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摘要:目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响。方法 以内蒙古自治区人民医院和包头市肿瘤医院2013年3月至2015年3月病理室确诊的49例肾癌患者为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)及反转录(RT)-PCR法检测肾癌组织及癌旁正常组织、肾癌细胞株及正常肾小管上皮细胞HK-2中MIF蛋白及mRNA表达;利用脂质体将siRNA MIF及siRNA NC转染到肾癌细胞中,Western blot及RT-PCR检测转染效果,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果 肾癌组织中MIF蛋白及mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(0.89±0.09 vs.0.18±0.02,1.19±0.04 vs.0.19±0.01,P〈0.05),肾癌细胞株ACHN、769-p、786-O、Caki-1中MIF蛋白及mRNA表达水平明显高于肾小管上皮细胞HK-2(P〈0.05)。与siRNA NC组比较,siRNA MIF组中MIF蛋白及mRNA表达水平明显下调(P〈0.05),细胞活力及侵袭能力降低(P〈0.05),HIF-1α及MMP9表达水平下调(P〈0.05)。结论 MIF在肾癌中高表达,下调MIF表达能明显抑制肾癌细胞的侵袭能力,可能与抑制HIF-1α/MMP9信号通路有关。
摘要:目的 将一定比例的脱镁叶绿酸引入聚乙烯醇-硫辛酸聚合物中,分析其理化性质及光热特性。方法 采用“一步法”合成聚乙烯醇-硫辛酸-脱镁叶绿酸(PLP)聚合物,激光粒径测定仪测定PLP纳米颗粒(PLPN)的粒径、多分散系数和ζ电位,电镜下观察形态,分光光度法和热成像仪初步探索其体外荧光和光热特性;建立卵巢癌裸鼠模型,行初步的体内实验评价。结果 合成的PLP聚合物在水相中自组装形成规则的球状纳米颗粒,电镜下呈紧密的球状结构,平均粒径、多分散系数和ζ电位分别为(22.92±9.00)nm、0.117±0.056和(-25.43±0.77)mV;PLPN在磷酸盐缓冲液(PBS)中的荧光强度明显低于十二烷基硫酸钠(SDS)溶液(P〈0.05),而近红外光照后温度明显高于SDS溶液(P〈0.05);在荷瘤裸鼠模型中,PLPN可靶向聚集在肿瘤部位,近红外光激发后能明显提高肿瘤部位的温度,并能杀伤肿瘤细胞。结论 PLPN发射红色荧光,能靶向聚集在肿瘤部位并行活体显像,且在体内外均具有显著的光热转换特性,在体内能有效抑制肿瘤的生长。
摘要:目的 观察丙酮酸盐替代乳酸盐腹膜透析液行腹腔复苏对失血性休克家兔肠黏膜屏障的影响。方法 雄性健康家兔48只以Wiggers改良方法制备失血性休克模型,将其分为常规静脉复苏组(A组)、常规静脉复苏+腹腔注射乳酸盐腹膜透析液组(B组)、常规静脉复苏+腹腔注射丙酮酸盐腹膜透析液组(C组)和静脉丙酮酸盐液复苏+腹腔注射丙酮酸盐腹膜透析液组(D组)。检测休克前、休克后60min及复苏后60、180min静脉血二胺氧化酶(DAO)和脂多糖(LPS)水平。于观察终点取距回盲部5cm的一段回肠,测定组织干/湿质量比、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察其病理形态学改变。结果 4组休克前血浆DAO、LPS水平比较,差异均无统计学意义(P〉0.05);休克后60min均较休克前升高,但组间比较差异均无统计学意义(P〉0.05);复苏后60、180min,A、B、C、D组血浆DAO、LPS水平依次降低(P〈0.05)。复苏后180min,A、B、C、D组回肠组织MDA水平依次降低(P〈0.05),SOD活力水平、组织干/湿质量比依次升高(P〈0.05),且组织损伤程度也依次减轻。结论 丙酮酸盐替代乳酸盐腹膜透析液腹腔复苏可更有效地保护失血性休克家兔肠组织细胞和减轻肠黏膜损伤。
摘要:目的 观察经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)及卵丘细胞(CCs)中生长分化因子9(GDF9)及Bim表达的影响,探讨其治疗效果及作用机制。方法 制备大鼠超排卵卵巢模型,收集COCs和CCs,分别与雌性SD超排卵大鼠空白血清和经后增殖方药物血清在体外共同培养,各分3组:空白血清组(空白组)、含药血清组(对照组)、含药血清+GDF9受体阻断剂组(实验组),共6组。24h后收集COCs和CCs,实时荧光定量PCR检测GDF9和Bim mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测GDF9蛋白表达水平。结果 (1)对照组COCs中GDF9mRNA表达水平明显高于空白组和实验组(P〈0.05)。(2)CCs中GDF9mRNA表达水平在3组间的差异性比较结果与COCs中一致;对照组和实验组CCs中Bim mRNA表达水平均明显低于空白组(P〈0.05)。结论 经后增殖方含药血清能提高COCs和CCs中GDF9的表达水平,维持COCs和CCs中Bim的低水平表达,抑制细胞凋亡,促进卵泡发育;COCs较剔除卵母细胞的CCs更有利于GDF9mRNA的表达。
摘要:目的 分析骨髓间充质干细胞(BMSCs)与两亲性肽三维凝胶的相容性。方法 取3周龄SD健康大鼠3只,分离股骨、胫骨获取BMSCs,采用流式细胞术检测BMSCs表面抗原;将10mg/mL含精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰(RGD)环两亲性肽溶液加入等体积DMEM/F12培养基数秒后自组装成三维凝胶,透射电镜显微镜(TEM)下观察三维凝胶结构;1×10 6 cells/mL BMSCs悬液与RGD环两性亲肽混合形成三维培养体系,1×10 6 cells/mL BMSCs悬液与多聚赖氨酸混合形成二维培养体系,无血清培养;CCK-8法观察细胞生长情况,钙黄绿素乙酰氧基甲酯/碘化丙啶(PI)双标染色,荧光显微镜观察RGD环两性亲肽对BMSCs增殖的影响。结果 分离培养的细胞高表达CD29、CD90,不表达或低表达CD34、CD45;TEM显示凝胶由多空纳米纤维构成,纳米纤维直径2-5nm,长度100-1 000nm;质谱测得合成多肽相对分子质量为1 256.37,与理论值一致;高效液相色谱分析两性亲肽纯度为95.88%;钙黄绿素乙酰氧基甲酯/PI双标染色显示,三维培养体系中,30min后少数BMSCs出现死亡,12h后细胞开始增殖,增殖较二维培养活跃,差异有统计学意义(P〈0.05);CCK-8细胞计数显示,三维培养体系细胞增殖活力高于二维培养体系,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 RGD两性亲肽与BMSCs有良好的生物相容性,可能成为组织工程支架材料。
摘要:目的 探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响。方法 不同浓度(0、10、20、40、60μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest33258荧光染色法观察细胞凋亡情况。结果 姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且随姜黄素浓度增加,CNE-2细胞抑制率呈上升趋势(P〈0.05),姜黄素作用CNE-2细胞24、48、72h的半抑制浓度(IC50)分别为(23.54±0.36)、(18.31±0.42)、(8.56±0.37)μmol/L,即姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且呈现明显浓度、时间依赖性;流式细胞检测结果显示,0、10、20、40、60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞,凋亡率随着姜黄素浓度增加而上升;荧光染色结果可见,CNE-2细胞未给予姜黄素处理,细胞呈圆形或者椭圆形,细胞核大小均匀一致,染色质分布均匀的淡蓝色荧光;10μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞胞体缩小,细胞核染色质凝聚,呈颗粒状亮蓝色荧光;20μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞出现胞体缩小,细胞核浓缩、染色质不均匀,出现凋亡小体,甚至出现核碎裂;40和60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞凋亡小体数量增多,出现大量核碎裂。结论 姜黄素对NPC细胞株CNE-2细胞增殖具有明显抑制作用,且促进CNE-2细胞凋亡。
摘要:目的 探讨滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)百分率在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及意义。方法 选取该院2016年9-11月收治的RA患者,分为RA活动组与RA稳定组,各35例。另选取同期行健康体检者35例作为健康对照组。用流式细胞术检测受试者外周血CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞的百分率,分析RA患者外周血Tfh细胞百分率与28个关节疾病活动度评分(DAS28)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF)水平的相关性。结果 RA活动组外周血Tfh细胞百分率[(0.84±0.16)%]明显高于RA稳定组[(0.64±0.15)%]及健康对照组[(0.56±0.14)%],差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 外周血中Tfh细胞百分率的增加可能与RA的发生、发展有关。
摘要:目的 探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)、α-L岩藻糖苷酶(AFU)和甲胎蛋白(AFP)联合检测对早期肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法 收集2016年3月至2017年3月该院肝病患者222例,根据疾病类型分为早期HCC组(74例)、晚期HCC组(27例)、肝硬化组(74例)、慢性乙型肝炎组(47例),另选取同期体检健康者49例作为健康对照组。分别测定各组血清AFP、AFU和GP73水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价3项指标单独和联合检测对早期HCC的诊断价值。结果 早期HCC组GP73、AFU和AFP水平均明显高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组和健康对照组(P〈0.05)。在肝癌筛查时,AFP单独诊断的ROC曲线下面积(AUC)为0.910(95%CI:0.864-0.936),两项指标联合时GP73和AFP联合诊断的AUC最大[0.925(95%CI:0.889-0.950)],灵敏度最高(95.0%)。在鉴别诊断早期HCC与肝硬化时,单独诊断以GP73的AUC最大[0.842(95%CI:0.746-0.879)],特异度最高(86.5%);两项指标联合时GP73和AFU联合诊断的AUC最大[0.901(95%CI:0.788-0.907)]。结论 GP73与AFP联合检测可以提高HCC筛查的诊断效能,GP73和AFU联合诊断能够提高早期HCC诊断效能,对于早期HCC和肝硬化的鉴别诊断具有重要意义。
摘要:目的 分析常规镜检、荧光PCR核酸扩增法和真菌显色培养法在阴道分泌物真菌检测结果的相关性。方法 选取2014-2016年于该院就诊的疑似阴道炎患者,收集镜检阴道分泌物真菌阳性和阴性标本各500例,用荧光PCR核酸扩增法鉴定念珠菌类型,并将100份荧光PCR核酸扩增法检测结果阳性标本进行真菌微生物培养,验证分型结果的正确率。结果荧光PCR核酸扩增法和常规镜检一致性检验Kappa值为0.632,二者一致性差。500例患者阴道分泌物常规镜检阳性标本,荧光PCR核酸扩增法测得白色念珠菌感染382例(76.4%),光滑假丝酵母菌感染73例(14.6%),热带假丝酵母菌感染10例(2.0%),白色念珠菌合并光滑假丝酵母菌感染3例(0.6%),其他真菌感染32例(6.4%)。500例患者阴道分泌物常规镜检阴性标本,荧光PCR核酸扩增法鉴定阳性共152例,其中白色念珠菌130例,光滑假丝酵母菌16例,热带假丝酵母菌6例。荧光PCR核酸扩增法与CHROMAgar快速显色法检测结果比较,差异无统计学意义(χ2=0.131,P=0.936)。结论 对于有临床表现而镜检阴性的患者,建议行荧光PCR核酸扩增快速分型鉴定或真菌培养鉴定。
摘要:目的 探讨超声弹性成像应变率比值对乳腺增生症伴纤维腺瘤与乳腺癌BI-RADS分级的校正价值。方法 回顾性分析2012年1月至2016年10月在该院经手术或穿刺活检证实的120例乳腺增生症伴纤维腺瘤与120例乳腺癌患者资料,总结其边界、形态、内部回声、后方回声、纵横比、钙化、血流分布、阻力指数、BI-RADS分级、超声弹性成像应变率比值等特点,分析超声弹性成像应变率比值对乳腺增生症伴纤维腺瘤与乳腺癌BI-RADS分级的校正价值。结果 乳腺增生症伴纤维腺瘤与乳腺癌超声图像在边界、后方回声、纵横比、钙化、超声弹性成像应变率比值之间差异有统计学意义(P〈0.05);血流分布方面,乳腺增生症伴纤维腺瘤主要表现为0-Ⅰ级,阻力指数(RI)〈0.7,乳腺癌多表现为Ⅱ-Ⅲ级,RI≥0.7,差异有统计学意义(P〈0.05)。超声弹性成像应变率比值对两者BI-RADS分级校正后诊断符合率有明显提高。结论 乳腺增生症伴纤维腺瘤与乳腺癌具有重叠超声表现,超声弹性成像应变率比值对两者BI-RADS分级校正后的定性诊断能力有提高,具有一定的临床价值。
摘要:目的 观察“扶正清肺汤”联合西医基础治疗对获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)肺部感染的临床疗效。方法 选取2013年11月至2016年12月西南医科大学附属医院收治的符合入选标准的艾滋病肺部感染患者154例,其中观察组86例,采用“扶正清肺汤”联合常规西医治疗方法治疗;对照组68例,只采用西医疗法治疗。观察治疗前后两组患者CD4+T淋巴细胞计数,降钙素原(PCT)与C反应蛋白(CRP)水平,以及临床症状改善情况。结果 治疗前两组患者CD4+T淋巴细胞计数、PCT及CRP水平比较,差异均无统计学意义(P〉0.05);治疗7d后,观察组患者PCT及CRP水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);治疗3个月后观察组CD4+T淋巴细胞计数高于对照组,PCT及CRP水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);观察组总有效率(87.21%)优于对照组(76.74%),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 “扶正清肺汤”联合常规西医治疗艾滋病合并肺部感染可提高抗感染疗效,降低炎性反应,提升CD4+T淋巴细胞计数,缓解患者临床症状,改善其生活质量。
摘要:目的 分析经阴道三维超声在宫腔粘连中的诊断价值。方法 回顾性分析2014年11月至2016年11月该院收治的经宫腔镜手术确诊并于术前行经阴道二维超声、三维超声检查的75例患者资料,以宫腔镜为金标准,比较分析经阴道二维超声、三维超声检查的准确度。结果 经阴道三维超声诊断宫腔粘连的准确率为87.7%,二维超声诊断准确率为69.2%;经阴道二维超声检出轻、中、重度宫腔粘连的准确率分别为56.7%、76.9%、88.9%,经阴道三维超声准确率分别为76.7%、96.2%、100.0%;经阴道二维超声检出周围型、中央型、混合型宫腔粘连的准确率分别为66.7%、76.7%、54.5%,经阴三维超声准确率分别为83.3%、86.7%、100.0%;经阴道三维超声诊断准确率明显优于经阴道二维超声,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 与经阴道二维超声比较,经阴道三维超声对宫腔粘连的诊断更为准确,能够为临床医生提供更多的信息。
摘要:目的 探讨新疆维吾尔自治区维吾尔族溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织中炎性细胞因子及信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT3)表达与汉族UC患者的差异。方法 选取2015年6月至2016年10月该院住院UC患者30例(维吾尔族15例,汉族15例)作为UC组,另选取同期健康检查者26例(维吾尔族13例,汉族13例)作为对照组,取受试者肠黏膜组织采用反转录PCR检测干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-22、IL-17A、IL-17F mRNA表达水平,并采用免疫组织化学法进行STAT3的检测。结果 与维吾尔族对照组相比,维吾尔族UC组患者IFN-γ、IL-22、IL-17A、IL-17FmRNA表达水平都上调,差异均有统计学意义(P〈0.05)。通过免疫组织化学法,STAT3在肠黏膜上皮细胞细胞质中着色,汉族、维吾尔族UC组阳性表达率均高于相应对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 在新疆维吾尔自治区,维吾尔族和汉族UC患者肠黏膜IFN-γ、IL-22、IL-17A、IL-17F及STAT3表达明显增高,但上述因子在维吾尔族与汉族患者UC的发生、发展中可能无明显差异。
摘要:目的 探讨副神经化上斜方肌肌皮瓣即刻修复舌鳞癌手术后舌体缺损的临床疗效。方法 收集2015年1月至2016年12月重庆医科大学附属口腔医院口腔颌面外科收治的6例经病理确诊的舌鳞癌患者,均行舌颈联合根治性颈清术,术中采用副神经和舌下神经吻合术的上斜方肌肌皮瓣同期修复舌缺损。供区创面直接拉拢缝合,未行植皮。结果 6例皮瓣全部成活。6个月至1年后,皮瓣呈现黏膜化,类似口腔黏膜形态,质地良好。再造舌的早期(3个月内)动度主要依靠残留舌体的运动。6个月后再造舌有明显动度,但灵活度较健侧差,患者对语言、吞咽等功能满意。结论 副神经化上斜方肌肌皮瓣是修复舌鳞癌术后缺损理想皮瓣之一。
摘要:目的 探讨普伐他汀对2型糖尿病合并高血压患者颈动脉粥样硬化的影响。方法 选取2015年4月至2016年4月该院收治的2型糖尿病合并高血压患者106例,将其分为常规治疗组(52例)和普伐他汀组(54例);常规治疗组患者给予控制饮食、降血糖、控制血压及对症支持治疗等常规治疗,普伐他汀组患者在常规治疗的基础上加用普伐他汀;治疗前后应用高频超声检测技术检测颈动脉内膜中层厚度(IMT),记录斑块检出率、颈动脉斑块积分的变化,同时检测血清血脂和高敏C反应蛋白(hsCRP)的变化。结果 常规治疗组患者上述各项指标在治疗前后比较,差异无统计学意义(P〉0.05);普伐他汀组患者治疗后IMT值、斑块积分、斑块检出率均较治疗前降低,血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及hs-CRP水平亦较治疗前降低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 普伐他汀可以有效而安全地改善2型糖尿病合并高血压患者颈动脉粥样硬化程度。
摘要:目的 探索血清钙黏蛋白13(CDH13)甲基化对非肌层浸润性膀胱癌行经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)治疗后进展的预测作用。方法 选取2010年1月至2012年1月在该院行TURBT治疗的非肌层浸润性膀胱癌患者98例,应用甲基化特异性PCR检测患者血清CDH13甲基化状态,并分析其与患者临床病理资料及术后进展情况的相关性。结果 52例(53.1%)患者血清中检测到CDH13甲基化,并且血清CDH13甲基化与肿瘤大小、分级及数目密切相关(P〈0.05)。在随访过程中有20例(20.4%)患者出现肿瘤进展,Kaplan-Meier分析和log-rank检验发现存在血清CDH13甲基化的患者无进展生存率低于血清CDH13未甲基化的患者,差异有统计学意义(P=0.007)。Cox回归分析显示,血清CDH13甲基化是非肌层浸润性膀胱癌行TURBT治疗后进展的独立危险因素。结论 血清CDH13甲基化可作为非肌层浸润性膀胱癌行TURBT治疗后进展的预测指标。
摘要:目的 探讨胸腰段青少年特发性脊柱侧凸(AIS)远端融合椎(LIV)新的选择标准。方法 纳入融合胸腰弯且经过1.5年以上随访的患者52例,患者均符合新的AIS选择标准,即术前站立正位X线片骶正中线(CSVL)在侧凸远端接触到的第1椎体为触及椎(TV),且该TV应符合以下要求:Nash-Moe旋转度小于或等于Ⅱ度;凹侧Bending像上CSVL位于TV两侧椎弓根之间;不存在胸腰段及腰段后凸畸形;CSVL距离TV 3~4mm的患者也列入研究范围。所有患者均由同一组经验丰富的脊柱外科医师实施手术,均采用后路全椎弓根钉内固定矫形融合。术前、术后即刻、终末随访均测站立位脊柱全长正侧X线片、卧位左右Bending像,并测量主弯Cobb角、冠状面躯干偏移(TS)、LIV倾斜度(LIVT)、LIV尾侧椎间盘角度(LIVA),观察TV、稳定椎等位置,记录并进行统计分析。结果 所有患者均随访18个月以上,平均(23±3)个月。术前、术后即刻、末次随访主弯Cobb角分别为(49.32±11.37)°、(9.08±6.78)°、(10.65±6.68)°,LIVT分为(21.76±4.68)°、(5.17±4.09)°、(5.16±3.08)°,LIVA分别为(7.19±5.16)°、(3.16±2.78)°、(4.17±3.28)°,术后即刻、末次随访时上述各项指标与术前比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。术前躯干失代偿患者27例,末次随访时5例患者并发躯干失代偿,未较术前增加。将TV作为LIV与采用稳定椎做LIV相比,前者可以节省(1.42±0.45)个融合节段。结论 采用新标准进行胸腰段AIS手术治疗比目前临床上常用的方法节省融合节段。
摘要:目的 探索建立长期照护失能等级评估量表。方法 基于文献回顾与长期照护需求的实地调研制订失能等级评估的初始量表,再结合德尔菲专家咨询法对22名专家进行咨询。结果 经过两轮专家咨询,一致通过的失能等级评估量表包括:感知觉、日常生活能力、认知能力、情绪行为等4项一级指标,重要性均数(M)在4.64-5.00分之间,均大于或等于4.0分,变异系数(CV)在0.00%-13.86%之间,均小于或等于25%,满分率(Fr)在72.73%-100.00%之间,均大于或等于50%,认可率(Ar)在90.91%-100.00%之间,均大于或等于80%,专家达成一致性意见;22项二级指标,其M在4.27-4.95分之间,均大于或等于4.0分;CV在4.20%-25.62%之间,Fr在63.64%-95.46%之间,Ar在77.27%-100.00%之间,新增触觉、坐立位起身两项,将床椅转移、近期记忆、程序记忆分别修改为坐凳椅、瞬时记忆及短期记忆,专家达成一致性意见。结论 补充更改的长期照护失能等级评估量表具有较高的权威性与专家一致性,可为长期照护保险制度的失能等级评估工作提供理论参考。