192例0～3个月先天性肠无神经节细胞症婴儿临床分析
摘要：目的探讨钙视网膜蛋白在3个月内婴儿先天性肠无神经节细胞症（HD）的临床诊断价值;对采用经肛门直肠结肠斜形切除吻合术治疗3个月内婴儿HD进行随访及疗效评价。方法 2008年1月至2014年10月该院确诊并行了经肛门直肠结肠切除斜形吻合术或肠造瘘术治疗3个月内婴儿HD 192例,收集其病案资料,并行根治术中期随访,评价其肛直肠功能及生活质量。结果 192例HD患儿中,139例行经肛门直肠结肠切除斜形吻合术,53例行肠造瘘术。术前诊断依据典型病史、体格检查及辅助检查,包括钡剂灌肠、直肠肛管测压和直肠吸引活检钙视网膜蛋白免疫组织化学染色,阳性率分别为80.1%、92.1%、97.9%。66例（60.5%）获中期随访,小肠结肠炎2例（3.0%）,污粪2例（3.0%）,无便秘复发、大小便失禁、肛门狭窄,男性患儿均有阴茎勃起现象,生长发育与正常婴幼儿相当。门诊随访25例,生化检查均在正常范围,15例钡剂灌肠检查显示肠道形态恢复良好;直肠肛管测压11例,10例（90.9%）肛门松弛反射恢复正常,1例未见松弛反射。结论钙视网膜蛋白免疫组织化学染色检查可作为3月内婴儿HD术前诊断的金标准;经肛门直肠结肠斜形切除吻合术设计符合生理,并发症少,中期疗效满意,适合0~3个月小婴儿根治术。骨形态发生蛋白在胶原诱导关节炎小鼠模型中的表达
摘要：目的建立DBA/1J小鼠胶原诱导关节炎（CIA小鼠）模型,初步研究CIA小鼠外周血单个核细胞中及病变关节组织中BMPs的表达水平。方法利用牛Ⅱ型胶原诱导DBA/1J小鼠发生关节炎病理改变;利用荧光定量PCR检测发病外周血单个核细胞中及关节组织BMPs的mRNA的表达水平,利用免疫荧光技术检测关节组织中BMP9蛋白表达水平。结果成功建立了CIA小鼠模型,检测发现BMP4mRNA和BMP9mRNA在发病的CIA小鼠外周血单个核细胞及病变关节组织中表达明显下调（P〈0.05）,荧光免疫技术显示BMP9蛋白在CIA小鼠病变关节组织中表达明显下调（P=0.002）。结论在基因水平BMP4、9在CIA小鼠外周血单个核细胞中及病变组织中表达明显下调,蛋白水平BMP9在CIA小鼠病变组织中表达明显下调。大鼠伏核微量注射天麻素对神经病理性痛镇痛作用的研究
摘要：目的构建神经病理性痛动物模型,研究伏核注射天麻素对神经病理性痛的镇痛作用。方法实验采用左侧坐骨神经干部分结扎致神经损伤制作神经痛动物模型,观察伏核注射天麻素对伤害性热刺激和压力刺激诱发的大鼠后爪缩爪潜伏期的影响。结果左侧坐骨神经干部分结扎,引起双侧后爪缩爪潜伏期缩短,尤以10d后左侧明显（热板测试：t_左=7.35,P〈0.01;t_右=3.24,P〈0.05。Randall Selitto测试：t_左=5.05,P〈0.01;t_右=3.32,P〈0.05）。神经病理性痛大鼠伏核注射40μg/μL和20μg/μL天麻素引起双侧后爪缩爪潜伏期延长,但注射10μg/μL的天麻素没有显著性影响。结论天麻素在大鼠伏核对神经病理性痛具有镇痛作用。损伤性肾匀浆体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞转分化效果及可能机制的研究
摘要：目的利用损伤性肾匀浆体外模拟急性肾损伤的微环境,探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）诱导转分化及其可能机制。方法将体外培养的BMSC用10%大鼠缺血再灌注损伤肾匀浆上清液进行培养。7d后从形态学改变、18型角蛋白（CK-18）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的相应表达水平。结果损伤肾匀浆诱导7d后,骨髓间充质干细胞形态发生明显变化,并检测到CK-18阳性表达;同时被诱导的HGF和BMP-7表达水平明显升高。结论损伤肾匀浆可诱导BMSC部分向肾小管上皮样细胞转分化,其可能机制是BMSC可能以旁分泌的形式产生了HGF和BMP-7等＂肾脏保护因子＂。基于PI3K/Akt信号转导通路探讨电针足三里、曲池对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响
摘要：目的观察电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,应用磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）信号转导通路抑制剂LY294002,深入探讨电针的神经保护作用与PI3K/Akt信号转导通路的关系。方法本研究采用Zealonga线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）缺血再灌注模型。将60只SD大鼠随机分为5组：假手术（SC）组、模型（IC）组、电针（EA）组、电针＋溶剂（DMSO）组,电针＋抑制剂（LY294002）组,每组各12只。术后24h开始电针治疗30 min,1次/天,治疗3d。采用Zealonga 5分评价方法观察神经功能缺损恢复程度;氯化三苯四唑（TTC）法脑组织染色计算脑梗死体积;TUNEL法观察皮质区缺血周围神经细胞凋亡的情况;应用Western blot检测脑组织中PI3K、Akt、p-Akt、bad、p-bad蛋白表达水平。结果神经功能评分、TTC染色显示EA组与DMSO组的神经功能恢复及脑缺血改善明显优于IC组和LY294002组（P〈0.05）;EA组与DMSO组凋亡阳性细胞数少于IC组和LY294002组,差异有统计学意义（P〈0.01）;与IC组及LY294002组比较,EA组与DMSO组提高了PI3K、p-Akt及p-bad的蛋白表达（P〈0.05）。结论 PI3K/Akt信号转导通路参与了电针足三里穴、曲池穴对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。非小细胞肺癌组织中VEGF和Bax的表达及意义
摘要：目的观察非小细胞肺癌（NSCLC）中血管内皮生长因子（VEGF）和Bax的表达,并探讨其临床应用价值。方法收集该院NSCLC患者肺组织石蜡标本80例（NSCLC组）及良性病变病灶旁正常肺组织石蜡标本20例（对照组）,采用Western blot和免疫组织化学染色（SP）法测定NSCLC组织中VEGF和Bax的表达,并探讨二者与NSCLC病理类型、TNM分期及淋巴结转移的相关性。结果 NSCLC组中VEGF阳性表达显著高于对照组,Ⅲ~Ⅳ期VEGF阴性表达高于Ⅰ~Ⅱ期,有淋巴结转移组织中的VEGF阳性表达高于无淋巴结转移组织,差异均有统计学意义（P〈0.05）;VEGF的表达与腺癌、鳞癌无相关性（P〉0.05）。NSCLC组中Bax表达低于对照组,Ⅲ~Ⅳ期Bax阳性表达低于Ⅰ~Ⅱ期,有淋巴结转移组织中Bax阳性表达低于无淋巴结转移组织,差异均有统计学意义（P〈0.05）;Bax的表达与腺癌、鳞癌无相关性（P〉0.05）。NSCLC中VEGF和Bax的表达呈负相关。结论 VEGF的表达在NSCLC中起着促进作用,并与Bax表达呈负相关,二者的表达可为NSCLC的诊断及预后提供判断依据。钙化性纳米微粒致大鼠肾结石模型的构建
摘要：目的建立钙化性纳米微粒（CNPs）致大鼠肾结石模型。方法利用临床手术所得肾结石标本分离和培养出CNPs。SD雄性大鼠40只分为CNPs诱石组（A组,鼠尾静脉注射CNPs）、CNPs＋肾石通组（B组,鼠尾静脉注射CNPs＋肾石通溶液灌胃＋生理盐水腹腔注射）、CNPs＋硝酸镓组（C组,鼠尾静脉注射CNPs＋硝酸镓腹腔注射＋生理盐水灌胃）、空白对照组（D组,鼠尾静脉注射生理盐水＋生理盐水灌胃和腹腔注射）,每组10只。8周后处死大鼠,镜下观察肾脏组织的病理改变及晶体分布并计数。结果 A、B、C组大鼠肾脏肾小管内产生钙盐结晶,Von kossa染色阳性,主要分布在远曲小管和近曲小管,D组大鼠肾组织内未见钙盐结晶,4组间成石率差异有统计学意义（P〈0.05）。镜下观察A、B、C组肾组织明显可见肾小管上皮细胞变性,肾间质可见炎性细胞浸润灶（主要为淋巴细胞）,D组肾组织未见病理性改变。各组大鼠尿Ca~（2＋）、尿肌酐水平实验结束前1d（T_2）高于注射CNPs后4周（T_1）（P〈0.01）;与D组T_2尿Ca~（2＋）和血肌酐水平相比,A、B、C组均增高（P〈0.05）,与A组T_2尿Ca~（2＋）相比,B、C组有降低趋势（P〈0.05）;各组之间T_2血Ca~（2＋）水平、T_2尿肌酐水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CNPs能损伤肾小管上皮细胞,促使肾小管内钙盐晶体的形成。伊马替尼对尿毒症心肌病大鼠心肌纤维化的保护作用
摘要：目的观察伊马替尼通过调控PDGFRα的表达改善尿毒症大鼠心肌纤维化的作用。方法将72只大鼠分为Sham组,5/6组和5/6＋I组,5/6组建立大鼠尿毒症模型,5/6＋I组建模后行伊马替尼灌胃,Sham组仅行肾脏游离。所有大鼠于术后8周行心脏病理染色;实时定量荧光PCR、免疫组织化学测定心脏血小板衍生生长因子受体α（PDGFRα）mRNA及蛋白表达。结果 5/6组和5/6＋I组大鼠尿蛋白、Scr、BUN均较Sham组明显增加（P〈0.01）.Sham组心肌病理评分显著低于5/6组（P〈0.01）,而5/6＋I组显著低于5/6组（P〈0.01）;5/6组心肌间质胶原容积分数值明显高于Sham组（P〈0.01）;5/6＋I组高于Sham组（P〈0.05）,但与5/6组比较,明显下降（P〈0.05）;5/6组和5/6＋I组的PDGFRαmRNA和蛋白表达均显著高于Sham组（均P〈0.01）;而5/6＋I组明显低于5/6组（P〈0.05）。结论伊马替尼可以通过抑制PDGFRα表达减少尿毒症大鼠心脏病理损伤及纤维化的程度。美托洛尔对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制研究
摘要：目的探讨美托洛尔对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法取健康3~4个月雄性C57BL/6小鼠32只,分为4组（n=8）,即对照组、美托洛尔组、缺血再灌注组（I/R组）和美托洛尔＋缺血再灌注组（美托洛尔＋I/R组）。检测各组小鼠心肌损伤情况、心肌细胞凋亡率、细胞色素c（Cyt C）的释放、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）活性及钙蛋白酶（calpain）活性。结果与I/R组相比,美托洛尔预处理后,显著减少了心肌梗死区与缺血危险区域的比率（P〈0.05）,而心肌缺血危险区域与左心室的比率并无明显变化;与对照组相比,I/R组心肌细胞凋亡率、心肌组织Cyt C的释放、Caspase-3活性及calpain活性均明显增高（P〈0.01）,美托洛尔预处理能抑制I/R损伤引起的上述变化。结论美托洛尔可能通过抑制心肌细胞内calpain的活化,从而抑制心肌细胞凋亡,最终减轻心肌的I/R损伤。谷胱甘肽对微囊藻毒素-LR所致小鼠肾脏氧化损伤的保护作用研究
摘要：目的研究谷胱甘肽（GSH）对微囊藻毒素-LR（MC-LR）致小鼠肾脏氧化损伤的保护作用。方法用随机数字表法将40只健康清洁级昆明小鼠分为5组,分别为生理盐水组、GSH对照组、MC-LR染毒组、GSH低剂量＋MC-LR染毒组、GSH高剂量＋MC-LR染毒组,每组8只（雌雄各半）,经腹腔注射染毒,每日1次,持续15d,取出肾脏用于病理观察及检测过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量。结果与生理盐水组比较,MC-LR染毒能引起MDA含量[（2.31±0.22）nmol/mg prot]明显升高（P=0.000）,以及GSH含量[（0.68±0.02）mg/g prot]、CAT活力[（320.54±38.99）nmol/mg prot]、SOD活力[（180.93±15.30）U/mg prot]、GSH-Px活力[（295.11±42.40）U/mg prot]下降（P〈0.05）;而外源性加入GSH干预后,与MC-LR染毒组比较,GSH高剂量＋MC-LR染毒组MDA含量[（1.94±0.12）nmol/mg prot]明显下降（P〈0.05）,GSH低、高剂量＋MC-LR染毒组GSH含量[（1.01±0.08）mg/g prot、（1.08±0.16）mg/g prot]、CAT活力[（383.46±21.98）nmol/mg prot、（428.50±28.61）nmol/mg prot]均明显升高（P〈0.05）,GSH高剂量＋MC-LR染毒组SOD活力[（222.01±11.51）U/mg prot]、GSH-Px活力[（358.37±20.29）U/mg prot]活力均明显升高（P〈0.05）。结论 MC-LR可能通过促进肾脏细胞发生脂质过氧化反应而引起导致肾脏氧化损伤,而加入GSH则可能通过减少脂质过氧化物质,提高抗氧化物活力,清除氧自由基而达到一定的肾脏保护作用。雌二醇通过BDNF促进端脑神经细胞增殖与分化
摘要：目的探讨雌二醇（E_2）在神经组织中的作用机制,分析E_2对神经细胞增殖及神经元分化的影响,以及其是否由脑源性神经营养因子（BDNF）介导。方法离体条件下培养动物端脑神经组织,设置各实验组,分别以E_2、E_2受体抑制剂、BDNF、BDNF抗体或以上试剂联合处理,之后进行相关免疫组织化学染色分析不同处理条件下神经细胞的增殖、神经元分化情况;在此基础上通过实时荧光定量PCR检测E_2能否调节BDNF基因的表达。结果 E_2和BDNF均能促进新生神经细胞的产生,增加Hu＋神经元数目,E_2受体抑制剂及BDNF抗体则有相反作用;并且E_2的作用效果能被BDNF抗体消减,而E_2受体抑制剂不能影响BDNF正常发挥作用;实时荧光定量PCR实验结果显示,E_2能显著上调BDNF mRNA的表达,而E_2受体抑制剂能抑制BDNF mRNA表达。结论体外培养条件下,E_2对神经组织内细胞增殖、神经元分化的促进作用可由BDNF介导。肉桂醛对烟曲霉菌体外生物膜的影响
摘要：目的探讨肉桂醛对烟曲霉菌生物膜（BF）的体外作用。方法体外建立烟曲霉菌BF;采用2倍稀释法测定肉桂醛的最低抑菌浓度（MIC）;结晶紫法评价不同浓度的肉桂醛对烟曲霉菌BF的影响;扫描电镜观察BF的形态学变化。结果烟曲霉菌可在体外形成生物膜;肉桂醛对受试烟曲霉菌的MIC为256μg/mL;在1 MIC、1/2 MIC、1/4 MIC时,生物膜量分别为0.81±0.11、1.13±0.18和1.59±0.11,与阳性对照组（2.18±0.15）相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;电镜下可见肉桂醛作用后生物膜结构变稀疏松散。结论肉桂醛对烟曲霉菌具有抗菌活性,亚抑菌浓度的肉桂醛对生物膜具有一定的破坏作用,其中浓度越高作用越强。降浊颗粒对慢性肾衰大鼠肠道IgA的改善作用研究
摘要：目的采用5/6肾切除法建立大鼠慢性肾衰动物模型,以中药复方剂＂降浊颗粒＂治疗,观察并评价其对CRF肠道免疫功能的影响。方法 Wistar大鼠造模后分为降浊颗粒高、中、低剂量组,贝那普利组,假手术组,模型对照组,分别给予降浊颗粒4.05、8.10、16.20g·kg~（-1）·d~（-1）及贝那普利1.2mg·kg~（-1）·d~（-1）灌胃,假手术组及模型对照组予生理盐水2mL·kg~（-1）·d~（-1）灌胃,疗程60d。观察治疗前后肌酐、尿素氮变化,同时测定血清及肠道SIgA水平,以及mRNA及蛋白表达。结果贝那普利组、降浊颗粒各剂量组血清BUN、Scr水平明显低于模型对照组（P〈0.05）;ELISA、蛋白表达与RT-PCR结果比较,贝那普利组、降浊颗粒各剂量组与模型对照组比较,肠道IgA蛋白和mRNA表达显著升高（P〈0.05）,降浊颗粒高、中剂量组与贝那普利组比较,明显升高（P〈0.05）。结论降浊颗粒有独立于具有改善肾功能的作用,此外对CRF肠道免疫功能也有一定的改善作用。正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响及机制研究
摘要：目的探讨不同浓度正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响与其作用机制。方法噻唑蓝（MTT）法探索正丁酸钠作用ACC-2细胞的最佳浓度,Transwell小室实验检测正丁酸钠对ACC-2细胞侵袭、迁移能力的影响,Western blot和实时荧光定量PCR（RT-PCR）分别检测5组浓度药物作用后ACC-2细胞中高迁移率族蛋白1（HMGB1）、TLR4的mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mmol/L 5组浓度的正丁酸钠均能抑制ACC-2细胞增殖（P〈0.05）且呈明显浓度依赖性;5组浓度正丁酸钠对细胞侵袭能力的影响差异无统计学意义（P〉0.05）;2.500、5.000、10.000mmol/L浓度正丁酸钠可以抑制ACC-2细胞的迁移能力（P〈0.05）,同时降低ACC-2细胞HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达（P〈0.05）;相关性分析显示TLR4蛋白表达的降低与HMGB1的抑制呈正相关（r=0.810,P〈0.05）。结论正丁酸钠能够抑制ACC-2细胞增殖,浓度较高时可以抑制ACC-2细胞的迁移能力,同时降低HMGB1、TLR4的mRNA与蛋白表达,提示NaB对ACC-2迁移能力抑制可能通过下调HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达来实现。皮质酮对大鼠股骨头微环境11β-HSD1表达及骨重建影响的初步实验研究
摘要：目的研究内源性糖皮质激素对大鼠股骨头微环境11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD1）表达的影响,并结合股骨头病理变化探讨相应的机制。方法将60只SD大鼠分成对照组、1月组、3月组（每组20只）。后两组分别于腹腔内注射醋酸皮质酮（8mg/kg）,2次/周,各干预1个月及3个月。此后取股骨头标本免疫组织化学,实时定量PCR方法进行11β-HSD1含量测定,苏木素-伊红（HE）染色观察股骨头组织学表现。结果免疫组织化学,实时定量PCR方法检测出1月组及3月组11β-HSD1含量均高于对照组（P〈0.05）;HE染色结果表明,与对照组相比,1月组出现骨髓腔脂肪细胞比例升高（P〈0.05）,3月组出现软骨下骨小梁密度降低（P〈0.05）。结论增加皮质酮可促进大鼠股骨头微环境11β-HSD1表达和出现软骨下骨小梁密度降低。去势大鼠髁突软骨雌激素受体及Ⅱ型胶原表达的研究
摘要：目的观察去势大鼠髁突软骨组织学变化,并检测雌激素受体（ER）和Ⅱ型胶原（ColⅡ）的表达,分析去势后髁突软骨生长代谢的变化,探讨雌激素缺乏与颞下颌关节骨关节病（OA）的关系。方法 HE染色观察大鼠去势后不同时期髁突软骨组织学变化,免疫组织化学法检测去势大鼠髁突软骨ER及ColⅡ表达,并运用图像分析仪测量并计算其平均阳性染色面积百分比。结果雌激素缺乏导致髁突软骨退行性改变。去势后大鼠ER和ColⅡ的表达受到抑制,且随作用时间的延长,其作用增强。结论雌激素缺乏或低下导致大鼠髁突软骨病损。低浓度雌激素降低或抑制ER表达,髁突软骨胶原表达与雌激素相关。龙葵碱联合VEGF抗体对人结肠癌鸡胚移植模型血管生成的影响
摘要：目的建立人结肠癌鸡胚移植模型,探讨龙葵碱、VEGF抗体及两者联合对人结肠癌细胞诱导肿瘤血管生成及肿瘤增殖的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞鸡胚移植模型分为实验组和对照组,实验组加入龙葵碱、VEGF抗体和龙葵碱＋VEGF抗体混合液,对照组加入磷酸盐缓冲液（PBS）液。通过立体显微镜照相、IPP 6.0图像分析软件分析图片;免疫组织化学方法检测CD34抗原和ki-67抗原,观察龙葵碱、VEGF抗体和龙葵碱联合VEGF抗体对肿瘤血管生成及肿瘤增殖的影响。结果肿瘤血管面积、CD34抗原和ki-67抗原表达：龙葵碱＋VEGF抗体组明显优于单药VEGF抗体组和龙葵碱组,VEGF抗体组优于龙葵碱组,3组均明显优于对照组（P〈0.01）。结论龙葵碱、VEGF抗体及两者联合时均能抑制人结肠癌HT-29细胞系诱导的肿瘤血管生成及肿瘤增殖,为抗肿瘤血管生成提供了一种新途径。冰片灌胃或滴鼻给药对氯胺酮-咪达唑仑麻醉大鼠苏醒和认知功能的对比研究
摘要：目的考察并比较冰片灌胃或滴鼻给药对氯胺酮-咪达唑仑麻醉大鼠苏醒和认知功能的影响。方法将受训大鼠按逃避潜伏期分为6个组：对照组,模型组,冰片灌胃低剂量组（1.0mL/100g）,冰片灌胃高剂量组（2.0mL/100g）,冰片滴鼻低剂量组（0.1mL/100g）,冰片滴鼻高剂量组（0.2mL/100g）,每组16只。实验前20min给药。除对照组,其余大鼠均给予全身麻醉。记录大鼠的翻正反射恢复时间、血气、逃避潜伏期和空间探索能力并进行组间比较。结果与对照组比较,模型组PaCO2和P（A-a）DO2升高,pH和PaO2降低,潜伏逃避时间延长,平台穿越次数减少（P〈0.05）;与模型组比较,冰片灌胃或滴鼻组全身麻醉后翻正反射恢复时间均有减少、血气有改善,潜伏逃避时间缩短（P〈0.05）,平台穿越次数增多（P〈0.05）;冰片灌胃高、低剂量组内的翻正反射恢复时间、血气和平台区穿越次数差异无统计学意义（P〉0.05）,与冰片灌胃低剂量比较,冰片灌胃高剂量的逃避潜伏期较短（P〈0.05）;与冰片灌胃组比较,冰片滴鼻组全身麻醉后翻正反射恢复时间明显减少、血气明显改善,潜伏逃避时间明显缩短,平台区穿越次数增多（P〈0.05）;与冰片滴鼻低剂量比较,冰片滴鼻高剂量的全身麻醉后翻正反射恢复时间明显减少、血气明显改善,逃避潜伏期较短（P〈0.05）。结论冰片可通过滴鼻途径改善血气达到缩短麻醉大鼠翻正反射恢复时间并改善认知功能。
