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卫生研究 2006年第05期杂志 文档列表

卫生研究杂志论著

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠内分泌和免疫系统的影响——Ⅱ．联合作用531-533

摘要：目的探讨农药氯氰菊酯（Cyp）和甲基对硫磷（MP）混配对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能的联合作用。方法健康2月龄Wistar大鼠80只，按3×2析因设计随机分为8组（雌雄各4组）。以1／30LD50剂量隔日灌胃1次，即0，Cyp8．0mg／kg bw，MP0．23mg／kg bw，Cyp8．0＋MP0．23mg／kg bw，连续30天，对照组用色拉油。测量大鼠体重增长，脏器湿重；用放射免疫法测定血清生殖激素指标促黄体生成激素（LH）、促卵泡成熟激素（FSH）、雌二醇（E2）和睾酮（T）；甲状腺激素指标（T3、T4和TSH）；以及免疫指标IgG和IgA。取血测定淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬率。结果氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大多数指标为相加作用，但对卵巢和肾脏重量、淋巴细胞转化率和血清IgA为拮抗作用；对雌二醇的联合作用则有性别差异：对雌鼠为协同作用，两种农药能分别使雌鼠血清雌二醇升高1．44倍或1．21倍；而对雄鼠则为相加作用，氯氰菊酯可使雄鼠E2值增加64．64％。结论氯氰菊酯和甲基对硫磷混配可对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能产生联合作用，雌二醇是较敏感的指标。

DNA修复基因XRCC1和XPC多态性与胰腺癌风险关联研究534-536

摘要：目的探讨碱基切除修复相关基因XRCC1及核酸切除修复基因XPC基因多态与胰腺癌发病风险的关系。方法采用病例一对照研究（胰腺癌新发病例101人，对照337人）方法，分析XRCC1 Arg399Gln、Arg194Trp及XPC第9内含子的AT双核苷酸的插入／缺失（PAT）多态与胰腺癌风险的关系。结果经年龄、性别及吸烟、饮酒状态调整后，携带XRCC1 399Arg／Gln及Gin／Gin基因型的个体较399Arg／Arg者发生胰腺癌的风险有所降低，OR值分别为0．83（95％CI，0．52～1．34，P=0．41）和0．64（95％CI，0．21～1．66，P=0．30），但没有达到统计学显著水平。携带PAT＋／＋基因型者发生胰腺癌的风险为XPC／PAT-／-基因型者的0．30倍（95％CI，0．10—0．76，P=0．02）。结论XPC—PAT多态可能在胰腺癌的发生中起着一定的作用。

神经酰胺诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡的研究537-540

摘要：目的探讨外源性神经酰胺诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡作用及对Bcl-2家族蛋白基因表达的影响。方法不同浓度C2-神经酰胺处理HT-29细胞，采用Hoechest荧光染色和琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡，RT—PCR方法检测Bcl-2、Bcl—xl、Bax、Bad和Bid基因表达水平。结果C2-神经酰胺诱导HT-29细胞发生核染色质断裂、出现凋亡小体等典型凋亡改变，50μmol／L神经酰胺作用12和24小时凋亡细胞率分别达到64．7％和81．3％。同时神经酰胺使Bax、Bad和Bid基因表达水平增高，使Bcl-2和Bcl—xl基因表达水平减弱，Bcl-2与Bax比值下降，呈现剂量-效应关系。结论外源性神经酰胺能通过上调或下调Bcl-2家族基因表达水平诱导人结肠癌HT-29细胞发生凋亡。

P4501A1基因Thr^461→Asn^461及Ile^462→Val^462突变载体的构建540-542

摘要：目的构建P4501A1基因cDNA Thr^461→Asn^461及Ile^462→Val^462突变载体，为进一步研究CYP1A1的功能和致癌机制奠定基础。方法根据人CYP1A1基因（GeneBank NM-000499）cDNA序列设计通用引物Pm3／Pm4和突变引物Pt15／Pt16；Pt17／Pt18，内含酶切住点和突变位点，先用Pm3／Pt16，Pm3／Pt18组成两对引物．以pGEM—T-CYP1A1质粒为模板进行第一轮扩增，获得上游1397bp片断，再用Pt15／Pm4，Pt17／Pm4组成两对引物以10ng pGEM—T—CYP1A1质粒为模板进行第二轮扩增，得到下游177bp片断。然后用Pm3／Pm4做引物以第一、第二轮扩增产物为模板进行第三轮扩增，获得的1．5kb扩增产物用1％琼脂糖凝胶分离并回收纯化，将纯化的PCR产物与pMD—T载体连接后转化大肠埃希菌DHα5感受态细胞，挑单克隆扩增、质粒抽提后进行酶切和测序鉴定。结果三轮PCR扩增得到的1．5kb片断，经内切酶BamHI和SalI消化和r17p和SP6通用引物进行双向测序，证实克隆的目的片段与GeneBank中人CYP1A1基因cDNA的序列同源性为99．9％，且包含两个设计的突变位点Asn^461、Val^462。结论本实验成功地构建了含突变位点Asn^461、Val^462的CYP1A1基因cDNA的片断．

邻苯二甲酸二环己酯人工抗原的制备研究543-546

摘要：目的合成邻苯二甲酸二环己酯半抗原衍生物和合格的人工全抗原，探讨其制备方法。方法通过保留环己基结构和在芳环上引入氨基取代基合成了一种邻苯二甲酸二环己酯半抗原衍生物4-氨基邻苯二甲酸二环己酯，产物经通过^1HNMR、IR和UV确证了结构。半抗原衍生物再通过重氮化反应与BSA偶联。结果得到的半抗原衍生物4-硝基邻苯二甲酸二环己酯的2个紫外吸收峰分别为：λ1=214nm，λ2=256nm；4-氨基邻苯二甲酸二环己酯的2个紫外吸收峰分别为：λ1=226nm，λ2=288nm。人工全抗原4-氨基邻苯二甲酸二环己酯-BSA，经荧光光谱（λex=307nm，λem=468mn）、体系颜色变化和免疫实验确证偶联成功。抗原结合比为19：1。人工全抗原通过免疫动物得到了效价高、特异性好、纯度也较高的抗体。结论通过保留环己基结构和在芳环上引入氨基的设计思路可以合成邻苯二甲酸二环己酯的人工全抗原。

染氟大鼠血清雌二醇水平与生精细胞端粒酶逆转录酶表达关系的研究546-548

摘要：目的了解氟中毒大鼠雌激素水平与生精细胞端粒酶表达的关系。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量染毒组、高剂量染毒组，分别按0、10和20mg／kg体重的染毒剂量隔日腹腔注射氟化钠（NaF）溶液39天后，用放射免疫法测定大鼠血清中雌二醇含量，用原位杂交法检测端粒酶逆转录酶（TERT）表达情况。同时镜检成熟精子质量和睾丸组织病理学改变。结果染毒各组大鼠血清雌二醇含量低于时照组（P〈0．05）；且随着染毒剂量的增加，雌二醇含量逐渐降低。染毒各组大鼠生精细胞TERT阳性表达率分别低于对照组（P〈0．05）；且随着染毒剂量的增加，TERT阳性表达率逐渐降低。各染毒组大鼠精子数量和精子存活率低于对照组（P〈0.05）；精子畸形率高于对照组（P〈0．05）；随着染毒剂量的增加，精子数量、精子存活率降低（P〈0．05），精子畸形率升高（P〈0．05）。各染毒组大鼠血清雌二醇含量与生精细胞TERT表达率均呈正相关，低剂量染毒组r=0．941，P〈0．01；高剂量染毒组r=0．929，P〈0．01。结论NaF很可能是通过雌激素／雌激素受体-端粒酶逆转录酶-精子途径时生殖系统造成损害的，各染毒组大鼠血清雌激素含量与生精细胞TERT表达率呈显著正相关。

吸入二氧化硅纳米颗粒和微米颗粒对雄性大鼠精子及其功能的影响549-553

摘要：目的比较雄性大鼠吸入纳米二氧化硅（nm-SiO2）与微米二氧化硅（μm—SiO2）对其生精功能的影响并探讨作用机理。方法45只雄性Wistar大鼠按体重随机分为5组，分别为nm—SiO2 100mg／m^3和300mg／m^3组，μm-SiO2 100mg／m^3和300mg／m^3组和对照组。动物隔天在装有风扇扬尘的静式染毒柜中吸入染毒2h，对照组不扬尘．只吸入空气。65天后．用HE染色法观察大鼠睾丸组织的病理改变；显微镜下观察精子数量、活动度和畸形率；用试剂盒检测大鼠睾丸组织中乳酸脱氢酶同工酶-C4（LDH-C4）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）含量和血清中MDA、SOD；ELISA法测定血清8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平。结果nm—SiO2可引起大鼠睾丸组织病理改变，病变程度明显重于同剂量水平的μm—SiO2；nm—SiO2致大鼠精子数量、LDH-C4活力下降和MDA生成量增加程度显著高于同刺量μm—SiO2（P〈0．05）；nm-SiO2可引起大鼠精子活动度、睾丸组织SDH活力和血清8-OHdG水平下降，精子畸形率升高（P〈0．05），但与同剂量μm—SiO2比较差异无显著性（P〉0．05）；各实验组血清中MDA含量和SOD活力与对照值比较，差异均无显著性（P〉0．05）；各同剂量水平纳米和微米组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论nm—SiO2和μm-SiO2对雄性大鼠生精功能影响存在差异，nm—SiO2致生殖损伤能力强于同剂量水平的μm—SiO2。

二氧化硫对大鼠肝和肺细胞色素P4502B1和2E1 mRNA表达及活性的影响554-556

摘要：目的探讨二氧化硫（SO2）对肝、肺微粒体细胞色素P450两种亚型CYP2B1和CYP2E1 mRNA表达及活性的影响。方法采用SO2动式染毒技术使雄性Wistar大鼠染毒7天，每天6h，SO2的染毒剂量分别为14、28和56mg／m^3。采用分光光度法测定大鼠肝、肺微粒体CYP2E1活性，采用荧光分光光度法测定肝、肺微粒体CYP2B1活性，采用RT-PCR方法测定各组大鼠肝、肺组织中CYP2B1和CYP2E1 mRNA表达水平。结果在肝中，较高剂量的SO2（28和56mg／m^3）可使CYP2B1活性及mRNA水平降低，肝微粒体CYP2E1活性及mRNA在各剂量组均未发生显著改变。肺组织中CYP2B1活性在56mg／m^3剂量组显著降低，但其mRNA水平在28及56mg／m^3剂量组均显著降低；肺微粒体CYP2E1活性及mRNA水平在28及56mg／m^3 SO2处理组均降低显著。结论SO2可降低大鼠肝中CYP2B1和2E1及肺中CYP2B1和CYP2E1的活性及mRNA水平。

大气PM10对两种不同细胞分泌炎性细胞因子的影响557-560

摘要：目的探讨大气可吸入颗粒物（PM10）对小鼠肺泡巨噬细胞（RAW264．7）和人肺成纤维细胞（HLF）分泌肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素8（IL-8）的影响。方法颗粒物样品采自北京市城区采暖期。两种染毒途径：（1）不同剂量的PM10直接对HLF染毒；（2）PM10首先作用于RAW264．7细胞，染毒一定时间后的细胞上清液再作用于HLF细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色（MTT）法测定细胞毒性；放射免疫法测定炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8。结果PM10作用24h后，表现为低剂量时刺激细胞增殖，而高剂量时抑制细胞增殖，细胞存活率随浓度增加而降低（P〈0．01）；PM10能刺激HLF分泌炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8，且有剂量-反应关系（P〈0．05）；巨噬细胞上清液亦能刺激HLF产生TNF-α、IL-6和IL-8，且其产生量高于PM10作用于HLF产生的量（P〈0．05）。结论大气可吸入颗粒物PM10对HLF有一定毒性作用；PM10染毒24小时后能诱导人肺成纤维细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8；巨噬细胞上清液亦能刺激人肺成纤维细胞释放上述三种炎性因子，其产生量高于PM10。

沈阳和重庆人群血清中全氟辛烷磺酸和全氟辛酸的污染水平比较研究560-563

摘要：目的阐明沈阳和重庆两地一般人群血清中全氟辛烷磺酸（PFOS）和全氟辛酸（PFOA）污染水平，比较两地人群血清中PFOS和PFOA分布特征。方法采集沈阳和重庆地区无职业性PFOS和PFOA暴露人群血清，采用高压液相色谱-质谱仪联机系统测定血清中PFOS和PFOA含量。结果沈阳地区一般人群血清中PFOS和PFOA浓度中位数分别为22．40μg/L和4．32μg／L，重庆地区分别为7．40μg／L和1．00μg／L。沈阳地区人群血清中PFOS、PFOA浓度明显高于重庆地区（P〈0．01）。两地区女性人群血清中PFOS和PFOA浓度均高于男性水平，沈阳地区人群血清中PFOS浓度男、女性别间差异显著（P〈0．05）。重庆地区女性人群血清中PFOS、PFOA浓度与年龄呈正相关关系（rPFOS=0．298，rPFOA=0．271），50岁以上女性人群的相关程度大于13岁以下和13～50岁年龄组。结论沈阳和重庆两地人群血清中PFOS和PFOA污染水平具有显著的地区性差异和分布特征．血清中PFOS和PFOA水平与年龄存在相关性。

短发夹RNA对人骨髓间充质干细胞生长增殖的影响564-566

摘要：目的观察靶向人端粒酶逆转录酶（hTERT）的短发夹RNA（shRNA）对人骨髓间充质干细胞（hMSCs）生长增殖的影响。方法根据RNA干扰原理，利用构建的表达shRNA的靶向hTERT mRNA的真核表达质粒（shRNA1），非特异性的shRNA真核表达质粒（shRNA2），转染试剂和正常培养液处理细胞。24h后在共聚焦显微镜下检测荧光表达情况；24h、48h、72h用MTT法检测细胞增殖活性；48h后行HE染色、RT—PCR及端粒酶活性检测。结果（1）共聚焦显微镜下见shRNA1及shRNA2组有大量的细胞表达荧光。（2）相应时间点各组细胞生长增殖无明显差异。HE染色发现，同等培养条件下，各组细胞生长密度及形态无明显变化。（3）RT-PCR显示各组细胞均无hTERT mRNA的表达；端粒酶活性均为阴性表达。结论靶向hTERT mRNA的shRNA对正常hMSCs的生长增殖无明显影响，该方法对不表达hTERT的正常体细胞是安全的。

葡多酚对肝细胞内Ca^2＋浓度和增殖活性的影响567-568

摘要：目的探讨葡多酚（GPC）对正常肝细胞和受乙醇损伤肝细胞内Ca^2＋浓度与细胞增殖活性的影响。方法将大鼠正常肝细胞和乙醇损伤肝细胞加入不同剂量GPC共同培养，用Fura-2荧光测定肝细胞内Ca^2＋浓度，用MTT法测定细胞增殖活性。结果①正常对照组和乙醇对照组的Ca^2＋浓度分别为（108．26±14．17）和（651．24±47.95）nmol／L，二者差异有显著性意义（P〈0．05）；中、高剂量GPC组均较乙醇对照组显著性降低（P〈0．05）。②加入GPC的正常肝细胞内Ca^2＋浓度依次为：细胞外液含Ca^2＋组〉外液无Ca^2＋组〉正常对照组。③正常肝细胞和乙醇损伤肝细胞的中、高剂量GPC组细胞增殖活性均较正常对照组和乙醇对照组显著性升高（P〈0．05）。结论GPC可通过增加细胞外液Ca^2＋内流和胞内Ca^2＋库的释放两种途径升高正常肝细胞内Ca^2＋浓度，提高细胞增殖活性，并可抑制乙醇引发的肝细胞内Ca^2＋浓度异常升高（超载）和细胞增殖活性损伤。

断乳后不同饲料构成对大鼠体重、体脂含量及激素敏感性脂肪酶基因表达的影响569-572

摘要：目的研究断乳后不同饲料构成对高脂膳食大鼠体脂含量及脂肪组织中激素敏感性脂肪酶（HSL）基因表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24天断乳，按体重随机分为A、B、C、D四组，分别给予高碳水化合物构成的基础饲料、高蛋白质构成饲料、高不饱和脂肪酸和高饱和脂肪酸构成饲料喂养3周。然后均转为基础饲料喂养2周后，按体重将A组随机分为A1、A2两组。A1组继续喂饲基础饲料作为对照组，A2和B、C、D四组给予高脂饲料喂养6周，结束实验；A2组则为高碳水化合物组。动态观察大鼠的体重、体脂含量、血糖变化及白色脂肪组织HSL mRNA水平。结果实验末期，断乳后喂饲高不饱和脂肪酸构成饲料的C组，体重、体脂含量和血糖均显著低于高碳水化合物组A2（P〈0．05）；断乳后喂饲高蛋白质的B组体重和体脂含量明显低于A2组（P〈0．05），但血糖水平高于A2（P〉0．05）；断乳后摄取高饱和脂肪酸饲料的D组，尽管体重明显低于A2（P〈0．05），但血糖和体脂含量与A2组无差异（P〉0．05）。动态观察表明，断乳后喂饲高不饱和脂肪酸的C组大鼠，白色脂肪组织HSL基因表达水平持续升高。结论断乳后喂饲高不饱和脂肪酸饲料不仅可以降低高脂膳食大鼠的体重、体脂含量，还可明显改善血糖异常，抑制肥胖形成；对基因表达的调控可能参与早期饮食对后续肥胖的程序性影响。

2002年中国部分民族高血压患病情况573-575

摘要：目的了解中国部分民族的高血压患病、血压水平情况。方法数据来源于2002年中国居民营养与健康状况调查，数据共包括15岁以上人群152683例，其中男性67700例，女性84983例。结果按1964年人口年龄构成标化后，男性高血压患病率最高的两个民族为藏族（25．6％）和满族（23．1％），最低的两个民族为苗族（9．2％）和土家族（11．1％），女性高血压患病率最高的两个民族也为藏族（24．0％）和满族（18．7％），而患病率最低的两个民族为苗族（6．1％）和壮族（8．3％）。与1991年相比除蒙古族的男性和苗族的女性高血压标化患病率有所下降外，其他各民族无论男女高血压患病率均升高。结论高血压的患病及血压水平在所调查的民族间各不相同，与1991年相比，几乎所有调查民族的高血压患病率均有不同程度的升高。

中国北方绝经前妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因多态性与骨密度关系研究576-579

摘要：目的探讨中国北方绝经前妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP5）基因Q89R、A1330V多态性与骨密度关系。方法选取哈尔滨市283例无亲缘关系20～50岁汉族绝经前妇女作为研究对象。采用食物频率法调查所有研究对象膳食钙的摄入量，测定研究对象钙营养相关的血清学指标和激素水平，包括血清钙、血清磷、碱性磷酸酶、甲状旁腺激素、降钙素、25（OH）D3、1，25（OH）2D3水平，以及骨密度（双能X线）的测定。应用PCR-RFLP法检测研究对象LRP5基因Q89R、A1330V位点多态性。结果研究对象QQ、QR、从和AV基因型频率分别为83．4％、16．6％、64．3％和35．7％。不同基因型之间各项血清生化指标和激素水平之间差异均无显著性。逐步回归分析显示影响绝经前妇女最主要的因素为体重，其次为年龄、LRP5基因，LRP5基因A1330V多态性与腰椎骨密度有关（P=0．012）；LRP5基因Q89R多态性与股骨体和总髋骨的骨密度有关（P值分别为0．033、0．034）。结论LRP5基因多态性是中国北方绝经前妇女骨密度水平的预测因素，不同部位的骨密度水平受LRP5基因不同多态性位点的调节。

卫生研究杂志实验研究

牛初乳粉对实验性糖尿病的作用579-580

摘要：目的探讨牛初乳粉（BCP）对正常大鼠血糖及糖尿病大鼠的影响。方法给正常大鼠及糖尿病大鼠各灌胃三个不同剂量的BCP溶液5周，分别测定灌胃后第8、15、22、29、36天的血糖、体重。灌胃后第36天还测定糖尿病大鼠的血脂（TG、TC、HDL-C），总胆红素（TBIL）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血尿素氮（BUN）和血清肌酐（Scr）。结果3个剂量的BCP对正常大鼠的血糖无影响。灌胃后第29天3个BCP组的血糖均低于链脲霉素（STZ）组，灌胃后第36天的结果与第29天相似。三个BCP组大鼠的体重、TG、HDL-C与STZ组相比无差异。灌胃后第36天高剂量BCP组的TC低于STZ组并且与对照组无差异。三个BCP组大鼠的TBIL、AST、AIT、BUN、Scr与STZ组相比均无差异。结论牛初乳粉具有降低STZ糖尿病大鼠的血糖及总胆固醇的作用，此作用与剂量、时间有关；而对正常大鼠的血糖无影响。

卫生研究杂志论著

植物甾醇酯对实验大鼠血脂水平的影响581-583

摘要：目的探讨植物固醇酯（PSE）对大鼠血脂水平的影响。方法（1）在高脂饲料喂养模型下，4组大鼠分别给予不舍（模型组）或含有3个剂量PSE（分别为4．0、16．0、32．0mg／kg bw）的油溶液，30天后测定血脂水平。（2）摘除卵巢的去势大鼠分为模型组，L组（22．5μg／kg bw己烯雌酚），PSE组（32．0mg／kg bw PSE）和FPE组（500mg／kg bw游离型植物固醇），60天后测定血脂、雌激素，及大鼠子宫、肝脏重量。各实验均设正常对照组以确认造模成功。结果PSE使高脂饲料喂养大鼠甘油三酯（TG）水平下降，高剂量PSE组大鼠总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显降低，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及HDL-C／TC升高（P〈0．05）。去势模型使大鼠体重、肝脏重量、TC、TG和LDL-C明显升高，雌激素水平和子宫重量显著下降（和对照组比，P〈0．05）。PSE和FPS可显著降低去势大鼠体重和肝重，使TC和TG水平下降，子宫重量略有增加（P〈0.05），但作用未及L（P〈0．05），对雌激素水平也没有显著影响。结论植物固醇酯具有明显降血脂作用。

高效离子色谱法测定糖浆中低聚半乳糖含量584-586

摘要：目的在AOAC2001．02方法基础上，优化淋洗液梯度，以高效离子色谱-脉冲安培检测法测定小分子可溶性膳食纤维低聚半乳糖。方法应用CarboPACTM PA1（2mm×250mm）阴离子交换柱，对淋洗液浓度进行优化后分离混合标准，并测定糖浆中低聚半乳糖含量，评估方法的重复性和再现性。结果成功地分离了半乳糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和果糖，三批糖浆中低聚半乳糖含量分别为（49．59±3．34）、（46．55±2．61）和（56．26±3．13）g/100g（n=6），批内RSD分别为6．73％、5．62％、5．56％；糖浆1批间测定的RSD为4．73％。结论方法优化后，葡萄糖和半乳糖得到更好的分离，使半乳糖定量更为准确。方法的重复性和再现性很好．可用于食品中低聚半乳糖的定量。