山东医药杂志 统计源期刊

山东医药 2017年第45期杂志 文档列表

山东医药杂志论著

食管鳞状细胞癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A表达变化及其相关性1-4

摘要：目的观察食管鳞状细胞癌（ESCC）癌组织及癌旁组织中miRNA-29家族（miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c）及血管内皮生长因子A（VEGF-A）的相对表达量变化,并探讨他们之间的关系。方法收集手术切除并经病理检查确诊的ESCC癌组织及癌旁组织,应用qRT-PCR及免疫组织化学染色技术分别检测miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A的相对表达量,并分析其相关关系;进一步应用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因系统推测和验证miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同调控同一靶基因VEGF-A的分子调节机制。结果与癌旁组织比较,ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c呈低表达（P均〈0.05）;VEGF-A呈高表达（P〈0.05）,且其之间呈负相关关系（miRNA-29a：r=-0.955;miRNA-29b：r=-0.950;miRNA-29c：r=-0.893,P均〈0.01）。生物信息学分析结果发现,VEGF-A能够与miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c进行特异性结合,可能为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。双荧光素酶报告基因系统验证了VEGF-A是miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。结论 ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c低表达,VEGFA高表达;且他们之间具有负相关关系。VEGF-A为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶向调节基因。

TGF-β对胃癌细胞干性因子Oct4、Nanog表达的影响及机制5-8

摘要：目的探讨TGF-β对胃癌细胞干性因子Oct4、Nanog表达的影响。方法将培养的胃癌MKN45细胞分为对照组、TGF-β（10 ng/m L）组和TGF-β＋BAPTA-AM组,对照组不进行任何处理,其余两组分别采用相应试剂刺激24h。采用qRT-PCR、Western blotting技术检测胃癌相关干性因子Nanog、Oct4的mRNA和蛋白表达水平。高速离子成像系统检测加入正常的PSS液（空白对照组）、加入TGF-β（20 ng/m L）（单独TGF-β组）及加入TGF-β＋BAPTA-AM（联合组）作用后胃癌细胞MKN45内Ca2＋浓度的变化。结果与对照组比较,TGF-β组Nanog和Oct4 mRNA及蛋白的表达上调（P均〈0.05）,与TGF-β组比较,TGF-β＋BAPTA-AM组Nanog和Oct4 mRNA及蛋白的表达下调（P均〈0.05）。与空白对照组比较,TGF-β组细胞内钙增加（P〈0.05）;与单独TGF-β组比较,联合组细胞内钙减少（P〈0.05）。结论 TGF-β可能通过增加细胞内钙浓度而使胃癌细胞干性因子Oct4、Nanog的表达增强。

直线相关与回归分析的区别和联系8-8

摘要：区别：（1）资料要求不同：直线相关分析要求两个变量都是正态分布;回归分析要求因变量Y服从正态分布,而自变量X是能精确测量和严格控制的变量。（2）统计意义不同：直线相关分析反映两变量间的伴随关系,这种关系是相互的、对等的,不一定有因果关系;回归则分析反映两变量间的依存关系,一般将＂因＂或较易测定、变异较小者定为自变量,这种依存关系可能是因果关系或从属关系。（3）分析目不同：

乳腺癌组织中CD68、VEGF的表达变化及意义9-12

摘要：目的探讨CD68和血管内皮生长因子（VEGF）在乳腺癌组织中的表达变化及其临床意义。方法采用免疫组化法检测230例份乳腺癌组织及相应癌旁组织中CD68和VEGF的表达,分析二者表达与乳腺癌临床病理参数、乳腺癌复发的关系以及二者表达的相关性。结果乳腺癌组织中CD68蛋白、VEGF蛋白阳性表达率均高于癌旁组织（P均〈0.01）。CD68蛋白阳性表达与乳腺癌患者的临床分期、淋巴结转移、雌激素受体（ER）相关（P〈0.05）。VEGF蛋白阳性表达与乳腺癌患者的ER相关（P〈0.05）。CD68与VEGF蛋白在乳腺癌复发患者中的阳性表达率均高于未复发者（P均〈0.05）。CD68蛋白与VEGF蛋白的表达呈正相关（rs=0.397,P〈0.01）。结论乳腺癌组织CD68蛋白、VEGF蛋白表达升高,其二者可能协同参与了乳腺癌的发生、发展及复发。

铜绿假单胞菌注射液对肺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制13-15

摘要：目的探讨铜绿假单胞菌（PA）注射液对肺癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法选择肺癌细胞株NCI-H1395和95-D接种于96孔板,分别设对照组和观察1、2、3组,分别加入0、0.25×109/m L、0.5×109/m L、1×109/m L的PA注射液培养24 h。另设对照组、PA组和AG1478组,对照组不加药,PA组加入1×109/m L的PA,AG1478组加入1×109/m L的PA和10-7mol/L的表皮生长因子受体抑制剂AG1478。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;Annexin V/PI双染试验检测各组细胞凋亡率。结果随着PA浓度的升高,肺癌NCI-H1395和95-D细胞OD570不断降低,细胞凋亡率不断升高（P均〈0.05）。与对照组相比,PA组细胞OD570降低（P〈0.05）,细胞凋亡率升高（P〈0.05）;与PA组相比,AG1478组细胞OD570升高,细胞凋亡率降低（P均〈0.05）。结论 PA注射液通过EGFR信号通路抑制肺癌细胞NCI-H1395和95-D增殖,促进其凋亡。

成人正常核型原发急性髓系白血病中TET2突变情况及临床意义16-19

摘要：目的探讨成人正常核型原发急性髓系白血病（AML）患者中TET2突变情况及其临床意义。方法收集98例成人正常核型原发AML患者的骨髓标本,PCR扩增目的片段,然后进行直接测序检测TET2突变情况,并探讨TET2突变与AML患者临床特征、疗效及生存率的关系。结果 23例AML患者出现TET2突变,且突变的白血病类型多为M2、M5型;与TET2野生型AML患者相比,TET2突变患者骨髓原始细胞、白细胞计数高,血小板计数低（P均〈0.05）,且TET2突变型患者具有较短的总生存期;TET2突变型患者的年龄、性别、血红蛋白、化疗方案、化疗疗效、危险分层、FLT3-ITD和NPM1突变与TET2野生型患者相比差异均无统计学意义（P均〉0.05）。结论成人正常核型原发AML患者中TET2突变发生率较高,与其预后差有关。

医药学名词常见错误及正确写法19-19

摘要：药品名称：错误（正确）二磷酸腺苷（腺苷二磷酸）,消炎痛（吲哚美辛）,阿斯匹林（阿司匹林）,维甲酸（维A酸）,双磷酸盐（双膦酸盐）,甲氨喋呤（甲氨蝶呤）,博莱霉素（博来霉素）,开浦兰（左乙拉西坦）,雷公多苷（雷公藤多苷）,非那根（异丙嗪）,四乙铵（四乙胺）,洗必泰（氯已定）,美息律（美西律）,大环内脂类（大环内酯类）,川穹（川芎）,酒精（乙醇）,头胞哌酮（头孢哌酮）。

miR-373-3p低表达慢病毒载体构建及其对子宫内膜癌细胞增殖迁移的抑制作用20-23

摘要：目的构建人miR-373-3p低表达慢病毒载体,探讨miR-373-3p低表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖和迁移能力的影响。方法利用PCR扩增包含miR-373-3p前体序列的目的基因,经酶切后克隆入慢病毒载体GV280中构建GV280-pre-miR-373-3p inhibitor表达载体,通过与包装质粒共转染293T细胞,进行慢病毒的包装和滴度测定。分别用空载慢病毒（空载病毒组）及重组慢病毒miR-373-3p（miR-373-3p组）感染HEC-1A细胞,并设立空白对照组。采用RT-PCR法检测细胞miR-373-3p mRNA的相对表达水平,CCK-8法检测培养24、48、72、96 h时细胞增殖活力,细胞划痕和Transwell小室试验检测培养24、48 h时细胞迁移能力。结果成功构建了人miR-373-3p低表达慢病毒载体。与空白对照组和空载病毒组比较,miR-373-3p组miR-373-3p相对表达量低,培养48、72、96h HEC-1A细胞增殖活力均降低（P均〈0.05）,24、48 h HEC-1A细胞划痕面积迁移率低,24 h穿膜细胞数少（P均〈0.05）。空载病毒组及空白对照组各指标比较,P均〉0.05。结论成功构建了人miR-373-3p低表达慢病毒载体,miR-373-3p低表达可抑制人子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、迁移能力。

不同剂量X线照射对大鼠卵巢功能的影响24-27

摘要：目的探讨不同剂量X线照射对大鼠卵巢功能的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为对照组、G0.1组、G1.0组、G10.0组,分别采用0、0.1、1.0、10.0 Gy X线外照射,于照射后1 h、5 d（1个动情周期）、10 d（2个动情周期）,分别应用免疫组化SABC法、免疫放射法检测不同剂量X线照射不同时间后Wistar大鼠在不同动物周期中卵巢颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达水平及生殖激素雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的水平;并比较各组上述指标。结果 X线照射后1 h,各组各级卵泡数目及各激素水平比较,P均〉0.05。X线照射后5d,与对照组比较,G0.1组各级卵泡数目升高,血清FSH降低、LH及E2升高;G1.0、G10.0组各级卵泡数目减少,血清FSH升高、LH及E2降低（P均〈0.05）;X线照射后10 d,G10.0组各级卵泡数目减少,血清FSH升高、LH及E2降低（P均〈0.05）。与其余组比较,G10.0组X线照射5、10 d各级卵泡数目减少,血清FSH升高,LH及E2降低（P均〈0.05）。与同组内照射后1 h比较,照射后5 d,G0.1组各级卵泡数目升高,血清FSH降低、LH及E2升高（P均〈0.05）,照射后10 d,均恢复至正常水平;G1.0组照射后5 d各级卵泡数目降低,血清FSH升高、LH及E2降低（P均〈0.05）,照射后10 d恢复至正常水平;G10.0组照射后5、10 d各级卵泡数目均降低,血清FSH升高、LH及E2降低（P均〈0.05）。与照射后1 h比较,G0.1组照射后5 d Bcl-2阳性表达率升高,G1.0组照射后5 d降低,G10.0组照射后5、10 d均降低（P均〈0.05）。结论低剂量X线照射可一定程度抑制细胞凋亡,避免卵巢损伤;当照射剂量超过一定值（≥1.0 Gy）,卵巢功能受损,但损伤是可逆的;当给予超大剂量（10.0 Gy）照射后,卵巢功能严重损伤,甚至出现不可逆性早衰。

GDM孕妇肘静脉及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平变化及意义28-30

摘要：目的观察妊娠期糖尿病（GDM）孕妇肘静脉血清、新生儿脐静脉血清中晚期糖基化终末产物（AGE）及AGE受体（RAGE）水平的变化,探讨其二者与GDM发病、新生儿早期神经系统发育的关系。方法选取GDM孕妇80例（GDM组）,按孕周匹配同期住院分娩糖耐量正常孕妇80例为对照组。采用ELISA法分别检测两组母体肘静脉及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平;出生72 h内,对新生儿行新生儿神经行为测定（NBNA）评分;并对上述指标之间进行相关分析。结果 GDM组母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平高于对照组（P均〈0.05）。GDM组新生儿主动肌张力、原始反射及NBNA总分高于对照组（P均〈0.05）。GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平分别与新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平呈正相关性（r分别为0.725、0.473,P均〈0.05）。GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性（r分别为-0.415、-0.320,P均〈0.05）。GDM组新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性（r分别为-0.294、-0.280,P均〈0.05）。结论 GDM母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平升高,其与GDM发生及新生儿早期神经系统缺陷均有关。

山东医药杂志基础研究

薯蓣皂苷元对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖及VEGF、IL-6表达的影响31-33

摘要：目的探讨薯蓣皂苷元（Dio）对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖及血管内皮生长因子（VEGF）、IL-6表达的影响。方法用不同浓度Dio作用于RPMI8226细胞24、48、72 h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,并选定下步试验中Dio的作用浓度。将对数期的RPMI8226细胞分为对照组,高、中、低Dio组,硼替佐米（BTZ）组,分别采用0、20、30、40μmol/L Dio及BTZ 10 nmol/L作用后,采用ELISA法检测各组IL-6、VEGF蛋白表达水平,PCR法检测各组IL-6、VEGF mRNA表达水平。结果 Dio对RPMI8226细胞增殖有抑制作用,随着药物浓度及时间的延长抑制率增加（P均〈0.05）。作用48 h,与对照组比较,BTZ组VEGF、IL-6 mRNA的表达水平降低,高、中、低Dio组VEGF、IL-6 mRNA及蛋白水平均降低（P均〈0.05）。与BTZ组比较,高、中、低Dio组各指标均降低（P均〈0.05）。结论 Dio可通过抑制多发性骨髓瘤RPMI8226细胞IL-6、VEGF的表达而抑制其增殖。

NK细胞对非小细胞肺癌细胞NCI-H292的杀伤作用及对其β-catenin蛋白表达的影响33-35

摘要：目的探讨自然杀伤（NK）细胞对肺癌细胞系NCI-H292的杀伤作用及对癌细胞中β-catenin蛋白表达的影响。方法无菌采集健康人外周血,培养NK细胞（NK组）,取培养14 d后的NK细胞,调整细胞浓度为5×106/m L,按1∶5的比例接种到NCI-H292细胞（NK＋NCI-H292组）培养板共培养24 h,单独培养NCI-H292细胞（NCIH292组）24 h。采用CCK-8法测算NK细胞对肺癌细胞系NCI-H292的杀伤活性,采用Western blotting法检测NCIH292细胞中β-catenin蛋白的表达。结果 NK细胞对NCI-H292细胞的杀伤率为96.720%±1.081%,与NK及NCI-H292组比较,NK＋NCI-H292组β-catenin表达降低（P均〈0.01）。结论 NK细胞对NCI-H292细胞具有杀伤力,同时能够抑制NCI-H292细胞中β-catenin蛋白的表达。

miR-7-5p靶向调控EGFR对非小细胞肺癌细胞增殖侵袭的影响36-38

摘要：目的探讨miR-7-5p是否通过调控表皮生长因子受体（EGFR）的表达而影响人非小细胞肺癌细胞体外增殖和侵袭能力。方法通过双荧光素酶试验证明EGFR为miR-7-5p的下游靶基因,用miR-7-5p（miR-7-5p组）或miR-N.C.（miR-N.C.组）转染NCI-H1975细胞,并设立空白对照组,采用实时荧光定量PCR法检测EGFR mRNA,采用Western blotting法检测EGFR蛋白的表达。然后通过比色法、流式细胞术和Transwell小室法检测NCIH1975细胞体外增殖活力和侵袭能力。结果 miR-7-5p可通过靶向3＇UTR发挥调节作用,降低荧光素酶的表达活性。miR-7-5p组EGFR mRNA及蛋白表达量低于miR-N.C.组（P均〈0.05）。转染后72 h,miR-7-5p组细胞增殖活力比miR-N.C.组降低（P〈0.05）。与miR-N.C.组相比,miR-7-5p组NCI-H1975细胞S期所占比例下调（P〈0.05）,而G0/G1期细胞所占比例增加（P〈0.05）。与miR-N.C组相比,miR-7-5p组细胞侵袭变化率下调（P〈0.05）。结论 miR-7-5p通过靶向抑制EGFR的表达而抑制人非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭能力。

长链非编码RNA MYU对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其机制39-41

摘要：目的探讨长链非编码RNA MYU对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其机制。方法检测长链非编码RNA MYU在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达差异,将Hela细胞株分为：1组：转染对照NC序列;2组：转染MYU siRNA;3组：转染对照pc DNA3.1;4组：转染pc DNA3.1-MYU过表达序列。采用CCK-8法检测各组细胞细胞增殖活力,Western blotting和RT-PCR检测c-myc、CDK4、CDK6基因mRNA及蛋白的表达,采用RNA结合蛋白免疫沉淀试验验证WDR5与MYU的结合,染色质免疫沉淀试验检测组蛋白H3赖氨酸4三甲基化（H3K4me3）水平。结果癌组织LncRNA MYU的表达量高于癌旁组织（P〈0.05）;转染24、48 h,OD值比较,2组低于1组,4组高于3组,P均〈0.05;Ki-67阳性细胞所占百分比比较,1组高于2组,3组低于4组,P均〈0.05;c-myc、CDK4、CDK6mRNA及蛋白比较,1组高于2组,3组低于4组,P均〈0.05;LncRNA MYU与WDR5的富集量高于阴性对照（P〈0.05）;H3K4me3水平比较,1组低于2组,3组高于4组,P均〈0.05。结论长链非编码RNA MYU通过募集WDR5抑制c-myc基因启动子区H3K4me3,上调c-myc转录从而促进Hela细胞增殖。

miR-429过表达对膀胱癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制42-44

摘要：目的探讨miR-429过表达对膀胱癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制。方法将常规培养好的膀胱癌细胞T24随机分为对照组、miR-429组,对照组转染miR-NC（无关序列的mimics）,miR-429组转染插入miR-429的目标片段。用划痕试验检测两组迁移能力,Transwell侵袭试验检测其侵袭能力。采用实时PCR技术检测T24细胞内E盒结合锌指蛋白（ZEB1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）及钙黏附蛋白E（E-cadherin）mRNA表达,用免疫印迹法检测T24细胞内ZEB1、MMP-2及E-cadherin蛋白表达。结果与对照组比较,miR-429组细胞迁移距离短,迁移细胞数少（P均〈0.05）,细胞内ZEB1、MMP-2 mRNA及蛋白表达低,E-cadherin mRNA及蛋白表达高（P均〈0.05）。结论 miR-429b过表达可能通过靶向抑制膀胱癌细胞内ZEB1、MMP-2表达,增强E-cadherin的表达阻止膀胱癌细胞迁移、侵袭。

半乳糖凝集素-1联合雷公藤内酯醇对急性脊髓损伤的保护作用及机制44-47

摘要：目的探讨半乳糖凝集素-1联合雷公藤内酯醇对急性脊髓损伤的保护作用及机制。方法 60只无特殊病原菌的雄性SD大鼠,随机均分为A、B、C、D、E组。通过Allen＇s法打击进行脊髓造模。A组腹腔注射半乳糖凝集素-1 4 mg/kg联合雷公藤内酯醇0.4 mg/kg,1次/d,持续1周;B组腹腔注射半乳糖凝集素-1 4 mg/kg,1次/d,持续1周;C组腹腔注射雷公藤内酯醇0.4 mg/kg,1次/d,持续1周;D组腹腔注射甲基强的松龙30 mg/kg,12 h后再重复1次,以后1次/d,重复3 d;E组腹腔注射生理盐水3 mg/kg,1次/d,持续1周。分别于术后1、3、7、14 d对各组大鼠进行行为学评价（BBB评分＋斜板倾斜度）;于术后14 d行病变脊髓组织苏木精-伊红染色法及免疫组化染色检查,同时用ELISA法测定IL-10及TNF-α表达水平。结果术后7、14 d,A组BBB评分及斜板倾斜度较其余组高（P均〈0.05）;其中B、C、D组间比较,P均〉0.05。术后14 d的HE染色结果显示A组的脊髓组织神经元数量多于其余组（P均〈0.05）。免疫组化染色结果提示,A组脊髓组织的GAP-43阳性表达水平较其余组高（P均〈0.05）。术后7 d及14 d,与其余组比较,A组TNF-α表达水平低,IL-10水平高（P均〈0.05）,而B、C、D组间比较,P均〉0.05。结论半乳糖凝集素-1联合雷公藤内酯醇可减轻急性脊髓损伤的进一步损害,其作用机制可能与上调IL-10及下调TNF-α的表达水平有关。

山东医药杂志临床研究

外源性肺表面活性物质气管内注射对胎粪吸入综合征的治疗作用及其机制48-50

摘要：目的探讨外源性肺表面活性物质（PS）气管内注射对胎粪吸入综合征（MAS）的治疗作用及其机制。方法选择MAS患儿38例,按照随机数字表法将患儿分为对照组和研究组,每组19例。对照组给予常规治疗,研究组在常规治疗基础上联合应用外源性PS进行治疗,PS 70 mg/kg,气管内注射。记录两组机械通气时间、氧暴露时间、住院时间及费用,分别于治疗前（T0）、治疗后24 h（T1）、治疗后48 h（T2）观察呼吸机参数,包括氧合指数（OI）、动脉肺泡氧分压比值（a/APO2）、动脉血氧分压与吸入氧浓度比值（Pa O2/Fi O2）,同时应用ELISA法分别于治疗前和治疗后24 h检测支气管肺泡灌洗液中肺表面活性蛋白（SP）-A、SP-D、血管内皮生长因子（VEGF）水平及血清中IL-8和IL-10水平。比较两组不良反应发生率。结果研究组机械通气时间、氧暴露时间及住院时间均低于对照组（P均〈0.05）。与同组T0时比较,T1、T2时两组OI均降低,a/APO2、Pa O2/Fi O2均升高（P均〈0.05）,T1、T2时同组内各指标比较,P均〈0.05;与对照组比较,T2时研究组OI降低,a/APO2、Pa O2/Fi O2升高（P均〈0.05）。与治疗前比较,治疗后两组SP-A、SP-D、VEGF、IL-10均升高,IL-8均降低（P均〈0.05）。与对照组比较,研究组VEGF、IL-8水平降低,其他指标升高（P均〈0.05）。两组不良反应发生率比较,P〉0.05。结论外源性PS气管内注射可改善MAS患儿氧合功能、缩短治疗时间,这些作用可能是通过提高支气管肺泡灌洗液中SP和VEGF水平及降低血清中炎症因子水平实现。

米力农在行机械通气的新生儿持续肺动脉高压中的应用效果51-53

摘要：目的探讨米力农在行机械通气的新生儿持续肺动脉高压（PPHN）中的应用效果。方法 80例PPHN患儿随机分为治疗组和对照组,各40例。对照组给予传统机械通气联合枸橼酸西地那非治疗,0.5 mg/（kg·次）,1次/6 h,共8次,鼻饲;治疗组给予传统机械通气联合米力农治疗,负荷量20μg/kg,10 min内静注,维持量0.75μg/（kg·min）,静滴,两组均治疗48 h。比较两组临床疗效。检测两组治疗前后左心室输出量（SV）、肺动脉压（PAP）、肺动脉平均压（PAMP）、血氧饱和度（Sp O2）、氧合指数（OI）及动脉血氧分压（Pa O2）,观察治疗期间不良反应发生情况。结果治疗组总有效率为92.50%,高于对照组的72.50%（χ2=5.541,P=0.019）。治疗后,与对照组比较,治疗组SV、Sp O2、OI及Pa O2高,PAP和PAMP低。两组未见明显不良反应。结论米力农可提高行机械通气治疗的PPHN患儿临床疗效,提高血氧含量、改善持续动脉高压状态,且安全性较好。