骨髓内皮祖细胞移植对假孕大鼠黄体促血管生长因子表达的影响
摘要：目的观察骨髓内皮祖细胞（EPC）移植对假孕大鼠黄体促血管生长因子（VEGF）表达的影响,探讨骨髓EPC促进假孕大鼠黄体血管新生的作用机制。方法雌性大鼠经137 Cs全身照射后,尾静脉移植雄性大鼠骨髓EPC行造血重建,然后制备假孕模型为移植假孕组;分别于假孕第3、7、11、15天应用real time PCR法检测黄体VEGF、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA的表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测黄体VEGF、bFGF蛋白表达;CD31免疫组织化学法检测黄体微血管密度。结果假孕对照组（输注等量培养液）及移植假孕组VEGF、bFGF表达在第7天达到最高;黄体微血管密度在第7、11天均高于第3天组水平（P〈0.01）;移植假孕组VEGF、bFGF表达在第7、11天均高于同期假孕对照组（P〈0.05）,且黄体微血管密度在第7、11天较同期假孕对照组高（P〈0.05）。结论骨髓EPC移植后黄体VEGF、bFGF mRNA及其蛋白表达水平升高,促进假孕大鼠黄体血管新生。肾损伤分子-1在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的保护作用
摘要：目的观察肾损伤分子-1（KIM-1）对肾小管上皮细胞缺氧损伤时增殖及凋亡的影响,证实KIM-1对肾缺氧损伤的保护作用。方法以人近端肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,用pcDNA-hKIM-1质粒转染HK-2细胞,获得稳定表达KIM-1的pcDNA-hKIM-1-HK2细胞株。观察pcDNA-hKIM-1-HK2细胞（A组）和KIM-1抗体预处理pcDNA-hKIM-1-HK2细胞（C组）在缺氧损伤后细胞活力、凋亡指标及凋亡相关信号分子表达,以未转染缺氧HK-2细胞（B组）作为对照。结果 A组细胞活力指数高于B组（0.427±0.046 vs.0.210±0.036,P〈0.05）,细胞凋亡数量及流式细胞仪检测的缺氧早、晚期凋亡指数明显低于B组（P〈0.05）。A组细胞缺氧时磷酸化ERK、磷酸化Akt表达较C组明显升高（P〈0.05）。结论 KIM-1对肾小管上皮细胞缺氧损伤具有保护作用,其机制与激活PI3K-Akt/PKB和ERK信号通路抑制凋亡有关。果蝇Tap蛋白结构与功能的生物信息学分析
摘要：目的利用生物信息学方法分析果蝇Tap蛋白的结构和功能。方法基于NCBI数据库中果蝇Tap蛋白的氨基酸序列,从蛋白质理化性质、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、结构域、三维结构及物种间同源蛋白进化关系等方面进行分析。结果Tap蛋白为不稳定亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽,在细胞核中发挥生物学效应,具有碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）结构域。Tap蛋白与来源于NeuroD1的模板2ql2.1.B有61.02%的氨基酸序列一致,Tap蛋白与人类和啮齿动物的编码产物高度同源,在系统发生树中距离最近。结论果蝇Tap蛋白具有bHLH蛋白家族的典型结构,可能在果蝇胚胎发育早期的神经发生、分化等过程中发挥作用。硫酸右旋糖酐抑制人胃癌腹腔种植转移及其对缺氧诱导因子-1α表达的影响
摘要：目的探讨硫酸右旋糖酐（DS）是否可抑制胃癌腹腔种植转移及其对缺氧诱导因子-1α（Hif-1α）表达的影响。方法裸鼠72只分为两大组,对照组32只,实验组40只,培养BGC-823胃癌细胞,腹腔注射建立裸鼠腹腔种植转移动物模型。注射胃癌细胞1d后,对照组注射生理盐水1mL,实验组注射0.3%DS 1mL。于1、3、7、14d时剖腹观察胃癌细胞腹腔种植转移情况,采用逆转录PCR（RT-PCR）及免疫组织化学检测缺氧诱导因子（Hif-1α）mRNA及蛋白的表达。结果第7、14天实验组瘤结节数明显少于对照组。经RT-PCR及免疫组织化学检测,第3、7、14天实验组Hif-1αmRNA及蛋白的表达明显低于对照组（P〈0.05）。结论 DS可以抑制胃癌的腹腔种植转移,DS可能是通过下调Hif-1α的表达来抑制胃癌的腹腔种植转移。骨形成蛋白9腺病毒表达载体的构建及鉴定
摘要：目的构建骨形态发生蛋白9（BMP9）基因腺病毒表达载体及稳定产毒细胞系,为观察其对T2DM糖、脂代谢异常的干预效应奠定基础。方法质粒pCMV/BMP9双酶切克隆至腺病毒载体Ad5.F,构建重组腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F,酶切测序鉴定;转包装细胞,经抗性筛选检测病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆进行逆转录PCR（RT-PCR）鉴定。结果建立BMP9基因腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;建立稳定产毒细胞克隆最高病毒滴度达7.4×10^5 CFU/mL,RT-PCR证实BMP9基因整合其中并稳定表达。结论成功构建含BMP9基因的腺病毒表达载体及其稳定产毒细胞系。脱氢洛伐他汀对佐剂性关节炎的作用研究
摘要：目的研究脱氢洛伐他汀（DLVT）对小鼠佐剂性关节炎的作用。方法建立小鼠后右足佐剂性关节炎（AA）模型。足容积法测定原发侧及继发侧足肿胀度,并进行多发性关节炎评分（关节炎指数）;观察各组小鼠站立和爬梯活动;苏木素-伊红（HE）染色检测非致炎侧踝关节的病理改变;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测血清中炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1、NO的表达。结果 8.4、16.8mg·kg^-1·d^-1 DLVT灌胃给药可明显抑制AA小鼠原发性和继发性关节炎,降低多发性关节炎指数,增强AA小鼠站立和爬梯能力;抑制脂多糖（LPS）诱导的AA小鼠脾淋巴细胞的增殖反应;抑制AA小鼠关节纤维增生和滑膜增生,减少炎症细胞的浸润。降低血清中IL-6、IL-1、NO及TNF-α水平。结论 8.4、16.8mg·kg^-1·d^-1 DLVT灌胃给药可明显抑制促炎症细胞因子病理性升高,从而控制了实验性佐剂性关节炎的病情发展。高糖状态下甲状旁腺素受体1对乳腺癌的作用机制研究
摘要：目的阐明高糖状态下甲状旁腺受体1（PTH1R）对乳腺癌细胞株SHZ-88的作用机制。方法应用实时（real time）PCR分别检测0（对照组）、5、15、25mmol/L葡萄糖浓度下PTH1R mRNA水平;构建出PTH1R基因沉默（siPTH1R）的细胞模型后,分别应用MTT法、TUNEL-FITC/Hoechst33258及Western blot法检测对照组、25mmol/L葡萄糖处理组（高糖组）、25mmol/L葡萄糖处理的阴性PTH1R基因序列组（高糖siPTH1R-NC组）及高糖阳性PTH1R基因序列组（高糖siPTH1R组）细胞活力、细胞凋亡情况及Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果随着葡萄糖浓度升高,PTH1R mRNA水平增高,其中25mmol/L葡萄糖处理后PTH1RmRNA水平最高（均P〈0.01）;高糖siPTH1R组细胞活力（P〈0.05,P〈0.01及P〈0.01）及Bcl-2表达（均P〈0.01）低于对照组、高糖组及高糖siPTH1R-NC组;高糖siPTH1R组中细胞凋亡水平及Bax表达高于对照组、高糖组及高糖siPTH1R-NC组（均P〈0.01）;与对照组比较,高糖组细胞活力（P〈0.01）及Bcl-2表达（P〈0.01）增高,而Bax表达（P〈0.01）降低。结论高糖状态下PTH1R表达水平与SHZ-88细胞增殖能力有关,抑制PTH1R表达可能为糖尿病合并乳腺癌治疗有效靶点之一。利多卡因对AMI动物模型星状神经节内心交感神经元电活动的影响
摘要：目的该实验通过电生理技术记录急性心肌梗死（AMI）动物模型星状神经节内心交感神经元放电活动,并用不同剂量利多卡因干预以观察利多卡因对心交感神经元电活动的影响。方法成功复制AMI家兔动物模型后,在动物星状神经节内寻找到与心脏活动相关的放电神经元确定为心交感神经元,分成6组,耳缘静脉给予不同剂量利多卡因干预,观察比较心交感神经元放电的改变,同时同步记录Ⅱ导联心电图,明确二者之间关系。结果 87只新西兰大白兔的星状神经节内共记录到48个心交感神经元放电,实验发现AMI动物心交感神经即刻放电频率明显增加[（14.4±3.82）Hz增加到（24.3±5.52）Hz],P〈0.05,经利多卡因干预后,随着给药剂量的加大,放电频率降低（P〈0.05）;Ⅱ导联心电图显示AMI动物心率加快[由（222.00±7.32）次/min上升到（289.00±10.51）次/min,P〈0.05]。经利多卡因干预后心率减慢[（223.00±9.22）次/min降至192.00±12.18次/min,（P〈0.05）];AMI动物ST段上抬且大于或等于2.5mm,经利多卡因干预后ST段上抬程度减小[（2.70±0.16）mm降至（1.10±0.44）mm,P〈0.05]。结论利多卡因能明显抑制AMI动物星状神经节内心交感神经元放电,并能抑制因心肌缺血反射性的交感神经兴奋,心动过速,从而降低心肌耗氧量,减轻心肌缺血症状。内质网应激与氧化应激在百草枯致大鼠肺纤维化中的作用
摘要：目的探讨百草枯（PQ）中毒大鼠肺纤维化与内质网应激（ERS）的关系。方法 40只sprague-dawley（SD）大鼠按随机数字表法分为对照组（8只）和染毒组（32只）,20%PQ溶液灌胃后分别于1、7、14、21d处死大鼠取肺组织,每个时间点处死8只。苏木素-伊红（HE）染色和Masson染色观察肺组织病理变化;比色法检测肺组织丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）变化;免疫组织化学法检测肺组织中糖调节蛋白78（GRP78）表达情况。结果 HE和Masson染色结果证实成功复制肺纤维化模型;模型组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度较对照组严重。染毒后1d肺组织MDA及GRP78蛋白表达均较对照组明显升高[MDA：（1.51±0.12）nmol/mg vs.（0.81±0.04）nmol/mg;GRP78：（14.25±6.36）vs.（3.18±1.02）;P〈0.05,P〈0.01],GRP78蛋白表达于染毒后7d逐渐下降。而染毒组肺组织SOD活性在各时间点均较对照组降低（P〈0.05）。结论 PQ中毒大鼠肺ERS标志性蛋白GRP78明显升高,表明ERS在PQ中毒后肺纤维中发挥一定的作用。犬窦房结功能与年龄相关性研究
摘要：目的测定犬窦房结功能及其组织学的增龄性变化,初步探讨老年病态窦房结综合征形成的潜在机制。方法分别检测幼年组（1-3个月龄）、成年组（2-5岁）和老年组（8-10岁）的杂交犬（1-25kg,n=4）的窦房结功能,利用HE及Masson染色鉴定窦房结组织学变化。结果犬窦房结功能随年龄递增而递减,固有心率（IHR）幼年组（167±11）次/min,成年组（119±9）次/min,老年组（85±7）次/min组间差异有统计学意义（P〈0.05）;校正窦房结恢复时间（CSNRT）幼年组（59±11）ms,成年组（122±27）ms,老年组（176±40）ms组间差异有统计学意义（P〈0.05）;犬窦房结组织中窦房结细胞数目随着年龄的增加而逐渐减少,窦房结间质随年龄增加而递增。结论犬窦房结功能呈增龄性减退的现象,其可能与窦房结细胞数目减少及间质逐渐增多有关。人SPOP真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达
摘要：目的构建人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒及稳定表达外源性人SPOP基因的人胃癌AGS细胞系。方法采用基因重组技术将人SPOP cDNA插入真核表达载体pUB6/V5-HisB,构建人pUB6/V5-HisB真核表达质粒。脂质体介导空载体pUB6/V5-HisB和表达质粒pUB6/V5-HisB-SPOP分别转染人胃癌AGS细胞株,杀稻瘟菌素筛选阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测SPOP mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒构建成功。SPOP转染组与空白对照组、空载体组比较,SPOP蛋白表达显著上调（P〈0.05）。结论成功构建人SPOP真核表达质粒并获得稳定表达SPOP基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究SPOP基因在胃癌发生发展中作用奠定实验基础。阿托伐他汀联合L-4F对apoE缺失小鼠HDL功能及水平的影响
摘要：目的通过采用高脂饮食喂养apoE缺失（apoE-/-）小鼠建立动脉粥样硬化（AS）模型,比较阿托伐他汀联合载脂蛋白A-I（apoA-I）模拟肽（L-4F）对AS小鼠血清氧磷酯酶（PON1）、髓过氧化物酶（MPO）活性及血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平的影响。方法雄性apoE-/-小鼠50只,高脂饲料喂养作为模型组,另外取适龄C57BL/6J小鼠20只给予普通饲料喂养作为正常对照组,实验4周后,处死2组小鼠各10只,检测相应血清指标,作为基线参考。其余apoE-/-小鼠分为模型对照组（单纯高脂饮食）、阿托伐他汀组（高脂饮食基础上给予阿托伐他汀治疗）、L-4F组（高脂饮食基础上给予L-4F治疗）、阿托伐他汀联合L-4F组（高脂饮食基础上给予阿托伐他汀＋L-4F治疗）,每组10只。实验第8周末处死5组小鼠,并取小鼠血清检测各血清指标。结果实验第8周末,与模型对照组比较,各药物组血清PON1活性显著升高（均P〈0.05）,MPO活性显著下降（均P〈0.05）;与模型对照组比较,阿托伐他汀组、阿托伐他汀联合L-4F组LDL-C水平显著减低（P〈0.05,P〈0.01）,HDL-C水平显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,L-4F组LDL-C、HDL-C水平差异无统计学意义（均P〉0.05）。实验第8周末,阿托伐他汀联合L-4F组较阿托伐他汀组及L-4F组PON1活性、HDL-C水平显著升高（均P〈0.05）;MPO活性、LDL-C水平显著降低（均P〈0.01）。结论阿托伐他汀、L-4F均可通过升高血清PON1活性,降低MPO活性,从而改善HDL抗氧化、抗炎功能,延缓AS进展。L-4F对LDL-C、HDL-C水平无影响。阿托伐他汀联合L-4F不仅降低LDL-C,升高HDL-C,而且更有效的改善HDL抗氧化、抗炎功能,从而延缓AS进展,优于单药使用。倦怠与急性冠状动脉综合征患者GRACE危险评分的相关性研究
摘要：目的研究倦怠对急性冠状动脉综合征（ACS）患者的全球急性冠状动脉事件注册（GRACE）危险评分的影响,为今后对伴有倦怠等负性情感的ACS患者早期开展心理干预提供理论依据。方法以2012年3月至2014年3月因首次发生ACS而首次收住昆明医科大学第一附属医院心内科的患者为研究对象,收集患者入院时的临床资料计算全球急性冠状动脉事件注册（GRACE）危险评分,用哥本哈根倦怠量表中的一般倦怠子量表评估患者的倦怠水平,按照倦怠评分的上四分位数P75将患者分为高倦怠组和低倦怠组进行统计分析。结果高倦怠组GRACE危险评分高于低倦怠组,差异有统计学意义（138.508分vs.110.867分,t=2.746 3,P=0.007 2）;以GRACE评分为应变量构建多重线性回归模型显示：在排除性别、吸烟、饮酒、既往心血管疾病史和家族史等混杂因素的影响后,＂一般倦怠＂与GRACE评分呈线性关系（P〈0.01）,＂一般倦怠＂每增加1分,GRACE危险评分增加1.256分。结论 GRACE危险评分对ACS患者近期和远期的病死率有重要的预测价值,倦怠与GRACE评分呈正相关关系,提示伴有倦怠的ACS患者近期或远期的预后不良。2型糖尿病合并冠心病患者血糖波动与冠状动脉病变的相关性研究
摘要：目的探讨2型糖尿病（T2DM）合并冠心病（CHD）的患者血糖波动对冠状动脉病变的影响。方法选取80例2013年6月至2014年3月在北京军区总医院内分泌科住院的T2DM患者为研究对象,其中合并CHD患者50例（CHD＆DM组）。单纯2型糖尿病患者30例（DM组）。应用动态血糖监测系统（CGMS）对两组患者行连续72h血糖监测并计算日内平均血糖波动幅度（MAGE）、日间血糖平均绝对差（MODD）、平均餐后血糖波动幅度（MPPGE）、最大血糖波动幅度（LAGE）,同时测定血浆高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、血管性假血友病因子（vWF）的水平,比较两组间HMGB1、vWF的水平及血糖波动参数,探讨T2DM合并CHD患者与单纯T2DM在血糖波动、HMGB1、vWF的差异及其在冠状动脉病变中的意义。结果 CHD＆DM组的病程、MAGE、LAGE、MPPGE、MODD、vWF、HMGB1水平明显高于DM组,差异有统计学意义（P〈0.05）。按照Gensini冠状动脉评分将CHD＆DM组分为3组,其中A、B、C 3组的Gensini评分差异均有统计学差异（P〈0.05）。C组及B组MAGE、LAGE、MPPGE、MODD、HMGB1、vWF水平较A组高（P〈0.05）,C组的水平较B组高（P〈0.05）。Pearson相关分析表明：Gensini评分与MAGE、LAGE、MODD、MPPGE、vWF、HMGB1、年龄、TC呈正相关（r=0.267、0.341、0.533、0.529、0.635、0.691、0.226、0.106,P〈0.05）。多元逐步回归分析发现：Gensini评分=342.865＋35.117MAGE＋14.821HMGB1＋7.927vWF。结论血糖波动对DM合并CHD的发病有一定的影响,其机制可能是通过内皮损伤及炎性反应而引起。肌动蛋白重构蛋白对瘢痕成纤维细胞增殖和分化的影响
摘要：目的观察肌动蛋白重构蛋白（flightlessⅠ,FliⅠ）对人瘢痕成纤维细胞增殖和分化的影响,探讨瘢痕组织形成的部分机制。方法将实验分为空白组、Lipo2000组、FliⅠsiRNA组、FliⅠcDNA组,采用WST-1法检测细胞增殖,RT-PCR法、Western blot法分别检测FliⅠ、COL-1mRNA及其蛋白的表达水平。结果转染48h后,各组成纤维细胞平均吸光度（A）值分别为：空白组0.934±0.153,Lipo2000组0.910±0.084,FliⅠsiRNA组1.330±0.216,FliⅠcDNA组0.607±0.042,FliⅠsiRNA组细胞增殖水平明显高于其他3组（P〈0.05）;FliⅠcDNA组细胞增殖水平明显低于其他3组（P〈0.05）;RT-PCR法检测FliⅠ、COL-1mRNA的表达：与空白组比较,FLiⅠsiRNA组扩增条带亮度减弱,FLiⅠcDNA组扩增条带亮度明显增强,FLiⅠsiRNA组的FliⅠ与COL-1扩增产物条带相对灰度值较空白组分别降低至0.194±0.023和0.316±0.176,均显著低于其他3组（P〈0.01）,而FLiⅠcDNA组的FliⅠ与COL-1扩增产物条带相对灰度值较空白组分别升高至7.846±1.075和9.842±1.659,均显著高于其他3组（P〈0.01）;与空白组及Lipo2000组比较,FLiⅠsiRNA组的成纤维细胞中FliⅠ、COL-1蛋白表达显著减弱（P〈0.05,P〈0.01）,FLiⅠcDNA组细胞中FliⅠ、COL-1蛋白表达显著增强（P〈0.05,P〈0.01）。结论 FLiⅠ缺失能增强瘢痕成纤维细胞的增殖,并能在转录和翻译水平下调FLiⅠ与COL-1的表达,可能是瘢痕增生的机制之一。右美托咪定对闭环麻醉下嗜铬细胞瘤切除患者术中血流动力学的影响研究
摘要：目的观察右美托咪定对闭环麻醉下嗜铬细胞瘤切除患者术中血流动力学的影响。方法选取嗜铬细胞瘤临床功能1级患者40例,分为右美托咪定组（n=20）于麻醉诱导前30min启动右美托咪定靶控输注,浓度设为3ng/mL,对照组（n=20）泵注等容量生理盐水。于丙泊酚闭合环反馈复合瑞芬太尼靶控输注麻醉下通过Swan-Gans漂浮导管监测术前基础值（T0）,气管插管时（T1）、切皮时（T2）、切除瘤体时（T3）、切除瘤体后5min（T4）、切除瘤体后10min（T5）、术毕（T6）的心率（HR）、平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）、每搏指数（SI）、心排指数（CI）、肺动脉楔压（PCWP）、外周循环阻力指数（SVRI）和左室收缩功指数（LVSWI）。结果右美托咪定组在T1-T3的HR、MAP、SVRI和LVSWI均显著低于对照组（P〈0.05）,SI则高于对照组（P〉0.05）;而在T4-T5的SI、CI、PCWP及SVRI均显著低于对照组（P〈0.05）。结论右美托咪定能使闭环麻醉下嗜铬细胞瘤切除患者术中血流动力学更加稳定。社交技能训练对非急性期青少年精神分裂症患者的疗效评估
摘要：目的探讨社交技能训练对非急性期青少年精神分裂症患者精神症状及社会功能的干预效果。方法将60例住院的非急性期青少年精神分裂症患者分为治疗组和对照组,分别采用药物治疗结合社交技能训练和单独药物治疗的方法进行干预,疗程8周。采用阳性和阴性症状量表（PANSS）和住院精神患者康复疗效评定量表（IPROS）中的2个分量表在干预前、干预后4、8周进行评估。结果共55例患者完成干预;与干预前比较,治疗组和对照组PANSS各量表得分和总分以及IPROS中的2个量表得分在干预4、8周后均逐渐降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;除一般精神病理量表分外,治疗组PANSS各量表得分和总分以及IPROS中的2个量表得分均明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论社交技能训练能改善非急性期青少年精神分裂症患者的阳性症状、阴性症状,有助于患者社会功能恢复。单脐动脉脐带螺旋与胎儿畸形及围产结局的关系
摘要：目的研究单脐动脉（SUA）脐带螺旋指数（UCI）与胎儿畸形及围产结局的关系。方法回顾性分析重庆医科大学附属永川医院2011年1月至2013年12月经超声诊断的73例SUA胎儿资料,产后计算UCI值,与病理学检查结果对照分析。结果 SUA脐带长度正常胎儿产后平均UCI为（0.13±0.07）周/cm,螺旋稀少（UCI〈0.10）发生率46.58%（34/73）,其中畸形发生率35.29%（12/34）,人工引产率35.29%（12/34）;螺旋正常（0.100.30）发生率19.17%（14/73）,其中畸形发生率（64.29%,9/14）,人工引产率71.43%（10/14）,胎儿畸形发生率及人工引产发病率在螺旋稀少组及螺旋正常组合并后与螺旋密集组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 SUA脐带异常螺旋密集的胎儿畸形发生率高,产前检查时应重视。
