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摘要:目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制,为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞(HKC)为研究对象,采用不同浓度的姜黄素(0、0.780、1.563、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000p.mol/L)刺激HKC72h,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响;应用不同浓度TGF-β1(0、1、5、10ng/mL)单独或联合姜黄素(6.250、12.500、25.000、50.000μmol/L和100.000μmol/L)共同刺激HKC细胞72h,观察细胞形态变化,应用逆转录PCR(RT-PCR)检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果HKC贴壁生长,呈铺路石样外观。姜黄素刺激对细胞形态无影响;TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化,且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加(P〈0.05,P〈0.01);MTT结果显示:姜黄素在3.125-25.000μmol/L浓度范围内,能显著促进HKC增殖(P〈0.05,P〈0.01);姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变,以12.500-50.000μmol/L的姜黄素作用最明显,同时,下调TGF-β1基因和蛋白的表达,相反上调BMP-7基因和蛋白表达,并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降(P〈0.05,P〈0.01)。结论姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型,能对抗TGF-β1诱导的HKc向梭形细胞转化,抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达,而促进BMP-7表达。
摘要:目的调查流行于钦南区的HIV-1亚型种类并分析其基因变异特征。方法抽取100例未抗病毒治疗的HIV-1感染者,从血样中提取病毒RNA或前病毒DNA,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HIV-1gag基因和pol基因片段并测序,用系统进化树分析其亚型,并计算gag和pol区的基因离散率。结果97份血样获得gag基因序列或pol基因序列,4份血样的gag与pol分型不一致,其他93份分型明确,其中CRF01_AE重组型、CRF07_BC重组型、CRF08BC重组型及G亚型分别占76.34%(71/93)、9.68%(9/93)、12.90%(12/93)和1.07%(1/93)。CRF08_BC的gag基因离散率为0.059±0.005,高于CRF07_BC的0.053±0.005(P〈O.01)和CRF01_AE的0.049±0.004(P〈0.01)。CRF01_AE的pol基因离散率为0.044±0.003,高于CRF07_BC的0.035±0.004(P〈0.01)和CRF08_BC的0.033±0.003(P〈0.01)。结论钦南区HIV-1存在至少3种流行亚型,其中CRF01_AE是最主要的亚型,不同基因区的变异程度有所不同。
摘要:目的经腹腔和气管建立大鼠芥子气(SM)肺损伤的动物模型,比较两种大鼠急性肺损伤模型炎性反应的差异。方法选取Sprague Dawley大鼠136只,分为5组,正常对照组8只,其他4个组(腹腔SM组、腹腔丙二醇对照组、气管SM组、气管丙二醇对照组)每组32只。腹腔SM组腹腔内注入稀释的SM0.1mL(0.96LD50=8mg/kg),气管SM组气管内注入稀释的SM0.1mL(0.98LD50=2mg/kg),正常对照组。不做任何处理。ELlSA法检测支气管肺泡灌洗液和血液标本,HE染色和免疫组织化学判断炎性反应情况。结果腹腔SM组各时间段支气管肺泡灌洗液蛋白含量和细胞计数与气管SM组相比显著升高(P〈0.05);腹腔SM组各时间段血清TNF-α、IL-1β、IL-6与气管sM组相比显著升高(P〈0.05);腹腔SM组各时间段肺泡间隔T、B淋巴细胞和巨噬细胞阳性表达率与气管SM组相比显著增加(P〈0.05)。结论失鼠在sMLD50相似的情况下,腹腔sM组支气管肺泡灌洗液、肺泡间隔及血清炎性反应指标明显高于气管SM组。
摘要:目的研究中药金骨莲胶囊对兔膝骨关节炎(OA)关节软骨中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,探讨其可能作用机制。方法40只家免分为4组:空白对照组(10只)、模型对照组(10只)、金骨莲胶囊组(10只,74.4mg·kg-1·d-1)、氨基葡萄糖组(10只,150mg·kg-1·d-1)。除空白对照组外其余均按改良Hulth法复制0A模型,术后当天开始药物灌胃,对照组仅灌服等量生理盐水,1次/天,连用8周。8周后处死家兔取右膝股骨髁及胫骨平台大体观察。采用Mankin评分评价关节软骨退变情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测股骨内侧髁负重区关节软骨IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量。结果空白对照组、金骨莲胶囊组、氨基葡萄糖组和模型对照组Mankin评分分别为(1.380土0.183)、(2.580±0.464)、(5.250±0.143)、(10.380±0.183)分,Mankin评分依次升高,组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。金骨莲胶囊组和氨基葡萄糖组3种炎性因子mRNA表达量均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);中药金骨莲胶囊在下调IL-1βmRNA方面与氨基葡萄糖作用相当,差异无统计学意义(P=0.271)。金骨莲胶囊在降低IL-6和TNF-αmRNA方面优于氨基葡萄糖作用,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论中药金骨莲胶囊可不同程度下调关节软骨中IL-1β、IL-6和TNF-a炎症因子的表达,使软骨退变的部分因素得到控制,从而起到保护关节软骨的作用。
摘要:目的构建靶向甲酰肽受体(FPR)基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定转染的U87细胞系。方法设计并合成FPR基因特异性的shRNA序列,构建PDS019_pL/shRNA/GFP/F-FPR慢病毒载体,通过脂质体转染293T细胞包装成FPR慢病毒颗粒,感染U87细胞。荧光显微镜观察转染效果,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法(Westernblot)法检测FPR干扰效率。结果成功构建FPR基因shRNA慢病毒表达载体。稳定转染U87细胞后,荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白。实时荧光定量PCR及Westernblot证实PDS019_pL/shRNA/GFP/F—FPR慢病毒载体具有良好的干扰效果。结论成功构建FPRshRNA稳定转染的U87细胞系。
摘要:目的探讨动脉灌注脑低温治疗大鼠大面积脑梗死的效果。方法32只大鼠被分成:模型组、冰帽组、全身低温组和颈内动脉的冷盐水灌注(ICSD组。再灌48h后,进行神经行为学评分;检测脑含水量及脑梗死体积。结果各低温方式均能降低大鼠梗死体积,ICSI组脑梗死体积分别与全身低温组、冰帽组及模型组比较,差异均有统计学意义(t=8.37、5.31、11.47,P〈0.05)。ICSI组与冰帽组、全身低温组比较,脑舍水量差异有统计学意义(均P〈0.05)。ICSI组与模型组、冰帽组、全身低温组比较,24、48h神经行为学评分差异有统计学意义(均P〈0.05)。ICSI组的24h与48h神经行为学评分差异具有统计学意义(t=6.06,P〈0.05)。结论ICSI可以显著减少局灶性脑缺血后梗死体积及脑含水量,促进神经功能的恢复。
摘要:目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)过表达对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)能力的影响。方法构建ABCG2稳定过表达乳腺癌细胞株,检测ABCG2稳定过表达前后MCF-7乳腺癌细胞中E-cadherin蛋白和N-cadherin蛋白的表达情况。结果E-cadherin蛋白表达在ABCG2过表达MCF-7乳腺癌细胞申明显低于常规MCF-7细胞(P〈0.05),而N-cadherin蛋白表达在ABCG2过表达MCF-7乳腺癌细胞中明显高于常规MCF-7细胞(P〈0.05)。结论ABCG2过表达可以通过调控EMT相关蛋白的表达进而增强乳腺癌细胞的EMT能力,可能与乳腺癌的转移密切相关。
摘要:目的探讨针刺百会穴对老年大鼠异氟醚吸入麻醉后术后认知功能障碍(POCD)的效果及电生理机制。方法48只老年SD大鼠分为针刺百会穴+异氟醚吸入组(AI组),单纯异氟醚吸入组(I组)。及对照组(C组),每组16只。AI组与I组接受1.5%异氟醚吸入4h,C组吸入空气。麻醉7d后从3组中各抽取8只进行Morris水迷宫实验,包括定位航行实验和空间探索实验,以评估3组大鼠的空间学习记忆能力;其余欠鼠进行在体电生理实验,通过比较各组高频刺激(HFS)前后海马CA1区神经元场兴奋性突触后电位(fEPSP)的幅度来评价长时程增强(LTP)的变化。结果AI组与C组每日定位航行实验的逃避潜伏期均明显短于I组(P〈O.05);I组跨台次数(5.9±2.1)较AI组(15.4±1.6)与C组(16.4±1.1)明显减少(P〈0.01);电生理实验;C组在HFS后1、30min和60min的fEPSP幅度为248.2%±16.3%,217.5%±17.6%与195.8%±11.9%;I组分别为201.3%±19.7%,153.2%±13.9%,146.7%±22.8%,与C组相比显著降低(P〈0.01);AI组相应时间点的fEPSP幅度为240.5%±13.8%,199.6%±11.1%与194.2%±20.2%,与I组相比有明显的升高(P〈0.05).I组HFS后fEPSP幅度明显低于AI组与C组(P〈O.05);AI组与C组间两种行为学实验以及LTP实验比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论异氟醚吸入麻醉可导致老年大鼠发生明显的POCD,而针刺百会穴可明显缓解异氟醚所导致的学习记忆功能障碍。
摘要:目的探讨雷奈酸锶(sR)对卵巢切除大鼠骨髓基质干细胞成骨分化及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法3月龄SD大鼠24只,分别接受假手术(Sham组,n=8)和双侧卵巢切除(0VX,n=16)手术,术后8周0VX大鼠分为2组,分别接受安慰剂(OVX+V组)或SR(0.9g·kg-1·d-1,OVX+SR组)治疗3个月。实验结束后处死所有大鼠,检测第4腰椎骨密度、最大载荷、弹性模量等生物力学性能,取股骨和胫骨骨髓细胞进行体外培养并向成骨细胞诱导分化,第25天共聚焦显微镜观察BMP-2的表达及分布,第28天提取细胞RNA及蛋白,RT-PCR及Westernblot法检测BMP-2的表达,细胞培养第32天vonkossa染色观察细胞外基质矿化能力。结果(1)骨密度:0VX+V组显著低于Sham组和OVx+sR组(P〈0.05),OVX+SR组显著低于Sham组。(2)最大载荷:0VX+V组显著低于OVX+SR组(P〈0.05),OVX+SR组显著低于Sham组(P〈0.05);弹性模量:0VX+V组显著低于Sham组和0VX+SR组(P〈0.05)。(3)共聚焦显微镜观察各组细胞BMP-2的表达及胞内分布无明显差异。(4)RT—PCR及Westernblot法检测BMP-2在各组的表达差异无统计学意义。(5)yonkossa染色观察各组矿化面积百分比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论SR可部分改善卵巢切除大鼠骨量丢失和力学性能,对其骨髓基质干细胞体外成骨分化能力及BMP-2的表达无显著影响。
摘要:目的探讨改良电休克治疗(MECT)联合重复经颅磁刺激(rTMS)治疗对偏执型精神分裂症患者认知功能的影响。方法将100例偏执型精神分裂症患者按随机数字表法分成联合治疗组和单纯MECT治疗组,联合治疗组中对患者实施MECT联合rTMS治疗,单纯MECT组中对患者实施MECT结合rTMS伪刺激治疗,每组各50例。偏执型精神分裂症的治疗疗效测定采用阳性与阴性症状量表(PANSS),采用修订韦氏记忆测验(WMS-RC)评定记忆功能,认知执行功能的评定采用威斯康星卡片分类测验(WCST),分别在第1次MECT治疗开始前(治疗前)和第24次rTMS或伪刺激结束后(治疗终点)运用上述3个量表对两组进行评定。结果与治疗前相比,3个量表的评分在治疗终点显示:与治疗前相比,两组PANSS量表评分在治疗终点时显著下降;联合治疗组的修订韦氏记忆测验(WMS-RC)量表评分结果显示在治疗终点,图片、再认、理解和联想评分均高于单纯MECT组;威斯康星卡片分类测验结果显示总错误数、持续反应数、持续错误数评分,联合治疗组在治疗终点均低于单纯MECT组,联合治疗组在治疗终点的完成分类数评分高于单纯MECT组。结论MECT联合rTMS治疗与单纯MECT对偏执型精神分裂症的治疗疗效相当,但MECT联合rTMS治疗比单纯MECT对偏执型精神分裂症患者认知功能影响更小。
摘要:目的探讨局麻下椎板间入路行经皮内窥镜下腰椎髓核摘除术(PELD)术中颈痛与颈椎硬膜外压力(EP)变化的关系。方法收集该院骨科2013-2015年28例因腰椎间盘突出症行经椎板间入路PELD的患者,术前于C5-C6节段安置颈椎硬膜外导管并连接压力传感器,整个手术过程持续监测颈椎EP。结果28例患者中有6例发生了颈痛,术中颈痛患者开始诉颈痛时的颈椎EP值(51.5±10.O)mmHg和最大颈椎EP值(67.8±12.4)mmHg都明显高于未发生颈痛患者的最大颈椎EP值(29.6±12.6)mmHg,差异有统计学意义(P〈0.05)。颈椎EP值越高的患者发生颈痛的概率越高(P〈0.05)。结论椎板闯入路行PELD时颈痛的发生与颈椎EP增高有关。
摘要:目的探讨胎儿颈项透明层(NT)与颈部皮肤皱褶(NF)测量增厚联合血清学筛查结果与染色体及胎儿异常的相关性。方法前瞻性、随机对照研究该院2010年9月至2014年3月所筛查的39560例孕妇及其所孕的41790例胎儿,其中双胎2230例,均为非选择性病例,进行了胎儿早孕期唐氏筛查及中孕期NF测量和超声结构筛查,对高风险值及胎儿NT,NF增高孕妇进行羊水或脐血穿刺术行胎儿染色体检查。结果检出NT〉3.0mm胎儿共203例,其中65倒为染色体异常,8例晚孕期出现胸腹水,3例为珠蛋白生成障碍性贫血(简称地中海贫血),127例正常分娩;NF〉6mm胎儿95例,其中染色体异常21例,2例为地中海贫血,3例晚孕出现水肿、胸腹水,其中1例为母儿血型不合,2例合并地中海贫血,69例正常分娩。结论胎儿NT及NF增高与染色体异常具有相关性,且NT较NF相关性更高,其增高程度不同提示不同的染色体异常类型。
摘要:目的探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)对重症急性胰腺炎(SAP)诱导的肠黏膜屏障功能障碍的影响。方法选取SAP患者78例,根据治疗方案的不同,分为CRRT组43例,非CRRT组35例,监测SAP患者治疗前后APACHEⅡ评分变化,比较两组间的病死率。分别在CRRT治疗0、12、24、48、72h等不同时间点检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)、血浆二胺氧化酶(DA0)和D-乳酸的变化。结果治疗后24、72hCRRT组APACHⅡ评分分别为10.2±3.8、6.4±2.6,较非CRRT组明显改善(P〈0.05),病死率(18.6%)也明显下降。CRRT组治疗后血清TNF-α、CRP、DAO、D-乳酸水平下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P〈0.05)。而非CRRT组患者经常规治疗后,血清TNF-α、CRP、DAO、D-乳酸水平与治疗前比较无明显变化(P〉0.05)。结论CRRT治疗对SAP诱导的肠黏膜屏障功能障碍具有改善作用。
摘要:目的探讨超声造影定量分析在肝脏局灶性病变诊断与鉴别诊断中的应用价值。方法对153例肝脏局灶性病变患者(良性组67例,恶性组86例)行超声造影检查。利用SonoLiver软件分别对两组患者超声造影的动态过程进行分析,得到时间一强度曲线及动态血管模式曲线(DVP)。分析两组局灶性病变的动态血流灌注特点,计算出两组局灶性病变的超声造影定量分析参数:峰值强度(IMAX%)、上升时间(RT)、达峰时间(TTP)、平均渡越时间(MTT),同时计算出上升支斜率与l/2下降支斜率,然后进行统计学分析。结果良性组、恶性组间的血流灌注模式不同,定量分析参数亦有差异:良性组与恶性组的IMAX%、RT、TTP与周围肝组织比较差异有统计学意义(P〈0.05);良性组与恶性组闻的RT[(13.77±8.11)s和(8.95±4.73)s],MTT[(74.79±73.40)s和(40.75±60.91)s]与1/2下降支斜率[(8.62±13.56)和(43.56±81.42)],差异均有统计学意义(P〈0.01),IMAX%差异没有统计学意义(P〉0.05)。结论超声造影定量分析可以对肝脏局灶性病变的诊断与鉴别诊断提供较客观的依据,具有一定的临床应用价值。
摘要:目的探讨被动抬腿试验(PLR)联合超声检测心输出量(CO)方法对老年休克患者容量反应性预测的可行性。方法采取前瞻性观察研究方法,选择万州区第五人民医院ICU2013年1月至2015年争月老年休克患者38例,先后行pLR及补液疗法。按补液疗法后超声检测CO增加百分比大于或等于10%为对容量治疗有反应组,否则为无反应组。结果38例患者行45例次补液疗法,有反应组13例,无反应组32例。有反应组PLR及补液后CO明显增加(P〈0.05),两组数值△COPLR为(8.36±4.02)%,△CO补液为(8.59±3.53)%;观察有反应组△COFLR与ACO补液两组变量呈正相关(r=0.815,P=0.01)。△COPLR预测容量反应性的AUC值为0.854。当阚值△COPLR≥15%时,预测容量反应性敏感性87%,特异性91%。结论PLR联合超声对CO检测可有效预测容量反应性,可作为一种无创方法指导老年患者休克治疗。
摘要:目的评价尘螨变应原舌下含服脱敏治疗对伴尘螨致敏慢性自发性荨麻疹的疗效。方法将98例伴有尘螨变应原皮肤点刺阳性的慢性自发性荨麻疹患者分为脱敏治疗组和常规治疗组。两组均给予口服盐酸左西替利嗪片并逐渐减量;脱敏治疗组同时接受舌下含服脱敏治疗,在治疗开始前及治疗后的第6、12个月评价所有患者荨麻疹疾病严重程度(UAS)和当月盐酸左西替利嗪片的总服用量。结果脱敏治疗组和常规治疗组在治疗后第6、12个月时的UAS均显著低于治疗前指标评分(P〈0.01),且脱敏治疗组治疗在第6、12个月时的左西替利嗪片月平均服用量均显著低于常规治疗组(P〈0.05)。结论舌下含服脱敏治疗联合抗组胺药治疗可有效改善伴尘螨致敏慢性自发性荨麻疹患者的症状并减少抗组胺药的服用量。
摘要:目的分析支架辅助弹簧圈栓塞术治疗破裂颈内动脉段微小动脉瘤(直径≤3ram)的临床经验及技巧。方法回顾性分析2011年12月到2014年12月该院神经外科采用支架辅助弹簧圈栓塞治疗破裂颈内动脉段微小动脉瘤19例,对术中经历,术中术后近、远期并发症,栓塞率,手术技巧及预后进行分析。结果(1)19个微小动脉瘤均成功栓塞,成功率为100%,其中采用支架稳定微导管技术(Jailing)治疗14个动脉瘤,支架半释放技术治疗3个,支架稳定微导管技术与微导管穿越支架技术(Mesh)相结合方法治疗2个。(2)术中即刻栓塞效果Raymond分级1级8个,2级6个,3级5个。远期随访无一例复发,Ray-mond分级1级14个,2级3个,3级2个.(3)术中破裂出血2例,及时救治无不良后果;术中发生脑血管痉挛1例,术后住院期间发生短暂缺血性神经损害。结论支架辅助弹簧圈栓塞术是目前治疗破裂颈内动脉段微小动脉瘤常用和有效的方法之一。
摘要:目的探讨超微血流成像技术评价颈内动脉闭塞的价值。方法对23例多普勒彩超发现的可疑单侧颈内动脉闭塞患者分别行超微血流成像(SMI),超声造影以及数字减影血管造影(DSA)3种检查,比较SMI与DSA、超声造影与DSA,以及SMI与超声造影检查的一致性。结果SMI显示颈内动脉完全闭塞15例,重度狭窄8例;超声造影显示颈内动脉完全闭塞13例,重度狭窄10例;DSA显示颈内动脉完全闭塞13例,重度狭窄10例。SMI与DSA、超声造影与DSA及SMI与超声造影的诊断一致性Kappa值分别为0.638、0.823、0,819。SMI与超声造影的诊断结果差异无统计学意义(P〉0.05)。结论SMI对颈内动脉闭塞有超声造影相似的价值。