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摘要:目的通过比较低浓度亚硒酸钠、砒霜对肺腺癌细胞A549的周期、凋亡、耐药及线粒体的影响,探讨肺腺癌药物治疗的新方法。方法体外培养肺癌A549细胞,分为对照组及5.0μmol/L亚硒酸钠(A组)、5.0μmol/L砒霜(B组)处理组,药物处理24 h后以流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测三组促凋亡因子Caspase-3、抗耐药基因RARα的表达,RT-PCR检测三组凋亡抑制基因Bcl-2、细胞周期素CyclinD3表达;电子显微镜观察细胞线粒体结构与凋亡小体。结果与对照组相比,A、B组G0/G1期增加、S和G2/M期减少,出现细胞周期阻滞,凋亡细胞比例增加。Caspase-3、RARα表达上调,Bcl-2、cyclinD3表达下调。线粒体肿胀、线粒体嵴模糊不清,出现凋亡小体。结论亚硒酸钠、砒霜治疗肺腺癌均有良好的效果,因为氧化还原能力不同,作用各有侧重。
摘要:先天性心脏病患儿术中输血是常见操作。对年龄较小(5岁以下)、体质量偏低(〈20kg)的患儿更需严格控制患儿输血的量及速度,因此普遍使用微量泵输血,常用方法是直接从血袋里用针头抽取或插入输血器在莫非滴管的侧孔进行输注,易致血管制品污染和体内感染等,且不良反应较多。2003年12月-2005年12月,在婴幼儿手术中,我们均采用准确量化密闭方法输注血液制品,未出现堵塞或其他不良后果,应用效果良好。现介绍如下。
摘要:目的观察食管癌引流淋巴结(TDLN)细胞体外培养结果及其抑瘤作用。方法术中切取食管癌患者的TDLN进行培养,分为3组:A组,培养基中添加IL-2;B组,添加IL-2+IL-4+粒—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF);C组,添加IL-2+IL-4+GM-CSF+自身食管癌细胞抗原。于培养第1、7、14、21天行细胞计数;采用流式细胞技术测定TDLN细胞的CD3+、CD4+、CD8+、CD5+6、CD8+3;MTT法测定各组TDLN细胞和淋巴因子激活杀伤(LAK)细胞对自体瘤细胞的抑瘤率。结果每1.0 g淋巴结组织培养第7、14、21天收获细胞数三组间差异不显著;A组第14天细胞明显多于第7天和第21天(P〈0.01),第7天和第21天之间无明显差异;B组、C组结果类似。三组间CD4+、CD8+、CD8+3细胞数相比,P〈0.05。未经培养的TDLN细胞、LAK细胞和各培养组TDLN细胞对自体肿瘤细胞的杀伤率有显著差异(P〈0.01)。结论TDLN细胞通过培养可以获得大量成熟树突状细胞和T细胞;培养基中添加GM-CSF和IL-4的TDLN培养后对自身肿瘤细胞的杀伤率最高。
摘要:目的观察不同时间深低温保存对胸骨组织活力的影响。方法切取SD大鼠胸骨后立即放入含有低钾右旋糖酐(LPD)冻存液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮,分别保存1、15、30、60、120 d后对胸骨组织进行体外培养,加入3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)以做标记,使用β液体闪烁计数器检测组织细胞吸收情况和培养上清中的碱性磷酸酶(ALP)活性。结果与冷冻前比较,低温保存1 d后胸骨组织培养上清中ALP活性开始降低,15 d降至最低,以后基本保持稳定。低温保存1 d后,3H-TdR掺入率降至90.02%。冷冻15 d以后3H-TdR掺入率降至73.9%,以后无明显变化。结论深低温保存后胸骨组织保留70%~80%的活力,损伤主要发生在冷冻早期,ALP活性检测和3H-TdR体外组织培养是测定胸骨组织活力的有效方法。
摘要:2006年7月~2008年6月,我们对10例原因不明的难治性气胸患者采用胸腔注射冰片治疗,疗效满意。现报告如下。 临床资料:全部患者均为我院住院的难治性气胸患者,男8例,女2例,年龄〉65岁,经胸腔闭式引流〉1个月。
摘要:目的观察非小细胞肺癌中包含氧化还原酶的ww域(WWOX)蛋白的表达,探讨其与临床病理参数的关系。方法采用免疫组化法检测79例非小细胞肺癌组织以及30例癌旁组织中WWOX蛋白,并分析其与非小细胞肺癌各临床病理参数的关系。结果WWOX蛋白在非小细胞肺癌组织的阳性率为16.4%(13/79),较癌旁肺组织的90%(27/30)显著减低(P〈0.05)。WWOX蛋白表达与是否有淋巴结转移显著相关(P〈0.01)。结论WWOX蛋白表达在肺癌组织中表达减少或缺失,可能与肺癌的发生发展有关。
摘要:目的观察体外循环心脏停跳和不停跳心内直视手术对机体免疫功能的影响。方法60例风湿性二尖瓣膜病变患者,随机分为实验组(不停跳组,40例)和对照组(停跳组,20例),分别于10个时点抽取静脉血,测定T细胞亚群、NK细胞以及IgA、IgG、IgM。结果两组CD3+、CD4+、NK细胞以及IgA、IgG、IgM在转机后下降,CD8+上升,两组比较P≤0.05,实验组CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞以及IgA、IgG、IgM恢复较对照组快(P均〈0.05)。结论体外循环不停跳心内直视手术对机体免疫功能影响较心脏停跳者轻。
摘要:目的探讨体外循环心脏瓣膜置换术后机体免疫功能的变化。方法28例风湿性心脏瓣膜病患者,分别于术前第3天、体外循环结束后10 min、术后第1天、术后第3天及术后第7天5个时点取外周静脉血。流式细胞术测定CD3+、CD4+、CD8+,计算CD4+/CD8+,采用免疫化学分析系统测定血清IgG、IgA、IgM浓度。结果体外循环后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均较术前下降(P〈0.05),血清IgG、IgA、IgM浓度也明显低于术前水平(P均〈0.05),术后第7天均恢复正常。结论体外循环能导致机体细胞免疫及体液免疫功能下降,至术后第7天基本恢复。
摘要:2006年3月~2008年9月,我们对8例面瘫患者进行面部弹力线静态悬吊治疗,效果满意。现报告如下。 临床资料:本组患者8例,男5例,女3例;年龄35~65岁。耳部手术引起2例,脑血管意外1例,耳部带状疱疹引起2例,面神经炎引起的3例。
摘要:目的构建重组人促红素(CHO)细胞核基质结合区MAR的逆转录载体。方法以CHO细胞DNA为模板,采用PCR扩增CHO细胞的MAR序列,克隆入逆转录表达载体PLXSN-CAT中,经限制性内切酶酶切及DNA序列分析鉴定目的基因。结果PCR扩增的特异性片段长度为476 bp,以此构建的重组质粒PLXSN-CAT-MAR经BamHⅠ酶切后显示为5.9 kb和476 bp左右的两条片段,测序结果与Gen-bank中的CHO细胞MAR基因(Genbank序列号M62716)序列一致。结论成功构建了CHO细胞MAR片段PLXSN-CAT-MAR重组逆转录表达载体。
摘要:目的探讨共刺激分子B7-H1和PTEN在膀胱移行细胞癌组织中的表达变化及意义。方法采用免疫组化SP法检测50例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱组织中的B7-H1和PTEN,分析其与膀胱移行细胞癌临床病理参数的关系及两者的相关性。结果正常膀胱组织中B7-H1不表达,膀胱移行细胞癌组织中B7-H1的阳性表达率为72%,且B7-H1的表达与肿瘤的病理分级、临床分期及复发密切相关(P〈0.05);正常膀胱组织中PTEN呈阳性表达,膀胱移行细胞癌中PTEN蛋白阳性表达率为58%,随着肿瘤病理分级、临床分期的增加PTEN表达显著降低(P〈0.05)。B7-H1与PTEN的表达呈明显负相关(r=-0.44,P〈0.01)。结论膀胱移行细胞癌中B7-H1的高表达和PTEN的突变或缺失与肿瘤的发生发展和免疫逃逸密切相关。
摘要:1991—2007年,我们共收治恶性肿瘤引起的食管气管支气管瘘患者15例,现将诊治情况报告如下。
摘要:目的用蛋白芯片联合表面增强激光解析离子化/飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析卵巢癌与对照血清中的差异表达蛋白来筛选与卵巢癌早期诊断和预后相关的肿瘤标志物。方法采用联合SELDI-TOF-MS及WXC2蛋白质芯片,对21例卵巢癌患者(实验组)及24例健康妇女(对照组)血清标本进行检测。结果在相对分子质量0~50 000 Da范围内,检测出69个差异蛋白峰。卵巢癌差异表达明显(P〈0.01)的蛋白峰8个,其中高表达的波峰3个,质荷比分别为5 927.6,8 719.3和11 729.8 Da,低表达的波峰5个,质荷比分别为4 073.8,4 158.4,4 186.7,4 290.2和8 162.5 Da。其中11 729.8 Da蛋白峰已经鉴定为血清淀粉样蛋白A1(SAA1)。结论SELDI-TOF-MS联合蛋白质芯片能够直接检测出卵巢癌患者血清中相对特异的蛋白峰,对于卵巢癌的诊断具有一定的临床意义。
摘要:目的探讨重组骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)的复性及纯化获得高纯度rhBMP-7二聚体的方法。方法表达rhBMP-7的工程菌经发酵、裂菌、提取包涵体后,4℃下依次在尿素浓度为4、2、1 mol/L的磷酸盐缓冲液中透析使蛋白复性,然后再通过层析色谱纯化去除杂蛋白。结果纯化后rhBMP-7以单体和二聚体形式存在,纯度达95%以上,其中rhBMP-7二聚体含量可达60%以上。结论初步建立了先复性然后在低脲浓度下纯化的方法,能够获得含量较高的rhBMP-7二聚体。
摘要:2004年2月~2007年8月,我们采用单边外固定架联合有限内固定的方法治疗粉碎性、开放性胫腓骨骨折患者56例,疗效满意。现报告如下。
摘要:目的探讨survivin与血管内皮生长因子(VEGF)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测50例HCC组织和20例正常肝组织中survivin、VEGF蛋白的表达,并分析其与HCC临床病理参数的关系。结果50例HCC组织中survivin、VEGF蛋白的阳性表达率分别为64.0%、68.0%,在正常肝组织中的表达率分别为0、10%,两者相比,P均〈0.05;survivin、VEGF蛋白表达与HCC临床分期及淋巴结转移相关(P〈0.05);HCC中survivin、VEGF蛋白表达呈正相关(r=0.886,P〈0.05)。结论survivin和VEGF蛋白在HCC中表达率较高,为肝癌的分子靶向治疗提供了新的靶点;survivin和VEGF在HCC中的表达关系密切,对肝癌的发展可能有协同作用;测定HCC中survivin、VEGF蛋白的表达,对判断患者预后及指导治疗有较大帮助。
摘要:2002年6月~2007年6月,我们采用交锁髓内钉治疗胫骨骨折42例,效果良好。现报告如下。