高强度皮秒脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞体外作用初探
摘要：目的探讨高强度皮秒脉冲电场对人宫颈癌HeLa细胞的体外损伤效应及机制。方法固定皮秒脉冲电场脉宽800ps、频率3Hz、场强250kV／cm，根据处理脉冲个数不同（0、1000、3000和5000个），将HeLa细胞分为对照组和不同剂量皮秒脉冲处理组，通过MTT比色法检测皮秒脉冲对各组细胞在处理后不同时间点生长抑制的影响；Fluo—s／AM探针标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测细胞[-Ca抖Ji改变；Westernblot法检测皮秒脉冲电场作用后Bax／Bcl-2蛋白表达量的改变。结果随着脉冲剂量的增加，细胞死亡率上升，生长受到抑制，12h时抑制率最为显著；皮秒脉冲处理可明显升高细胞[-Ca^2＋]i（P〈0．05）；随着脉冲剂量的增加，细胞内Bax蛋白表达量由对照组的0．205±0．102增加至各处理组的0．257±0．083、0．586±0．138和0．791±0．262（P〈0．05）；Bcl-2蛋白表达量由对照组的0．694±0．132降低至各处理组的0．591±0．145、0．364±0．105和0．262±0．092（P〈0．05）；Bax／Bcl-2比值显著上调（P〈0．05）。结论高强度皮秒脉冲电场对HeLa细胞有损伤效应，并能诱导其凋亡。皮质酮对动物骨髓间充质干细胞迁移活性的影响及其修复学意义
摘要：目的研究下丘脑一垂体一肾上腺轴效应激素——糖皮质激素（GC）对不同动物骨髓间充质干细胞迁移活性影响。方法分离、培养并鉴定大鼠和小鼠骨髓间充质干细胞，通过不同方法观察两种来源的骨髓间充质干细胞趋化活性的变化，评价GC对不同来源的骨髓间充质干细胞迁移活性的影响。结果尽管不同种属来源的骨髓闯充质干细胞在形态上存在一定差异，但一定浓度的GC能够显著增强其趋化活性（P〈0．05）。结论急性应激条件下，骨髓间充质干细胞迁移活性增强对损伤组织修复具有潜在的临床意义。3种不同类型基因导入系统转染类神经元细胞的效率比较
摘要：目的应用3种不同类型基因导入系统携带能表达绿色荧光蛋白的pAAV—EGFP质粒转染两类神经元细胞株，并对细胞毒性和转染效果进行比较。方法LipofectAMINE2000、聚乙烯亚胺（polyethylenimine，PEI，相对分子质量为25×10^3）及该课题组合成的PEI-聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）4．6在SH—sY5Y神经母细胞瘤细胞和c6胶质瘤细胞中的转染效果，通过MTT法检测细胞存活率，倒置显微镜荧光观察法和流式细胞仪法检测转染效果。结果MTT检测发现，在c6胶质瘤细胞中，PEG-PEI4．6的细胞存活率为83％，比PEI（70％）和LipofectAMINE2000（73％）的细胞存活率要高（P＜0．05）；但LipofectAMINE2000和PEI的细胞存活率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；在sH—sY5Y神经母细胞瘤细胞中的检测结果与C6胶质瘤细胞类似。倒置显微镜观察发现，在c6胶质瘤细胞中，PEG-PEI4．6的细胞荧光表达效果比LipofectAMINE2000和PEI要好；而在SH—SY5Y神经母细胞瘤细胞中，LipofectAMINE2000的荧光表达效果比另外两种复合物的效果好，同时PEG-PEI4．6的荧光表达效果比PEI要好。流式细胞仪检测发现在C6胶质瘤细胞中，PEG-PEI4．6的转染效率最好，为23．2％；Lipo—fectAMINE2000其次，为16．9％；PEI最差，为12．6％，三者两两比较差异有统计学意义（Pdo．05）。在SH—SY5Y神经母细胞瘤细胞中则是LipofectAMINE2000的转染效率最好，PEG-PEI4．6其次，PEI最差，转染效率分别为22．3％、17．2％、10．6％，三者两两比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论LipofectAMINE 2000和PEG-PEI4．6都可作为目前神经系统基因转染的传输载体。不同类型淋巴瘤患者肿瘤坏死因子-β 的表达及其临床意义
摘要：目的探讨不同类型淋巴瘤患者肿瘤坏死因子-β（TNF-β）在肿瘤组织与血浆中表达及其临床意义。方法收集97例不同类型淋巴瘤患者石蜡组织和血浆标本，应用免疫组化和ELISA法观察组织与血浆中TNF-β表达情况。结果TNF-β在霍奇金淋巴瘤（HL）、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、浆细胞肿瘤（PCN）、小淋巴细胞淋巴瘤／慢性淋巴细胞白血病（SLL／CI，L）、滤泡性淋巴瘤（FL）、周围T细胞淋巴瘤（PTL）表达较高，而在淋巴母细胞淋巴瘤（LBL）、结外NK／T细胞淋巴瘤（NK／TCL）表达较低，各种类型淋巴瘤组织TNF-β的表达情况比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。在HL、DLBCL、PCN、SLL／CLL、FL、PTL患者血浆中TNF-β水平高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）。组织中TNF-~表达在国际预后指标（IPI）评分的中、高危组与低危组比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。TNF一口在组织与血浆中的表达无相关性（rs=0．12，P〉0．05）。结论TNF-β在淋巴瘤组织与血浆中都有不同程度表达，提示TNF-β在淋巴瘤发生、发展中起到一定作用，但是TNF-β与淋巴瘤的关系比较复杂，不同的类型可能存在不同的机制。螺内酯对清蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响
摘要：目的探讨螺内酯对人清蛋白诱导的人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）发生转分化的影响，以及该过程是否通过转化生长因子β1（TGF-β1）／Smads信号通路发挥作用。方法体外培养HK-2细胞，将其随机分为7组：A组（未加刺激物）、B组（加入10^-7mol／l。螺内酯）、C组（加入5mg／mL清蛋白）、D组（加入5mg／mL清蛋白及10^-8mol／L螺内酯）、E组（加入5mg／mL清蛋白及10^-7mol／L螺内酯）、F组（加入5mg／mL清蛋白及10^-6mol／L螺内酯）、G组（先加10μmol／LTGF-β1拮抗剂，30min后加入5mg／mL清蛋白）。采用RT—PCR检测TGF-β1和整合素连接激酶（ILK）的tuRNA表达；细胞免疫荧光检测上皮钙黏素（E—cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达；ELISA法检测纤维连接蛋白（FN）的蛋白水平。结果c组ILKtuRNA，R—SMA、FN蛋白较其他各组表达明显增高（P＜O．05），E-cadherin蛋白表达明显下降（P＜0．05），而TGF-I？ImRNA表达高于除G组以外其余各组（P＜0．05L与G组相比，C组TGF-β1 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05），而ILK mRNA，α—SMA、FN蛋白表达明显下降（P＜0．05），E-cadherin表达明显升高（P＜0．05）。D、E、F组TGF-β1、ILKmRNA、α-SMA，FN蛋白表达逐渐下降，组间两两比较差异有统计学意义（P＜0．05）；E-cadherin的表达逐渐增高（P＜0．05）。结论一定浓度的清蛋白可以诱导体外培养的HK-2细胞发生转分化；螺内酯可抑制人清蛋白诱导HK一2细胞转分化作用，且呈剂量依赖性；TGF-β1／Smads信号通路可能是此过程中的重要通路。干化学法尿隐血检测的可靠性分析
摘要：目的探讨干化学法尿隐血检测的可靠性。方法收集843例泌尿外科住院患者及403名体检人员的尿液标本。分析干化学法尿隐血检测与显微镜检测尿沉渣红细胞（镜检）结果的相符性。结果843份泌尿外科尿标本中，482份干化学法尿隐血检测阳性，431份（51．1％）镜检阳性；千化学法尿隐血检测阴性与镜检阴性的相符率为98．9％。在843例泌尿外科住院患者和403名体检人员的尿液标本中，干化学法尿隐血检测结果为±、＋时，两种方法检测结果相符率远低于干化学法尿隐血检测结果为阴性、＋＋、＋＋＋时两种方法检测结果相符率（P〈0．05）。两种方法检测279例泌尿系统结石患者阳性相符率最低。结论干化学法尿隐血检测可靠性欠佳，当检测结果异常时，应结合镜检报告结果进行综合判断。氧化苦参碱对LoVo细胞Bcl-2、OCLN、TUBAIAmRNA表达的影响
摘要：目的探讨氧化苦参碱（OM）抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法以及免疫组化法检测OM对LoVo细胞凋亡相关以及细胞骨架相关的B细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）、微管蛋白1A（TUBA1A）、咬合蛋白（0CLN）的基因及蛋白表达的影响。结果OM能显著抑制LOVo细胞增殖；可明显抑制LoVo细胞Bcl-2的mRNA以及蛋白的表达（P＜0．05），抑制TUBAlAmRNA表达，同时上调OCLN蛋白的表达，但并不能明显上调OCLNmR—NA的表达。结论0M抑制LoVo细胞增殖，可能与下调LoVo细胞Bcl-2、TUBAlA表达以及上调OCLN表达有关。72例胰腺损伤诊治分析
摘要：目的探讨胰腺损伤的诊断和治疗方法。方法对近10年间该院手术治疗的胰腺损伤72例作回顾性分析。主要诊断技术为CT，MRI，内镜逆行胰胆管造影（ERCP）等；手术方法包括修补加引流术、远端胰腺切除术、空肠与远端胰腺Roux-en—Y吻合术、胰十二指肠修补术加广泛引流、胰十二指肠修补术加憩室化术和“损伤控制外科（DCS）”术等术式。结果52例腹内脏器合并伤中，穿透伤13例（25％），钝性伤39例（75％），二者比较差异无统计学意义（χ^2=0．000，P〉0．05）；49例腹以外部位合并伤中，穿透伤6例（12．24％），钝性伤43例（87．76％），二者比较差异有统计学意义（χ^2=13．310，P〈0．01）。72例患者中死亡9例（12．5％），合并伤、失血总量、伤后至手术时间等因素与患者死亡具有相关性（P〈0．05）。术后并发症共18例（25％），Ⅰ～Ⅱ级伤3例，Ⅲ～Ⅴ级伤15倒，二者比较差异有统计学意义（χ^2=10．667，P〈0．01）。术后并发症包括出血、胰瘘、胰腺假性囊肿、胰腺脓肿、创伤性胰腺炎、胰腺内外分泌功能障碍等。72例患者中存活63例。34例胰腺损伤级别为Ⅲ～Ⅴ级的患者，伤后随访6个月至22年（中位数随访时间2年），情况良好。结论避免胰腺损伤早期漏诊，手术时迅速控制合并伤大出血，按胰腺损伤分级采用不同术式，可明显减少并发症和病死率。阿苯达唑对耐顺铂肺癌细胞糖酵解、细胞周期及细胞凋亡的影响
摘要：目的研究阿苯达唑（ABZ）对人耐顺铂肺癌细胞（A549／DDP细胞）糖酵解、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法用MTT比色法检测ABZ对A549／DDP细胞增殖的影响，求得抑制率为0％、25％、50％、75％所对应的ABZ浓度，并按抑制率将实验分为对照组，25％抑制浓度（IC25）组、半数抑制浓度（IC50）组和75％抑制浓度（IC75）组，每组给予相应浓度的ABZ处理，并按作用时间再将每组分为12、24、36h亚组。按照分组，在设定时间点，用比色法测定己糖激酶（HK）和丙酮酸激酶（PK）活性，酶标仪法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性，RT—PCR法测定Akt和MycmRNA表达，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。结果ABZ抑制了A549／DDP细胞增殖，呈剂量依赖性，抑制率为0％、25％、50％、75％所对应的ABZ浓度分别为（0．00±0．00）μmol／L（0．99±0．11）μmol／L、（5．73±0．65）μmol／L 33．15±3．94）μmol／L。ABZ明显降低了A549／DDP细胞HK、PK、LDH的活性，且下调了Akt和MycmRNA表达，细胞周期阻滞，凋亡明显。结论ABZ能抑制A549／DDP细胞糖酵解酶活性，下调糖酵解相关基因表达，阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡。皮质发育障碍大鼠海马转化生长因子-β2表达下调
摘要：目的检测转化生长因子-β2（TGF-β2）在皮质发育障碍模型大鼠海马的表达，探讨海马形态改变的发生机制及致癫机制。方法制作皮质发育障碍大鼠模型，选取出生60d幼鼠，利用免疫组化、荧光定量PCR和Western blot等方法检测TGF-β2在皮质发育障碍模型大鼠海马区的变化。结果与正常对照组比较，皮质发育障碍组大鼠海马TGF-β2 mRNA和蛋白表达明显降低（蛋白：0．60±0．17VS0．92±0．19，P＜0．05；mRNA：0．48±0．07VS1．12±0．16，P＜0．05）。结论TGF2表达变化可能与皮质发育障碍大鼠海马神经元的迁移紊乱有关。EGFR信号通路调控人胶质瘤U87细胞侵袭转移的分子机制
摘要：目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）信号通路与人胶质瘤细胞（U87细胞）增殖和侵袭转移的关系及调控分子机制。方法表皮生长因子（EGF，100ng／mL）、EGFR抑制剂——AGl478（10μmol／L）单独和联合处理u87细胞，采用MTT法和Transwell小室体外侵袭实验检测U87细胞增殖和体外侵袭能力；明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9的表达水平；Westernblot法检测磷酸化EGFR（P—EGFR）、磷酸化AKT（P—AKT）蛋白表达。结果EOF（100ng／mL）增加P—EGFR和P—AKT蛋白表达，使加药后24h和48h的细胞生长率分别提高了19．25％、22．32％（P〈0．05），使12h过膜细胞数由（27±4）个上升到（126±3）个（PG0．05），促进U87细胞的MMP-2、MMP-9蛋白表达（PG0．05）；AGl478（10μmol／L）可以阻断EGF增加P—EGFR和P—AKT蛋白表达的作用（P〈0．05），并具有时间依赖性（P〈0．05），减弱u87细胞体外侵袭能力（P〈0．05），抑制MMP-2、MMP-9蛋白的表达（P〈0．05）。结论EGFR—PI3K／AKT信号通路参与调节U87细胞增殖和侵袭转移过程，其机制可能是EGFR—PI3K／AKT信号通路活化后，导致MMP-2和MMP-9蛋白的表达增加，对细胞外基质的破坏增强。小剂量罗呱卡因复合舒芬太尼蛛网膜下腔麻醉用于剖宫产的临床观察
摘要：目的观察小剂量罗呱卡因复合舒芬太尼行蛛网膜下腔麻醉用于剖宫产的麻醉效果。方法将75例美国麻醉医师协会（ASA）分级为Ⅰ-Ⅱ级的剖宫产患者随机分为A、B、C3组，每组25例。A组：0．75％罗呱卡因15mg（2mL）；B组：0．75％罗呱卡因10mg（1．3mL）；C组：0．75％罗呱卡因7．5mg＋舒芬太尼5pg（0．75％罗呱卡因1．0mL4-舒芬太尼0．1mL）。B、C两组均加10％葡萄糖溶液至2mL。观察3组给药后平均动脉压（MAP）和心率变化、麻醉效果、新生儿Apgar评分、不良反应发生率及麻黄碱用量。结果麻醉后A、B两组MAP和心率明显下降（P＜0．05），且与C组比较，差异有统计学意义（P＜0．05）；麻醉后A、B组间MAP比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。麻醉后c组感觉阻滞起效时间短于A、B组（P＜0．05）；B组感觉阻滞维持时间短于A、C组（P＜0．05），而A、C组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；B组感觉阻滞最高平面高于A、C组（P＜0．05），而A、c组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；C组运动神经阻滞持续时间短于A、B组（P＜0．05）；C组Bromage评分低于A、B组（P＜0．05）。C组术后尿潴留、恶心、呕吐发生率，以及麻黄碱用量明显低于A、B组（P＜O．05）。3组患者所产新生儿Apgar评分比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论小剂量罗呱卡因复合舒芬太尼麻醉效果确切、对患者呼吸、血流动力学的影响轻微、不良反应少，是剖宫产手术较理想的麻醉方法。原发性肾上腺皮质肿瘤组织中间隙连接蛋白32和43的表达及其临床意义
摘要：目的研究间隙连接蛋白（Cx）32和43在原发性肾上腺皮质肿瘤中的表达，探讨其在原发性肾上腺皮质肿瘤的临床诊断及预后评估中的价值。方法应用免疫组化Novolink^TM Polymer法检测21份正常肾上腺组织、45份肾上腺皮质腺瘤及14份肾上腺皮质癌标本中Cx32、Cx43的表达水平，运用SPSSl3．0统计软件进行统计学处理。结果Cx32和Cx43在肾上腺皮质癌中表达阳性率分别为21．4％和35．7％，明显低于肾上腺皮质腺瘤中的68．9％和75．6％（P=0．002，P=0．010）及正常肾上腺组织中的85．7％和100％（P=0．000，P=0．000）；肾上腺皮质腺瘤中Cx43表达的阳性率低于正常肾上腺组（P=0．013）。Cx43的表达与肾上腺皮质腺癌患者的预后相关（P〈0．05），Cx43表达越低患者预后越差。在肾上腺皮质癌中，Cx32和Cx43之间的表达呈明显正相关（P=0．015）。结论联合检测Cx32和Cx43的表达对鉴别良、恶性肾上腺皮质肿瘤具有重要的参考意义。Cx43在原发性肾上腺皮质癌组织的表达与患者预后相关，增加其表达可能改善患者顸后。2种不同试剂检测血清免疫球蛋白结果的可比性及偏倚评估
摘要：目的进行2种不同免疫球蛋白诊断试剂对血清免疫球蛋白测定结果的可比性及偏倚评估研究，为血清免疫球蛋白测定的标准化和临床实验室认可提供实验数据。方法参考美国临床和实验室标准协会（CLSI）的EP9A2文件，分别用执诚试剂和优利特试剂在HITACHl7600—010全自动生化分析仪上测定免疫球蛋白IgG、IgA和IgM，以执诚试剂为对照组，优利特试剂为实验组。用线性回归统计法分析对照组（Y）和实验组（X）测定结果决定水平处的方法间误差，以美国临床实验室修正法规（CLIA′88）规定的室间质量评价允许误差范围的1／2为标准，判断不同试剂的l临床可接受性。结果两种试剂对患者血清免疫球蛋白测定结果显示，方法内重复性良好，无离群点，除IgA在决定水平处的系统误差不能被接受外，其余项目测定结果的偏差临床可以接受。结论当同一实验室同一检验项目存在2个或以上的试剂时，应进行方法比对和偏差评估，判断其临床可接受性，以保证检验结果的可比性。宫颈子宫内膜异位症23例临床分析
摘要：目的分析宫颈子宫内膜异位症的发病原因、临床表现及诊疗方法以指导临床工作。方法回顾性分析重庆医科大学附属第一医院妇产科宫颈门诊2008年12月至2009年10月间阴道镜下活检、病理诊断为宫颈子宫内膜异位症的23例患者的临床资料。结果23例宫颈子宫内膜异位症患者中除1例外，其余均有宫颈治疗病史；22例患者阴道镜诊断与病理学诊断结果相符；超频电刀电熨和局部病灶切除术治疗宫颈子宫内膜异位症的有效率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论各种医源性损伤可能诱发宫颈子宫内膜异位症，利用阴道镜进行定点活检有助于发现和诊断该病。米索前列醇预防产后出血52例分析
摘要：目的探讨米索前列醇在预防产后出血中的效果。方法回顾性分析该院2009年1月至2010年12月100例正常单胎足月的自然分娩患者，将其随机分为观察组52例和对照组48例，观察组产妇在胎儿娩出后口服米索前列醇片400μg或600μg，对照组在胎儿娩出后肌内注射缩宫素20U，分别测定两组产妇的出血量、第三产程时间、产后出血发生率和血压等指标。结果两组在第三产程时间、产后2h出血量、产后出血发生率等方面比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论米索前列醇口服给药促进子宫收缩作用强于肌内注射缩宫素，能有效缩短第三产程，减少产后出血。胎儿宫内窘迫行剖宫产术221例临床分析
摘要：目的探讨如何预防和早期发现胎儿窘迫，减少新生儿窒息，正确诊断，及时行剖宫产术。方法将该院以胎儿窘迫为第一手术指征行剖宫产的221例患者进行回顾性分析，以宫口开大情况分为未临产组、潜伏期组、活跃期组，分析各组胎儿窘迫的相关因素、新生儿Apgar评分情况。结果新生儿窒息率5．43％。胎儿窘迫发生在未临产组115例（52．04％），潜伏期组54例（24．43％），活跃期组52例（23．53％）。3组诊断符合率分别为77．39％、98．14％、98．08％。221例病例中早产33例，未临产组30例（90．91％）。结论加强产前、产时胎儿的胎心监护，早期发现胎儿受损迹象，及时进行干预，可以减少新生儿窒息发生率。21例脑后部可逆性脑病综合征的临床和影像学特征分析
摘要：目的探讨脑后部可逆性脑病综合征（PRES）的临床和影像特征。方法回顾性分析21例PRES在发病机制、临床表现、病变部位、影像表现及疾病转归等方面的特点。结果病变主要分布在双侧顶枕皮质或皮质下白质区，以白质受累为主，可累及胼胝体、脑干、小脑及额颞叶等。扩散加权成像（DWI）PRES常为等高信号，表观扩散系数（ADC）表现为高信号。PRES一般是可逆的，部分可合并脑梗死或出血。结论PRES的临床和影像学表现具有一定特征性，结合病史，采用多种影像学检查及随访有助于对PRES的正确诊断。
