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摘要:目的通过生物信息软件预测出miR-155的靶基因,构建miR-155靶基因荧光素酶基因报告载体,验证其与miR-155的对应关系。方法以数据库miR Base为依据,对miR-155进行生物信息学分析,通过Target Scan、Mir Base、Pic Tar三大软件预测miR-155的靶基因;将设计合成的T淋巴细胞核因子5(NFAT5)及其突变序列NFAT5-mu序列分别克隆至荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT (TM) Luciferace;将第4代人胚胎肾293AD(HEK-293AD)细胞按随机数字表法分为4组:miR-155mimics+pMIR-NFAT5组、miR-155 mimics+pMIR-NFAT5-mu组、miR-155inhibitor+pMIR-NFAT5组、miR155 Negative control+pMIR-NFAT5组与对照质粒(pRL-TK)共转染24h后用双荧光素酶检测试剂盒测定相对荧光素酶活性。结果 Mirbase、TargetScan、PicTar预测交叉结果显示,NFAT5基因3′UTR与miR-155存在结合互补位点;构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu重组质粒经酶切及测序鉴定正确;双荧光素酶报告基因检测系统显示:pMIR-NFAT5+miR155 mimics组较pMIR-NFAT5+miR-control组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论成功构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu荧光素酶报告基因重组质粒;证实miR-155对NFAT5基因mRNA 3′-UTR具有靶向调控作用,为下一步研究miR-155在吸入性肺损伤机制中的作用提供前期实验室数据和方法。
摘要:目的探讨5岁以下喘息患儿外周血单核细胞(PBMCs)表面Toll样受体4(TLR4)及血清白细胞介素6(IL-6)的表达。方法选取该院门诊或住院患儿共224例,其中哮喘预测指数(API)阳性组116例,阴性组108例。两组患儿均在喘息症状缓解1个月后分别抽取外周血,流式细胞仪检测PBMCs TLR4阳性率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-6水平。结果 API阳性组患儿CD14+单核细胞表面TLR4阳性率明显高于API阴性组[(34.9±10.0)%vs.(30.2±8.8)%];API阳性组患儿血清IL-6水平明显高于API阴性组[(46.4±15.1)ng/Lvs.(40.5±13.6)ng/L];且两组TLR4阳性率和IL-6水平均呈线性相关(P〈0.05)。结论 TLR4的激活诱导IL-6等细胞因子表达可能和哮喘的发生、发展有关,TLR4可能可以作为喘息发展为哮喘的预测指标。
摘要:目的探讨低聚半乳糖(GOS)对早产大鼠肠道菌群的调节作用。方法早产新生大鼠分为GOS组和对照组,GOS组每天滴管喂养GOS 4g/kg,共14d。于喂养GOS后7d和14d,观察大鼠一般情况并称质量,同时取大鼠直肠末端粪便,行双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌及肠球菌培养并行菌落计数。结果 GOS组与对照组在给药期间均正常生长,精神状态等未见异常。与对照组比较,GOS组体质量增长差异无统计学意义(P〉0.05),使用GOS 7d时,双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌及肠球菌与同时间点对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。使用GOS 14d后,大鼠粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌较对照组明显增加,而肠杆菌、肠球菌明显减少,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论低聚半乳糖可促进早产鼠双歧杆菌和乳酸杆菌增长,抑制肠杆菌及肠球菌生长,从而调节肠道菌群平衡。
摘要:目的观察糖尿病大鼠脑组织神经生长因子(NGF)mRNA表达变化及口服降糖药致低血糖的影响作用。方法64只Wistar大鼠分为对照组(16只)、糖尿病模型组(48只),制备高脂高糖饮食+腹腔注射链脲佐菌素致2型糖尿病大鼠模型,模型组分为非药物组(16只)、口服药物治疗组(16只)和低血糖组(16只),口服药物治疗组和低血糖组大鼠均予格列本脲+二甲双胍灌胃给药,低血糖组剂量为口服药物治疗组5倍,每天1次,连续12d,各组大鼠分别于低血糖反应第3、6、9、12天取脑组织行RT-PCR法NGF mRNA检测。结果与对照组相比,糖尿病模型组3组大鼠脑组织NGF mRNA表达均不同程度下降,低血糖降低最为显著(P〈0.01),与非药物组比较,口服药物治疗组升高明显(P〈0.01),低血糖组则进一步降低(P〈0.01)。结论口服降糖药可有效增强糖尿病大鼠脑组织NGF mRNA表达,而口降糖药致低血糖能使NGF mRNA表达进一步下降,不利于糖尿病神经病变的修复。
摘要:目的探讨静脉注射全氟化碳(PFC)预处理与后处理对脂多糖(LPS)致急性肺损伤大鼠的保护作用及相关作用机制。方法选取24只雄性Wistar大鼠分为对照组(NS组)、LPS组、PFC预处理组(Pre组)和PFC后处理组(Post组)。NS组均以等量生理盐水作对照,LPS组经气管内滴注LPS;Pre组于气管内滴注LPS前经股静脉注射PFC;Post组于气管内滴注LPS后经股静脉注射PFC。NS组于气管内滴注生理盐水后6h,LPS组、Pre组与Post组分别于滴注LPS后6h处死动物。比较各组大鼠肺病理学变化,PaO2,肺湿干比(W/D),肺髓过氧化物酶(MPO)及细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达情况。结果应用PFC明显升高PaO2,降低肺W/D比值、MPO活性及ICAM-1表达水平(P〈0.05),而且Pre组较Post组作用更显著。结论静脉注射PFC对ALI具有保护作用,以PFC预处理效果更为显著,其机制可能与下调ICAM-1表达有关。
摘要:目的将制备的羟基磷灰石/壳聚糖-转化生长因子-β1缓释微球复合涂层种植体运用于糖尿病兔胫骨,探讨其周围Runx-2/ALP/OC基因表达的改变,从分子水平评估该种植体的成骨性。方法制备复合涂层种植体,运用扫描电镜(SEM)分析其表面形貌。并建立SPF级新西兰兔2型糖尿病模型,分别在其胫骨干骺端植入种植体,分别于术后4、8、12周,取出带种植体周围骨组织,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测普通图和糖尿病兔在不同种植体植入后Runx-2、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、晚期糖基化终末产物(AGEs)的表达量。结果 Runx-2、ALP、OC在改性涂层种植体表面的mRNA表达在同一时间点上,改性种植体组的表达量高于普通种植体组;不同时间点上,使用改性种植体的Runx-2、ALP、OC的基因表达量增加高于普通种植体,正常兔改性种植体基因表达最高。结论复合涂层种植体能促进高糖环境下Runx-2/ALP/OC基因表达,具有一定的临床运用前景。
摘要:目的探讨O-连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响,并评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞体外增殖及侵袭过程中的作用。方法通过使O-GlcNAc转移酶(OGT)过表达(过表达OGT组)或沉默表达(沉默OGT组)及使用O-GlcNAc水解酶(OGA)特异性抑制剂Thiamet-G(抑制剂组)下调O-GlcNAc水解酶活性(抑制剂组)等构建O-GlcNAc糖基化水平升高或降低的细胞模型;采用MTT法检测各组胃癌细胞增殖活力;软琼脂集落形成实验观察各组胃癌细胞集落形成;Transwell细胞迁移实验各组胃癌细胞体外迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组胃癌细胞Akt1活性;Thiamet-G处理Akt1表达沉默(沉默Akt1组)的胃癌细胞以评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞侵袭中的作用;利用Thiamet-G处理Akt1过表达(过表达Akt1组)的胃癌细胞以进一步验证Akt1在O-GlcNAc糖基化调控胃癌细胞侵袭性过程中的作用。结果 O-GlcNAc糖基化水平升高可促进胃癌细胞增殖并显著提高细胞集落形成、体外迁移和侵袭的能力;Akt1活性被由O-GlcNAc糖基化水平升高所介导的Ser473磷酸化上调而激活;Thiamet-G诱导的细胞侵袭性被Akt1shRNA所抑制;Akt1高表达可进一步促进由Thiamet-G诱导的细胞侵袭性增强。结论 O-GlcNAc糖基化可部分通过Akt1途径增强胃癌细胞的体外增殖及侵袭力。
摘要:目的研究甲状腺术中甲状旁腺自体移植过程中体外临时保存对其细胞活性和移植后功能的影响,以提高甲状旁腺自体移植的成活率。方法 (1)以实验家兔为研究对象,分为A、B、C 3组,每组8只。取出双侧下甲状旁腺,A组立即后续处理;B、C组分别置于4℃、室温(22-24℃)生理盐水中30min。左侧甲状旁腺统一行HE染色,观察细胞形态;右侧甲状旁腺统一行透射电子显微镜检查,观察细胞超微结构变化。(2)实验家兔分为D、E、F 3组,每组8只,行双侧甲状腺全切除术后,取出双下甲状旁腺,D组立即移植(双侧颈前肌内,下同);E、F组分别置于4℃、室温(22-24℃)生理盐水中30min后移植;3组动物于术前1d,术后1、3、5、7d抽血监测血钙、血PTH水平,并于第7天处死动物,切取移植的甲状旁腺组织行HE染色,高倍镜下观察甲状旁腺组织面积及病理损害。结果正常甲状旁腺以主细胞为主,电镜下主细胞核圆、居中;4℃保存后甲状旁腺细胞形态未见明显变化,主细胞线粒体轻度肿胀;室温保存后甲状旁腺细胞稍肿胀,部分空泡变性,电镜下细胞核形态不规则,线粒体极度肿胀变形、嵴断裂、减少。动物双下甲状旁腺移植术后,血钙、血PTH均明显下降,之后逐渐上升;术后7d两组间差异均有统计学意义(P〈0.05);术后7dD组:正常甲状旁腺细胞密集分布于颈前肌肉组织中;E组部分空泡变性;F组:只有部分健存甲状旁腺细胞散在分布于肌肉中。结论离体甲状旁腺应保存在4℃生理盐水中,并尽可能在30min内完成自体移植。
摘要:目的研究冠心病患者实施经皮冠状动脉支架植入术(PCI)前后血清可溶性趋化因子16(soL-CXCL16)和N-端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平变化情况及临床价值。方法选取77例实施PCI的冠心病患者。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清soL-CXCL16、NT-proBNP和肌钙蛋白(cTnT)的水平,应用Pearson相关性分析方法检测soL-CXCL16和NT-proBNP与cTnT的关系。结果与PCI术前相比,血清中soL-CXCL16水平在术后0.5h达到峰值,在术后2.0h开始下降,在术后24.0h回落至术前水平。而血清NT-proBNP在术后0.5h开始升高,至术后24.0h显著升高(P〈0.05)。soL-CXCL16和NT-proBNP与心肌缺血呈正相关(P〈0.01)。结论监测患者术前及术后血清soL-CXCL16和NT-proBNP水平的变化,为评估PCI术后的预后提供依据。
摘要:目的探讨血清肿瘤M2型丙酮酸激酶(TuM2-PK)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原CA199、CA724、CA125和CA242对结肠癌的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光法测定231例结肠癌、105例结肠良性病和166例健康对照血清TuM2-PK、CEA、CA199、CA724、CA125和CA242水平。采用ROC曲线和Logistic-ROC曲线比较单一和组合标志物的诊断效能,以最优组合标志物建立结肠癌Logistic回归和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)诊断模型。结果结肠癌组血清TuM2-PK、CEA、CA199、CA125和CA242水平显著高于结肠良性病组和健康对照组(P〈0.05)。血清CA199诊断结肠癌的ROC曲线下面积(AUC)最高[0.79(95%CI:0.75-0.83)],在临界值为69.5U/L时灵敏度和特异性分别为64.1%和89.7%。Logistic-ROC曲线中各组合标志物较单一指标的AUC高,其中(CEA+CA199+TuM2-PK)的AUC较为理想[0.89(95%CI:0.86-0.92)]。血清(CEA+CA199+TuM2-PK)的Logistic回归和PLS-DA模型对结肠癌的诊断准确率分别为82.7%和77.5%,对非结肠癌的诊断准确率分别为93.7%和95.6%。结论联合检测血清CEA、CA199和TuM2-PK是较为理想的肿瘤标志物组合,有助于结肠癌的早期诊断。
摘要:目的探讨与原发性肝癌术后获长期生存的有关因素。方法对该院原发性肝癌手术切除生存10年以上94例患者的术前术后情况作回顾性分析。结果能获长期生存的重要因素是:(1)肿瘤直径小于或等于5cm(占73.4%),外周型肝癌(占70.2%);(2)对复发患者行有效治疗;(3)术后长期行抗肝纤维化联合抗肿瘤治疗(以服用中药为主);(4)坚持随访。结论原发性肝癌根治术后,尤其是肿瘤直径小于或等于5cm、外周型肝癌患者,坚持随访,坚持行抗纤维化联合抗肿瘤为主的治疗是获得长期生存的重要因素。
摘要:目的观察益肺健脾合剂对肺脾气虚型慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)伴Ⅱ型呼吸衰竭患者的中医症状积分、营养、血气等相关指标的影响。方法将符合AECOPD伴Ⅱ型呼吸衰竭需要使用无创或有创呼吸机辅助通气,且符合中医辨证分型为肺脾气虚型患者40例分为两组,对照组予常规西医治疗,中药组在西医治疗基础上加用益肺健脾合剂,口服或管喂,1周为1个疗程,观察患者治疗前后的中医症状及体征积分、APACHEⅡ评分、血清清蛋白、前清蛋白、中性粒细胞百分比、C反应蛋白(CRP)及血气分析等相关指标。结果中药组能够改善患者的中医症状及体征积分,治疗后两组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);两组患者在治疗后血清清蛋白、前清蛋白、转铁蛋白、中性粒细胞百分比、CRP及动脉血气分析等相关指标进行比较,中药组优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);在治疗1个星期后,APACHEⅡ的改善情况,中药组均优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论在采用西医常规处理基础上,加用基于培土生金理论而设立的组方--益肺健脾合剂治疗AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭疗效好,能够改善了患者的营养状况及动脉血气分析的各项指标。
摘要:目的对微创经椎间孔腰椎椎体间融合(MIS-TLIF)下单纯椎间植骨融合与椎间Cage融合治疗单节段腰椎间盘突出症疗效的对比分析,以判断2种融合方法的术后疗效及对比临床价值。方法采用MIS-TLIF手术治疗的单节段腰椎间盘突出症患者共61例,根据融合方法的不同分为单纯椎间植骨融合组(A组)和椎间Cage融合组(B组)。比较两组患者的手术时间,术中出血量,术后引流量,临床疗效采用腰、腿疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、日本骨科协会(JOA)评分和Macnab标准,行腰椎动力位X线片和CT三维重建检查评价椎间融合情况。结果两组患者性别、年龄、病程、病变节段等一般资料比较,差异均无统计学意义(P〉0.05),具有可比性。两组患者术中出血量,术后引流量差异无统计学意义(P〉0.05)。术后两组的VAS评分、ODI评分、JOA评分和Macnab标准,末次随访椎间融合率,差异无统计学意义(P〉0.05)。两组患者的手术时间,手术后椎间隙高度变化,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 MIS-TLIF下单纯植骨融合治疗腰椎间盘突出症可获得与Cage融合相当的临床疗效和植骨融合率,并且治疗费用低,无排斥反应,可供临床选择。
摘要:目的探讨隐匿性阴茎被误行包皮环切术后的有效矫正方法。方法对16例隐匿性阴茎被误行包皮环切术后的患儿,采用改良Brisson术式矫正隐匿性阴茎,观察其疗效。结果 16例患儿阴茎外观获得完全或基本恢复,其中5例出现严重包皮水肿,3-6个月后恢复正常。随访1-2年无1例阴茎回缩或下屈。结论隐匿性阴茎误行包皮环切术后,用改良Brisson术式治疗隐匿性阴茎是一种较好的矫正方法。
摘要:目的探讨宫颈治疗对妊娠结局及分娩方式的影响。方法收集2012年6月至2015年6月该院住院分娩且孕前在该院行各类宫颈治疗的初产妇共249例为研究组,研究组按不同治疗方式分为手术治疗组97例(环形电刀锥切术和宫颈冷刀锥切术)及物理治疗组152例(激光和聚焦超声)。选取同期在该院住院分娩,无宫颈治疗史的初产妇250例作为对照组。观察各组的早产率、胎膜早破率、分娩方式、产程、新生儿体质量。结果 (1)研究组剖宫产率为65.86%,早产率为13.65%,胎膜早破发生率为20.48%,均明显高于对照组,差异有统计学意义(χ2=18.428、10.452、8.066,P0.05)。结论各类宫颈治疗增加了早产、胎膜早破及剖宫产率,对产程时间无影响。
摘要:目的探讨2型糖尿病并发急性脑梗死患者血清细胞黏附分子-1(ICAM)、活化白细胞细胞黏附分子(ALCAM)、血管细胞黏附分子-1(VCAM)、血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)的水平及临床意义。方法选择2014年7月至2015年12月60例2型糖尿病并发急性脑梗死患者为研究对象,按照动脉粥样硬化严重程度不同分为:无斑块11例,稳定斑块22例,不稳定斑块27例。选择40例急性脑梗死患者及40例2型糖尿病患者作为疾病对照组;选健康者40名为健康对照组。采用双抗夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平。采用美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)行神经功能评估。结果糖尿病并发脑梗死组ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平高于其他3组,差异有统计学意义(P〈0.05)。而脑梗死组、糖尿病组ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05),脑梗死组、糖尿病组ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。糖尿病并发脑梗死患者NIHSS评分(7.39±1.72)分高于脑梗死组患者(5.33±1.49)分,差异有统计学意义(t=4.376,P〈0.05)。糖尿病并发脑梗死患者血清ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平与NIHSS评分均呈正相关(r=0.559、0.619、0.421、0.451,P均〈0.007)。随着糖尿病并发脑梗死患者颈动脉斑块严重程度的加重,血清ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1水平呈上升趋势(P〈0.05)。结论ICAM、ALCAM、VCAM、PECAM-1在2型糖尿病并发急性脑梗死患者外周血血清中呈现异常升高,他们与2型糖尿病并发急性脑梗死患者的神经功能缺损及颈动脉斑块严重程度密切相关。
摘要:目的研究重型脑外伤手术患者血清炎症细胞因子与颅内压(ICP)之间的关系。方法 32例重型脑外伤患者均于术中放置ICP探头,术前及术后每12小时采集血清并测定白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子α(TNF-α),并比较各炎症因子与患者预后的关系。记录每小时ICP值,以12h为周期,20mm Hg为基线,将该时间段超过20mm Hg的ICP差值累加,得到ICP的时间累积值(PTD-ICP20),将该值分别与该12h周期前(Pre)和后(Post)各炎症因子行直线回归分析。结果血清IL-1β、IL-8及TNF-α均与患者预后显著相关(P〈0.05)。本组患者的PTD-ICP20均值为(42.9±60.2)mm Hg/h。Pre-IL-8(r=0.554,P〈0.05)、Pre-TNF-α、Post-IL-8及Post-TNF-α均与PTD-ICP20呈正相关(r=0.554、0.597、0.629、0.538,P〈0.05)。结论血清IL-8及TNF-α可作为监测脑外伤患者ICP的生物标记物,对指导脑外伤诊治,改善患者预后有重要价值。
摘要:目的探讨手术松解联合外支架治疗合并疼痛的创伤后肘关节功能障碍的临床效果。方法 2011年1月至2014年12月,采用手术治疗32例合并有疼痛的创伤后肘关节功能障碍患者。男22例,女10例,年龄18-65岁,平均39岁。32例中,25例轻中度疼痛患者作单纯肘关节松解术;4例重度疼痛患者合并有肘关节陈旧性脱位,在术中充分松解肘关节后直视下复位肘关节;3例肘关节炎严重,疼痛剧烈患者在作肘关节松解术同时,作真皮移植间隔式肘关节成形术。共26例患者使用了铰链式外固定架辅助早期功能锻炼。结果术后随访12-18个月,平均14个月。所有患者肘关节活动范围和疼痛症状得到明显改善。术后关节功能改善程度:2例极重度僵硬改善为中度僵硬,19例中度以上僵硬患者改善为轻度僵硬,其余11例改善为无僵硬,改善率100%;术后疼痛缓解情况:6例中重度疼痛缓解为轻度疼痛,其余26例疼痛消失,疼痛缓解率100%。肘关节功能评定采用Mayo综合评分。术前评分:优0例,良6例,可14例,差12例。术后评分:优20例,良8例,可4例,优良率87.5%。术后和术前比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论手术松解联合外支架有利于术后早期功能康复和恢复肘关节僵硬术后的屈伸功能,对陈旧性脱位或肘关节炎引起的疼痛也可获得较好疗效。