摘要:目的:寻找并获得内异症患者差异表达基因,进行功能分析,探讨它与内异症发病的关系.方法:用荧光标记差异显示技术(Fluoro-DDPCR)克隆测序,Northem Blot杂交验证.结果:克隆了33个差异片段,大小介于300~1500bp之间.根据结果将已测序的差异片段分为3类,第1类有15个差异片段的序列,与已知基因的同源性高于98%,可认为代表着此基因;第2类有10个差异片段的序列,在数据库里有高度同源的EST,其中有的与其同源EST完全相同,但代表基因的全序列尚未找到;第3类有8个未在数据库中找到高同源序列的克隆,可能代表新的基因.在已知基因中,PABP,TPT-1等在内异症组表达显著增强,而HIB-CoA水解酶则低于非内异症组.并鉴定了20号EST的组织表达特征.结论:内异症的发生发展涉及到新基因的开启表达或某些已知基因的表达量上调/下降.Fluoro-DDPCR可快速、敏感、经济有效的筛选差异表达基因.
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