植物激素样品前处理方法的研究进展
摘要：植物激素是植物中一类含量很低，却对植物生长发育等生命过程起重要调控作用的有机化合物。近年色谱/质谱联用技术不断发展，已成为植物激素分析的常用方法，而样品前处理则是色谱分析过程中的一个关键环节，所以高选择性和高回收率的前处理方法对于植物激素的分析至关重要。根据植物激素的化学性质，本文将其分为酸碱性植物激素、油菜素甾醇、植物多肽3类，并对相应的前处理方法加以综述，特别是近年来发展起来的新方法。内容包括前处理方法的原理、装置、萃取材料以及衍生试剂等，相关内容主要围绕本研究组的痕量植物激素研究工作展开，最后对研究趋势做了简短展望。选择性反应监测技术在蛋白质组学研究中的进展及应用
摘要：选择性反应监测（SRM）技术作为一种重要的定向蛋白质分析技术，通过选择性检测特定母离子和子离子来排除非目标组分的干扰，增强了检测灵敏度和定量准确度，具有选择性高、重复性好、灵敏度高、动态范围宽等优点，已被广泛应用于定量蛋白质组学研究，在生命科学领域发挥着至关重要的作用。本文从分析通量、检测灵敏度、定量方法以及相关软件资源4个方面，对近期 SRM 技术的研究进展进行了综述。然后，对 SRM 技术在蛋白质组学研究包括生物标志物验证、蛋白质翻译后修饰研究、生物工程以及信号通路分析等领域中的应用进行了概述。最后，本文对 SRM 技术的应用以及发展前景进行了展望。光子晶体的分析化学应用研究新进展
摘要：光子晶体具有规则的堆积结构、纳米级别的孔径和新颖的光学性质，在工程、物理、化学以及生物学等研究中均有重要的研究与开发价值。本文从分析化学应用研究角度对其进行了审视，综述了最近5年多以来光子晶体在传感与分离分析方法发展中应用的最新进展。用于人血浆中蛋白质分离的在线阵列式二维常规柱液相色谱系统的建立
摘要：构建了一种在线阵列式二维常规柱液相色谱系统，并将其应用于分离血浆中的完整蛋白质。该系统以1根强阴离子交换柱作为第一维分离柱，8根阵列式反相色谱柱作为第二维分离柱。强阴离子交换柱分离的馏分通过十通阀被依次转移到第二维预柱上并得到保留富集，随后第二维流动相通过分流器同时将预柱上的蛋白质反冲至分析柱上进行分离。二维之间以及第二维阵列色谱柱之间均相互独立，从而可以提高系统分离的通量和总峰容量。采用该系统对血浆中的蛋白质进行了完整蛋白质水平上的分离。该系统具有高通量和高分辨率的特点，为血浆样品中高丰度蛋白质的去除以及血浆样品的深入研究提供了一种有效的手段。利用谱图校正提高色谱-质谱联用的分析效率
摘要：在使用对二甲基亚砜（ DMSO）和 NEDD8激活酶抑制剂（ MLN4924，MLN）刺激的人脐静脉内皮细胞（ HU-VEC）内的蛋白质进行分析的过程中，利用 Progenesis LC-MS 软件对色谱图进行了保留时间的校正，并比较了同组分多次重复实验中的谱图相似率及两种刺激下细胞内蛋白质色谱图的相似度。样品经双酶切处理后，加入 Qcon-CAT 标准蛋白质混合物作为参照，经高效液相色谱-串级质谱分离，后续又对谱图进行了校正与分析。经过谱图校正，将蛋白质鉴定结果从7000个左右提高到8000个以上，提高了蛋白质的鉴定效率。在利用谱图计数进行相对定量时，还分析了 DMSO 和 MLN 分别刺激 HUVEC 后细胞内的蛋白质差异在1000个左右，并给出了校正后的色谱总离子流图的相似度比较。相比其他方法更为简单快捷和流程化，具有高通量高灵敏度的优点。集成化蛋白质组定量分析平台的构建及应用
摘要：为提高蛋白质组定量分析的准确度、通量和自动化程度，构建了由微升级混合离子交换色谱、亲水型固定化酶反应器（hIMER）和纳升级反相色谱-电喷雾串级质谱（nanoRPLC-ESI-MS / MS）组成的集成化蛋白质定量分析平台。该平台实现了二甲基化标记蛋白质样品在线分离、酶解、肽段分离鉴定和定量分析。采用质量比为1：1的轻、重标记的蛋白质样品考察该平台的定量性能，发现蛋白质水平二甲基化标记效率为90％；蛋白质经 hIMER 在线酶解10 min 产生的漏切及酶解产物在 hIMER 柱上的非特异性吸附对定量准确度的影响较小，所有定量到的重/轻标记的蛋白质质量比的平均值为1.01。最后将该平台应用于小鼠腹水型肝癌淋巴道高、低转移细胞系差异蛋白质的分析，发现了12种蛋白质在高转移细胞系中低表达，15种蛋白质在高转移细胞系中高表达。以上结果证明了该平台可以实现高准确度和高通量的蛋白质组定量分析。金属标记结合高效液相色谱-选择离子监测质谱的蛋白质绝对定量新方法
摘要：建立了金属标记结合高效液相色谱-选择性离子监测质谱（SIM）的蛋白质绝对定量新方法。实验考察了金属标记效率、金属标记的稳定性、标记后肽段的色谱保留和质谱行为、新定量方法的线性范围和准确度。实验结果表明金属标记具有标记效率高，稳定性好，色谱保留行为一致等优点。另外，金属标记-选择离子监测质谱绝对定量方法灵敏度高，其定量限低至1 fmol，线性范围为1-500 fmol，线性范围内 R2值大于0.99，具有良好的线性关系；经过测量，标准肽段的回收率为117.01％，说明该方法具有较高的准确度。将该方法应用于腾冲嗜热菌中烯醇酶蛋白的定量分析，相对标准偏差为5.47％，表明该方法的精密度高。以上结果表明该方法可以用于生物样本中的蛋白质的绝对定量分析，为比较简单的生物样本中蛋白质的绝对定量方法提供了一种新的选择。伴刀豆凝集素修饰磁性纳米粒子富集人血清中糖蛋白及质谱鉴定
摘要：发展了一种新型的磁性纳米粒子应用于人血清中特异性糖蛋白的亲和富集。制备的磁性纳米粒子具有核/壳/壳结构，即由 Fe3 O4磁性粒子/硅胶层/有机聚合物外层构成。伴刀豆凝集素 A（Con A）以共价键合的形式通过短链聚乙二醇固定在粒子表面，实现了人血清中特异性糖蛋白的高效富集。富集的蛋白经过胰蛋白酶酶解后，所得的肽段经离线的二维色谱分离，用高分辨质谱共鉴定出80种蛋白。通过 NetNGlyc 等搜索软件分析确定其中76种为糖蛋白，分析发现在血清中质量浓度仅为0.00001 g / L 的β-2-glycoprotein 1也得到了鉴定，表明我们发展的磁性纳米粒子与凝集素相结合的方式，可以高效地富集复杂体系中与主要蛋白成分含量相差12个数量级的低丰度糖蛋白。赖氨酸胍基化对蛋白质组分析的影响
摘要：赖氨酸胍基化在蛋白质组学定性和定量研究中起着重要作用，本文系统分析了胍基化前后，HeLa 细胞蛋白质经胰蛋白酶酶解产生的3种不同类型肽段的质谱鉴定情况，并探讨了不同肽段质谱响应改变的内在原因。发现赖氨酸在侧链能选择性地发生胍基化反应（其选择性达到96.8％），转化为高精氨酸，碱性增强。因此在正离子质谱模式下，C 端为赖氨酸的肽段产生了更多的 y 离子，提供了许多新的离子碎片信息。在鉴定结果中，此类肽段所占总肽段的比例由原来的51.7％上升为57.3％，并且有1015条新的肽段被检测到。对于不含有赖氨酸的肽段，其鉴定结果在胍基化前后基本没有变化。结果表明，胍基化可以在一定程度上提高质谱鉴定的灵敏度和互补性，提高蛋白质分析的覆盖率。一种混合模式反相弱阳离子交换色谱填料的制备及其保留机理
摘要：采用“点击化学”的合成方法制备了一种混合配体的辛基-羧基共同键合硅胶（OCS）材料，经元素分析和红外光谱表征，证明了辛基和羧基官能团均已成功键合到硅胶表面。将其作为混合模式反相弱阳离子交换（ RP / WCX）的固定相填料，以3种同系物阳离子表面活性剂作为探针分子，定量研究了该固定相的混合模式保留机理，考察了溶质保留因子与盐浓度和溶质亚甲基数目的关系，验证了混合模式固定相的单点和两点保留机理的数学模型，并进一步将其应用于一系列标准碱性混合物的分离。结果表明：两点保留机理更加符合实验的结果；根据混合模式两点保留机理的数学方程，可以得到单一的疏水或离子交换作用力对总保留的影响，对混合模式色谱的实际分离应用提供了有价值的参考。本文建立了反相弱阳离子交换混合模式 OCS 固定相的保留机理的定量模型，并证明了该固定相在碱性化合物的分离中具有很大的应用前景。以聚乙二醇／甲醇为二元致孔剂的新型磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱的合成与色谱评价
摘要：使用新型二元致孔剂聚乙二醇（PEG）/甲醇，以 N，N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N，N-二甲基-N-丙烷磺酸内盐（SPP）为单体，季戊四醇三丙烯酸酯（PETA）为交联剂，偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂，通过原位聚合法制备磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱。对各反应物的配比进行了优化。结果表明，当单体与致孔剂的质量比为1：2.5，并且致孔剂中 PEG 与甲醇的质量比为1：2，单体内部 SPP 与 PETA 的质量比为1：1，AIBN 为总质量的0.1％时为最优配比；PEG /甲醇二元致孔剂的加入实现了对整体柱内部孔径大小的调节，得到了结构更为均一，渗透性、机械稳定性良好的毛细管整体柱，并且理论塔板数与传统制备方法相比有显著提高，在毛细管液相色谱模式下最高可达2．4×10^5塔板/ m。将制备的整体柱应用于毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱分离酚类、核苷类等极性小分子混合物，得到了很好的分离效果。电喷雾离子源中样品离子化能量转移理论的初探
摘要：电喷雾离子源（electrospray ionization，ESI）不仅可以用于小分子的检测，也能够用于蛋白质、多肽等大分子的研究。本文通过对离子化过程的系统分析，提出了基于能量最低原理的离子化过程能量转移理论。样品分子在由液相转移到气相形成离子化气体的过程中受到静电力、分子间的范德华力等多种力的作用。样品的离子化是多种力共同作用的结果，在不同的离子化阶段，不同形式的力的作用也不尽相同。电荷在样品表面蒸发和多电荷离子的形成之间存在竞争。对不同结构的分子，分子形态、构象改变导致的两相间转移 Gibbs 自由能变化不同，可能导致离子蒸发、大分子形成多电荷离子、产生链弹射等行为。离子化能量转移理论不仅能够对已有的3种理论加以简化统一，也可以说明溶剂、电解质离子等在离子化过程中的作用，为优化不同结构与形态样品的质谱检测、了解离子化的真实过程提供了一种可能的依据。基于整体材料搅拌棒固相萃取高效液相色谱联用测定饲料和水样中硝基呋喃类药物残留
摘要：利用自制的以聚（乙烯基咪唑-二乙烯基苯）（VIDB）整体材料为涂层的固相萃取搅拌棒（ VIDB-SBSE）萃取3种硝基呋喃类药物，然后与高效液相色谱-二极管阵列检测器联用建立了测定饲料和水样品中硝基呋喃类药物残留的方法。详细考察了萃取过程中萃取和解吸时间、样品基质的 pH 值以及离子强度等实验条件对萃取效率的影响。在最佳条件下，呋喃唑酮的线性范围为0.5-200μg / L，呋喃妥因和呋喃西林的线性范围为0.25-200μg / L，3种目标物的检出限（LOD）（S / N =3）在0.068-0.11μg / L 之间，所建方法具有理想的日内和日间重现性（RSD 值均小于6％）。在对饲料和实际水样的测定中，不同加标浓度呋喃唑酮、呋喃妥因和呋喃西林的回收率在80.6％-108％之间。研究表明，所建立的方法具有简便、灵敏、环境友好等特点。整体柱固相萃取-高效液相色谱法在线分析水果中的氯吡脲
摘要：建立了整体柱固相萃取-高效液相色谱/紫外检测在线联用方法并用于水果中氯吡脲的分析测定。考察了萃取溶剂的 pH 值及其流速、溶剂解吸时间及其流速等因素对氯吡脲萃取率的影响。在优化的条件下，该方法对氯吡脲的富集倍数为214倍，方法的线性范围为0.01-50.00μg / L，检出限为25 ng / L，相对标准偏差（ RSD）为3.9％。黑葡萄、猕猴桃和西瓜等水果中氯吡脲的加标回收率为87.0％-120.7％，RSD 为0.6％-9.2％。结果表明该方法快速、灵敏，能满足水果中痕量氯吡脲残留分析的要求。四氧化三铁／单壁碳纳米管磁性复合纳米粒子分散固相微萃取-高效液相色谱法测定牛奶中的香精添加剂
摘要：通过化学键合的方法制备单壁碳纳米管包覆的四氧化三铁（ Fe3 O 4/ CNTs）磁性复合纳米粒子。首先用水热法合成磁性 Fe3 O4纳米粒子，并进行硅烷氨基化处理，羧基化的单壁碳纳米管通过1-（3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDC）和 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）交联剂反应修饰到 Fe3 O 4纳米颗粒表面。合成的 Fe3 O 4/ CNTs 复合纳米粒子具有很高的磁响应度和很好的分散能力，是一种很好的分散固相萃取剂。本研究将合成的 Fe3 O 4/ CNTs纳米粒子用于分散固相微萃取富集牛奶中的香精添加剂，并与高效液相色谱分析联用，实现了香兰素和乙基香兰素的快速高效富集和高灵敏度检测，两者的检出限达10μg / L，回收率大于92％。本研究表明，合成的 Fe3 O 4/ CNTs磁性复合粒子是一种很好的奶制品中香兰素添加剂的样品前处理富集材料。改进的 QuEChERS 方法用于鱼肉中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的快速检测
摘要：孔雀石绿（MG）和结晶紫（CV）具有抗菌等活性，常被违法用于水产养殖业。但 MG、CV 及其代谢产物隐色孔雀石绿（LMG）、隐色结晶紫（LCV）具有致癌性。所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。由于水产品基质复杂，样品前处理尤为重要。本文发展了一种基于 QuEChERS 技术与高效液相色谱联用的方法，用于鱼肉中4种染料的同时检测。对 QuEChERS 方法中提取剂体积、提取次数以及分散固相萃取材料进行了优化。结果表明反相/强阴离子交换材料（C18SAX）能有效提高回收率。在最优条件下，4种染料在0.5-100 mg / L 范围内线性良好，相关系数均大于0.998。该方法在鱼肉中的回收率为73％-91％，RSD 为0.66％-5.41％。结果表明该方法简单、高效，适合于鱼肉中染料的快速检测。保留时间两点校正反相高效液相色谱法测定持久性有机污染物的正辛醇-水分配系数
摘要：采用改进的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定了持久性有机污染物（ POPs）包括多环芳烃（ PAHs）、多氯二苯并二恶英（PCDDs）、多氯二苯并呋喃（PCDFs）和十溴二苯乙烷（ DBDPE）等的正辛醇-水分配系数（ logK ow ）。采用保留时间双点校正法（DP-RTC）校正因色谱柱老化等引起的保留时间漂移。以37种有可靠 logK ow 实验值的苯系物、PAHs、PCDD / Fs 类似物为模型化合物，建立了 logK ow 和外推至纯水相的保留因子 logk w 的定量结构-色谱保留关系（QSRR）模型，回归方程为 logK ow =（1.18±0.02）logk w ＋（0.36±0.11），其相关系数（R 2）为0.985，交叉验证相关系数（R2 cv ）为0.983，标准偏差（SD）为0.16。进而，用4个已有可靠 logK ow实验值的验证化合物（联苯、芴、PCDD 1和 PCDF 114）对模型进行了外部验证，表明 RP-HPLC 测得的 logK ow 值与摇瓶法/慢搅法结果有很好的一致性，尤其是对疏水性强的化合物。采用该模型测定了29种特别受关注的 POPs 的 logK ow 值，这些化合物的logK ow 实验值均未见报道。所建立的 DP-RTC-HPLC 是测定强疏水性 POPs 的 logK ow值的一种值得推荐的方法。基于冷冻熔炼的液-液萃取／气相色谱法测定啤酒中的 N-二甲基亚硝胺
摘要：建立了一种新型的冷冻熔炼液-液萃取法直接提取啤酒中的 N-二甲基亚硝胺（ N-nitrosodimethylamine， NDMA），萃取液经 GC-FID 分析，双柱法定性，外标法定量。优化的前处理条件为：以二氯甲烷为萃取溶剂，啤酒样品和萃取溶剂的体积比为9：1，-19℃下冷冻16 h。结果表明：NDMA 在5~200 mg / L 范围内具有良好的线性关系（r2=0.9996）；在5、10和20 mg / L 3个加标水平下的回收率分别为84.94％、83.24％、85.14％，平行7次测定的相对标准偏差（RSD）分别为3.06％、3.19％、2.63％。与常规液-液萃取方法（需要经过蒸馏、萃取、旋蒸、氮吹4个步骤）相比，本方法稳定、可靠，且操作简单，有机溶剂消耗量少。
