摘要：工业上将β-淀粉酶与其他淀粉水解酶进行复配可获得高纯度的麦芽糖浆。相对于目前常用的植物来源β-淀粉酶,微生物β-淀粉酶具有生产工艺简单、不受原料限制、质量稳定、纯度高等优势,但其最适作用pH多为6.0~8.0,难以与其他淀粉水解酶(pH多为4.5~5.5)进行复配。本实验室前期获得的弯曲芽孢杆菌β-淀粉酶其最适pH值为7.0,本研究在此β-淀粉酶基础上构建T47K,Y164K,L396K三个突变体,其最适pH由突变前的7.0分别下降为6.0,4.5,5.5,其中L396K的最适温度也由突变前的50℃提高为60℃。以马铃薯淀粉(10%w/v)为底物进一步对L396K制备麦芽糖的转化条件进行探索与优化。结果表明,在反应初始pH为5.5,温度60℃,β-淀粉酶加酶量为100 U/g干淀粉时麦芽糖最大转化率达到80.2%,符合高纯度麦芽糖浆的生产要求。