基因沉默Delta N p63对膀胱肿瘤生长抑制和CDK4的影响
摘要：目的采用RNA干扰（RNAi）方法,研究当Delta N p63基因的表达沉默后,对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型肿瘤的抑制作用,并检测对细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）基因和蛋白表达的影响,进一步揭示Delta N p63基因在膀胱肿瘤中的作用机制。方法首先构建Delta N p63基因特异性短发卡RNA（shRNA）表达质粒,将表达质粒转染至裸鼠皮下移植模型肿瘤瘤体内,比较各组肿瘤体积,光镜下检测肿瘤组织病理学改变,RT-PCR方法检测CKD4基因的表达变化,Western blot和SP免疫组化检测CKD4蛋白表达变化。结果质粒注射到肿瘤8周后,治疗组、对照组与生理盐水组比较,治疗组与生理盐水组瘤体积比较差异有统计学意义（P〈0.01）,抑瘤率74.62%。光镜结果显示治疗组肿瘤生长受到明显抑制,细胞核分裂象明显减少,可见坏死和凋亡肿瘤细胞、局部炎症细胞浸润。RT-PCR结果显示治疗组CKD4基因表达降低,蛋白检测结果显示CKD4蛋白表达下降。结论沉默Delta N p63表达后,可显著抑制人膀胱癌裸鼠肿瘤模型中肿瘤的生长,Delta N p63可能通过抑制CKD4的表达而抑制肿瘤的细胞生长。持续表达的丙型肝炎病毒NS4B激活HepG2细胞内质网应激反应的研究
摘要：目的研究持续表达的丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白4B（NS4B）对HepG2细胞内质网应激反应的影响。方法 NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1（-）NS4B通过脂质体转染HepG2细胞,G418筛选、基因组PCR和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内人X盒结合蛋白1（XBP1）mRNA剪接,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78启动子、XBP1启动子和核因子κB（NF-κB）活性。结果基因组PCR和Western blot鉴定证实NS4B基因整合到转染HepG2细胞的染色体上,并有效表达;在NS4B稳定转染的HepG2细胞中,检测到XBP1mRNA剪接、XBP1和Grp78启动子激活、Ca2＋稳态变化及NF-κB激活。结论 NS4B在HepG2的稳定表达诱导了内质网应激反应,揭示NS4B可能通过诱导肝细胞内质网应激反应在HCV感染及其致病性中发挥作用。脑钠肽对猪冠状动脉的舒张作用及机制研究
摘要：目的观察脑钠肽（BNP）对猪冠状动脉舒张作用,探讨其扩血管机制。方法采用猪冠状动脉环张力测定法,观察脑钠肽对猪冠状动脉的舒张作用及C型利钠肽受体（NPR-C）拮抗剂cANF4-28、鸟苷酸环化酶抑制剂1H-（1,2,4）恶二唑（4,3-α）喹喔啉-1-酮（ODQ）和各种钾离子通道阻滞剂对其舒血管效应的影响。结果 10-6 mol/L的BNP对血管的最大舒张率为（68.5±11.5）%,ODQ、四乙胺或格列苯脲均能明显抑制脑肽钠的舒血管作用（P〈0.05）,cANF4-28对BNP的舒张血管作用无明显影响（P〉0.05）。结论 BNP可通过激活BKCa和KATP对猪冠状动脉产生舒张作用。化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析
摘要：目的构建化脓性链球菌高毒力株特异基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交技术（SSH）,以从患者体内所分离链球菌为毒力菌株,分离特异表达基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选消减文库后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析。结果酶切产物为100～2 000bp,连接效率大于50%,消减组与非消减组差异明显,成功构建了化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性。结论用SSH及T/A克隆技术成功构建了人源化脓性链球菌高毒力株基因文库,5个未知的新序列有待于进一步的研究。白细胞介素1β对失神经肌肉保护作用的实验研究
摘要：目的研究白细胞介素1β（IL-1β）对失神经支配骨骼肌的作用。方法将36只健康SD大鼠制备失神经支配腓肠肌模型,随机分成实验组和对照组,每组18只。A组于腓肠肌不同的5个点注射IL-1β0.1mL（浓度1ng/mL）,B组注射同等剂量的生理盐水,术后每天注射1次。于术后2、4、8周各取6只大鼠处死,取右侧腓肠肌观察,测定肌湿质量维持率、肌细胞横截面积、肌肉蛋白总含量,检测运动终板,细胞凋亡等指标。结果术后2、4、8周实验组的肌湿质量维持率、肌细胞截面积、肌肉蛋白含量均明显高于对照组（P〈0.05）。术后8周两组的运动终板平均灰度值和平均光密度值差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组肌细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论靶肌肉局部注射IL-1β能减轻失神经骨骼肌形态的改变,对失神经骨骼肌和运动终板具有保护作用,能在短时间内有效延缓失神经支配骨骼肌萎缩。淋巴瘤患者循环microRNA-21的检测及其临床意义
摘要：目的分析淋巴瘤患者外周血中循环microRNA-21（miR-21）的表达,探讨循环miR-21在淋巴瘤早期诊断中的意义。方法收集60例临床确诊的淋巴瘤患者外周血,50名健康体检人群外周血作为正常对照组,用FQ-PCR方法检测miR-21的表达;同时检测对应的临床确诊淋巴瘤患者肿瘤组织及外周血中miR-21的表达,判断二者的相关性。结果 FQ-PCR检测结果显示,淋巴瘤患者外周血中循环miR-21的表达显著高于正常对照组,差异有统计学意义（t=6.9,P〈0.000 1）;且淋巴瘤患者外周血中循环miR-21的表达与肿瘤组织中miR-21的表达密切相关（r2=0.931,P〈0.000 1）。结论外周血循环miR-21检测有望成为淋巴瘤早期诊断的新的分子标志。β-榄香烯对肿瘤细胞上清夜诱导的大鼠骨髓来源的内皮祖细胞增殖、管腔形成能力及细胞周期的影响
摘要：目的探讨β-榄香烯对内皮祖细胞（EPCs）参与肿瘤血管形成的抑制作用。方法原代培养大鼠骨髓来源内皮祖细胞,胃癌细胞株SGC-7901培养上清液刺激与β-榄香烯干预,四唑氮蓝还原反应（MTT）法检测内皮祖细胞增殖;碘化丙啶（PI）标记流式细胞仪检测细胞周期,Matrigel检测细胞管腔形成能力。结果β-榄香烯抑制肿瘤细胞上清液诱导的内皮祖细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,G1期细胞增多,进入S期及G2期细胞减少,细胞周期被阻滞于G1期;接种于Matrigel的内皮祖细胞形成管腔数目减少。结论β-榄香烯可抑制内皮祖细胞的增殖,阻滞其从G1期进入S期,并降低其形成管腔的能力。海拔5000m以上地区健康人群心电图特征分析
摘要：目的了解高海拔地区健康青年人群心电图改变。方法分析不同海拔高度[海拔5 380、5 200、5 010m（n=126）,4 300m（n=50）,3 750m（n=26）,1 400m（n=98）]心电图资料,用实测法与目测法测定额面心电轴、J波、SⅠSⅡSⅢ综合征、顺钟向转位、电轴右偏等指标,对并海拔5 000m以上地区健康人群心电图特征进行分析。结果顺钟向转位、电轴右偏发生率组间比较差异有统计学意义（P〈0.01）;额面电轴中5 000m以上组与海拔4 300m组、3 750m组比较,与1 400m组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;4 300m组与3 750m组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;SⅠSⅡSⅢ综合征各海拔组间相比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;窦性心律不齐不同海拔高度组比较,3 750m、4 300m及5 000m以上组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,而3 750m以上各组与1 400m组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论特高海拔地区健康青年人群心电图改变有一定的特殊性,为进一步了解特高海拔人群心电改变提供了新的依据。干、湿化学检测系统测定肾功能高值标本时稀释液的选择与评价
摘要：目的系统评价不同稀释液对干化学、湿化学检测系统测定肾功3项高值标本的影响,确定理想的稀释液。方法收集接近各系统肾功能3项检测上限的新鲜血清,分别用蒸馏水（DH2O）、生理盐水（NS）、7%小牛血清（7%BSA）、混合血清进行倍比稀释（最高稀释倍数为1∶32）,在美国强生Vitros 350干化学分析仪和日本日立7600全自动生化分析仪上分别测定,然后进行偏差分析和线性评价。结果在湿化学检测系统上,尿素用NS、BSA、混合血清稀释,偏差分析均符合要求。肌酐、尿酸用DH2O、BSA、混合血清均符合要求。在干化学检测系统上,尿素、尿酸用DH2O和混合血清稀释均符合要求,肌酐除了BSA外各稀释液均符合要求。根据分析测量范围评价（AMR）,在湿化学检测系统中,尿素、肌酐、尿酸用4种稀释液稀释后均符合要求;在干化学检测系统中,尿素只有DH2O和混合血清稀释后符合要求,肌酐只有NS和混合血清稀释后符合要求,尿酸用4种稀释液稀释后均符合要求。结论混合血清是最理想的稀释液。动脉灌注化疗治疗32例恶性梗阻性黄疸患者的临床分析
摘要：目的探讨胆道支架置入后行动脉灌注化疗治疗恶性梗阻性黄疸的疗效。方法 32例恶性梗阻性黄疸置入胆道支架后,行动脉灌注化疗,观察血清胆红素和转氨酶变化、支架保持通畅时间和患者生存时间。结果支架置入成功率100%;术后1～2周、术后1个月总胆红素（TB）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（AKP）明显下降（P〈0.05）;6、12、24个月生存率分别为96.88%（31/32）、71.88%（23/32）、40.63%（13/32）,平均生存时间16.3个月;3、6、12个月支架保持通畅率分别96.88%（31/32）、93.75%（30/32）、62.5%（20/32）,平均15.6个月。结论放置胆道支架后行动脉灌注化疗治疗恶性梗阻性黄疸是安全有效的方法,能提高患者的生存质量及延长生存时间。Ⅰ类整合子在耐多药产ESBLs大肠埃希菌中的分布探讨
摘要：目的了解耐多药产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌中Ⅰ类整合子携带情况。方法纸片扩散法（K-B法）测定大肠埃希菌对6种3类抗生素的敏感性并筛选出产ESBLs酶菌株;聚合酶链反应（PCR）检测整合子遗传标记qacE△1sul1。结果 71株大肠埃希菌中QacE△1-sul1共检出阳性菌株55株（74.46%）,其中多耐模式检出率最高为88.89%（40株）。不同耐药模式中遗传标记基因的阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.05）;产酶菌株在不同耐药模式中检出差异有统计学意义（P〈0.05）;非产酶菌株中检出差异无统计学意义（P〉0.05）。结论耐多药产ESBLs大肠埃希菌中Ⅰ类整合子携带率高。阿托伐他汀治疗急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的临床研究
摘要：目的观察阿托伐他汀治疗急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的临床疗效。方法 120例急性缺血性卒中且颈动脉粥样硬化斑块患者随机分为两组,对照组采用常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用阿托伐他汀,观察两组颈动脉内膜-中层厚度（IMT）、斑块面积变化、血脂变化及不良反应情况。结果治疗后两组颈动脉IMT变薄、斑块面积减小,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0.05）,组间治疗后比较,治疗组疗效优于对照组（P〈0.05）;治疗组治疗后血清胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平明显下降,高密度脂蛋白（HDL-C）水平升高,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对照组治疗前后血脂比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论阿托伐他汀可显著减轻患者的颈动脉粥样硬化,缩小斑块面积,调节血脂,预防卒中事件复发。生长抑素与泮托拉唑钠治疗重症急性胰腺炎的疗效及对血清炎性因子的影响
摘要：目的探讨生长抑素联合泮托拉唑钠治疗重症急性胰腺炎（SAP）的疗效及对血清炎性因子的影响。方法将74例SAP患者随机分为对照组和治疗组,每组各37例。在常规治疗基础上,对照组单用泮托拉唑钠,治疗组采用生长抑素和泮托拉唑钠联用。疗程均为7d。比较两组患者的临床指标（腹痛缓解时间、肠道功能恢复时间和撤离呼吸机时间）及血清炎性因子（血清白介素-8、高敏C反应蛋白和肿瘤坏死因子-α）的水平。结果治疗组的腹痛缓解时间、肠道功能恢复时间和撤离呼吸机时间均优于对照组（P〈0.01）,而血清白介素细胞-8、高敏C反应蛋白和肿瘤坏死因子-α水平低于对照组（P〈0.01）。结论生长抑素联合泮托拉唑钠治疗可显著降低SAP患者血清炎性因子水平,并提高临床治疗效果。悬吊式与气腹腹腔镜对卵巢手术患者术中心率变异性的影响
摘要：目的比较妇科无气腹悬吊式腹腔镜与气腹腹腔镜手术对卵巢手术患者术中心率变异性的影响。方法选择行腹腔镜下卵巢肿瘤切除术患者50例,美国麻醉师学会（ASA）分级Ⅰ～Ⅱ级,按患者意愿分成两组,每组25例。Ⅰ组于全麻下行CO2气腹腹腔镜手术;Ⅱ组于全麻下行悬吊式腹腔镜手术。监测两组患者麻醉前（T1）、气腹或悬吊建立后到气腹或悬吊撤除（T2）、气腹或悬吊撤除后20min（T3）和术后次日08：00～10：00（T4）4个时段心率变异性的各项指标。结果 T1、T4两组时段心率变异性的各项指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。T2、T3两组时段心率变异性的各项指标比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论悬吊式腹腔镜技术有利于心率改变患者术中心血管系统功能的稳定,有利于降低患者术中心血管事件发生。厄贝沙坦联合左旋氨氯地平治疗原发性高血压的疗效观察
摘要：目的观察厄贝沙坦联合左旋氨氯地平治疗原发性高血压的疗效和安全性。方法将180例原发性高血压患者随机分为观察组（厄贝沙坦联合左旋氨氯地平）和对照组（厄贝沙坦）,各90例,均治疗8周。观察治疗前、后两组血压变化及不良反应发生情况。结果治疗后,两组收缩压（SBP）和舒张压（DBP）均明显下降（P〈0.05）;SBP在两组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,DBP在两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。观察组治疗后4、8周总有效率分别为88.2%和96.6%,对照组分别为75.5%和88.8%,两组总有效率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组第8周总有效率明显高于第4周（P〈0.05）。两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论厄贝沙坦联合左旋氨氯地平具有良好的降压作用和较高的安全性。不同剂量固尔苏治疗40例新生儿呼吸窘迫综合征的临床研究
摘要：目的观察在并发有新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）的早产儿中,不同首次剂量固尔苏的临床效果。方法将胎龄小于36周,生后3d内诊断为早产儿呼吸窘迫综合征的40例患儿随机分为治疗组和对照组,前者在确诊NRDS后即给予固尔苏200mg/kg治疗,后者给予固尔苏100mg/kg治疗,若病情无明显改善可在每12小时后再次给予固尔苏100mg/kg,但总量不得超过400mg/kg。具有机械通气指征时均予行机械通气。结果治疗组患儿需要接受第2、3剂固尔苏治疗的比例以及平均机械通气时间。平均吸氧时间均低于对照组（P〈0.05）;治疗组血气分析结果较对照组明显改善（P〈0.05）;胸片结果也明显优于对照组;两组患儿严重并发症的累积发生率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论对于确诊为NRDS的早产儿,首次给予固尔苏治疗剂量（200mg/kg）可减少再次用药比例,改善患儿血气分析及胸片结果,缩短早产儿机械通气时间及氧疗时间,值得临床广泛推广。血浆置换对重型肝炎患者血清HGF、OSM、aFGF的影响
摘要：目的观察血浆置换对重型肝炎患者血清肝细胞生长因子（HGF）、抑瘤素M（OSM）、酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）的影响。方法对45例重型肝炎患者根据是否进行血浆置换分为治疗组和对照组。对照组入院后给予内科综合治疗,治疗组在内科综合治疗的基础上于入院1周内开始接受血浆置换治疗。采用ELISA法检测两组治疗前后骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化因子水平。结果治疗组治疗后血清OSM为（11.77±6.01）ng/L,aFGF为（4.07±1.67）ng/L,HGF为（1 013.22±730.68）ng/L,其中HGF较治疗前升高（P=0.009）,OSM及aFGF较治疗前差异无统计学意义（P〉0.05）;对照组HGF、OSM及aFGF治疗前后比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血浆置换治疗可以提高慢性重型肝炎患者血清HGF水平,同时不影响OSM及aFG水平。帕瑞昔布联合吗啡术后静脉镇痛对胃癌患者淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞活性的影响
摘要：目的观察帕瑞昔布联合吗啡术后静脉镇痛对胃癌患者淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞（NK细胞）的影响。方法选择胃癌根治术患者40例,随机分为帕瑞昔布联合吗啡镇痛组（PM组,n=20）和吗啡镇痛组（M组,n=20）。两组患者均接受相同的麻醉方法。术毕分别用帕瑞昔布联合吗啡和单纯吗啡行静脉术后镇痛,采用视觉模拟评分法（VAS）镇痛评分评价镇痛效果,并分别于麻醉前、术毕、术后24h及术后48h抽取静脉血,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值及NK细胞（CD16＋、CD56＋/CD45＋）的变化。结果两组患者术后VAS评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两组患者CD3＋、CD4＋淋巴细胞在术毕、术后24h及48h均较麻醉前明显降低（P〈0.05）,两组患者的NK细胞（CD16＋、CD56＋/CD45＋）、CD4＋/CD8＋在术毕及术后24h也低于麻醉前（P〈0.05）。CD8＋在各时点变化差异无统计学意义（P〉0.05）。与M组相比,PM组在术后24hNK细胞（CD16＋、CD56＋/CD45＋）、CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋明显增高（P〈0.05）;PM组在术后48hNK细胞（CD16＋、CD56＋/CD45＋）、CD4＋/CD8＋已恢复到麻醉前水平（P〉0.05）,而M组仍处于较低水平（P〈0.05）。结论帕瑞昔布联合吗啡和单纯吗啡术后镇痛都取得良好的镇痛效果,但前者更有利于胃癌患者术后细胞免疫功能的恢复。
