山东医药杂志 统计源期刊

山东医药 2016年第16期杂志 文档列表

山东医药杂志论著

慢病毒介导siRNA沉默ERK2对创伤性骨性关节炎大鼠软骨退变的影响及其机制1-4

摘要：目的观察慢病毒介导siRNA沉默细胞外信号调节激酶2（ERK2）对创伤性骨性关节炎大鼠软骨退变的影响,并探讨其机制。方法将30只右膝创伤性骨性关节炎大鼠随机分为三组,每组10只,分别于右膝关节腔注射无菌PBS（模型组）、ERK2 siRNA阴性慢病毒溶液（对照组）及ERK2 siRNA慢病毒溶液（观察组）。8周后处死大鼠,取其右膝关节观察膝关节软骨形态并进行评分,行HE、甲苯胺蓝及番红＂O＂染色后观察软骨组织病理形态,采用Mankin半定量法进行关节软骨评分。采用Real-time PCR法检测各组软骨组织MMP3、MMP13及Col2a mRNA相对表达量。结果观察组软骨面溃疡、缺损程度均轻于模型组和对照组。HE、甲苯胺蓝、番红＂O＂染色均显示,观察组软骨面较光滑,裂隙出现、表面组织丢失、基质染色减轻、软骨细胞增生和排列紊乱程度均轻于模型组和对照组。模型组、对照组软骨形态评分、关节软骨评分均高于观察组（P均〈0.05）,模型组和对照组比较无统计学差异（P均〉0.05）。观察组MMP3、MMP13 mRNA相对表达量均低于模型组和对照组,Col2a mRNA相对表达量均高于模型组和对照组（P均〈0.01）;模型组和对照组MMP3、MMP13及Col2a mRNA相对表达量比较无统计学差异（P均〉0.05）。结论慢病毒介导siRNA沉默ERK2能够减轻创伤性骨性关节炎大鼠的软骨退变,机制可能与降低MMP3、MMP13表达及增加Col2a表达有关。

丝素蛋白三维支架与骨髓间充质干细胞的生物相容性观察5-7

摘要：目的制备丝素蛋白三维支架,并与大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）复合培养,观察二者的生物相容性。方法将家用蚕丝反复脱胶,计算脱胶率;将脱胶的蚕丝溶于Li Br溶液中获得丝素蛋白溶液,置于真空冷冻干燥机中作用24 h,获得成型的丝素蛋白三维支架。液体置换法计算支架孔隙率;将该支架与MSCs复合培养,记录支架降解1~8周降解液的p H值变化,MTT法检测支架的细胞毒性（以吸光度值表示）,扫描电镜下观察支架结构及MSCs生长情况。结果平均脱胶率为20.72%,平均支架孔隙率为65.25%。复合培养1~8周降解液p H值分别为6.98、6.93、6.90、6.83、6.72、6.75、6.78、6.76。两组吸光度值比较,P均〉0.05。扫描电镜下观察到该支架具有三维空间结构,孔隙大小分布较均匀;复合物中可见MSCs在支架上生长良好,部分细胞嵌入支架孔隙中,与支架黏附良好;细胞外基质分泌量多,细胞与细胞间、细胞与支架间通过细胞外基质紧密相连。结论成功制备丝素蛋白三维支架,该支架对MSCs无毒性作用,具有良好的生物相容性,是一种理想的韧带组织工程学支架材料。

先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植新方法的建立8-10

摘要：目的建立一种先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植的新方法。方法选择孕16、17、18天的雌性大鼠各30、30、26只,制备先天性显性脊椎裂胎鼠模型。采用胎仔外科、显微外科和显微注射技术,将转染绿色荧光蛋白基因的骨髓间充质干细胞（MSCs）移植到脊椎裂胎鼠脊髓中。大鼠孕20天时剖腹、取胎,计算胎鼠成活率;制作胎鼠脊髓切片,荧光显微镜下观察胎鼠脊髓干细胞移植情况。结果接受手术的孕鼠86只,孕20天成活81只,成活率为94.2%。行干细胞移植的先天性显性脊椎裂胎鼠258只,共取出198只,成活率为76.7%（198/258）,其中胎龄为16、17、18天的胎鼠成活率分别为72.1%（80/111）、77.3%（78/101）、87.0%（40/46）。荧光显微镜下观察胎鼠脊髓切片,可见呈现绿色荧光的MSCs;干细胞移植成活的胎鼠195只,成活率为98.5%（195/198）。结论成功建立先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植的新方法;该方法干细胞成活率较高,可用于神经管畸形治疗。

口腔扁平苔藓患者血清差异蛋白表达检测及意义11-14

摘要：目的探讨口腔扁平苔藓（OLP）患者血清差异蛋白表达及意义。方法选择6例OLP患者（观察组）和6例健康志愿者（对照组）,抽取空腹静脉血后采用苯酚抽提法提取血清蛋白,Bradford法测定蛋白含量,双向荧光差异凝胶电泳法分离检测差异蛋白点,液相色谱-质谱联用技术鉴定差异蛋白。选择其中研究较少的蛋白,采用Western blotting法检测两组蛋白相对表达量。结果两组血清差异蛋白点（583±183）个,其中重复性好的蛋白差异点20个,质谱分析蛋白序列鉴定出12种蛋白质。12种蛋白质中,7种（补体C3、激肽原、α-2-巨球蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、分泌型Ig A、补体C9、β-1-金属结合球蛋白）在观察组血清中表达降低,5种（结合珠蛋白、铜蓝蛋白、载脂蛋白AⅠ、维生素D、人类因子B）表达升高。观察组血清补体C3和人抗凝血酶Ⅲ蛋白相对表达量均低于对照组,载脂蛋白AⅠ高于对照组（P均〈0.01）。结论 OLP患者血清中存在12种差异蛋白质,血清补体C3和人抗凝血酶Ⅲ蛋白表达均降低,载脂蛋白AⅠ表达升高,其发病可能与免疫功能降低及感染有关。

山东医药杂志作者·编者·读者

《山东医药》参考文献著录要求14-14

摘要：每篇论文须标引参考文献10~20条。正文中引用的文献采用顺序编码制,以引用文献的先后顺序连续编码,并将序号置于方括号中。文后参考文献按GB/T7714-2005《文后参考文献著录规则》采用顺序编码制标注,序号置于方括号中,排列于文后。内部刊物、未发表资料、个人通信等请勿作为文献引用,确需引用时,可将其在正文相应处注明。引用文献（包括文字和表达的原意）务请作者与原文核对无误。日文汉字请按日文规定书写,勿与我国汉字及简化字混淆。

山东医药杂志论著

层流剪切应力对高脂环境下白细胞-内皮细胞黏附的影响及其机制15-18

摘要：目的探讨层流剪切应力对高脂环境下白细胞-内皮细胞黏附的影响及其机制。方法以氧化型低密度脂蛋白造成高脂环境,诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤,分别以0、5、25 dyne/cm2层流剪切应力对损伤后的HUVECs干预4 h（分别记为0、5、25 dyne/cm2组）。采用人白血病淋巴瘤细胞株U937行白细胞-内皮细胞黏附试验,计算每100个HUVECs上黏附的U937细胞数;采用激光扫描共聚焦显微镜观察HUVECs细胞膜上的β1整合素抗体荧光信号强度,流式细胞术检测β1整合素阳性率。结果 0 dyne/cm2组、5 dyne/cm2组和25 dyne/cm2组黏附的细胞数量依次降低（P均〈0.05）,细胞膜上的β1整合素抗体荧光信号强度逐渐减弱,β1整合素阳性率分别为98.98%±0.36%、88.58%±3.34%、81.28%±5.19%;0 dyne/cm2组β1整合素阳性率明显高于25 dyne/cm2组（P〈0.05）,0 dyne/cm2组与5 dyne/cm2组比较、5 dyne/cm2组与25 dyne/cm2组比较均无统计学差异（P均〉0.05）。结论在一定范围内适当提高层流剪切应力能够降低高脂环境下内皮细胞上黏附的白细胞数量,机制可能与降低内皮细胞膜β1整合素表达有关。

山东医药杂志作者·编者·读者

《山东医药》对医学名词及术语的一般要求18-18

摘要：医学名词应使用全国科学技术名词审定委员会公布的名词。中医临床诊疗术语、经穴部位、耳穴名称与部位等应遵循相应的国家标准。对于没有通用译名的名词术语,在文内第一次出现时应注明原词。中西药名以最新版《中华人民共和国药典》和《中国药品通用名称》（均由中国药典委员会编写）为准。英文药物名称则采用国际非专利药名。在题名及正文中药名一般不得使用商品名,

山东医药杂志论著

慢病毒介导干扰LSD1基因的卵巢癌稳转细胞株的构建及鉴定19-22

摘要：目的构建并鉴定慢病毒介导干扰赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1）基因的卵巢癌稳转细胞株,为深入研究以LSD1为靶点的表观遗传学抗肿瘤治疗奠定基础。方法扩增并抽提所需质粒,紫外分光光度计检测质粒纯度,计算A260/A280。采用Lipofectamine 2000脂质体转染法将质粒转染入人肾上皮细胞293T,取转染THM质粒后的293T细胞,在倒置荧光显微镜下观察转染情况;分别取转染目的质粒和PLKO空载体质粒后的293T细胞,收集病毒上清液,感染人卵巢癌SKOV3细胞（分别记为观察组和对照组）,筛选出稳转细胞株。观察组经浓度梯度（0、1、10、100、1 000 ng/m L）多西环素诱导,以及两组均经100 ng/m L多西环素诱导后,采用Western blotting法检测LSD1及其特异性反应底物H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量。结果目的质粒A260/A280在2.0左右,说明纯度较高;THM质粒转染293T细胞呈绿色荧光,为真核载体表达的绿色荧光蛋白,表明成功转染。随着多西环素浓度的升高,观察组诱导后LSD1蛋白相对表达量均逐渐降低,H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量逐渐升高,各浓度间比较有统计学差异（P均〈0.01）。观察组经100 ng/m L多西环素诱导后LSD1蛋白相对表达量均明显低于同组诱导前及对照组诱导后,H3K4me1、H3K4me2蛋白相对表达量明显高于同组诱导前及对照组诱导后（P均〈0.01）。结论成功构建慢病毒干扰下调LSD1基因表达的卵巢癌稳转细胞株,并经不同浓度多西环素诱导鉴定;该细胞株可用于以LSD1为靶点的表观遗传学抗肿瘤治疗研究。

不同病理类型肺癌患者孤立性肺结节64排螺旋CT动态增强扫描特点分析23-26

摘要：目的分析不同病理类型肺癌患者的孤立性肺结节64排螺旋CT动态增强扫描特点。方法选择肺癌患者79例,均伴有孤立性肺结节,病理类型为鳞癌17例、小细胞癌6例、腺癌56例。采用64排螺旋CT对患者行平扫及动态增强扫描,比较不同病理类型孤立性肺结节的CT值变化、达峰时间、强化方式、强化净增值、强化率,动态增强峰值出现后延迟扫描180、300、600 s的相对廓清值及廓清率。结果不同病理类型孤立性肺结节CT值随延迟扫描时间延长先升高后降低,峰值出现在60~180 s,小细胞癌结节强化达峰时间早于鳞癌和腺癌结节。腺癌结节的强化方式以均匀强化为主（占75.0%）,鳞癌结节以不均匀强化为主（占64.7%）,小细胞癌结节无明显的强化方式,腺癌和鳞癌结节的强化方式构成比比较有统计学差异（P〈0.05）。腺癌与鳞癌结节强化净增值均高于小细胞癌结节（P均〈0.05）,腺癌与鳞癌结节强化净增值比较差异无统计学意义（P〉0.05）。腺癌、鳞癌和小细胞癌结节的强化率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。腺癌、鳞癌和小细胞癌结节延迟扫描300 s的相对廓清值及廓清率比较无统计学差异（P〉0.05）,小细胞癌结节延迟扫描180 s相对廓清值、廓清率均高于腺癌、鳞癌结节,腺癌结节延迟扫描600 s的相对廓清值、廓清率均低于鳞癌、小细胞癌结节（P均〈0.05）。结论小细胞癌孤立性肺结节强化达峰时间早,强化净增值低,延迟扫描180 s相对廓清值、廓清率较高;腺癌孤立性肺结节的强化方式以均匀强化为主,延迟扫描600 s相对廓清值、廓清率较低;鳞癌孤立性肺结节的强化方式以不均匀强化为主。

山东医药杂志作者·编者·读者

直线相关与回归分析的区别和联系26-26

摘要：区别：1资料要求不同：直线相关分析要求两个变量都是正态分布;回归分析要求因变量Y服从正态分布,而自变量X是能精确测量和严格控制的变量。2统计意义不同：直线相关分析反映两变量间的伴随关系,这种关系是相互的、对等的,不一定有因果关系;回归则分析反映两变量间的依存关系,一般将＂因＂或较易测定、变异较小者定为自变量,这种依存关系可能是因果关系或从属关系。

山东医药杂志基础研究

金铁锁对膝关节骨性关节炎兔关节软骨的保护作用及其机制27-29

摘要：目的观察金铁锁对膝关节骨性关节炎（OA）兔关节软骨的保护作用,并探讨其作用机制。方法将50只家兔随机分为空白对照组,金铁锁大、中、小剂量组和模型对照组,各10只。除空白对照组外,其余各组均按照改良Hulth法制备右膝关节OA模型。金铁锁大、中、小剂量组术后分别按体质量称取金铁锁粉末12.80、4.23、2.58 mg/kg,配制药物溶液10 m L灌胃,空白对照组及模型对照组灌服等量生理盐水,1次/d,连用8周。造模第8周处死家兔,取右膝股骨内侧髁组织,采用Mankin评分标准评价关节软骨退变情况,qRT-PCR法检测关节软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量。结果空白对照组,金铁锁大、中、小剂量组和模型对照组Mankin评分分别为（0.80±0.20）、（2.60±0.16）、（3.40±0.16）、（5.10±0.38）、（10.40±0.16）分,各组Mankin评分依次升高,组间两两比较均有统计学差异（P均〈0.01）。模型对照组软骨组织IL-6、TNF-αmRNA相对表达量均高于其余各组,空白对照组均低于其余各组,金铁锁大、中剂量组均低于金铁锁小剂量组（P均〈0.05）。模型对照组软骨组织IL-1βmRNA相对表达量均高于其余各组,空白对照组、金铁锁大剂量组均低于金铁锁中、小剂量组（P均〈0.05）。结论金铁锁对膝关节OA兔的软骨具有保护作用,且呈浓度依赖性,机制可能与降低软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α表达有关。

大鼠脑胶质瘤模型的建立及意义30-32

摘要：目的建立稳定可靠、简便易行的大鼠脑胶质瘤模型,为深入研究脑胶质瘤提供理想的动物模型。方法选择24只大鼠作为模型组,采用立体定向仪,将1×106个/10μL的C6脑胶质瘤细胞悬液接种于大鼠大脑右侧尾状核区,建立脑胶质瘤动物模型。选择6只大鼠作为正常组,颅内钻孔后不接种C6脑胶质瘤细胞。模型组随机选择6只,比较两组生长状况、活动饮食情况及体质量变化。模型组剩余大鼠分别于建模第7、14、21天各随机处死6只,病理解剖观察肿瘤体积变化及脏器转移情况;取模型组建模第7天的脑组织,正常组同期处死,取脑组织行HE染色,观察肿瘤组织病理学变化。结果正常组生长状况良好,活动饮食均正常,体质量逐渐升高。模型组荷瘤后逐渐出现精神萎靡、反应迟钝、食欲不振、腹泻、出血甚至死亡,体质量逐渐下降。与建模第7天比较,建模第14、21天肿瘤体积体明显增大（P均〈0.05）,且建模第21天肿瘤体积明显大于建模第14天（P〈0.05）。模型组脑组织HE染色后可见肿瘤细胞呈纺锤形,核大深染,核分裂相多见,生长活跃,密集成群,排列紊乱;正常组脑组织HE染色后可见细胞分布均匀,无异常现象。结论成功建立大鼠脑胶质瘤模型;该模型成瘤周期短,肿瘤细胞生长稳定,可为脑胶质瘤的基础研究提供理想的动物模型。

人肺腺癌A549细胞上清液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响33-34

摘要：目的探讨人肺腺癌A549细胞上清液对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法取对数生长期HUVECs,分别加入培养24、48 h的A549细胞上清液（分别记为24 h组和48 h组）,对照组仅加入高糖DMEM培养基。采用MTS法检测各组细胞增殖活性,Transwell试验检测各组细胞迁移及侵袭能力。结果与对照组比较,24 h组和48 h组HUVECs增殖、迁移和侵袭能力均升高,且24 h组升高更明显（P〈0.05或〈0.01）。结论 A549细胞上清液可增强HUVECs的增殖、迁移和侵袭能力,以培养24 h的A549细胞上清液作用较强。

山东医药杂志临床研究

绝经后骨质疏松症患者血浆SOST表达变化及其与基因甲基化的关系35-37

摘要：目的观察绝经后骨质疏松症患者血浆SOST基因表达变化,并探讨其与基因甲基化的关系。方法选择绝经后骨质疏松症者60例（观察组）,绝经后无骨质疏松症患者60例（对照组）。采集两组空腹外周血,采用实时定量PCR法检测血浆SOST mRNA相对表达量,甲基化特异性-PCR法检测SOST基因甲基化情况,分析SOST mRNA表达与其基因甲基化的关系。结果观察组及对照组SOST mRNA相对表达量分别为（6.126±0.304）×10-5、（1.936±0.358）×10-5,两组比较P〈0.05;SOST基因甲基化阳性率分别为66.67%（40/60）、83.33%（50/60）,两组比较P〈0.05。观察组SOST基因甲基化阳性及阴性者mRNA相对表达量分别为（1.725±0.046）×10-5、（4.253±0.039）×10-5,SOST基因甲基化阳性阳性率与其mRNA表达呈负相关（r=-0.996,P〈0.01）。对照组SOST基因甲基化阳性及阴性者mRNA相对表达量分别为（1.362±0.091）×10-5、（5.251±0.042）×10-5,SOST基因甲基化率与其mRNA表达呈负相关（r=-0.985,P〈0.01）。结论绝经后骨质疏松症患者血浆SOST mRNA表达升高,可能与其基因低甲基化有关。

绝经后骨质疏松症患者骨组织JMJD2A、JMJD2B表达变化及意义37-39

摘要：目的观察绝经后骨质疏松症（PMOP）患者骨组织组蛋白去甲基化酶JMJD2表达变化,并分析其与骨密度（BMD）的关系。方法选择拟行全髋关节置换术的绝经后患者30例,术前根据股骨颈BMD分为骨质疏松组15例和骨量正常组15例。术中取术侧股骨颈松质骨,采用实时定量PCR法和免疫组化法分别检测骨组织中JMJD2A和JMJD2B mRNA和蛋白表达,并分析其与BMD的关系。结果与骨量正常组比较,骨质疏松组JMJD2A、JMJD2B mRNA相对表达量和蛋白阳性率均显著降低（P均〈0.01）。直线相关分析结果显示,BMD与JMJD2A、JMJD2B mRNA相对表达量均呈正相关（r分别为0.705,0.796,P均〈0.01）BMD与JMJD2A、JMJD2B蛋白表达阳性率均呈正相关（r分别为0.606、0.674,P均〈0.01）。结论 PMOP患者骨组织JMJD2A和JMJD2B表达均降低,二者可能共同参与了PMOP的发病过程。

颈椎后路手术后吞咽困难危险因素分析40-42

摘要：目的探讨颈椎后路手术后吞咽困难的危险因素。方法选择182例颈椎椎管狭窄症、颈椎后纵韧带骨化症患者,均行颈椎后路棘突纵割式椎管扩大、人工骨桥成型术。参照国际通用的Bazaz分级系统,术后即刻发生吞咽困难17例（吞咽困难组）,未发生吞咽困难165例（无症状组）。采集两组临床资料（性别、年龄、BMI、翻修率、手术时间、出血量、手术节段数）,计算手术前后C2~C7角度变化（d C2~C7）,对上述资料行单因素和二元Logistic回归分析。结果单因素分析显示,两组性别、年龄、BMI、翻修率、手术时间、出血量、手术节段数比较差异无统计学意义（P均〉0.05）;吞咽困难组d C2~C7为4.8°±1.2°,无症状组为2.1°±0.3°,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对d C2~C7进行二元Logistic回归分析,结果显示d C2~C7增大是颈椎后路手术后发生吞咽困难的危险因素（OR=1.144,95%CI为1.012~1.293,P〈0.05）。结论颈椎后路手术前后C2~C7角度变化过大是患者术后发生吞咽困难的主要原因。

跟骨闭合性骨折术后软组织并发症的影响因素分析42-44

摘要：目的分析跟骨闭合性骨折术后软组织并发症的影响因素。方法跟骨闭合性骨折术后患者341例,记录其术后软组织并发症情况。收集患者的临床资料（年龄、性别、糖尿病、高血压、甲状腺功能低下、吸烟、饮酒、激素使用史、血红蛋白水平、Sanders分型、手术固定方式、受伤至手术时间、手术操作时间、术中应用止血带及引流情况）,采用χ2检验和Logistic多因素回归分析其对患者术后软组织并发症的影响。结果 341例患者中,术后软组织并发症43例（12.6%）,其中切口延迟愈合19例（44.2%）、皮瓣坏死18例（41.9%）、皮肤软组织感染6例（13.9%）。单因素分析结果显示,吸烟、Sanders分型、手术固定方式、受伤至手术时间、糖尿病、激素使用史是患者术后软组织并发症的影响因素（P均〈0.05）,年龄、性别、高血压、甲状腺功能低下、饮酒、血红蛋白水平、手术操作时间、术中应用止血带及引流情况不是患者术后软组织并发症的影响因素（P均〉0.05）。Logistic多因素回归分析结果显示,手术固定方式和糖尿病是患者术后软组织并发症的独立影响因素（P均〈0.05）。结论手术固定方式和糖尿病是跟骨闭合性骨折患者术后软组织并发症的主要影响因素。

斜T形钢板内固定治疗桡骨远端C型骨折临床观察45-47

摘要：目的比较斜T形钢板内固定与支架外固定联合克氏针内固定治疗桡骨远端C型骨折的临床效果。方法将60例桡骨远端C型骨折患者随机分为内固定组（33例）和外固定组（27例）,内固定组行斜T形钢板内固定手术,外固定组行支架外固定联合克氏针内固定手术。术后12个月评价两组腕关节功能,计算优良率。比较两组术前及术后6、12个月掌倾角、尺偏角及桡骨高度,术后12个月腕关节活动度及并发症发生情况。结果术后12个月,内固定组与外固定组优良率分别为81.82%、81.48%,并发症发生率分别为6.06%、11.11%,两组比较均无统计学差异（P均〉0.05）。与术前比较,两组术后6、12个月掌倾角、尺偏角及桡骨高度均明显升高,且内固定组术后6个月掌倾角、尺偏角均明显高于外固定组（P均〈0.05）。两组术后12个月腕关节背伸、掌屈、桡偏、尺偏、旋前及旋后角度比较均无统计学差异（P均〉0.05）。结论斜T形钢板内固定治疗桡骨远端C型骨折的近期复位效果优于支架外固定联合克氏针内固定,两种方法的远期疗效及安全性相似。