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摘要:目的探讨黄芪多糖对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及周期的影响,以及黄芪多糖用于结肠癌治疗的抗肿瘤分子机制。方法在体外培养HT-29细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的半数致死量(IC 50),设置不同的黄芪多糖浓度,检测黄芪多糖对HT-29细胞增殖能力的影响;利用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)凋亡检测试剂盒流式细胞仪检测不同浓度黄芪多糖对HT-29细胞凋亡的影响;利用碘化丙啶(PI)周期检测试剂盒流式细胞仪检测不同浓度黄芪多糖对HT-29细胞周期的影响。结果MTT实验结果显示黄芪多糖抑制HT-29细胞增殖的IC 50为92.49μg/mL,黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞HT-29的增殖,且当浓度小于200μg/mL时,随着黄芪多糖浓度的增高其抑制增殖作用增强,抑制作用呈剂量依赖型;流式细胞仪检测结果显示,黄芪多糖能够促进人结肠癌细胞HT-29的凋亡,且当浓度小于200μg/mL时,随着黄芪多糖浓度的增高其促进凋亡作用增强;黄芪多糖对HT-29细胞具有周期阻滞作用。结论黄芪多糖可使结肠癌HT-29细胞增殖减慢延缓、凋亡增加,细胞阻滞于G 1期,其可能是黄芪用于结肠癌治疗的抗肿瘤机制。
摘要:目的构建携带人β3-肾上腺素受体基因(hADRB3)的高滴度纯化重组腺病毒Ad-hADRB3,并观察经心包注射后hADRB3在慢性心力衰竭(CHF)大鼠体内的表达。方法HindⅢ、SalⅠ双酶切hADRB3 cDNA质粒获得hADRB3目的基因片段,应用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Ad-hADRB3,测定纯化后的病毒滴度。将CHF成模大鼠10只随机分为两组,观察组单次心包注射2.50×10^11 VP/mL NS Ad-hADRB3 100μL,对照组予以心包注射0.90%NaCl 100μL,7 d后免疫组织化学(IHC)检测hADRB3在CHF大鼠体内的表达情况。结果成功构建重组腺病毒Ad-hADRB3,纯化后滴度达到5.20×10^12 VP/mL。单次心包注射Ad-hADRB3,CHF大鼠心、肝、肺、肾、脾及小肠均检测到hADRB3的表达。结论腺病毒介导的外源hADRB3基因经心包注射后,可在CHF大鼠多脏器中表达。