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摘要:[摘要]目的将热休克人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力,为得到高质量CIK提供研究基础。方法(1)从外周血单个核细胞中常规诱导培养CIK;(2)热休克处理hAMSCs(42℃,1h),48h后收集上清液及胞内物质,将提取物与第10天CIK(370μg:2×106个)共培养;(3)计数第12、14、17天CIK细胞数,绘制生长曲线;(4)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的分泌量;(5)MTT法检测CIK对A549的体外杀伤活性。结果(1)加入hAMSCs提取物的实验组增殖速度明显高于对照组,第12、14、17天CIK细胞数分别为[(5.26±0.01)×105/mL%(5.60±0.00)×105/mL)]、r(6.26士0.23)×105/mL。5.(9.37±0.15)×105/mL]、[(8.10±0.75)×105/mL vs.(11.00土1.67)×105/mL],差异有统计学意义(P〈0.05);(2)ELISA结果表明,hAMSCs提取物对早期CIK细胞分泌细胞因子有一定促进能力,两组第14天IL-2、TNF-α、IFN-γ量(pg/mL)分别为(13.49±0.78 vs.15.49±3.47)、(53.52±5.52 vs.33.83±15.61)、(60.68±19.390s.50.24±18.89),差异无统计学意义(P〉0.05);(3)MTT结果:对照组与实验组IC50分别为(38.60±18.63 vs.25.62±8.39),差异无统计学意义(P〉0.05)。结论成功将热休克hAMSCs提取物与CIK共培养;共培养后显著促进了早期CIK的增殖活性。
摘要:[摘要]目的探讨P13K/Akt信号通路是否调控脂多糖诱导的人内皮细胞VCAM—1表达及机制。方法脂多糖(LPS)10μg/mL刺激人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)0、6、12、24h,蛋白免疫印迹法(westerrtblot)检测VCAM_1蛋白表达,刺激0、4、8、12h行RT-PCR检测VCAM-1mRNA;LPS(10vg/mL,后同)刺激HUVEC0、30、60、120min后,Westernblot检测P13K(磷脂酰肌醇-3激酶)、磷酸化P13K(p-P13K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)表达;P13K抑制剂LY294002(10、50μmol/L)、Akt抑制剂A6730(2、10gmol/L)预处理细胞1h后LPS刺激12h,Westernblot检测VCAM-1蛋白表达,刺激8h行RT-PCR检测VCAM-1mRNA;加或不加抑制剂,LPS刺激8h加入放线菌素D抑制转录,于0、1、2、3、4h收细胞行RT—PCR检测VCAM-1mRNA,计算mRNA半衰期。结果LPS刺激HUVEC(6、12、24h)后VCAM_1蛋白表达增加(P〈0.05),12h达峰值,VcAM-1mRNA在刺激后也增加(P〈0.05),8h达峰值;LPS刺激HUVEC后p-P13K、p-Akt增加,p-P13K在刺激30min达峰值(P〈0.05),以后逐渐下降,120min与0h接近(P〉0.05),p-Akt在刺激30min明显增加,60min达峰值,120min仍高于0h(P〈0.05);LY294002下调了p-Akt表达(P〈0.05),同时降低VcAM-1蛋白、mRNA合成(P〈0.05);Akt抑制剂也抑制VCAM-1蛋白、rnRNA(P〈0.05);P13K、Akt抑制剂均不影响VCAM-1mRNA稳定性(P〉0.05)。结论PIgK/Akt信号途径在转录水平调控VCAM_1表达。
摘要:[摘要]目的探讨纳米雄黄对卵巢癌细胞COCl的凋亡作用。方法0.6μmol/L浓度的纳米雄黄作用于COCl细胞,于不同时间收集的细胞。倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中Bax、Bel-2和Caspase-3的mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测细胞中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平。结果0.6μmol/L浓度的纳米雄黄作用于COCl细胞48h后出现显著的凋亡形态改变;纳米雄黄显著的促进细胞凋亡,并随着纳米雄黄处理COCl细胞时间的延长凋亡率显著性增加(Pd0.05);随着纳米雄黄处理间的延长COCl细胞中的Bax和Caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著增加(P〈0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P〈O.05)。结论纳米雄黄对COCl细胞有显著的促凋亡作用,其作用机制可能与升高Bax和Caspase-3的表达和降低Bcl-2的表达有关。
摘要:[摘要]目的观察Wnt/β-catenin信号通路在肾缺血再灌注(IRI)致慢性肾间质纤维化大鼠模型中的表达。方法将sD大鼠分为3组,即假手术组(Sham组)及IRI7d组、IRI14d组。分离左侧肾动脉,IRI组用无创血管夹夹闭左侧肾动脉,35min后去除血管夹;假手术组不夹闭左侧肾动脉。IRI7d组与IRll4d组分别于术后第6、13天切除右侧肾,分别于第7、14天处死大鼠。观察比较3组大鼠肾功能,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测3组肾组织pcatenin、纤维连接蛋白(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(aα—SMA)的蛋白表达水平,免疫组织化学观察β—catenin表达部位,生化染色检测胶原含量,Masson染色观察比较3组病理改变。结果与Sham组相比,IRI7d组Fibronectin、α—SMA、胶原含量无明显增高,病理无明显肾小管间质纤维化;而IRI14d组Fibronectin、α—SMA的蛋白表达水平则明显增高,胶原含量增多,肾功能减退,病理显示肾小管间质纤维化。与Sham组相比,IRI7d组α-catenin表达增高,IRI14d组较IRI7d组增高更显著。结论Wnt/β-catenin信号通路可能在肾IRI致慢性肾间质纤维化病程中发挥一定作用。
摘要:[摘要]目的研究永川豆豉复合配方对糖尿病大鼠糖代谢的影响。方法采用自发性糖尿病ZDF大鼠为研究对象,分为模型对照组、模型干预组;以及正常SD大鼠作为阴性对照,分为正常对照组、正常干预组。复合配方水溶剂连续干预35d,同时监测体质量、饲料消耗、空腹血糖(FBG)情况,以及口服葡萄糖耐量实验(OGTT)测量。结果该复合配方对正常动物血糖、体质量无影响。与模型对照组相比,ZDF模型干预组大鼠干预后体质量(P〈O.01)、体质量增长率(P〈0.05)显著增加,空腹血糖下降百分率显著增高(P〈0.01);同时,ZDF大鼠糖耐量明显改善,表现为0.5、2.0h血糖下降百分率和0、0.5、2.0h血糖曲线下面积下降率升高(P〈0.05)。结论永川豆豉复合配方可以改善ZDF糖尿病大鼠的糖代谢,而不影响正常大鼠的糖代谢,提示该复合配方具有辅助降血糖功能的作用。
摘要:[摘要]目的研究Gli抑制剂GANT61对人胃癌细胞AZ521和AGS凋亡的作用。方法应用不同浓度(0、10、20μmol/L)的GANT61处理AZ521和AGS细胞24h后,蛋白免疫印迹法(westernblot)观察GANT61作用于AZ521和AGS细胞后对Gli-1、Gli-2、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响。流式细胞术观察细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果West—ernblot结果显示GANT61可以剂量依赖性显著下调AZ521和AGS细胞Gli-1、Gli-2和Bcl-2蛋白表达和增加Caspase-3蛋白表达。流式细胞术检测显示10μmol/LOANT61作用AZ521,AGS细胞后凋亡率为(19.37±0.81)%和(16.1±0.26)%,显著高于0μmol/LGANT61凋亡率(4.23±0.35)%和(6.00±0.87)%(P〈0.05);10μmol/L和20umol/LGAN761的AZ521细胞中Bcl-2蛋白表达水平分别为355.33±10.12、312.67±7.37,与0umol/LGANT61423.33±11.37相比显著降低(P〈0.05);10μmol/L和20umol/LGAN761的AGs细胞中Bcl-2蛋白表达水平分别为306.67±4.16、273.33±8.02,与0μmol/LGANT61388.33±11.06相比显著降低(P〈0.05);10μmol/L和20μmol/LGANT61的AZ521细胞中Caspase-3蛋白表达水平分别为305±9.64、360.24±8.54,与0μmol/LGANT61261.12±11.53相比显著增高(P〈O.05);10μmol/L和20μmol/LGANT61的AGS细胞中Caspase3蛋白表达水平分别为255.00±6.56、310.67士8.50,与0μmol/LGANT61198.33±2.50相比显著增高(P〈0.05)。结论GANT61通过特异性抑制Gli-1,Gli-2蛋白表达从而调节AZ521和AGs细胞中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平,诱导细胞凋亡。
摘要:[摘要]目的探讨25羟维生素D3与抗菌肽在反复上呼吸道感染的作用。方法选择连续3年就诊的上呼吸道感染患者,其中,1年上呼吸道感染次数大于或等于2次患者46例,男20例,女26例,平均(32.35±9.10)岁;选择15例人作为对照组,平均(31.35±10.20)岁,对照组在年龄上与上呼吸道感染患者差异无统计学意义(P〉0.05)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血血清中25羟维生素D3水平和诱导痰上清液抗菌肽LD37水平并做相关性分析。用人气道上皮细胞株分析25羟维生素D3对抗菌肽LL-37水平影响。结果反复上呼吸道感染患者外周血血清25羟维生素D3水平低于对照组(P〈0.05),并且反复上呼吸道感染患者诱导痰上清液人抗菌肽LL-37水平低于对照组(P〈O.05)。上呼吸道感染平均次数与上呼吸道感染患者外周血25羟维生素D3呈负相关(r=-0.54,P〈0.05),上呼吸道感染平均次数与诱导痰上清液抗菌肽LL-37水平呈负相关(r=-0.65,P〈0.05),上呼吸道感染患者外周血25羟维生素D3和诱导谈上清液抗菌肽LL-37水平呈正相关(r=0.59,P〈0.05)。体外细胞实验显示I,25羟维生素D3能上调上皮细胞抗菌肽LL-37表达。结论25羟维生素D3的缺乏可能是上呼吸道反复感染患抗菌肽LL-37的表达下调的重要原因。
摘要:目的探讨原发性干燥综合征(PSS)伴间质性肺病(ILD)患者血清中核因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF—β1)水平及其临床意义。方法以该院2012年1月至2015年10月收治的82例PSS患者为研究对象,其中,单纯涎腺和(或)泪腺受累PSS患者39例(单纯PSS组),仅伴肺间质损害PSS患者43例(PSS+ILD组),以该院同期健康体检者31例为对照组,收集各组外周血标本检测分析NF-κB和TGF-β1水平和PSS相关生化指标。结果各组血清NF—κB水平差异有统计学意义(P〈0.05),其中,PSS+ILD组(70.49±25.64)ng/mL高于单纯PSS组(43.71±18.62)ng/mL和对照组(20.35±9.69)ng/mL(P〈0.05),单纯PSS组高于对照组(P〈0.05);各组血清TGF-81水平差异有统计学意义(P〈0.05),其中,PSS+ILD组(37.43±10.68)μg/L高于单纯PSS组(18.52±6.32)μg/L(P〈0.05),而PSS+ILD组和单纯PSS组均低于对照组(49.61±15.19)μg/L(P〈0.05)。结论NF-κB和TGF-β1水平变化在PSS伴间质性肺病的发生、发展中起着重要作用。
摘要:[摘要]目的评价锝(99Tc)亚甲基二磷酸盐(99Tc—MDP)治疗难治性强直性脊柱炎(As)的临床疗效和安全性。方法入选60例难治性AS患者根据随机数字表法分为治疗组和对照组。治疗组:原有的改善病情抗风湿药加99Tc—MDP。对照组:继续使用原有的改善病情抗风湿药。主要疗效指标:达到AS疗效评价(ASAS)20%改善程度(ASAS20)的受试者比例。次要疗效指标:达到AS疗效缓解50%(ASAS50)、ASAS标准中6项改善5项(ASAS5/6)、BathAS疾病活动指数(BASDAI)改善50%(BAsDAI50)、ASAS部分缓解的受试者比例。结果As患者使用99Tc—MDP治疗第4周时,有30%患者达到治疗反应,16周时80%患者达到治疗反应。次要疗效标准(ASAS5/6、BASDAI50、ASAS50、ASAS部分缓解)也有改善,第16周时有72.5%患者达到ASAS5/6,55.0%患者达到BASDAI50、42.5%患者达到AsAs50、35%患者达到ASAS部分缓解。不仅如此,在第8周时患者ESR、CRP均有所下降。而且99Tc—MDP的耐受性好,不良反应少。结论99Tc—MDP可有效缓解难治性AS患者临床症状,降低炎症指标,为治疗难治性AS提供了一种新的选择。
摘要:[摘要]目的探讨肺叶切除与全肺切除手术方式对肺癌患者右心功能各项指标的变化情况,为肺癌的治疗提高临床经验。方法选择2011年6月至2015年1月在该院接受治疗的80倒肺癌患者作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例,对照组患者实施全肺切除手术,观察组患者实施肺叶切除术。观察两组患者手术前后的肺动脉平均压、中心静脉压、动脉血氧分压、心率、右心室舒张末期容积指数、右心室射血分数等右心功能指标,并进行比较。结果术前,两组患者右心功能肺动脉平均压、中心静脉压、动脉血氧分压、心率、右心室舒张末期容积指数、右心室射血分数比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。术后,观察组肺动脉平均压、心率和右心室舒张末期容积指数低于对照组,观察组右心室射血分数高于对照组,差异均有统计学意义(P〈O.05)。结论全肺切除术对肺癌患者右心功能的影响比肺叶切除术明显,为减少患者右心功能损害,提高手术的安全性及成功率,应选择肺叶切除术。
摘要:[摘要]目的探讨2型糖尿病患者尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOx)的变化与肾功能及尿清蛋白排泄率(UAER)的关系,并分析比较氧化应激指标与糖尿病肾脏损害程度的相关性。方法将100例2型糖尿病患者,排除感染应激和急慢性代谢紊乱,其中,50例为无肾病糖尿病组,另50例患者为糖尿病性慢性肾脏疾病(DKD)组,健康对照组50例。测定2组患者空腹血糖、肾小球功能、血和尿肌酐水平,以及血中糖化血红蛋白(HbAlc)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(Tc)、低密度脂蛋白(LDL)、NOX、8-羟基脱氧鸟苷(8—OHdG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。同时留取所有受试者3次不同时间清洁尿液检测尿清蛋白与尿肌酐比值,计算uAER。结果无肾病糖尿病组体内NOx、8-OHdG、MDA明显高于健康对照组,s0D明显低于健康对照组;而DKD患者NOX、8—0HdGUAER明显高于无肾病糖尿病组,Logistic回归分析显示N0x与DKD更为紧密(0R=1.199,P〈O.01)。结论与3个氧化应激指标8—OHdG、MDA、SOD相比,NOX更能确切地反映2型糖尿病肾病患者体内的氧化应激水平,即NOX是反映氧化应激水平与2型糖尿病肾脏损害相关的更为理想的指标。
摘要:[摘要]目的探讨内质网应激相关蛋白及CXCL12在特发性肺纤维化中的表达及意义。方法收集荆州市中心医院2004~2014年诊断为特发性肺纤维化且存有活检或手术标本的患者共18例,并收集正常肺组织20例作为对照,通过蛋白免疫印迹法(westernblot)检测内质网应激相关蛋白(GRP78、CHOP)及CXCL12蛋白(SDF-1)的表达,通过逆转录PCR(RT-PCR)检测肺组织中GRP78mRNA及CXCL12mRNA的表达。结果与对照相比,肺纤维化患者肺泡上皮中GRP78、CHOP、CXCLl2蛋白表达均上调,且GRP78mRNA及CXCL12mRNA也表达上调。结论内质网应激相关蛋白及CXCL12在特发性肺纤维化的发病过程中起重要作用,可能参与了特发性肺纤维化的发生与发展。
摘要:[摘要]目的探讨孕前和不同孕期体质量指数(BMI)增加对新生儿体质量及分娩方式的影响。方法选取341名单胎、头位且无妊娠并发症的初产妇为研究对象,按照产前BMI不同,孕12周BMI增加不同,孕28周BMI增加不同及孕期BMI增加不同各分为3组,以分娩方式、新生儿出生体质量为观察指标,对各组进行随访分别比较不同孕期各组和新生儿体质量及分娩方式的关系。结果孕前BMI分组不同与新生儿体质量差异有统计学意义(P〈0.05),与分娩方式差异无统计学意义(P〉0.05)。孕12周ABMI与新生儿体质量差异无统计学意义(P〉0.05),与分娩方式差异有统计学意义(P〈0.05)。孕28周ABMI及孕期ABMI与新生儿体质量及分娩方式差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论孕前BMI及不同孕周ABMI和新生儿出生体质量及分娩方式有关,合理进行孕期体质量管理,控制ABMI有助于控制新生儿体质量并降低剖宫产率。
摘要:[摘要]目的探讨早期间断高容量血液滤过对群蜂蜇伤后出现横纹肌溶解患者预后及炎症因子的影响。方法选取2006年1月至2014年10月该院急诊科收治的119例群蜂蜇伤出现横纹肌溶解的患者分为两组,A组:蜂蜇伤24h后接受血液滤过;B组:蜂蜇伤后进行早期血液滤过(蜂蜇伤24h内),比较两组患者的急性肾损伤和多器官功能障碍综合征的发生率、病死率、平均住院时间,以及蜂蜇伤后第3、7、10天血液主要生化指标及炎症因子变化。结果与A组比较,B组急性肾损伤与多器官功能障碍综合征的发生率、病死率明显下降(P〈0.05),平均住院时间缩短[(14.6±6.3)d%(19.2±7.1)d,P〈0.05];B组患者在蜂蜇伤后血清肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、肌酐、降钙素原、高迁移率族蛋白B1、总胆红素及血红蛋白恢复较A组快(P〈0.01);B组患者降钙素原水平与高迁移率族蛋白B1、肌酸激酶、肌酐、总胆红素呈正相关(P〈0.05)。结论对群蜂蜇伤出现横纹肌溶解的患者进行早期间断高容量血液滤过可降低炎症因子水平及改善预后,提高生存率。
摘要:[摘要]目的观察重症手足口病患几经过艾司洛尔治疗前后乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK—MB)、去甲肾上腺素(NE)等心肌酶相关指标的变化。方法选择2014年1~12月到该院进行重症手足口病治疗的急性期患儿共计136例,分为普通治疗组与艾司洛尔组,选择同期该院进行健康体检的0.5~5.0岁健康婴幼儿68例作为对照组。普通治疗组给予患儿常规的抗病毒、降低颅内压、保护心肌细胞等对症治疗。艾司洛尔组患儿在普通治疗组的治疗方案基础上给予史司洛尔治疗。所有患儿采集入院当天及治疗3d后采集静脉血,检查患儿的心肌酶各项指标。采集对照组儿童静脉血作上述指标检测。观察患儿与健康儿童的上述指标差异,观察普通治疗组与艾司洛尔组治疗前后上述指标差异。结果与同年龄段的健康儿童相比,患儿的LDH、CK、CK—MB、NE等指标明显偏高,差异有统计学意义(P〈0.05)。经过3d的治疗,普通治疗组和艾司洛尔组患儿的心肌酶指标较入院时均有显著下降,与入院时相比差异有统计学意义(P〈0.05),与普通治疗组相比艾司洛尔组指标下降的更为明显,且差异有统计学意义(P〈0.05)。结论在重症手足口病患儿的临床治疗方案中使用艾司洛尔能够缓解患儿的心肌损伤,对患儿病情向好方向的转归起到了积极作用。
摘要:[摘要]目的探讨口服白藜芦醇对卵泡颗粒细胞线粒体功能及人工辅助生殖技术(ART)效果的影响。方法研究入组受试对象109例,其中,对照组59例,白藜芦醇组50例。分析其颗粒细胞氧化应激水平和线粒体功能,检测胚胎发育和妊娠结局相关指标及不良反应。结果白藜芦醇使颗粒细胞的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化活性下降了28.57%(P〈0.05),同时也降低了丙二醛(MDA)水平(0.653±0.084)nmol/mL225.(0.382±0.052)nmol/mL,(P〈0.05)。白藜芦醇增加了线粒体DNA(mtD—NA)拷贝数(4.62±0.24)×10。VS.(5.77±0.38)×105,(P〈0.05)和ATP生成(2.516±0.160)pm01VS.(4.484±0.180)pmol,(P〈0.05)。白藜芦醇组较之对照组其卵成熟率(87.75%口s.94.15%,P〈0.05)、受精率(86.69%vs.91.49%,P〈0.05)和优质胚胎率(44.30%215.51.22%,P〈0.05)均显著提高,且尚未发现有明显的不良反应。结论白藜芦醇可能对提高ART的成功率具有一定的辅助作用。
摘要:[摘要]目的考察并发心房颤动(AF)对急性脑血管病患者外周血炎性因子,血管性假血友病因子(vWF)与氧减饱和度指数(ODI)的影响及病理意义。方法收集2013年4月至2015年3月在齐齐哈尔医学院附属第三医院收治的急性脑血管病患者132例,按是否并发AF分为2组:并发AF的急性脑血管病组60例,非AF的急性脑血管病组72例。选择同期健康体检者67例为对照组。结果与急性脑血管病组比,并发AF的急性脑血管病组脑出血、意识障碍、既往脑血管病史和大脑中动脉发病例数较多(P〈0.05)。与对照组比较,急性脑血管病组神经功能缺损评分(N1HSS)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、vWF和ODI增高(P〈0.05),与急性脑血管病组比,并发AF急性脑血管病组NIHSS、IL-6、TNF-α、CRP、vWF和ODI明显增高(P〈0.05)。结论AF加重了急性脑血管病患者的炎症反应、血管内皮功能紊乱和低氧并存的状况。
摘要:[摘要]目的探讨儿童心脏轻度杂音与心脏瓣膜反流的相关性。方法选取2013年5月至2015年1月在该院非心脏疾病诊疗或常规体检时,听诊有心脏杂音的儿童274例,行心脏彩超、心肌酶等检查明确心脏杂音产生的原因。结果274例心脏杂音患儿中确诊为生理性杂音168例,占61.31%(168/274),先天性心脏病36例,占13.14%,继发性心脏病70例,占25.55%。生理性杂音原因中包括瓣膜反流、左室假腱索等情况,其中,瓣膜反流101例,占生理性杂音的60.12%(101/168),占整个心脏杂音的36.86%(101/274);3~6岁心脏杂音组中瓣膜反流例数为35例,占76.09%,明显高于其他组(P〈0.05);2~〈3岁心脏杂音纽中瓣膜反流率为38.55%,高于小于1岁纽的20.59%,差异有统计学意义(P〈0.05);其中,心脏杂音分级为Ⅰ级的患儿中,为瓣膜反流的占53.13%,Ⅱ级为29.89%,Ⅲ级为11.86%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论儿童心脏听诊杂音与瓣膜反流之间存在一定的关系,通过心脏杂音可初步判断儿童器质性心脏病发生情况。