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摘要:目的构建含有脑源性神经营养因子(BDNF)的原核表达质粒pET28a(+)/BDNF及相应的原核表达菌,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后研究其生物学活性。方法按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,人工合成大鼠BDNF的基因序列并构建原核表达质粒pET28a(+),/BDNFo经限制性内切酶(BamHI,HindⅢ〉酶切鉴定及DNA测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达情况,以BDNF特异性抗体采用Western blot法鉴定BDNF蛋白抗原性,鹋甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BDNF蛋白对PC12细胞活力的影响。结果构建的pET28a(+)/BDNF经双酶切和测序鉴定与设计序列100%一致;工程菌经IPTG诱导后在相对分子质量17×10^3左右有1条明显蛋白条带,Western blot显示目的蛋白能够与特异性BDNF抗体反应;不同浓度BDNF蛋白处理组与时照组比较细胞活力均有不同程度的增加,其中50ng/mLBDNF处理组效果最优。结论成功构建原核表达质粒pET28a(+)/BDNF及相应的原核表达菌,该工程菌表达的BDNF蛋白具有良好的生物学活性。
摘要:目的探讨以3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)为支架材料,以人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)为种子细胞的复合物体内构建组织工程骨的能力。方法将hUCMSCs接种在PHBHHX上体外成骨诱导培养2周,诱导组为实验组,不滴加hUCMSCs组为对照组,植入裸鼠皮下,并分别于1、3、5个月取材行HE、I型胶原免疫组织化学、碱性磷酸酶染色及逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测。结果PHBHHX表现出良好的细胞吸附性。实验组细胞大、小形态基本保持原状,成骨特异性指标检测均为阳性;对照组细胞则不能保持原状,体积逐渐缩小至完全降解,成骨特异性指标均为阴性。结论PHBHHx复合hUCMSCs经体外成骨诱导后具有在裸鼠体内异位构建组织工程骨的能力。
摘要:目的探讨微量元素锶对大鼠脂代谢紊乱的改善及非酒精性脂肪肝的防治作用及可能机制。方法将50只SD大鼠分为5组,对照组用普通饲料,其余4组用高脂饲料,共喂养13周。18mg/L锶组和36mg/L锶组在后9周分别给予18mg/L与36mg/L的鳃水,辛伐他汀组于后4周每天给予10mg/kg辛伐他汀灌胃。第14周末处死大鼠,检测肝指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及肝组织TG和TC含量,肝组织冰冻切片,油红O染色观察脂肪样变及其分布情况。结果与对照组比较,脂肪肝模型组的肝指数、肝TC、肝TG、血清TC、LDL-C均升高(P〈0.05);与脂肪肝模型组比较,18mg/L锶组大鼠血清TC、LDL-C、HDL-C也降低(P〈0.05);36mg/L锶组肝指数、肝TC、肝TG、血清TC、LDL-C均降低(P〈0.05)。油红O染色绔果显示:脂肪肝模型组肝组织含有大量的红染脂肪颗粒;18mg/L锶组、36mg/L锶组以及辛伐他汀组红染颗粒含量均较脂肪肝模型组有不同程度减少。结论长期较高浓度的微量元素锶摄入具有改善大鼠脂代谢紊乱,防治非酒精性脂肪肝的作用。
摘要:目的选择斑马鱼作为实验动物模型,研究Rap1基因在胚胎早期发育过程中的时空表达规律。方法从斑马鱼胚胎cDNA中克隆Rap1基因片段,将Rap1基因片段和pCS2+质粒进行体外连接重组,重组质粒经双酶切、菌落聚合酶链反应(PCR)及测序鉴定正确后,经T3RNA体外转录体系合成DIG标记的Rap1基因反义mRNA探针,采用整胚原位杂交方法检测Rap1在斑马鱼胚胎早期发育过程的表达情况。结果在斑马鱼胚胎0.75hpf的细胞分裂连接处、3.70hpf和6.00hpf的动物极、12.00~72.00hpf的脊索神经部位均可见Rap1基因的阳性杂交信号。结论Rap1基因在斑马鱼脊索神经系统的早期发育过程中可能起到重要的调控作用。
摘要:目的探讨雷公藤多甙对黑色素瘤生长、侵袭和血管生成的影响及其作用机制。方法采用药物总评分(MTS)法考察雷公藤多甙对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响;利用裸鼠皮下移植瘤模型考察雷公藤多甙对体内黑色素瘤生长的影响;Transwell实验考察雷公藤多甙对人黑色素瘤A375细胞侵袭的影响;小管形成实验检测雷公藤多甙对人黑色素瘤血管生成的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测雷公藤多甙对A375细胞分泌因子的影响,如血管内皮生长因子(VEGF)、碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)及白细胞介素-8(IL-8)等。结果雷公藤多甙处理A375细胞后,肿瘤细胞的体外增殖及体内生长较对照组明显受到抑制;肿瘤细胞的侵袭能力较对照组明显减弱;雷公藤多甙能通过下调VEGF、bFGF及IL-8蛋白从而抑制肿瘤细胞诱导的血管生成;但对TGF-β蛋白的表达没有明显影响。结论雷公藤多甙具有抗黑色素瘤生长及侵袭的能力,其机制可能与抑制黑色素瘤的血管生成有关。
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摘要:目的研究自噬对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的影响。方法将48只SD大鼠平均分为4组:(1)生理盐水对照组(NS组);(2)脂多糖(LPS)模型组(L组);(3)LPS+自噬组(L+A);(4)LPS+自噬抑制组(L+I)。血气分析检测动脉血氧分压(PaO2)、动脉二氧化碳分压(PaCO2)和pH值;计算肺组织干湿比;HE染色观察肺组织病理学变化并进行肺损伤评分;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和肺泡灌洗液中微管关联蛋白LC3b、髓过氧化物酶(MPO)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果与NS组比较,L组动脉血PaO2、pH值降低,PaCO2升高(P〈O.05);与L组相比,L+A组动脉血PaO2、pH值上升,PaCO2下降(P〈0.01);L+I组动脉血Pa02、pH值降低,PaCO2升高(P〈0.01),差异具有统计学意义。L组和L+I组血清和肺泡灌洗液中LC3b水平降低,MPO、MIP-2、IL-1β和TNF-α水平均升高,而L+A组正好相反。结论自噬对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤起到改善或保护作用。
摘要:统计资料共有三种类型:计量资料、计数资料和等级资料。按变量值性质可将统计资料分为定量资料和定性资料。定量资料又称计量资料,指通过度量衡的方法,测量每一个观察单位的某项研究指标的量的大小,得到的一系列数据资料,其特点为具有度量衡单位、多为连续性资料、可通过测量得到,如身高、红细胞计数、某一物质在人体内的浓度等有一定单位的资料。
摘要:目的探讨T1期肺癌淋巴结转移特点以及微创手术与开放手术的治疗效果比较。方法将120例T1期肺癌手术患者分为两组,其中微创手术组68例,开放手术组52例,研究T1期肺癌患者淋巴结转移数目,比较两种手术方法治疗不同大小肿瘤患者的围术期相关指标。结果患者均顺利完成手术,无手术死亡病例。两组在手术时间、术中出血量以及淋巴结清扫个数方面无明显差别。肿瘤最大直径小于或等于1.0cm、1.0~3.0cm患者的淋巴结转移率分别为1.3%、9.7%。肿瘤最大直径小于或等于1.0cm的鳞癌N1、N2均无转移。肿瘤最大直径小于或等于1.0cm的患者两种手术方式围术期相关临床指标差异有统计学意义(P〈0.05),肿瘤最大直径1.0-3.0cm的患者围术期相关临床指标差异无统计学意义。结论肿瘤最大直径小于或等于1.0cm的T1期肺癌患者更适合微创手术,但是肿瘤最大直径大于1.0cm的T1期肺癌患者微创手术与开放手术的治疗效果无明显差异。
摘要:凡投本刊的临床研究论文(主体是以人为研究对象),作者应说明其遵循的程序是否符合负责人体试验的委员会(单位性的、地区性的或国家性的)所制订的伦理学标准,并提供(上传)该委员会的批准文件复印件及受试对象或其亲属的知情同意书复印件。
摘要:目的探讨急诊6大病神情景演练培训模式在低年资护士培训中的应用效果。方法对2010-2013年新入科的36名护士进行急诊6大病种情景演练培训。培训前后采用问卷调查、笔试和实作等形式,对岗位胜任能力、培训态度、理论知识、操作技能、单次求救时间及参与抢救医生对其配合能力,的满意度进行调查、分析。结果培训后低年资护士在岗位胜任能力、培训态度、理论知识、操作技能、单次求救时间及参与抢救医生对其配合能力的满意度等方面明显改进,培训前后差异有统计学意义(P〈0.01或0.05)。结论急诊6大病种情景演练培训模式适用于急诊低年资护士培训,对低年资护士整体素质提升有着积极的意义。
摘要:目的观察参七合剂对不同类型高脂血症患者血浆凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NQ)、内皮素(ET)及血脂水平的影响,探讨其血管保护机制。方法将64例高脂血症患者按血脂检测结果分为高总胆固醇(TC)组(20例)、高三酰甘油(TG)组(12例)、混合型高脂血症组(23例)、低高密度脂蛋白(HDL)组(9例),给予参七合剂10g/d,疗程为6周。另选25例血脂水平正常的健康人群作为对照组。治疗前后分别检测sLOX-1、SOD、MDA、N0、ET及血脂水平。结果高TC、混合型高脂血症患者sLOX-1升高(P〈0.01),sLOX-1与TC、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)呈正相炭(r=0.616、P〈0.05,r=0.537、P〈0.05);各型高脂血症均能使SOD、NO降低(P〈0.01),MDA、ET升高(P〈0.01),但影响存在差异(P〈0.01);参七合剂能降低高脂血症患者的sLOX-1、TC、LDL-C、MDA、ET水平(P〈0.01),升高SOD、NO、HDL-C水平(P〈0.01),对TG没有影响(P〉0.05)。结论参七合剂可能通过降低LOX-1的表达、调节脂质氧化与过氧化水平的平衡、保护血管内皮细胞,从而对高脂血症患者的血管起到保护作用。
摘要:目的探讨两种全身麻醉方式对腹腔镜下根治性广泛全子宫切除术患者术后认知功能的影响。方法将100倒择期腹腔镜下根治性广泛全子宫切除术患者分为两组:丙泊酚组(P组)、七氟醚组(S组),每组各50例。记录麻醉时闻、舒芬太尼用量、维库溴铵用量、苏醒时闻、定向力恢复时间,记录麻醉复苏期并发症。分别于术前1d(T0)、术后1d(T1)、术后3d(T2)、术后7d(T3)、术后1个月(T4)、术后3个月(T5)对患者进行简易智能状态量表(MMSE)评分,采用Z计分法评定术后认知功能障碍(POCD)发生情况。结果与P组比较,S组舒芬太尼用量及雏库溴铵用量较少(P〈0.05),苏醒时间及定向力恢复时间增加(P〈0.05),S组患者出现寒战、躁动、上呼吸道梗阻较多(P〈0.05)。组间MMSE评分变化相比较,差异无统计学意义(F=0.14,P=0.709);时间点MMSE评分变化相比较,差异有统计学意义(F=74.46,P〈0.01);全身麻醉方式与时间MMSE评分之间存在交互效应(F=7.99,P〈0.01);与P组比较,T1、T2时间点S组MMSE评分较低(P〈0.05),S组中T1、T2、T3、T4时间点POCD发生率高(P〈0.05)。结论腹腔镜下根治性广泛全子宫切除术中,采用七氟醚吸入麻醉患者较丙泊酚麻醉患者POCD发生率较高,但3个月后POCD发生率无差异,
摘要:目的探讨脂肪肝对慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒疗效的影响。方法选择2011年1月至2014年4月在该院门诊就诊的乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性CHB患者204例为研究对象,按照是否合并脂肪肝分为2组,其中单纯CHB患者122例为对照组,CHB合并非酒精性脂肪肝(NAFID)患者82例为观察组。两组患者均给予阿德福韦酯(10mg/d)口服抗病毒治疗24周,观察两组氨基转移酶复常率(生物化学应答)、HBeAg阴转率(血清学应答)及HBV—DNA阴转率(病毒学应答)的差异。并将两组中治疗后获得病毒学应答的患者再次进行比较,观察在获得病毒学应答患者中,单纯CHB组和CHB合并NAFLD组氨基转移酶复常率、HBeAg阴转率的差异。结果CHB合并NAFLD组氨基转移酶在治疗24周复常率为58.5%,显著低于单纯CHB组(72.1%),差异具有统计学意义;单纯CHB组HBV-DNA在治疗24周阴转率(67.2%vs.51.2%)及HBeAg阴转率(52.5%vs.37.8%)均显著高于合并NAFLD组,差异具有统计学意义;在获得病毒学应答患者中,单纯CHB组氨基转移酶复常率为96.3%,显著高于CHB合并NAFLD组(66.7%),差异具有统计学意义。而在获得病毒学应答患者中,HBeAg阴转率在单纯CHB组为78.0%,在CHB合并NAFLD组为73.8%,单纯CHB组略高于合并NAFLD组,但二者差异无统计学意义。结论脂肪肝对HBeAg阳性CHB患者应用阿德福韦酯抗病毒疗效有影响,而合并NAFLD是cHB抗病毒治疗时达病毒学应答和血清学应答而未达生物化学应答的重要原因。
摘要:目的探讨急性脑梗死患者弥散加权成像(DWI)不同b值下表现弥散系数(ADC)值的变化趋势。方法选取急性脑梗死患者为病例组,健康志愿者为对照组,使用5个不同的弥散梯度,即b=200、400、600、800、1000s/mm^2对20例急性脑梗死患者及20例健康志愿者进行DWI扫描,测量不同b值下的ADe值。使用单因素方差分析对两组ADC值进行统计学分析。结果在5个不同b值下,病例组ADC值分别为0.64、0.59、0.55、0.47、0.41,对照组ADC值分别为1.04、0.99、0.92、0.85、0.78;两组差异具有统计学意义(P〈0.01),且随着b值升高,ADC值具有降低趋势(P〈0.01)。结论急性脑梗死患者ADC值明显降低:DWI不同b值下ADC值不同,二者呈负相关。
摘要:目的观察关节镜辅助下取自体掌长肌腱解剖重建远端桡尺韧带治疗慢性下尺桡关节不稳的临床疗效。方法对7例保守治疗无效的慢性下尺桡关节界稳患者,腕关节探查明确诊断,然后取自体掌长肌腱解剖重建远端桡尺韧带;平均随访12个月,记录患者手术前后的握力、腕关节活动度;采用视觉模拟评分(VAS)评估腕关节的疼痛状况,利用MMWS评分和DASH评分评估腕关节的功能状态。结果在腕关节活动时VAS评分从术前的(7±2)分恢复至术后的(3±3)分,MMwS评分为术前(50±9)分,术后(83±11)分,DASH评分从术前(37±15)分提升至术后(16±10)分,差异有统计学意义;握力术前为84.5±16.0,术后93.4±11.0,差异有统计学意义。腕关节屈伸活动度,术前为93.5%士6.0%,术后为96.4%±.3.0%,旋前旋后活动度术前为92.6%±7.0%,术后为97.2%±5.0%,虽有增加,但差异没有统计学意义。结论。在关节镜辅助下解剖重建远端桡尺韧带是治疗慢性.下天耱关筘不稳的有效方法,短期随访或采满意。
摘要:目的总结分析41例全肺灌洗术中双腔支气管导管插管的临床经验。方法回顾性分析2010年2月至2015年2月在该院行大容量全肺灌洗术患者41例,对双腔支气管插管后使用听诊定位法与纤维支气管镜定位法进行探讨。结果41例患者利用听诊定位等辅助定位成功39例,2例患者反复听诊定位无法进行双肺隔离,改用纤维支气管镜定位成功。其中使用纤维支气管镜检查后调整导管深度19例,调整后均隔离良好,灌洗顺利。结论全晡灌洗术成功的前提在于双腔支气管导管选择及精确定位。纤维支气管镜直视定位已成为双腔支气管导管定位的金标准。
摘要:目的分析胃癌脑转移患者的临床特征及预后因素。方法回顾性分析2004年1月至2013年12月江西省肿瘤医院连续收治的18例胃腺癌脑转移患者临床资料,进行生存分析。结果患者男13例,女5例,中位年龄56岁(16-83岁)。患者诊断脑转移前均有神经症状,常见不适为头痛(38.9%)、乏力(33.3%)和恶心呕吐(22.2%)。确诊胃癌至发现脑转移的中住时间为10.4个月。同时性脑转移者5例,异性脑转移13例。44%为单一脑转移灶,56%为多发脑转移。13例(72.2%)合并颅外转移,常见部位是远处淋巴结(92.3%)、肝脏(46.2%)和骨(30.8%)。根据脑转移瘤治疗方式将患者分成3组,A组(n=7)给予地塞米松对症处理;B组(n=7)地塞米松联合全脑放疗(WBRT);C组(n=4)在激素的基础上,接受全脑放疗和三维适形放疗。全组患者中位生存时间2.5个月(95%CI 1.25~3.75个月),1年生存率16.7%。A、B、C3组中位总生存分别为1.9个月,2.5个月和20.7个月;A组与B组患者比较,总生存差异无统计学意义(P=0.46),C组患者生存获益明显(P=0.012)。单因素分析发现,ECOG评分0~2分(P=0.022)、组织学分级G1~G2(P=0.05)、异时性脑转移(P=0.039)、其他部位转移0~1个(P=0.005)和接受放疗(P=0.034)的患者预后较好;多因素分析显示,ECOG评分(P=0.012)和合并其他部位转移(P=0.009)是胃癌脑转移患者的独立预后因素。结论胃癌脑转移预后极差,通过多学科诊治有望延长部分患者的生存时间,ECOG评分和颅外转移可能是预测胃癌患者疗效的因素。