摘要：为有效控制和预防猪流行性腹泻(PED),分离获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)云南地方流行毒株,并选取部分经RT-PCR鉴定为阳性的样品,处理后接种在Vero细胞中进行分离培养,细胞培养物盲传至15代后可观察到典型的细胞病变(CPE),对细胞培养物通过RT-qPCR方法检测和间接免疫荧光(IFA)鉴定,并对分离株S基因全序列进行克隆和遗传进化分析。结果表明:获得的细胞培养物均为PEDV阳性,病毒半数细胞感染量(TCID50)为10-4.85/0.1mL,将其命名为YNDH-2017毒株。该分离株S基因与参考毒株的同源性为92.8%~98.2%,和国内近年来PEDV流行毒株亲缘关系较近,存在相同的突变位点,而与经典毒株CV777株在两个大的分支上,亲缘关系较远。试验分离获得的YNDH-2017株属于当前国内流行毒株。