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摘要:目的 研究鹅去氧胆酸(CDCA)对结肠癌细胞HCT-116的影响,并探讨其作用机制。方法 采用体外细胞培养、四甲基偶氮唑蓝(MTT法)、苏木素-伊红染色(HE染色)、吉姆萨染色(Giemsa染色)、吖啶橙/溴化乙锭染色(AO/EB染色)和流式细胞术检测经CDCA诱导处理对结肠癌HCT-116细胞的存活率、形态学变化、细胞周期、线粒体膜电位和细胞凋亡率的影响。结果 试验结果表明,CDCA作用于结肠癌细胞HCT-116细胞株48h的半抑制浓度为0.304mmol/L。0.800mmol/L CDCA处理48h后细胞抑制率达88.4%,且表现出细胞体积缩小、细胞核固缩和染色质凝聚等凋亡特征性的形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,经CDCA诱导处理后,细胞株细胞周期被阻滞于G2/M期,线粒体膜电位降低,0.400mmol/L CDCA处理48h后HCT-116细胞凋亡率达54.5%。结论 CDCA对人结肠癌HCT116细胞株的抑制作用与其剂量有依赖性,并可能通过线粒体途径诱导人结肠癌细胞HCT-116细胞株凋亡。
摘要:目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)在维吾尔族宫颈病变[宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ~Ⅲ及早期宫颈癌]组织中的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)载量相关性。方法 采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法测定140例维吾尔族妇女(慢性宫颈炎30例,CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各20例,早期宫颈癌50例)宫颈石蜡切片组织中VEGF-C的水平;术前用第2代杂交捕获(HC-Ⅱ)方法测定同一患者术前宫颈HPV载量;比较2个指标同宫颈病变的关联。结果 CINⅡ、CINⅢ及早期宫颈癌组织VEGF-C水平、宫颈病变程度及HPV载量均高于慢性宫颈炎组织(P〈0.05);组织中VEGF-C水平与HPV载量呈正相关,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 新疆维吾尔族妇女宫颈组织中VEGF-C水平、HPV载量均与宫颈病变严重程度相关,且二者存在协同作用。
摘要:目的 研究采用定量CT(QCT)方法测量腹部脂肪,并探讨腹部内脏脂肪面积与高血压的关系。方法 使用QCT脂肪测量软件定量测量400名年龄大于或等于18岁的受试者腹部脂肪,按照是否有高血压将患者分成非高血压组和高血压组。包括从T12到S1范围每个椎间隙测量,加上脐水平一个层面共7个层面内脏脂肪面积,同时获得血压水平及高血压用药情况。结果 与非高血压组相比,高血压组患者的总内脏脂肪体积以及T12~L1等各层内脏脂肪面积均较高。各层面中,L2~3内脏脂肪面积与总内脏脂肪体积相关系数最高(r=0.981)。在调整了年龄,性别和腰围等因素后,Logistics回归分析结果显示L1~2、L2~3、L4~5内脏脂肪面积是高血压发生的正相关因素,且L2~3高于其他各层面。结论 L2~3内脏脂肪面积与总内脏脂肪体积相关性较好,且与高血压发生显著关联,可作为预测指标。
摘要:目的 探讨雷公藤甲素对U251细胞自噬活性的影响及机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测雷公藤甲素对U251细胞的增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);免疫荧光化学法测定细胞中LC3-Ⅱ表达,Western blot法测定LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、磷酸化P70、磷酸化Erk、磷酸化AKT蛋白的表达。结果 雷公藤甲素作用于U251细胞后,细胞增殖受抑制,24h的IC50为0.73μmol/L,48h的IC50为0.27μmol/L。免疫荧光法测定6、12、24h后LC3-Ⅱ水平增高;Western blot法测定LC3-Ⅱ水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值随时间增高;Beclin-1水平增高,磷酸化P70、磷酸化Erk表达降低、磷酸化AKT无明显变化。结论雷公藤甲素可抑制U251细胞增殖并促进自噬,并可通过上调Beclin-1表达和抑制mTOR的活性来促进自噬。
摘要:目的 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)与核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体被其特异性配体激活后对下游炎症因子表达的影响。方法实验分为4组:空白对照组、TATP组、TMDP、TMDP+ATP组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定白细胞介素(IL)-1β及IL-18的表达,逆转录PCR测定NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)的表达情况。结果 TMDP组、TATP组、TMDP+ATP组的IL-1β和IL-18水平均高于空白对照组(P〈0.05),且TMDP+ATP组水平增高更显著。TMDP组、TATP组、TMDP+ATP组的NLRP3和Caspase-1表达均高于空白对照组(P〈0.05),且TMDP+ATP组水平增高更显著(P〈0.05)。结论 NOD2的特异性配体胞壁酰二肽,NLRP3的特异性配体腺苷三磷酸单独刺激THP-1后NLRP3及下游炎症因子的表达很弱或无表达,联合刺激后可显著增强NLRP3及下游炎症因子的表达,二者之间存在相互促进及协同作用。
摘要:目的 探讨T-CAM表面修饰纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(nano-hydroxyapatite/polyamide 66,n-HA/PA66)复合骨修复材料修复兔桡骨中段骨缺损的疗效。方法 选择36只成年新西兰大白兔,建立右桡骨中段1.5cm骨缺损模型后分为两组:实验组植入T-CAM表面修饰n-HA/PA66复合骨修复材料;对照组植入n-HA/PA66。观察术前,术后2、4、8、12周静脉血碱性磷酸酶(ALP)值;术后4、8、12周每个时间点处死6只兔子,进行X线片、大体标本观察、组织学等观察桡骨骨缺损愈合情况。结果所有兔子术后切口均一期愈合,无死亡,无体内植入材料脱落。影像学及组织学结果表明实验组在术后4周就有新生骨组织,随着时间的延长,实验组新骨生长速度和数量明显优于对照组,术后12周Lane-Sandhu法X线片和组织学评分实验组均高于对照组(P〈0.05);术后2周实验组ALP值开始升高,随着时间的推移,两组ALP值均升高,术后8周达最高峰,之后开始下降,在12周时接近于术前,静脉血ALP值在术后第2、4、8周与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 T-CAM表面修饰n-HA/PA66复合骨修复材料具有促进骨质愈合的作用,尤其在早期修复骨缺损的效果优于n-HA/PA66。
摘要:目的 探讨机械力刺激对人肺泡上皮A549细胞c-Jun氨基末端激酶/促分裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK)表达的影响。方法 建立离体的A549细胞机械刺激模型:分别以大小为1 000μstrain的张应力或压应力刺激细胞,在刺激前和刺激后0、5、15、30、60min时间点进行观察,共10组,每组3皿细胞。采用Western blot检测机械刺激后细胞内磷酸化JNK/MAPK蛋白、总JNK/MAPK蛋白的表达变化。结果 A549细胞经机械力刺激后,磷酸化JNK/MAPK蛋白水平增加。张应力组在30min时间点增加最明显,压应力组在15min时间点最明显。之后随着机械刺激时间延长,张应力和压应力刺激组的磷酸化JNK蛋白水平均出现下降,在60min时下降至基线水平。结论 1 000μstrain张应力或压应力刺激,均激活A549细胞JNK/MAPK,提示JNK通路可能参与了机械力诱导的A549细胞信号转导。
摘要:目的 研究白藜芦醇对脑胶质瘤U87细胞自噬的诱导作用及其可能的作用机制。方法 分别用不同浓度的白藜芦醇处理脑胶质瘤U87细胞12、24、48h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测白藜芦醇对U87细胞生长的抑制作用;电子显微镜观察药物处理后U87细胞自噬空泡的出现;逆转录PCR及Western blot分别检测白藜芦醇作用后自噬相关基因微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC-3)、抗Bax交互作用因子(Bif-1)mRNA及蛋白表达的变化。结果 随着药物浓度的增加及作用时间的延长,白藜芦醇对U87细胞的生长抑制作用逐渐增大。电镜检测发现未使用白藜芦醇处理的细胞未出现自噬空泡,而白藜芦醇处理过的细胞出现明显的自噬空泡。白藜芦醇能剂量依赖性地增强自噬相关基因LC-3、Bif-1mRNA及蛋白水平的表达。结论 白藜芦醇可以通过诱导细胞自噬来抑制U87细胞增殖,LC-3、Bif-1基因表达上调是其诱导自噬的可能机制。
摘要:目的 初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响。方法 用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(Real-time PCR)、Western blot检测碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)mRNA和蛋白水平表达的变化,并采用细胞增殖检测试剂(CCK-8)实验检测对细胞增殖能力的影响。结果 在HepG2细胞中,白藜芦醇能剂量依赖性地诱导BATF2在转录和翻译水平的表达,并抑制细胞的增殖(P〈0.05);基因检测发现白藜芦醇显著诱导BATF2启动区活性,-244--152区域存在白藜芦醇的可能结合位点。结论 白藜芦醇能增强HepG2细胞中BATF2的表达并抑制细胞的增殖,提示上调BATF2的表达可能是白藜芦醇抑制肝癌细胞增殖的机制之一。
摘要:目的 通过检测甲状腺功能亢进(简称甲亢)时大鼠肝、脾组织铁含量和血红素加氧酶1(HO-1)的表达,探讨甲亢对大鼠机体铁代谢的影响。方法 将18只雌性SD大鼠分为甲亢4周组、甲亢8周组和对照组,每组6只。甲亢组灌胃给药优甲乐,对照组灌胃生理盐水。造模结束分别取各组大鼠肝、脾脏,用二氨基联苯胺增强的Perl′s铁染色法检测肝、脾组织铁含量,用逆转录PCR技术检测大鼠肝、脾组织HO-1mRNA的表达;利用Western blot和免疫组织化学染色法对大鼠肝、脾脏HO-1表达进行分析。结果 甲亢模型4周、8周组大鼠的肝、脾组织铁染色均明显强于对照组,且甲亢8周组强于甲亢4组(P〈0.01);甲亢4周、8周组大鼠的肝、脾脏的HO-1 mRNA、蛋白表达均高于对照组,且甲亢8周组明显高于4周组,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论 甲亢可引起肝、脾组织铁含量增加,HO-1表达增强。
摘要:凡投本刊的临床研究论文(主体是以人为研究对象),作者应说明其遵循的程序是否符合负责人体试验的委员会(单位性的、地区性的或国家性的)所制订的伦理学标准,并提供(上传)该委员会的批准文件复印件及受试对象或其亲属的知情同意书复印件。
摘要:目的 研究扩张头静脉建立鼻烟窝动静脉内瘘在长期血液透析患者中的临床应用价值。方法 137例尿毒症患者分两组分别实施鼻烟窝(72例)与腕部(65例)桡动脉远心端与头静脉近心端血管吻合术制作动静脉内瘘,观察比较两种内瘘手术的吻合口内径、内瘘成熟时间和初次透析的血流量及1年随访观察透析使用时间、通畅度及并发症情况。结果 137例内瘘手术均一次成功,鼻烟窝内瘘的患者头静脉扩张后口径明显增大(P〈0.05),扩张前口径小于腕部内瘘的患者,差异具有统计学意义(P〈0.05)。两种方法的透析使用时间、畅通率差异均无统计学意义(P〉0.05)。由于肝素生理盐水的冲扩,鼻烟窝内瘘路径术后血栓形成的发生率更小(P〈0.05)。结论 鼻烟窝动静脉内瘘可作为长期血液透析患者较佳的血管通路选择。
摘要:目的 检测鲜红斑痣患儿皮损厚度与年龄、部位、性别等因素的关系。方法 选取该院门诊鲜红斑痣患儿60例,采用丹麦高特司科技公司DermaLab Combo皮肤生理检测仪进行超声检测。结果 各组间皮损皮肤厚度比较差异有统计学意义(P〈0.01),其中婴幼儿组最薄(885.85±96.84)μm,学龄组最厚(1 100.55±153.98)μm。皮损各部位在不同组间皮肤厚度比较差异均有统计学意义(P〈0.05),其中同一部位皮损厚度相对较正常皮肤厚度厚。不同部位皮损皮肤厚度比较差异均有统计学意义(P〈0.01),且肩胛部最厚(1 222.25±110.78)μm,颈部最薄(825.45±86.57)μm。结论 超声能精确测量鲜红斑痣患儿皮损厚度,且皮损厚度与部位、年龄有关,与性别无关。
摘要:目的 探讨在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中,整合素连接激酶(ILK)抑制剂QLT0267对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)表达的影响。方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2),分10组,每组给予不同浓度葡萄糖及QLT0267,干预48h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);随后选取对照组、高糖组、DMSO组、QLT0267(IC50)组(使用QLT0267后,HK-2细胞数量减少一半所需的QLT0267药物浓度),免疫荧光法检测各组ILK、P-P38MAPK的表达;Western blot检测各组ILK、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化-蛋白激酶B(P-AKT)、PP38MAPK、P38MAPK、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,观察各组表达差异性,探讨在TEMT过程中QLT0267对P38MAPK的影响。结果 30mmol/L的葡萄糖干预48h HK-2细胞增殖显著,同时上调细胞中ILK、P-AKT、P-P38MAPK、α-SMA的表达;QLT0267在抑制HK-2细胞增殖的同时,可以通过下调ILK下游P-AKT的表达,阻止P38MAPK活化,进而减少HK-2细胞中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。结论 QLT0267可能通过部分阻止P38MAPK的活化,从而延缓HK-2细胞TEMT进程。
摘要:目的 探讨青光眼滤过手术失败后行透巩膜二极管激光睫状体光凝术的中期安全性和有效性。方法 共纳入患者40例(42眼),均经过1次以上青光眼滤过手术并且无法耐受最大剂量局部用药,其中小梁切除手术30眼,Ahmed青光眼阀植入手术12眼。使用Oculight Diode Laser System IRIS 810nm红外激光仪G探头。观察病例病史、激光治疗参数、眼压(IOP)、视力、并发症及安全性、有效性。结果 平均随访时间(18.7±6.4)个月,平均IOP在术后3个月时由(35.6±7.4)mm Hg降至(17.3±2.6)mm Hg(降幅51.7%,P〈0.01),术后1年时降至(15.7±2.1)mm Hg(降幅56.1%,P〈0.01)。并发症包括低IOP(4.8%),光感丧失(4.8%)、视力下降(16.7%)、前房积血(19.0%)和剧烈疼痛(11.9%)。结论 透巩膜二极管激光睫状体光凝术能够显著降低青光眼滤过手术失败病例的IOP,但该治疗方式对此类难治性青光眼人群的安全性仍有待进一步观察和分析。
摘要:目的 探讨慢性偏头痛(CM)合并药物过度使用的临床特点,对国际头痛分类第3版测试版(ICHD-Ⅲbeta)诊断标准进行初步临床测试。方法 回顾性研究71例CM合并药物过度使用患者的临床特征,分析ICHD-Ⅲbeta关于CM的诊断标准中各项满足诊断的情况及比例。结果 71例CM患者平均年龄为(49.5±10.5)岁。仅有3例患者有先兆偏头痛(MA),13例患者表现为可能性偏头痛(PM)。其中以头痛粉(60.0%)过度使用率最高,咖啡因(82.2%)和对乙酰氨基酚(76.1%)为使用最多的药物成分。此外,85.9%的CM患者满足B诊断,而有19.7%的患者不能满足C诊断标准,其偏头痛类型主要为PM。结论 将CM的ICHD-Ⅲbeta版诊断标准中C.3项改为PM可能在临床更适用。
摘要:目的 评价微探头超声内镜与腹部超声联合应用对提高大肠癌患者的临床分期准确性及特异性的价值。方法 应用微探头超声内镜及其与B超联合的检查方法分别对88例大肠癌患者进行术前TNM分期,并与术后病理结果进行比较。结果微探头超声内镜术前大肠癌浸润深度的分期和是否有淋巴结转移与术后病理结果分期的总符合率分别为78.4%和72.7%,T1、T2、T3和T4的符合率分别为88.9%、73.9%、80.6%和76.0%;无淋巴结转移(N-)和有淋巴结转移(N+)的符合率分别为75.0%和71.9%。微探头超声内镜与B超联合对淋巴转移的准确度、敏感度及特异性均高于单独应用微探头超声内镜检查,但差异无统计学意义。结论 微探头超声内镜是大肠癌浸润深度分期的有效手段之一,结合其他影像学检查有助于提高TNM分期准确性。
摘要:目的 探讨负压垫固定CT引导下经皮肺穿刺活检对肺部占位性病变的诊断价值。方法 收集该院呼吸内科2013年11月至2014年12月接受激光定位配合负压垫固定CT引导下经皮肺穿刺活检术的288例患者,分析负压垫固定CT引导下经皮肺穿刺活检术对肺恶性肿瘤的诊断阳性率。结果 288例经皮肺穿刺的病理结果为恶性肿瘤153例,良性病变110例,未确诊25例,敏感度、特异度及准确率分别为86.9%、100.0%及92.0%;穿刺并发症包括气胸(17.0%),咯血(9.7%),咯血合并气胸(0.3%)。结论 负压垫固定CT引导下经皮肺穿刺活检是一种安全、准确、微创的诊断方法,值得推广。