基因组学与应用生物学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

基因组学与应用生物学 2016年第12期杂志 文档列表

基因组学与应用生物学杂志分子医学与临床应用

经HIF-1α与EGFP双基因重组腺病毒转染大鼠心肌干细胞后HIF-1α基因的表达3210-3218

摘要：常规经基因修饰腺病毒转染细胞后，即进行细胞的移植，并不对病毒转染效果进行检验。本研究采用HIF-1α与EGFP双基因重组腺病毒转染大鼠心肌干细胞，察看基因重组腺病毒是否能够转染心肌干细胞内；研究经HIF-1α与EGFP（enhanced green fluorescence protein，EGFP）双基因重组腺病毒转染心肌干细胞后HIF-1α基因的表达情况。在荧光显微镜下，去察看病毒转染细胞的情况，确定病毒最适MOI值；采用实时定量PCR（real-time quantitative PCR，RT—qPCR）评价HIF-1α基因表达变化；应用Western blotting方法检测HIF-1α蛋白表达变化，进而获得良好的实验结果。

Legume Genomics and Genetics （LGG）3218-3218

沉默MDR1基因表达逆转肺癌A549／DDP细胞对顺铂的耐药性3219-3223

摘要：本研究以A549／DDP细胞为实验对象，利用shRNA（short hairpin RNA）沉默MDR1基因，逆转人肺癌A549／DDP细胞对顺铂的耐药性。构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体，稳定转染A549／DDP细胞，qRT—PCR检测MDR1 mRNA表达水平，Western blotting检测MDR1蛋白表达水平，MTT法检测细胞对顺铂的敏感性。结果显示成功构建了3种靶向MDR1的重组表达载体p2．1-1、p2．1-2和p2．1-3。3种干扰表达载体均能有效沉默A549／DDP细胞MDR1基因表达，其中p2．1-3对MDR1沉默效果最好，对mRNA和蛋白的沉默效率分别为51．47％和53．24％。转染p2．1—3的细胞对顺铂的IC50由（72．08±7．00）μmol／L降至（31．89±3．39）μmol／L，逆转率达到（67．60±5．70）％。这些结果表明靶向MDR1的重组干扰载体均能够有效抑制MDR1表达，其中p2．1-3干扰效果最佳并且能逆转A549／DDP细胞对顺铂的耐药性。

Molecular Entomology3223-3223

颗粒蛋白前体（PGRN）通过活化内质网应激诱导肝细胞胰岛素抵抗的机制3224-3230

摘要：颗粒蛋白前体（PGRN）最近被发现作为一种重要的调控子参与胰岛素抵抗的发生发展过程，然而其具体机制尚未阐明。在本研究中，给予PGRN和／或内质网应激抑制剂4-苯基丁酸（4-PBA）处理AML12肝细胞，运用免疫印迹分析，检测内质网应激标志物及胰岛素信号通路分子的表达。结果显示，PGRN可提高肝细胞eIF2α和PERK磷酸化的表达，降低IRS-1及Akt磷酸化的表达，表明PGRN可活化肝细胞内质网应激，损伤其胰岛素信号通路。同时，在PGRN干预的肝细胞中表现出上调的IL-6和TNF-α浓度，以及降低的葡萄糖摄取。此外，在PGRN处理的肝细胞中，内质网应激抑制剂4-PBA的加入可逆转PGRN的负效应。总之，我们的研究表明，PGRN作为一个重要的调控子，通过诱导内质网应激，损害胰岛素信号通路，导致肝细胞的胰岛素抵抗。

头孢克肟对健康SD大鼠甲状腺功能的影响3231-3234

摘要：本研究探讨头孢克肟对健康SD大鼠甲状腺功能的影响。采用SPF级雄性SD大鼠40只，随机分为正常组、对照组、头孢克肟高、低剂量组各10只。除正常组外，分别给予生理盐水、头孢克肟18mg／kg、36mg／kg灌胃，每日1次，连续4周。给药结束1周后，取血及甲状腺，ELISA法测定血清FT3、FT4、TSH、rT3，HE染色、光镜观察甲状腺组织病理变化。ELISA法结果显示，与正常组和对照组比较，头孢克肟高、低剂量组血清FT3、FT4、rT3水平均降低，差异有统计学意义（p〈0．05），正常组与对照组之间对比无统计学意义（p〉0．05）。HE染色结果显示，头孢克肟高、低剂量组甲状腺滤泡大小不均匀，滤泡明显萎缩，滤泡间可见大量淋巴细胞。本研究结果提示，头孢克肟可导致健康SD大鼠甲状腺功能减退。

人子宫颈癌肿瘤相关巨噬细胞浸润与T细胞亚型及临床病理特征的相关性分析3235-3240

摘要：为了探讨肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages，TAMs）在人子宫颈癌微环境内的分布与T细胞亚型和临床病理特征的相关性，本研究应用S-P免疫组化法检测TAMs在60例子宫颈癌组织、10例高级别鳞状上皮内病变组织及10例子宫颈组织的分布情况；间接免疫荧光双标法分析浸润的FOXP3^＋Treg细胞数量、CD8^＋T细胞数量及其粒酶B分泌情况。统计学分析TAMs数量与癌间质浸润的FOXP3^＋Treg、CD8^＋T数量和临床病理特征的相关性。结果显示TAMs在子宫颈癌微环境的数量均显著多于高级别鳞状上皮内病变和子宫颈组织（p〈0．01，p〈0．01），同时高级别鳞状上皮内病变组织阳性细胞数也明显多于子宫颈组织（p〈0．01）；TAMs数量与宫颈癌间质内浸润的FOXP3＋T细胞数量呈正相关性（p〈0．05），且与淋巴结转移和癌栓相关（p〈0．05，p〈0．05），但与CD8^＋T细胞浸润数量无明显相关性（p〉0．05）。本实验发现TAMs在宫颈癌微环境内大量分布，且与肿瘤局部免疫抑制及淋巴结转移和癌栓有关。

Journal of Mosquito Research （JMR）3240-3240

高脂、禁食条件下CIDEC互作蛋白的分析3241-3248

摘要：脂肪过度沉积是引起肥胖的最主要原因。脂肪沉积水平受到脂肪代谢的影响。CIDEC是近年研究新发现的一种脂肪滴结合蛋白，是调控脂肪滴发育和脂肪沉积的关键因子。本研究以小鼠为动物模型，采用Co-IP和质谱分析等实验方法，从蛋白功能、亚细胞定位、GO、KEGG功能及其富集度等方面解析CIDEC在高脂和禁食条件下互作蛋白的差异，为理解CIDEC感应机体能量状态的分子机制，及在不同生理条件下的信号传导和功能转换提供实验依据。

纳米氢氧化镁对抗菌类药物的增效作用3249-3254

摘要：以纳米氢氧化镁为载体，研究了纳米氢氧化镁载体对诺氟沙星药物的负载情况以及对大肠杆菌的抗菌效果的影响。研究表明，利用共沉淀法合成的纳米颗粒为较规则的片状结构，分散性较好，且纳米颗粒在101面的尺寸约为14．0nm。通过傅里叶红外光谱分析发现氢氧化镁与诺氟沙星负载后并没有出现新的特征峰，它们之间主要是以物理包埋的方式结合。以不同含量的纳米氢氧化镁载体与诺氟沙星进行结合，根据上清液中诺氟沙星的量可计算载药量和包封率。当氢氧化镁的含量从1mg增加到2mg时，载药量从40．58％提高到59．00％，包封率从81．15％增加到88．50％，这表明氢氧化镁的用量可以影响其对诺氟沙星的载药量和包封率。此外，诺氟沙星、纳米氢氧化镁载体和诺氟沙星-纳米氢氧化镁载体与大肠杆菌共培养，测定OD600与涂平板实验检测24h后细菌的致死情况，诺氟沙星对大肠杆菌仅有23％的抑制率，而经氢氧化镁负载后抑制率提高至62％，这说明诺氟沙星在氢氧化镁的协同作用下，能够明显提高药物对大肠杆菌的抗菌效果。

International Journal of Super Species Research3254-3254

人造抗瘤活性肽的构建及其抗瘤作用3255-3259

摘要：通过构建融合RGD肽的NF-κB抑制肽，获取新型抗瘤融合肽，研究其抗肿瘤效果。构建人造抗瘤活性肽pEGFP-C1-ARP表达载体，转染COS7细胞，获取人造抗瘤活性肽，利用Western blotting法检测PC-3M细胞A20、Bcl2、CCND1；通过观察ARP对荷人前列腺癌PC-3M裸鼠肿瘤抑制实验，研究人造抗瘤活性肽的抗肿瘤效果。限制性内切酶酶切鉴定与DNA测序证实合成人造抗瘤活性肽真核载体寡核苷酸链插入正确。Western blotting检测结果表明转染后PC-3M细胞A20蛋白表达增加。并抑制凋亡抑制基因Bcl2的表达，动物实验证实人造抗瘤活性肽可显著抑制肿瘤生长。本研究成功构建人造抗瘤活性肽，其对肿瘤细胞具有明显的消除效应。

人钙结合蛋白S100A9基因克隆表达纯化及其对SH—SY5Y细胞作用的研究3260-3267

摘要：钙结合蛋白S100A9在许多慢性疾病中聚集并可能在一些自身免疫性如老年痴呆中发挥了重要的作用。大量的报道也表明S100A9日益获得人们的注意。通过获取足量重组人S100A9蛋白，探索其对神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y的作用及机制。运用全基因合成法合成人S100A9基因，构建人S100A9原核表达重组质粒pET28a—S100A9，经单酶切法及PCR法鉴定重组质粒已构建成功。利用异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPT6）在18℃、25℃、37℃分别诱导表达，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS．PAGE）和Western blotting鉴定，结果显示18℃时蛋白大量表达于上清中，在37℃时大量表达于包涵体。采用镍亲和层析法分别纯化两种来源重组蛋白，透析后低温冻干获得蛋白粉。使用CCK-8法检测上清来源和包涵体来源的S100A9蛋白对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖抑制作用。结果显示两种来源重组蛋白对SH．SY5Y细胞具有生长抑制作用，在浓度为0．05mg／mL时即有明显抑制作用（p〈0．01），且二者作用无明显差异（p〈0．01）。采用AO／EB双重染色和流式细胞术初步检测S100A9对SH—SY5Y细胞的增殖抑制机理，结果显示该蛋白可促进SH—SY5Y细胞的凋亡。两种来源蛋白之间的比较也显示二者对于SH-SY5Y细胞作用无明显差异（p〈0．05）。本研究成功获得足量S100A9重组蛋白，且两种来源S100A9蛋白作用于SH-SY5Y细胞的生物学效应一致。

参麦注射液对肺腺癌耐药细胞株的逆转作用3268-3272

摘要：本研究探讨了参麦注射液对人肺腺癌耐药细胞株A549／DTX（多西他赛）的耐药逆转作用，并初步分析其作用机制。以MTT法检测参麦注射液、多西他赛及联合应用对耐药细胞株的增殖抑制率，并计算耐药逆转倍数。用流式细胞术测定参麦注射液联合多西他赛对A549／DTX细胞株的促凋亡作用；用Western blotting分析参麦注射液对A549／DTX细胞株的凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达水平的影响。研究表明，参麦注射液增加耐药细胞株对DTX的敏感性，耐药逆转倍数为3．92，并明显增强DTX对A549／DTX细胞株的促凋亡作用。同时抑制了Bcl-2和P—gP蛋白表达，与对照组相比差异显著（p〈0．05）。故参麦注射液能部分逆转A549／DTX细胞株耐药性，其作用通过诱导细胞凋亡及降低P—gp表达实现。

脊髓损伤术后长时间制动对患者术后恢复的影响3273-3276

摘要：本研究目的是探讨脊髓损伤术后长时间制动对患者术后恢复的影响。选取腰椎骨折患者60例，所有患者均进行了手术治疗；有30例患者术后早期主被运动称为运动组，另外30例患者完全制动称为制动组，观察两组患者在治疗后4周和治疗后8周的ASIA和WISCIⅡ运动评分，同时观察两组患者在术前、治疗后第1周、4周和8周的双下肢主动关节评分。分析两组患者的下肢主要关节的活动度，在第1周、第4周和第8周时均存在差异（p〈0．05），制动组患者主动关节活动度比运动组明显受限。两组患者在手术治疗后随着时间延长，运动能力均显著改善，前后评分存在统计学差异（p〈0．05）；发现第4周时两组患者的ASIA运动评分存在差异（p〈0．05），而WISCIⅡ运动评分无明显差异（p〉0．5）；第8周时两组患者的两个运动评分存在显著差异，差异具有统计学意义（p〈0．05），其中制动组的患者在第8周时运动能力显著低于运动组的患者。脊髓损伤术后制动时间过长严重影响患者的术后运动恢复，应合理管理患者的术后制动时间，同时制动期间即使简单的主被动运动也促进患者术后恢复。

International Journal of Molecular Veterinary Research （IJMVR）3276-3276

高压氧对颅脑外伤患者的认知功能及肺部感染的临床治疗作用3277-3280

摘要：本研究探讨高压氧对颅脑外伤患者的认知功能及肺部感染的临床治疗作用。我们收集颅脑外伤患者100例，分为试验组和对照组各50例，试验组患者在常规临床治疗基础上增加高压氧治疗，对照组患者进接受常规临床治疗。观察患者住院期间在治疗前、第1周、第2周和第3周时的GCS评分的变化，第2周和第3周时的MMSE评分，同时记录患者肺部感染的发生率。两组患者的GCS和MMSE评分随着时间的延长逐渐增大，在第2周和第3周时两者患者的GCS和MMSE评分均存在显著差异（p〈0．01），其中试验组的GCS和MMSE评分均大于对照组的相应评分。比较两组患者的肺部感染率，对照组的发生率78％显著大于试验组的48％（p〈0．01）。早期高压氧治疗可以促进脑外伤患者的觉醒，提高患者认知功能，降低肺部感染率的发生。

International Journal of Marine Science （IJMS）3280-3280