液透析患者的血压变异危险因素分析
摘要：目的：评估慢性肾病维持性血液透析（MHD）患者透析过程中血压变异性（BPV）情况，探讨影响 MHD过程中 BPV增加的相关危险因素。方法对该院112例 MHD患者进行回顾性分析。记录血液透析过程中所有血压值，分析患者透析中是否发生心脑血管事件的 BPV 情况。结果患者透析过程中收缩压 BPV 值为（12．19±3．74）％，舒张压 BPV 值为（11．90±2．49）％。其中出现心血管事件43例，脑血管事件5例，发生心脑血管事件患者的收缩压 BPV值明显高于未发生心脑血管事件的患者（P＜0．05），而舒张压BPV值在两组间差异无统计学意义（P＞0．05）；将透析中收缩压 BPV作为应变量进行多元回归分析，结果显示患者年龄、透析间期体质量增长率、透析前收缩压及血红蛋白水平是透析中收缩压BPV的独立影响因素。将透析中舒张压BPV作为应变量进行多元回归分析，结果显示透析间期体质量增长率、平均脱水量是透析中舒张压 BPV的独立影响因素。结论高龄、透析前高收缩压、透析间期体质量增长率增加、血红蛋白水平降低为 MHD患者透析中收缩压 BPV升高的独立危险因素。经输尿管镜碎石术后留置输尿管支架的必要性研究
摘要：目的：探讨经输尿管镜碎石术治疗输尿管中、下段结石术后留置输尿管支架的必要性。方法将112例输尿管中、下段结石患者分为两组，A组（未留置支架）56例，B组（留置支架）56例，比较两组患者间手术时间、结石清除率、支架相关疼痛评分（VAS）、尿路症状评分（USSQ）、肉眼血尿发生率、泌尿系感染率及输尿管狭窄发生率。结果两组患者手术时间、结石清除率、泌尿系感染率比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；A组患者术后 VAS评分、USSQ、肉眼血尿发生率均明显低于 B组，差异有统计学意义（P＜0．05），两组均未出现输尿管狭窄。结论经输尿管镜碎石术治疗单纯输尿管中、下段结石不必留置输尿管支架。胰岛素受体基因酪氨酸激酶区单核苷酸多态性与多囊卵巢综合征的相关性
摘要：目的：探讨胰岛素受体基因酪氨酸激酶区单核苷酸多态性与多囊卵巢综合征（PCOS）的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术（PCR-RFLP）以及PCR产物直接测序法对96例PCOS患者（PCOS组）和48例健康妇女（对照组）的胰岛素受体基因中3个单核苷酸位点（＋168715 C＞T、＋176506 C＞T和＋176525 G＞A）进行序列分析。结果 PCOS组的胰岛素受体基因 Exon17的＋168715 C＞T的多态性出现频率明显高于对照组（63．5％vs．45．8％，P＝0．043），而且在非肥胖亚组中差异更明显（P＝0．039）；两组研究对象在距离 INSR-Exon22前端85 bp和56 bp处存在＋176506 C＞T和＋176525 G＞A的多态性，两位点多态性出现频率相同，而且PCOS组多态性出现频率亦高于对照组（64．6％vs．47．9％），但差异无统计学意义（P＝0．055）。进一步分组比较发现在PCOS非肥胖亚组中两位点多态性出现频率高于对照组（P＝0．042）。结论胰岛素受体基因中＋168715 C＞T、＋176506 C＞T和＋176525 G＞A的多态性可能与PCOS非肥胖型患者的发病有关。大肠癌组织中MMP-2与TIMP-2的表达及临床意义
摘要：目的：研究基质金属蛋白酶-2（MMP-2）与组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在大肠癌中的表达，探讨二者在大肠癌发展过程中的意义。方法应用免疫组化法检测52例大肠癌、20例大肠腺瘤和20例正常大肠黏膜组织中MMP-2与TIMP-2的表达，并分析二者表达与性别、年龄、肿瘤发生部位、浸润程度、组织分化程度及淋巴结转移等临床指标间的关系。结果MMP-2在大肠正常黏膜、大肠腺瘤和大肠癌中的表达强度依次增加，而TIMP-2在三者中的表达强度则依次降低。MMP-2在浸润程度深的大肠癌中的表达高于浸润程度浅的，低分化的高于中高分化的，有淋巴结转移的高于无淋巴结转移的；TIMP-2的表达则在浸润程度深的低于浸润程度浅的，低分化的低于中高分化的，在有淋巴结转移的低于无淋巴结转移的。MMP-2与 TIMP-2在大肠癌组织中的表达与患者的性别、年龄及肿瘤发生部位无显著相关性，MMP-2与 TIMP-2在大肠癌中的表达呈负相关。结论 MMP-2与TIMP-2表达的失平衡与大肠癌的浸润和转移密切相关。糖皮质激素对鼻息肉中细胞角蛋白13表达的影响
摘要：目的：探讨细胞角蛋白13（CK13）在鼻息肉上皮细胞增生分化过程中的作用。方法选取慢性鼻-鼻窦炎（伴鼻息肉）患者60例。其中 A组30例患者，术前未应用糖皮质激素直接进行手术治疗，术中取下鼻息肉组织；B组30例患者应用糖皮质激素类药物治疗3～5 d后手术治疗，术中取下鼻息肉组织。C组10例为正常中鼻甲组织对照组。采用免疫组化（二步法）检测标本中CK13的表达。结果 A组CK13的阳性表达率高于B组，差异有统计学意义（χ2＝11．482，P＝0．009），C组正常中鼻甲组织上皮细胞未见CK13的阳性表达。结论（1）CK13在鼻息肉组织中不同上皮表达程度的差异，反映了 CK13在鼻息肉在发生发展过程中的动态变化；使用糖皮质激素治疗后鼻息肉组织中 CK13蛋白表达有所下降，说明糖皮质激素对鼻息肉的增生、分化有抑制作用。LPS通过调节Cdc2蛋白表达诱导HeLa细胞凋亡的研究
摘要：目的：构建细胞分裂周期蛋白2（Cdc2）真核表达载体，并在 P16基因缺失的肿瘤细胞 HeLa细胞中表达，利用 LPS诱导细胞凋亡，并探讨 LPS诱导 HeLa细胞凋亡的机制。方法从人 U2OS细胞中提取 RNA，反转录克隆 Cdc2 cDN段，利用Gateway技术构建 pDEST27-Cdc2质粒。将 pDEST27-Cdc2质粒瞬时转染人宫颈癌 HeLa细胞，免疫印迹分析 Cdc2的表达情况，并用 LPS刺激，观察其对 LPS引起的细胞凋亡和细胞周期的影响。结果成功构建 pDEST27-Cdc2质粒，质粒酶切及测序结果完全正确。LPS刺激 HeLa细胞24 h后，流式细胞仪检测发现大量细胞凋亡，而转染pDEST27-Cdc2质粒的细胞凋亡率明显降低，提示Cdc2的重要作用。免疫印迹分析研究发现，LPS诱导 HeLa细胞 Cdc2蛋白水平下降，进一步研究发现 LPS诱导 HeLa细胞 G2/M期阻滞，过表达Cdc2可以降低 G2期细胞阻滞的发生。结论 LPS诱导 HeLa细胞凋亡是由于其导致 Cdc2表达下降，细胞分裂停止在 G2/M期，过表达Cdc2可以阻止死亡信号诱导的细胞凋亡。Slit2蛋白对深静脉血栓作用的实验研究
摘要：目的：探讨 Slit2过表达对深静脉血栓形成的影响。方法利用 Slit2过表达转基因小鼠进行下腔静脉结扎造模，观察血栓形成的情况，测量出血时间、血栓重量长度比，HE染色观察血栓形成的病理形态，并同时设立C57小鼠对照组。结果成功建立了小鼠下腔静脉血栓模型；在造模48 h后 Slit2过表达转基因小鼠与 C57小鼠相比，裸血栓重量长度比明显减小；出血时间延长；Slit2过表达小鼠形成的血栓中白色血栓所占比例较小，而 C57小鼠则白色血栓所占比例较大。结论 Slit2过表达能通过抑制白色血栓形成，从而有效抑制深静脉血栓的形成。MFG-E8基因在梗阻性黄疸小鼠免疫组织中的表达及临床意义
摘要：目的：动态观察梗阻性黄疸小鼠血浆MFG-E8水平，以及肝脏、脾脏、淋巴结、胸腺的MFG-E8 mRNA和蛋白的表达情况，探讨其在梗阻性黄疸中的意义。方法建立梗阻性黄疸小鼠模型，分为假手术组、胆总管结扎组，采用蛋白免疫印迹法检测梗阻性黄疸小鼠第3、7、14天血浆中 MFG-E8蛋白水平；RT-PCR检测肝脏、脾脏、淋巴结、胸腺中 MFG-E8 mRNA的表达变化；采用蛋白免疫印迹法检测上述组织中 MFG-E8的蛋白表达水平。结果梗阻性黄疸小鼠血浆中 MFG-E8蛋白水平在每个时相点均较假手术组明显降低（P＜0．05）；肝脏、脾脏、淋巴结、胸腺组织中 MFG-E8 mRNA表达明显降低（P＜0．05），同时，肝脏、脾脏、淋巴结、胸腺组织中 MFG-E8蛋白表达水平亦明显下降（P＜0．05）。结论 MFG-E8在梗阻性黄疸免疫组织中的表达明显减少，可能对梗阻性黄疸后组织凋亡细胞的清除产生重要的影响。真核起始因子6抑制小鼠肾间质纤维化的组织学研究
摘要：目的：通过建立小鼠单侧输尿管结扎（UUO）模型，探讨真核起始因子6（eIF6）在肾间质纤维化中的作用。方法建立 eIF6＋/-和 eIF6＋/＋小鼠 UUO模型；用 HE和 Masson染色观测小鼠肾间质胶原沉积程度，免疫组化方法观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达与分布变化，并进行图像定量分析。结果 UUO模型 eIF6＋/-小鼠在建模后10 d出现比eIF6＋/＋小鼠更明显的肾纤维化；在UUO模型中，eIF6＋/-小鼠的肾小管区比eIF6＋/＋小鼠的肾小管区表达更多的TGF-β1和α-SMA。结论 eIF6可能通过影响TGF-β1的表达参与调控肾间质纤维化。
