噬菌体展示肽库筛选赭曲霉毒素A模拟表位的研究

作者:刘仁荣; 余宙; 何庆华; 王希; 许杨

摘要:目的从噬菌体随机肽库中筛选模拟赭曲霉毒素A表位的噬菌体粒子,并以其替代毒素建立免疫学检测方法.方法以抗赭曲霉毒素A的单克隆抗体为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序确定插入七肽的氨基酸序列.结果经过4轮淘选,共筛选到11株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合能被赭曲霉毒素A阻断,模拟表位的共有序列为IRPMVXX,X为任意氨基酸.以其中的P2号克隆建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200~8000pg/ml,检测下限为150pg/ml.结论噬菌体展示技术可成功筛选到赭曲霉毒素A模拟表位,筛选到的噬菌体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学分析方法.

分类:
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关键词:
  • 噬菌体展示肽库
  • 赭曲霉毒素a
  • 模拟表位
  • 单克隆抗体
  • 免疫分析

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期刊名称:卫生研究

期刊级别:北大期刊

期刊人气:3866

杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国卫生部
主办单位:中国疾病预防控制中心
出版地方:北京
快捷分类:医学
国际刊号:1000-8020
国内刊号:11-2158/R
邮发代号:82-720
创刊时间:1972
发行周期:双月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:0.76
综合影响因子:1.26