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摘要:目的探讨miR-146a对血小板免疫炎症功能的影响。方法体外培养双分化潜能的K562细胞,佛波酯诱导其向巨核细胞系分化,分别导入miR-146a模拟物和阻遏物。ELISA检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平;Western blot及RT-PCR检测转染细胞后Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB蛋白和mRNA的表达水平;通过荧光素酶报告基因法验证IL-1受体相关激酶1(IRAK1)是否含有miR-146a的靶位点,观察miR-146a对靶基因IRAK1的影响。结果过表达miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平降低,TLR4蛋白表达明显升高,NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低。抑制miR-146a后,细胞上清中IL-6、TNF-α水平升高,TLR4蛋白表达明显降低,NF-κB mRNA和蛋白表达明显升高。双荧光素酶报告实验证实Pmir-Report-WT-IRAK1和miR-146amimic共转染组的荧光素酶报告基因活性明显受到抑制,miR-146a过表达可抑制IRAK1蛋白表达,而对IRAK1mRNA表达无影响。结论 miR-146a可能通过IRAK1作用于TLR4/NF-κB信号通路,从而调控血小板免疫炎症。
摘要:目的研究人卵巢癌细胞顺铂耐药与上皮间质转化(EMT)的关系。方法以顺铂低剂量诱导结合间歇大剂量冲击的方法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP、OVCAR3/DDP。观察亲本细胞(A2780、OVCAR3)与耐药细胞(A2780/DDP、OVCAR3/DDP)形态;采用Transwell细胞迁移实验及细胞侵袭实验检查各细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测EMT标记物E-cadherin、Vimentin的表达,免疫荧光检测E-cadherin的亚细胞定位。以5ng/mL TGF-β体外诱导卵巢癌细胞A2780发生EMT改变,MTS检测其对顺铂化疗敏感性的影响。结果 A2780/DDP、OVCAR3/DDP较A2780、OVCAR3的IC50分别提高了9.58、13.19倍。A2780/DDP、OVCAR3/DDP呈间充质细胞特点,获得侵袭、迁移能力,且上皮分子标志物E-cadherin表达下调,间充质分子标志物Vimentin表达上调。TGF-β体外诱导卵巢癌细胞发生EMT改变后对顺铂敏感性明显降低。结论 EMT与卵巢癌细胞顺铂耐药密切相关。
摘要:目的探讨胰腺神经内分泌肿瘤(PNEN)的临床及病理特征。方法收集8例PNEN的临床及病理资料,依据WHO(2017)内分泌肿瘤的新分级标准重新分级,分析其临床病理特征、治疗及预后。结果 8例中男4例,女4例,中位年龄45岁;肿瘤最大径1.5~10.0cm,中位数6.0cm。胰腺神经内分泌瘤(PNET)G1级2例、G2级4例,胰腺神经内分泌癌(PNEC)2例,无PNET G3级病例。显微镜下示肿瘤多由小圆细胞构成,排列呈假菊形团状、梁索状、实体性。免疫组织化学示7例CgA阳性,6例Syn阳性,1例PNET G2级ATRX阴性,1例PNEC TP53阳性。本组7例获得随访,随访时间10个月至4年,4例出现肝转移,其中1例伴有腹腔转移。结论 PNEN是一类罕见的肿瘤,多无典型症状,确诊主要依据其病理形态特征和免疫组织化学表型。
摘要:目的探讨血清胱抑素C(CysC)和视黄醇结合蛋白(RBP)水平评价血清肌酐(Scr)参考范围调整的临床价值。方法对重庆医科大学附属第二医院2017年12月21日至2018年4月25日体检中心20 126例病例Scr测定情况进行回顾性分析,1 874例同时有Scr和CysC结果,对372例按照WS/T 404参考区间(新参考区间)Scr升高但无CysC结果的样本重新测定CysC和RBP。结果新参考区间更加适用于临床95%置信区间。采用CysC升高为评价肾损伤的参考方法,以新参考区间为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=198.648,P=0.000);以132.3μmol/L(旧参考区间上限)为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=82.337,P=0.000)。以新参考区间为截断值的Scr与CysC的相关性较旧参考区间更好。当Scr>108μmol/L时,RBP才出现升高,存在正相关。结论新参考区间的截断值更加有助于临床辅助诊断。