丹皮酚对肝癌HepG2/ADM细胞株多药耐药性的逆转作用及其机制
摘要：目的探讨丹皮酚体外给药对肝癌耐药细胞株Hep G2/阿霉素（ADM）多药耐药性的逆转作用及其可能分子机制。方法采用人的肝癌细胞株HepG2,体外ADM浓度递增法诱导建立耐药肝癌细胞HepG2/ADM耐药模型。分别用0、5、10、25、50、100μmol/L的丹皮酚培养液培养HepG2/ADM、Hep G2细胞48 h,选定25、50μmol/L丹皮酚进行下一步实验。分别采用ADM（0.01、0.2、0.5、0.75、1.5、3.0μmol/L）和氟尿嘧啶（0、1、2、4、10、20、40μmol/L）单独刺激,及25、50μmol/L丹皮酚联合上述各浓度的氟尿嘧啶及ADM联合刺激2种细胞株。采用MTT法检测HepG2/ADM、HepG2细胞的增殖水平,流式细胞仪检测Hep G2/ADM、HepG2细胞内细胞毒药物含量,蛋白免疫印迹法检测肿瘤细胞P-糖蛋白表达水平。结果 ADM抑制Hep G2/ADM、HepG2细胞株的IC50依次为1.48、124.14μmol/L,耐药指数为83.9;丹皮酚（25、50μmol/L）能够明显增强ADM、氟尿嘧啶对HepG2/ADM细胞株的细胞毒作用,并降低IC50值（P均〈0.01）,但对HepG2细胞的细胞毒作用无明显影响;丹皮酚（25、50μmol/L）能够明显增加HepG2/ADM细胞株对ADM的摄取能力（P均〈0.01）,但对HepG2细胞株无明显影响;丹皮酚能显著降低HepG2/ADM细胞株P-糖蛋白表达水平（P均〈0.01）,但对HepG2细胞株P-糖蛋白水平无明显影响。结论丹皮酚对HepG2/ADM细胞株多药耐药性具有明显的逆转作用,可能与其抑制HepG2/ADM细胞株P-糖蛋白表达、增加细胞毒药物细胞内摄取有关。JNK信号通路对肝癌小鼠PGE_2及CD4~＋CD25~＋调节性T细胞表达的影响
摘要：目的探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路对肝癌小鼠PGE_2以及CD4~＋CD25~＋调节性T细胞表达的影响。方法 BALB/c小鼠肝癌移植瘤模型分为实验组与对照组,分别用SP600125多肽和生理盐水处理24 d,RT-PCR法检测各组JNK,ELISA法检测PGE_2,流式细胞术和免疫组化法分别检测小鼠外周血和肝癌组织中CD4~＋CD25~＋调节性T细胞。结果实验组JNK表达低于对照组（0.68±0.03比0.98±0.17,P〈0.05）。实验组组织中PGE_2的表达低于对照组[（4.64±0.36）ng/g比（6.64±1.24）ng/g,P〈0.05）];实验组外周血PGE_2的表达低于对照组[（76.57±10.16）pg/m L比（107.88±16.13）pg/m L）,P〈0.05];在肝癌组织中,实验组CD4＋CD25~＋调节性T细胞所占百分比低于对照组[（14.37±3.35）%比（30.90±4.19）%,P〈0.05];在外周血中,实验组CD4~＋CD25~＋调节性T细胞所占百分比低于对照组[（3.20±0.12）%比（4.22±0.32）%）,P〈0.01]。结论阻断肝癌小鼠JNK信号通路可使PGE_2表达下降,进而引起CD4~＋CD25~＋调节性T细胞水平降低。《山东医药》参考文献著录要求
摘要：每篇论文须标引参考文献10~20条。正文中引用的文献采用顺序编码制,以引用文献的先后顺序连续编码,并将序号置于方括号中。文后参考文献按GB/T7714-2005《文后参考文献著录规则》采用顺序编码制标注,序号置于方括号中,排列于文后。内部刊物、未发表资料、个人通信等请勿作为文献引用,确需引用时,可将其在正文相应处注明。引用文献（包括文字和表达的原意）务请作者与原文核对无误。日文汉字请按日文规定书写,勿与我国汉字及简化字混淆。参考文献中的作者前1~3名全部列出,3名以上只列前3名,后依文种加表示＂,等＂的文字。食管癌变进程中HGF、c-met、VEGF蛋白的表达变化及意义
摘要：目的研究从正常食管→食管癌前病变→早期食管癌→进展期食管癌过程中,处于不同病变阶段上皮或间质中HGF、c-met及VEGF蛋白的表达变化及意义。方法免疫组化法检测HGF、c-met及VEGF蛋白在正常食管组织20份、低级别上皮内瘤变组织30份、高级别上皮内瘤变组织50份、早期癌组织25份、进展期癌组织25份中的表达。抗体CD34标记血管内皮细胞,测算微血管密度。结果正常食管低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、早期癌变、早期癌、进展期癌上皮组织中,HGF蛋白阳性表达率依次为0（0/20）、3%（1/30）、26%（13/50）、36%（9/25）、60%（15/25）;在间质中的阳性表达率依次为0（0/20）、0%（0/30）、30%（15/50）、52%（13/25）、76%（19/25）;在食管病变上皮中c-met蛋白阳性表达率依次为0（0/20）、10%（3/30）、30%（15/50）、36%（9/25）、56%（14/25）;在间质中VEGF蛋白阳性表达率依次为0（0/20）、3%（1/30）、26%（13/50）、36%（9/25）、52%（13/25）;MVD值分别为12.33±1.68、15.72±1.97、20.91±2.20、26.42±1.96、30.01±2.35。5种组织中,HGF、c-met、VEGF蛋白的表达及MVD值差异有统计学意义（P均〈0.01）。结论随食管癌变进展,食管上皮组织中HGF、cmet及间质中VEGF蛋白表达均明显升高,HGF/c-met蛋白通路可刺激间质成纤维细胞分泌VEGF蛋白,促进间质微血管形成,加速癌的进展。前列腺癌组织中ERG蛋白的表达变化及意义
摘要：目的观察前列腺癌（PCa）组织中ERG蛋白的表达变化并探讨意义。方法选择144例PCa和100例良性前列腺增生（BPH）患者,取其前列腺组织,采用免疫组化Max Vision法检测ERG蛋白,并分析其与相关临床病理特征的关系。结果 PCa及BPH组织中ERG蛋白的阳性表达率分别为25.0%和0,两者比较,P〈0.01;PCa组织中ERG蛋白表达与患者的年龄、术前前列腺特异性抗原值及远处转移无关（P均〉0.05）,与Gleason评分呈负相关（r=-0.175,P〈0.05）,Gleason评分≤7分组ERG蛋白表达率高于Gleason评分〉7分组（P〈0.05）。结论PCa患者前列腺癌组织中ERG蛋白表达升高,ERG蛋白的检测可能有助于PCa患者的鉴别诊断及病理分级。肺癌组织中Kiss-1蛋白的表达变化及意义
摘要：目的探讨Kiss-1蛋白在肺癌组织中的表达变化及意义。方法选取肺癌患者60例,其中肺鳞癌3例（鳞癌组）、腺癌27例（腺癌组）,另择肺癌同侧距肿瘤边缘5 cm以上的肺泡（25例）（肺泡组）及支气管正常组织（29例）（支管组）。采用免疫组化SP法检测Kiss-1蛋白的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果 Kiss-1蛋白在肺鳞癌和肺腺癌组中的表达均显著低于肺泡组或支气管组（P均〈0.01）;Kiss-1蛋白表达与肺癌淋巴结转移、TNM分期明显相关（P均〈0.05）,与肺癌患者性别、年龄及肿瘤大小、分化程度、组织学类型无明显相关（P均〉0.05）。结论 Kiss-1蛋白在肺癌组织中表达降低,其在肺癌的发生和转移过程中发挥抑癌作用。非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响
摘要：目的观察非必需氨基酸（NEAA）和β-巯基乙醇对神经干细胞（NSCs）增殖的影响。方法取孕龄为14.5 d的雌鼠,处死后提取NSCs并培养,取5~7代的NSCs用于实验,将NSCs细胞使用传代培养基培养,并分为四组,对照组：加入磷酸盐缓冲液（PBS）12μL;NEAA组：加入NEAA 10μL,PBS 2μL;β-巯基乙醇组：加入β-巯基乙醇2μL,PBS 10μL;NEAA＋β-巯基乙醇组：加入NEAA 10μL,β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度,噻唑蓝（MTT）法测定NSCs增殖率,RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）的表达,免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较,NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低（P〈0.05或〈0.01）;β-巯基乙醇组及NEAA＋β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低,Nestin升高（P〈0.05或〈0.01）。与NEAA组比较,NEAA＋β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）;与β-巯基乙醇组比较,NEAA＋β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低（P〈0.05或〈0.01）。结论 NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖,联合使用起协同作用。子宫内膜癌组织中miR-15a的表达变化及其对子宫内膜癌细胞侵袭转移的影响
摘要：目的探讨miR-15a在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞侵袭转移的影响。方法选取原发性子宫内膜癌组织及癌旁组织标本79份,利用荧光定量PCR检测组织中miR-15a的表达。将miR-15a模拟物（miR-15a转染组）、无关序列模拟物（非转染组）转染入RL95-2人子宫内膜癌细胞,并设立阴性对照组。利用荧光定量PCR检测RL95-2细胞中miR-15a表达,利用Transwell肿瘤细胞迁移实验和Transwell肿瘤细胞侵袭实验对RL95-2细胞迁移能力和侵袭力进行检测,利用Western blotting法检测RL95-2细胞中基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达。结果 miR-15a在子宫内膜癌组织中相对表达量（2.37±0.96）显著低于癌旁组织（4.83±1.27）（P〈0.05）;miR-15a在子宫内膜癌组织中的表达与FIGO分期、淋巴结转移和远处转移有关（P均〈0.05）;miR-15a转染组细胞中miR-15a相对表达量（8.71±2.65）显著高于阴性对照组（3.62±1.97）和未转染组（3.59±1.83）（P均〈0.05）;miR-15a转染组穿膜细胞数显著低于阴性对照组和未转染组（P均〈0.05）;miR-15a转染组细胞中MMP-2蛋白相对表达量（1.62±0.59）显著低于阴性对照组（4.57±2.05）和未转染组（4.64±2.17）（P均〈0.05）。结论miR-15a在子宫内膜癌组织中呈低表达,过表达的miR-15a可通过抑制MMP-2蛋白抑制肿瘤细胞的侵袭及转移。二甲双胍对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制
摘要：目的探讨二甲双胍对人子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法以不同浓度（0、1、5、10 mmol/L）的二甲双胍作用于Ishikawa细胞分别干预24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖率;干预48 h后,采用RT-PCR技术检测雷帕霉素靶蛋白（m TOR）和DNA损伤反应调节基因（REDD1）mRNA的表达,Western blotting技术检测m TOR和REDD1蛋白的表达。结果二甲双胍抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖,呈浓度时间依赖性（P均〈0.05）。二甲双胍增加REDD1蛋白及基因的表达,降低m TOR蛋白及基因的表达（P均〈0.05）。结论二甲双胍可能通过REDD1/m TOR信号通路抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖。《山东医药》对来稿中统计学处理的有关要求
摘要：统计学分析方法的选择：对于定量资料,应根据所采用的设计类型、资料所具备的条件和分析目的,选用合适的统计学分析方法,不应盲目套用t检验和单因素方差分析;对于定性资料,应根据所采用的设计类型、定性变量的性质和频数所具备的条件以及分析目的,选用合适的统计学分析方法,不应盲目套用χ2检验。普伐他汀对人胰腺癌细胞SW1990增殖的抑制作用及其机制
摘要：目的探讨普伐他汀对人胰腺癌细胞SW1990增殖的抑制作用及其机制。方法分别用含普伐他汀0、1、5、10、15、20、25、50μmol/L的RPMI1640培养基培养人胰腺癌细胞SW1990,24、48、72、96 h后采用MTT比色法检测细胞抑制率,以观察普伐他汀对SW1990细胞增殖的影响。48 h后采用流式细胞仪测定细胞周期分布并测算细胞增殖指数（PI）,以观察0、5、10、20μmol/L普伐他汀对SW1990细胞周期分布和凋亡的影响,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞仪及间接免疫荧光技术分析普伐他汀作用后SW1990细胞p21Ras、细胞周期蛋白激酶4（CDK4）、Bax蛋白表达的变化。结果普伐他汀（1、5、10、15、20、25、50μmol/L）对SW1990细胞具有抑制增殖的作用,有明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系（P均〈0.05）。普伐他汀作用SW1990细胞后,有明显的细胞形态学改变。0、5、10、20μmol/L普伐他汀作用SW1990细胞48 h后,随药物浓度增大,G0/G1期细胞逐渐增多;S期和G2/M期细胞则逐渐减少（P均〈0.05）。0、5、10、20μmol/L普伐他汀处理细胞48 h后,出现典型的亚二倍体凋亡峰,依普伐他汀浓度增大而逐渐升高;细胞凋亡率分别为1.06%、6.24%、12.46%、17.21%。0、5、10、20μmol/L普伐他汀处理SW1990细胞48 h后,p21Ras、CDK4的荧光指数FI值随处理浓度增大而逐渐降低;Bax的FI值则随处理浓度增大而逐渐升高（P均〈0.05）。结论普伐他汀可通过下调p21Ras、CDK4蛋白的表达和上调Bax蛋白的表达而发挥其抑制胰腺癌细胞SW1990增殖、诱导该细胞凋亡的作用。唑来膦酸联合培美曲塞对肺腺癌细胞的体外抗肿瘤作用
摘要：目的探讨唑来膦酸联合细胞毒性药物培美曲塞是否有协同抗肺肿瘤作用。方法将不同浓度（0.1、0.5、1、5、10、50、100μg/m L）唑来膦酸和不同浓度（0.001、0.01、0.1、1、10、100μg/m L）培美曲塞以及两药联合（1、10μg/m L唑来膦酸＋0.01μg/m L培美曲塞）作用于体外培养的A549肺腺癌细胞株24、48、72 h,采用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率。透射电子显微镜观察细胞形态学改变。结果唑来膦酸及培美曲塞单药对A549细胞株生长有抑制作用,呈剂量-时间依赖性（P均〈0.05）;唑来膦酸联合培美曲塞能够增强对细胞增殖的抑制作用（P〈0.05）。两药联合用药时的细胞凋亡率高于单药（P均〈0.05）。结论唑来膦酸及培美曲塞对A549细胞株均具有生长抑制及诱导凋亡作用,二者联用有协同抗肺肿瘤作用。rh-bFGF对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机制
摘要：目的研究重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-b FGF）对兔视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）的保护作用,并探讨其作用机制。方法 66只雄性体健大耳白兔随机分为3组：A组为RIRI组（30只）、B组为RIRI＋rh-b FGF组（30只）、C组为正常假手术组（6只）,A、B组按6、12、24、48、72 h 5个时间点又随机分为5组,每组6只。造模初期,分别往A、B组实验动物玻璃体腔内注入相同剂量的生理盐水和rh-b FGF溶液,并分别于制模后5个时间点处死动物摘取眼球,制作视网膜标本。C组实验动物给予前房穿刺,处死并摘除眼球。组织标本常规HE染色后观察各组兔视网膜组织病理学变化,免疫组化法检测c-Fos、c-Jun阳性细胞数。结果 C组兔视网膜各层次清晰、细胞平行排列且形态规则,视网膜神经节细胞呈单层排列、规则,无空泡变性。A组兔视网膜出现高度水肿,层次紊乱、细胞结构疏松,视网膜神经节细胞出现空泡样变性,神经节细胞数目减少。B组兔视网膜结构层次和细胞组织变化与A组变化大致相同,但其损害程度较A组明显减轻。C组兔视网膜中未发现c-Fos、c-Jun表达;与A组比较,B组RIRI后5个时间点视网膜组织中c-Fos、c-Jun阳性细胞数减少（P均〈0.05）。结论 rh-b FGF对兔视网膜RIRI有保护作用,其机制可能与抑制c-Fos、c-Jun的表达有关。磁性牵引装置在小型家猪单孔腹腔镜胆囊切除术中的应用
摘要：目的探讨磁性牵引装置在小型家猪单孔腹腔镜胆囊切除术中的安全性及有效性。方法使用磁性牵引装置辅助暴露下行小型家猪单孔腹腔镜下胆囊切除术10例（实验组）,磁性牵引装置由永久硼铷磁铁及血管夹组成,采用丝线悬吊方法辅助暴露完成单孔腹腔镜下胆囊切除术10例（对照组）,了解磁性牵引装置的性能,同时比较实验组与对照组手术时间、出血量。结果在距离0.2、0.5、1、2、4 cm时,磁性牵引装置牵引力分别为453、255、131、39、0.8 N;实验组与对照组手术时间分别为（57.5±18.3）、（53.7±20.6）min,出血量分别为（17±5.4）、（20±6.1）m L,两组比较,P均〈0.05。结论磁性牵引装置在2 cm以内可提供确切有效的牵引力,可明显暴露术野,缩短单孔腹腔镜胆囊切除术的手术时间,且安全性好。血清CYFRA21-1与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的关系
摘要：目的探讨细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的关系。方法 47例浸润性膀胱尿路上皮细胞癌患者中,初发肿瘤36例、复发肿瘤11例,临床分期：T_2期34例,T_3期9例,T_（4a）期4例。病理分级：G_1级9例,G_2级22例,G_3级16例。采用电化学发光免疫分析技术检测术前血清CYFRA21-1水平,以3.5μg/L为临界值将上述患者分为高表达组与低表达组,绘制Kaplan-Meier生存曲线,并进行比较。采用χ~2检验分析CYFRA21-1表达与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌患者临床病理特征的关系。结果血清CYFRA21-1在T_（3~4a）期中高表达的比例明显高于T_2期,CYFRA21-1在复发膀胱癌中高表达的比例明显高于初发膀胱癌（P均〈0.05）。而CYFRA21-1表达的高低与膀胱癌患者的年龄、性别、病理分级等指标无关。CYFRA21-1高表达组膀胱癌患者的平均生存时间、术后3年生存率、术后5年生存率均明显低于CYFRA21-1低表达组（P均〈0.05）。结论检测治疗前血清CYFRA21-1水平有助于浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的判断。液基薄层细胞学检查在宫颈癌患者放化疗疗效评估中的应用
摘要：目的探讨液基薄层细胞学检查（TCT）在宫颈癌患者放化疗疗效评估中的应用价值。方法搜集有宫颈癌放化疗病史的323例患者的TCT涂片,其中放化疗结束后1个月32例、3个月48例、6个月31例、9个月11例、12个月78例、18个月44例、2年36例、3年15例、5年28例。结果结果判定依据2001版TBS诊断系统。放化疗结束后正常宫颈细胞检出率为75.9%（245/323）;异常宫颈细胞检出率为24.1%（78/323）,其中意义不明确鳞状上皮细胞、不除外高度鳞状上皮内病变、低度鳞状上皮内病变、高度鳞状上皮内病变、鳞癌、非典型腺细胞和腺癌分别为32.0%、19.2%、3.8%、19.2%、24.4%、1.3%、0。放化疗结束后1、3、6、9、12、18个月,2、3、5年异常宫颈细胞检出率分别为3.8%（14/32）、25.0%（12/48）、29.0%（9/31）、27.3%（3/11）、25.6%（2/78）、20.5%（9/94）、19.4%（7/36）、13.3%（2/15）、7.1%（2/28）。23例活检病例中,18例异常细胞学病例得到了组织学证实;5例异常细胞学病理结果提示放化疗后反应性改变,结果符合率为78.3%。结论 TCT可作为宫颈癌放化疗后疗效评判的监测指标。胸腺五肽对肾癌患者围手术期细胞免疫功能的影响
摘要：目的探讨胸腺五肽对肾癌患者围手术期细胞免疫功能的影响。方法将56例Ⅰ~Ⅲ期肾癌患者根据围手术期是否给予胸腺五肽治疗分为治疗组（35例）、未治疗组（21例）。两组均于术前1 d,术后第1、7、14天抽取外周空腹静脉血。另外收集健康查体中心的20例健康查体者（对照组）的外周空腹静脉血。采用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群（CD3~＋、CD4~＋、CD8~＋）以及自然杀伤（NK）细胞所占百分比。结果治疗组、未治疗组术前CD3~＋、CD4~＋/CD8~＋及NK细胞所占百分比较对照组低（P均〈0.05）,治疗组和未治疗组术前各指标无统计学差异（P均〉0.05）。术后第1、7天,未治疗组患者的CD3~＋、CD4~＋/CD8~＋及NK细胞所占百分比均较术前明显下降（P均〈0.05）,第14天仍较术前及对照组低（P均〈0.05）。术后第1天,治疗组CD3~＋、CD4~＋/CD8~＋及NK细胞所占百分比也均较术前明显下降（P均〈0.05）,之后逐渐升高,术后第7天时恢复至术前水平（P均〉0.05）,术后第14天与对照组差异无统计学意义（P均〉0.05）。术后第1、7、14天,治疗组CD3~＋、CD4~＋/CD8~＋及NK细胞所占百分比均明显高于未治疗组（P均〈0.05）。治疗组无明显不良反应出现。结论胸腺五肽可增强肾癌患者围手术期细胞免疫功能。胆脂瘤上皮细胞中Caspase-9及Smac的表达变化及其相关性
摘要：目的探讨胆脂瘤上皮细胞中Caspase-9和Smac的表达变化及其相关性。方法选取16例胆脂瘤样本及10例正常对照样本。应用免疫组化法及Western blotting法检测Caspase-9和Smac的表达。采用Spearman检验分析Caspase-9和Smac的相关性。结果胆脂瘤上皮细胞中Caspase-9及Smac蛋白表达较正常对照明显降低（P均〈0.01）,Smac及Caspase-9的表达水平呈正相关（r=0.744,P〈0.01）。结论胆脂瘤上皮细胞中Smac和Caspase-9的表达降低,Smac及Caspase-9的表达呈正相关。
