重庆医学杂志 统计源期刊

重庆医学 2016年第17期杂志 文档列表

重庆医学杂志论著

M_3受体激动剂对急性缺血性心肌的保护作用2305-2307

摘要：目的研究M_3受体激动剂胆碱对大鼠急性缺血性心肌的保护作用其可能的机制。方法用低pH值（pH 6.8）乏氧液来模拟缺血环境,全细胞膜片钳技术记录L-型钙电流（I_（Ca-L））变化;激光扫描共聚焦技术观测细胞内钙变化,探讨胆碱对细胞内钙及钙库的影响。结果在膜片钳实验结果显示,与正常组比较,缺血组I_（Ca-L）电流密度明显增高,应用胆碱后I_（Ca-L）下降,差异有统计学意义（P〈0.01）;共聚焦实验结果显示,与正常组比较,缺血组细胞内钙升高明显（P〈0.01）,胆碱组细胞内钙升高幅度不明显;预先给予4-DAMP可部分逆转胆碱抑制细胞I_（Ca-L）及细胞内钙升高的作用。结论 M_3受体参与保护缺血心肌的可能机制为通过抑制缺血心肌细胞I_（Ca-L）,从而抑制细胞内钙超载。

上皮间质转化与大肠癌奥沙利铂化疗耐药的关系研究2308-2311

摘要：目的上皮间质转化（EMT）与大肠癌化疗耐药的关系。方法采用Transwell细胞迁移实验及Transwell细胞侵袭实验检测大肠癌奥沙利铂耐药细胞株LOVO/L-OHP与大肠癌LOVO亲本细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测LOVO与LOVO/L-OHP细胞株上皮细胞标志因子E-cadherin和间叶细胞标志因子Vimentin蛋白水平以评价EMT发生。然后用GSK-3β特异性抑制剂SB415286处理LOVO细胞诱导EMT,检测各组细胞迁移、侵袭能力及E-cadherin和Vimentin蛋白表达评价表型改变,通过MTT法检测细胞增殖,Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡以评价SB415286诱导EMT后对大肠癌细胞株奥沙利铂化疗敏感性的影响。结果耐药细胞株LOVO/L-OHP形态学特点,Transwell细胞迁移侵袭实验结果,E-cadherin和Vimentin蛋白表达改变证实LOVO/L-OHP出现了典型的EMT表型改变。增殖与凋亡结果提示SB415286诱导EMT后大肠癌细胞株的化疗敏感性下降,导致大肠癌细胞化疗耐药。结论本研究从耐药细胞株LOVO/L-OHP的EMT发生与诱导EMT对大肠癌细胞表型的改变和化疗敏感性的影响两个角度证实了EMT与大肠癌化疗耐药间的直接关系,从而为未来干预大肠癌化疗耐药性的治疗奠定基础并提供新的研究策略。

缺氧调控JAR细胞Stat3表达及细胞凋亡的研究2312-2313

摘要：目的探讨缺氧对JAR细胞信号转导子和转录激活子3（Stat3）和磷酸化Stat3（p-Stat3）蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法在缺氧条件下培养JAR细胞,通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Stat3和p-Stat3在缺氧前后蛋白表达的差异,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果缺氧培养JAR细胞48h后,细胞形态发生异常改变,Stat3和p-Stat3蛋白表达水平均明显降低（P〈0.05）,细胞凋亡水平明显增加（P〈0.05）。结论缺氧使JAR细胞Stat3和p-Stat3蛋白表达水平降低,凋亡增加。

IRE1-XBP1通路调控肝巨噬细胞极性的机制研究2314-2318

摘要：目的分离、培养LEWIS大鼠肝脏肝巨噬细胞（KCs）,观察肌醇酶1-X盒连接蛋白1（IRE1-XBP1）通路活性改变对KCs功能的调控的作用机制。方法 （1）采取Ⅳ型胶原酶消化肝脏联合非连续梯度离心法分离Lewis大鼠KCs;（2）鉴定后的KCs分为4组：XBP1沉默组（XBP1-shRNA组）、错义序列沉默对照组（Ctrl-shRNA组）;Adv-XBP1过表达组（AdV-XBP1组）、错义序列过表达对照组（Ctrl-AdV组）;（3）实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测各组KCs中XBP1、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17转录水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JAK1、JAK2、STAT1及STAT3的蛋白表达水平;（4）流式细胞术（FCM）及激光共聚焦检测各组KCs表型的变化情况;（5）分离大鼠脾脏淋巴细胞,尼龙毛柱过滤纯化T细胞,与上述各组KCs共培养,Brdu渗入法检测T细胞增殖情况;（6）Annexin V/PI法FCM观察T淋巴细胞凋亡情况;（7）酶联免疫吸附测定（ELISA）检测上清液中IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17及IL-10水平。结果 （1）RT-PCR结果显示,XBP1-shRNA组中XBP1的表达量较对照组显著降低,而在AdvXBP1组则明显上调（P〈0.05）;（2）FCM发现,XBP1-shRNA组中MHC-Ⅱ、CD86、CD40的表达明显低于对照组,而CD204和CD206的表达则显著高于对照组;而在Adv-XBP1组,则呈相反趋势;（3）Western blot检测发现XBP1-shRNA组中JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的蛋白表达及其磷酸化水平均受到抑制,而在Adv-XBP1组则上述蛋白的表达及磷酸化水平得到显著增强;（4）Brdu发现抑制KCs中IRE1-XBP1活性后T细胞增殖受到明显抑制,凋亡增加,促炎细胞因子分泌减少,抗炎细胞因子分泌增加（P〈0.05）,而上调KCs中IRE1-XBP1活性后T细胞增殖则明显增强,凋亡明显减少,促炎细胞因子分泌增加,抗炎细胞因子分泌减少（P〈0.05）。结论 KCs中IRE1-XBP1通路活性变化可以转化KCs的极性状态,并通过调节JAK-STAT家族成员表达,调控KCs自分泌细胞因子的�

抑制组蛋白去乙酰酶1后对人胃癌干细胞的影响2319-2322

摘要：目的研究抑制组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）后对人胃癌干细胞（GCSGs）增殖、干性及侵袭作用的影响。方法以CD44为胃癌干性标志物,流式分选出GCSCs。实时荧光定量核酸扩增检测（RT-qPCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测GCSGs与胃癌非干细胞中HDAC1的表达量。组蛋白去乙酰化酶抑制剂处理GCSCs后,CCK-8法、克隆形成和Transwell实验观察细胞增殖和侵袭的变化;RT-qPCR和Western blot检测其对凋亡、侵袭相关蛋白及干性标志物表达的影响。结果 HDAC1在GCSCs中的表达比胃癌非干细胞高。实验组细胞的增殖和侵袭能力相较于对照组均减弱,且下调干性标志物及介导上皮间质转化。结论抑制HDAC1的去乙酰化作用后GCSCs的增殖、干性及侵袭能力降低。

重庆医学杂志论著·基础研究

siRNA抑制HMGA1基因表达对LX-2细胞生物学功能的影响2323-2326

摘要：目的探讨高迁移率蛋白A1（HMGA1）siRNA对人肝星状细胞HMGA1、α-SMA、E-钙黏素（E-cadherin）基因的表达调控作用及增殖活性的影响,并探讨其可能的机制。方法将有效的人工合成的HMGA1siRNA转染人肝星状细胞LX-2（LX-2）后沉默HMGA1基因的表达。通过实时荧光定量PCR（RT-PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测LX-2细胞中HMGA1、α-SMA和E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测LX-2细胞增殖水平。结果以HMGA1-siRNA序列1组沉默效果最好。TGF-β1刺激组与TGF-β1＋NC-siRNA组之间细胞增殖水平、HMGA1、α-SMA、E-cadherin的基因及蛋白表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）,细胞增殖水平、HMGA1、α-SMA表达均明显高于正常对照组（P〈0.05）,E-cadherin表达显著低于正常对照组（P〈0.05）;TGF-β1＋HMGA1siRNA组细胞增殖水平及HMGA1、α-SMA的mRNA及蛋白表达水平较另外3组均显著下降（P〈0.05）,E-cadherin表达水平显著增高（P〈0.05）。结论靶向HMGA1的siRNA能够沉默LX-2中HMGA1的表达;抑制TGF-β1诱导的LX-2增殖水平,提示HMGA1参与了TGF-β1诱导的肝星状细胞活化。

血管紧张素1-7对蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性的保护作用2327-2329

摘要：目的分析血管紧张素Ang-（1-7）对蛛网膜下腔出血（SAH）后血脑屏障通透性的作用及机制。方法枕大池二次注血法制备SAH大鼠,伊文思蓝（Evans blue）检测Ang-（1-7）处理后SAH大鼠血脑屏障通透性及脑组织含水量;实时荧光定量PCR（RT-PCR）与蛋白免疫印迹法（Western blot）分析脑组织黏连蛋白ICAM-1、VCAM-1的表达。人工血性脑脊液（BCSF）刺激血管内皮细胞（HBMEC）,检测细胞通透性及细胞增殖与凋亡情况。结果 Ang-（1-7）可降低SAH大鼠脑组织中Evans blue渗透量及脑组织含水量,具有剂量和时间依赖性,以10~（-5） mol/L Ang-（1-7）处理24h时变化最为显著,SAH大鼠脑组织中ICAM-1、VCAM-1表达水平显著上调。同时Ang-（1-7）作用的BCSF刺激的血管内皮细胞中Evans blue的渗透量明显减少,ICAM-1、VCAM-1的表达水平及细胞增殖活力显著增加,细胞凋亡减少。结论 Ang-（1-7）具有保护蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性作用。

富氢水对大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用2330-2333

摘要：目的探讨富氢水对大鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）的保护作用及其可能机制。方法以150~180g SD大鼠为研究对象,分为对照组（C组）、NAFLD组（M组）、非酒精性脂肪肝＋富氢水组[（M＋H2）组]、富氢水组（H2组）,每组12只;C组和H2组常规饲养,M组和（M＋H2）组以高脂饲料＋土霉素（10 mg/100g剂量注射20 mg/mL,每5天1次）暴露建立大鼠NAFLD模型;连续暴露8周后各组随机选取4只,HE染色检测肝脏组织病理特征,观察到脂肪空泡为模型建立成功;采用生化方法检测各组大鼠外周血丙氨酸氨基转移酶（ALT）、丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性;第9周起,各组常规饲养,前两组注射生理盐水（每只4mL/d）,后两组注射富氢水（每只4mL/d）,连续腹腔注射24d后,观察各组肝脏组织病理特征,并检测大鼠外周血ALT、MDA水平及SOD活性。结果各组暴露8周后,HE染色显示：M组和（M＋H2）组肝脏组织均有大小不等的脂肪空泡,C组和H2组肝脏组织细胞形态正常,无脂肪空泡;血液检测显示：与C组相比,M组和（M＋H2）组ALT、MDA水平均显著升高（P〈0.05）,SOD活性显著降低（P〈0.05）。连续注射生理盐水或富氢水24d后,HE染色显示：（M＋H2）组大鼠肝脏组织仅极少部分有脂肪空泡,多数肝细胞形态正常,无明显损伤;M组大鼠肝脏组织一半以上区域有脂肪浸润现象,并有脂肪滴出现,肝细胞受损明显;血液检测显示：与M组比较,（M＋H2）组大鼠肝脏中ALT、MDA水平降低（P〈0.05）,SOD活性增高（P〈0.05）;但与C组相比,（M＋H2）组大鼠肝脏中ALT、MDA水平增高（P〈0.05）,SOD活性降低（P〈0.05）。结论成功建立大鼠NAFLD模型,富氢水处理对大鼠NAFLD有一定保护作用,其机制可能与富氢水抗氧化作用有关。

Skp2基因沉默对SPC-A-1肺癌细胞增殖和凋亡的影响2334-2336

摘要：目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）基因沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将Skp2 RNA干扰表达载体转染至SPC-A-1肺癌细胞中,G418筛选获得阳性克隆细胞。通过实时荧光定量（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺癌细胞中Skp2的表达。采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组肺癌细胞生长、凋亡情况。结果转染Skp2 shRNA表达载体的肺癌细胞中Skp2蛋白表达量明显减少,抑制效率分别可达75.3±5.1,70.4±3.2;转染Skp2 shRNA表达载体的肺癌细胞生长减慢,阻滞于G_1期的增多,S期细胞减少。Skp2 shRNA转染质粒组凋亡率较阴性对照组明显增加,细胞凋亡率分别为（17.5±2.8）%、（15.6±3.1）%。结论通过特异性沉默Skp2基因的表达,可有效降低肺癌细胞中Skp2蛋白表达水平,抑制肺癌细胞生长及增加细胞凋亡。

丙泊酚预处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响2337-2339

摘要：目的观察丙泊酚对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响。方法选择健康成年雄性SD大鼠60只,分为假手术组、缺血再灌注组、丙泊酚药物组,每组20只,各组又根据再灌注时间分成4个亚组。复制大鼠经典右下肢缺血再灌注模型,恢复血流灌注前5min用丙泊酚注射液（50mg/kg,腹腔注射）处理,分别于再灌注后3、6、9、12h进行取材,检测血清样本中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子κB（NF-κB）水平、肌肉组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平,以及计算肌肉湿干质量比值。结果恢复灌注后各时间段内,相对于缺血再灌注组,丙泊酚处理后能降低TNF-α、NF-κB的表达水平（P〈0.05）,抑制组织MDA水平增加（P〈0.05）,抑制SOD水平的减少（P〈0.05）,也明显减轻肌肉组织的水肿（P〈0.05）。结论丙泊酚预处理可通过遏制炎症因子表达、减轻氧自由基损害从而对缺血再灌注肢体具有保护作用。

重庆医学杂志论著·临床研究

氨甲环酸保守治疗慢性硬膜下血肿19例临床观察2340-2342

摘要：目的观察单独应用氨甲环酸保守治疗慢性硬膜下血肿的作用。方法对2014年3月至2015年8月西南医科大学附属医院住院治疗的19例慢性硬膜血肿患者,均经头颅CT检查确诊,给予静脉氨甲环酸（1g/d）治疗,1周后改为口服（250mg,每日3次）,持续1~5个月[（2.73±1.05）个月],随访6~10个月。比较患者用药前后CT及临床症状变化。结果治疗效果分为有效和无效。19例中有效13例（68.4%）;无效6例（31.6%）,其中3例（15.8%）因临床症状加重改用手术治疗,1例（5.3%）因血肿量及症状变化不大改为手术治疗,1例（5.3%）因药物不良反应停药治疗,1例（5.3%）失访。结论单独应用氨甲环酸保守治疗慢性硬膜下血肿是安全有效。

贵阳地区2013年手足口病非EV71、非CVA16型肠道病毒的检测分析2343-2345

摘要：目的了解贵阳地区引起手足口病（HFMD）的非肠道病毒71型（EV71）、非柯萨奇病毒A（CVA）16型肠道病毒的病原构成及优势型别,为贵阳地区HFMD防治工作提供依据。方法收集2013年4~6月检测为非EV71、非CVA16型肠道病毒的HFMD患者肛拭子标本共107例。提取病毒核酸,用巢式RT-PCR法扩增病毒VP4区序列,对PCR阳性扩增产物进行测序,通过与GenBank收录的序列BLAST比对确定病毒型别;并对优势型别进行序列和进化分析。结果 107例标本中共有100例标本巢式RT-PCR检测为阳性（93%）,其中100例PCR产物测序成功,经BLAST比对后,100例标本病毒型别均得到确定：CVA6为46例,CVA10为30例,CVA5为10例,CVA2为6例,CVA3和CVA4各2例,CVB2和ECHO16各2例。CVA6在型别确定的非EV71、非CVA16型肠道病毒中占42.99%,为优势肠道病毒型别。结论贵阳地区引起HFMD的肠道病毒型别多样,CVA6为非EV71、非CVA16型肠道病毒中的优势型别。

7例体外膜肺氧合救治心脏术后心室电风暴的临床分析2346-2347

摘要：目的总结体外膜肺氧合（ECMO）救治心脏术后心室电风暴（VES）患者的治疗经验。方法回顾性分析2013年1月至2014年4月河南省胸科医院7例心脏术后发生VES并采用ECMO辅助治疗患者的临床资料,调查患者术前基本情况,临床诊断,发生VES的原因及ECMO的辅助过程,预后等。结果 7例患者经治疗后,均顺利脱机,1例患者脱机后严重感染,1周后多脏器功能衰竭,自动出院;1例脱机后2d脑出血,自动出院;其余5例治愈出院,无并发症。5例患者经治疗后,均治愈出院,无并发症。结论 ECMO为心脏术后VES患者提供了有效的循环支持,维持有效的冠脉供血,防止心肌进一步受损,维持电解质等内环境稳定,为心律恢复、针对病因及诱因治疗争取了时间。

进展期胃癌术后辅助放化疗与单纯化疗的比较2348-2351

摘要：目的对比分析进展期胃癌术后辅助放化疗及单纯化疗的疗效及不良反应。方法 64例局部晚期胃癌术后患者,分为观察组和对照组各32例。观察组：接受卡培他滨1 000mg/m^2（每天2次）,第1~14天联合奥沙利铂130mg/m^2,联合方案化疗4周期后,给予卡培他滨825mg/m^2（每天2次）,第1~35天联合三维适形（3DCRT）同步放化疗（总剂量45Gy,共25次,5周完成）;对照组：给予卡培他滨联合奥沙利铂化疗方案6周期。同期观察疾病进展时间,1年和2年生存率和毒性反应。结果 64例患者随访率100%,观察组和对照组各项比较：1＋2级恶心、呕吐发生率分别为87.50%、62.50%（P〈0.05）,其余不良反应组间对比,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;1年总生存率和无复发生存率分别为90.63%、87.50%（P〉0.05）和84.38%、62.50%（P〈0.05）;2年总生存率和无复发生存率分别为84.38%、59.38%（P〈0.05）和75.00%、50.00%（P〈0.05）。结论进展期胃癌术后化疗4周期后采用3DCRT联合卡培他滨同步放化疗,局部控制率和生存率有所提高,不良反应耐受性良好。

腋窝淋巴结阴性的T_2中危组乳腺癌患者术后放疗的价值探讨2352-2354

摘要：目的探讨放疗对PT2N0M0中危组乳腺癌患者预后的影响。方法按危险因素的个数将PT2N0M0中危组患者101例分为A组（含1个危险因素,n=45）和B组（含有2个或2个以上危险因素,n=56）,B组又随机分为未行放疗的B0_组（n=32）和行放疗的B_1组（n=24）,比较A、B两组及B亚组间5年的生存指标,并进一步分析影响预后的危险因素。结果 5年随访率92.3%,A、B两组及B亚组间5年局部复发率（LR）、远处转移率（DM）、无病生存期（DFS）、总生存率（OS）差异均无统计学意义。单因素分析显示年龄、脉管侵犯、免疫组织化学与生存指标相关,多因素分析显示年龄为5年无瘤生存率的独立危险因素。结论 PT_2N_0中危组乳腺癌患者需要个体化放疗,尤其是综合考虑年龄与免疫组织化学等危险因素。

老年冠心病与脂联素及N端脑钠肽前体水平的相关性研究2355-2356

摘要：目的探讨老年冠心病（CHD）患者血浆脂联素（APN）与N端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平的相关性。方法选择老年CHD患者50例,分为急性心肌梗死（AMI）组（16例）、不稳定型心绞痛（UAP）组（18例）、稳定型心绞痛（SAP）组（16例）、对照组（50例）,测定APN和NT-proBNP水平,进行对比分析。结果老年CHD组患者APN水平明显降低,且SAP、UAP组、AMI组3组APN依次降低,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）;老年CHD组患者NT-proBNP水平明显升高,且SAP、UAP组、AMI组3组NT-proBNP依次升高,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。老年CHD组患者APN水平与NT-proBNP呈负相关（r=-0.236,P〈0.05）。结论 APN和NT-proBNP水平检测对老年CHD的预防、疗效判断和预后判断均有重要价值。

NGAL及MMP9在原发性肝癌患者血清中表达及意义2357-2359

摘要：目的探讨原发性肝癌（PHC）患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）及基质金属蛋白酶9（MMP9）的变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测47例PHC患者（PHC组）及19例健康体检者健康血清中NGAL及MMP9水平,并分析二者与临床病理的联系,同时使用ROC曲线分析二者对PHC的诊断价值,Kaplan-Meier生存曲线分析不同NGAL、MMP9水平的生存差异。结果 PHC组NGAL、MMP9水平明显高于健康体检者对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;NGAL及MMP9的水平在Ⅲ~Ⅳ期组高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清MMP9、NGAL检测灵敏度分别为70.2%和83.0%。二者联合检测可提高灵敏度至94.9%。Kaplan-Meier生存分析发现血清NGAL水平高患者预后差。结论 PHC患者血清NGAL及MMP9与PHC的发生、发展密切相关;联合检测血清水平NGAL及MMP9可明显提高敏感度,对PHC诊断及预后指标有一定的价值。

柳氮磺胺吡啶对神经胶质瘤致癫痫的疗效研究2360-2361

摘要：目的探究柳氮磺胺吡啶（SAS）治疗神经胶质瘤导致的癫痫的疗效。方法选择2006年3月至2013年12月就诊南方医科大学珠江医院神经外科的胶质瘤导致癫痫的患者,予以SAS控制癫痫的发作,分别计算50%、75%有效率及发作完全控制率来评估SAS治疗的疗效,同时根据癫痫发作结局的评分标准对患者进行评分,来分析SAS对不同类型的癫痫的疗效。结果患者给予SAS治疗后1、2、3个月时每个月发作频率平均减少率分别为54.32%、61.71%、75.74%。每个月发作频率平均减少率在治疗后较治疗前差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗后50%有效率、75%有效率、完全控制率不同时间点与治疗前比较,差异有统计学意义（F=20.007,P〈0.01）。治疗3个月后不同类型癫痫患者中单纯部分性发作（SPS）和复杂部分性发作（CPS）类型癫痫的完全控制和发作改善率均为100.00%,而部分性发作继发全面性强直阵挛发作（SGTCS）和特发性或隐源性全面性发作（GS）分别为84.62%和75.00%,它们完全控制和发作改善率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SAS能够有效控制胶质瘤导致的癫痫发作,且对各种类型的癫痫均有效。