不同浓度GDNF诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化研究
摘要：目的观察不同浓度胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对神经干细胞（NSCs）向多巴胺（DA）能神经元分化的影响。方法取新生鼠脑组织体外分离培养NSCs,第2代NSCs诱导培养基中分别加入0、5、10、20 ng/mL GDNF进行诱导。用逆转录-聚合酶链反应检测诱导后细胞酪氨酸羟化酶（TH）mRNA的表达,免疫细胞化学染色鉴定NSCs,检测NSCs向DA能神经元分化率。结果各诱导组均表达TH mRNA。神经球具有自我更新和表达巢蛋白的能力,诱导分化后的细胞能表达神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性抗原。与空白对照组比较,GDNF诱导组TH阳性细胞率均明显升高（P〈0.05）;且10、20ng/mL GDNF诱导组升高幅度明显高于5 ng/mL GDNF诱导组（P〈0.05）,10、20 ng/mL GDNF诱导组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论从新生鼠脑组织分离出NSCs。不同浓度的GDNF均能促进NSCs向DA能神经元分化,GDNF浓度从10ng/mL提高到20 ng/mL时TH阳性细胞率无明显变化。肝硬化大鼠肝部分切除后IL-6/STAT3信号通路的变化
摘要：目的了解白细胞介素-6（IL-6）/信号转导及转录活化因子3（STAT3）信号通路在肝硬化大鼠肝部分切除后残肝再生障碍中的作用。方法采用皮下注射四氯化碳（CCl4）法建立肝硬化大鼠模型。正常大鼠为对照组。对照组及肝硬化组均行70%肝切除后,于不同的时间点收集残肝组织及血液标本,检测血清IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、肝组织增殖细胞核抗原（PCNA）及活性STAT3蛋白表达。结果肝切除后24 h,肝硬化组大鼠有丝分裂细胞数及PCNA阳性细胞数均明显小于对照组。肝切除后的前12 h,肝硬化组大鼠IL-6表达水平明显低于对照组。术后2 h,对照组残肝组织的活性STAT3蛋白远远高于肝硬化组。结论肝硬化肝切除术后早期IL-6的低表达导致STAT3蛋白活化不足是肝硬化大鼠肝部分切除术后残肝再生障碍的重要原因之一。糖尿病大鼠牙周炎症组织中TGF-β_1表达的研究
摘要：目的探讨血清转化生长因子-β1（TGF-β1）及相关促炎性细胞因子在糖尿病性牙龈炎发病机制中的作用。方法选择雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、牙龈炎组及糖尿病性牙龈炎组。应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测牙龈炎、糖尿病性牙龈炎及健康大鼠牙龈组织TGF-β1、白细胞介素6（IL-6）及白细胞介素8（IL-8）的含量,免疫组化染色观察牙龈组织中TGF-β1表达水平的变化。结果与健康大鼠相比,牙龈炎组及糖尿病性牙龈炎组大鼠牙龈组织TGF-β1I、L-6及IL-8含量均明显升高,并有递增趋势。TGF-β1在健康大鼠牙龈组织中呈弱阳性反应,反应呈黄色,牙龈炎组及糖尿病性牙龈炎组TGF-β1表达较正常对照组明显增强,反应为棕黄色,呈强阳性改变。结论 TGF-β1在糖尿病性牙龈炎的发生、发展中起重要作用。非甾体类抗炎药物对急性高原病的预防效果
摘要：目的验证非甾体类抗炎药物盐酸苄达明对急性高原病的预防效果。方法将急进5 200 m高原的118例健康青年官兵随机分为安慰剂组（n=20）、复方红景天组（n=33）、复方党参组（n=33）、盐酸苄达明组（n=33）,自海拔1 400 m,历时5 d进入5 200 m高原。从出发前5 d开始分别服用盐酸苄达明片、复方红景天胶囊、复方党参胶囊和安慰剂胶囊,定期测试其血氧饱和度（SaO2）和心率（HR）,并以军用卫生标准GJB1098-91《急性高原反应的诊断和处理原则》随访记录受试者急性高原反应症状,然后分度评分;进入高原后第7天进行高原习服基础生理指标测定,进行药效评价。结果盐酸苄达明对全程试验期内受试者高原缺氧所致头痛和呕吐的预防效果显著优于安慰剂,且对头痛症状的预防效果优于复方红景天与复方党参。盐酸苄达明组受试者急性高原反应GJB评分,进入海拔5 200 m高原第3、5天SaO2、心率,高原习服基础生理指标等均显著优于安慰剂组。结论非甾体类抗炎药物盐酸苄达明防治急性高原病效果显著。神经生长因子和表皮生长因子在衰老大鼠下颌下腺的表达
摘要：目的观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子（NGF）、表皮生长因子（EGF）表达的改变。方法选取18只SD雌性大鼠,随机分成正常组、模型组,模型组大鼠每天腹腔注射D-半乳糖,连续60 d,制造亚急性衰老大鼠模型。用SP免疫组化法检测下颌下腺NGF、EGF的阳性表达。结果 NGF、EGF阳性反应颗粒为浅棕色至深褐色,主要分布于颗粒曲管细胞及纹状管细胞顶部胞质中,腺泡细胞为阴性。正常组NGF、EGF表达明显高于模型组（P〈0.01）。结论 D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、EGF表达较正常大鼠明显减少,说明NGF、EGF表达伴随衰老明显降低,为延缓组织退行性改变、预防衰老性涎腺疾病研究提供了一定的实验资料。宁血饮对ITP模型小鼠血小板系统和免疫功能的影响
摘要：目的观察宁血饮对特发性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠血小板系统及免疫功能的影响。方法建立ITP模型小鼠,并分为空白对照组,模型组,筪血小板胶囊组,宁血饮高、低剂量组,每组12只。于造模后第7天开始分组给药,连续给药8 d。检测各组血小板计数,外周血T淋巴细胞亚群、血小板相关抗体,骨髓巨核细胞计数和产板巨核细胞计数等,称脾脏质量,计算脾脏系数。结果宁血饮高剂量组血小板计数升高,骨髓巨核细胞计数减少,产板巨核细胞计数增多,血小板相关抗体水平降低,脾脏质量及脾脏系数减少,T淋巴细胞亚群失调得到改善,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。升血小板胶囊组血小板计数升高,骨髓巨核细胞计数减少,产板巨核细胞计数增多,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。宁血饮低剂量组血小板系统有所改善,但与模型组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论宁血饮高剂量对ITP模型小鼠血小板系统和免疫相关指标的异常有明显改善、调节作用,而升血小板胶囊仅能改善血小板系统,宁血饮低剂量则无明显影响。十二烷基硫酸钠对多重耐药大肠埃希菌Ⅰ类整合子作用的初步探讨
摘要：目的探讨十二烷基硫酸钠（SDS）对多重耐药大肠埃希菌（E.coli）Ⅰ类整合子的作用。方法采用纸片扩散法（K-B法）测定71株大肠埃希菌对3类4种常用抗菌药物的药敏情况,聚合酶链反应（PCR）检测Ⅰ类整合子3个不同部位的基因。对经SDS处理的Ⅰ类整合子阳性多重耐药大肠埃希菌的Ⅰ类整合子基因与最低抑菌浓度（MIC）值进行测定与比较。结果 71株大肠埃希菌的多重耐药率为32.39%（23株）,Ⅰ类整合子的总检出率为88.73%,不同部位基因检出率分别为：整合酶基因74.65%、遗传标记基因78.87%、可变区基因21.13%。SDS处理前、后多重耐药大肠埃希菌中的Ⅰ类整合子基因阳性率差异有统计学意义（P〈0.05）;对庆大霉素、头孢噻肟的MIC值差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 SDS对多重耐药大肠埃希菌的Ⅰ类整合子有一定的影响。52例胃癌组织中Survivin和Bcl-2蛋白表达研究
摘要：目的探讨胃癌组织中Survivin及Bcl-2蛋白的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测52例胃癌组织、30例正常胃黏膜组织中Survivin及Bcl-2蛋白的表达。结果 Survivin、Bcl-2蛋白在胃癌组织中的阳性表达均高于正常胃黏膜（P〈0.05）;Survivin、Bcl-2蛋白表达均分别与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 Survivin、Bcl-2蛋白表达上调可能与胃癌的发生、发展有关,二者共同作用抑制凋亡。RNA干扰Axin2对大鼠骨髓基质干细胞的成骨分化表达的影响
摘要：目的通过对大鼠Axin2基因的RNA干扰（RNAi）,探讨Axin2对大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化过程的影响。方法取6周龄雌性SD大鼠双侧股、胫骨骨髓细胞,采用全骨髓培养法进行原代和传代培养。细胞传2代后实验组进行Axin2 mRNA干扰质粒转染,对照组进行阴性干扰质粒转染。转染48 h后换用成骨诱导分化培养基。诱导分化28 d后用von Kossa方法进行细胞外基质矿化染色。采用适时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）技术检测诱导分化后第7、14天β-catenin、骨钙素（OCN）、frizzled-2、Lef-1、Wnt5a mRNA的表达水平。结果对照组大鼠BMSCs经体外诱导后分化为具备矿化细胞外基质能力的成熟成骨细胞,而实验组BMSCs成骨分化不全;RQ-PCR检测显示,诱导分化后第7天实验组β-catenin、frizzled-2 mR-NA表达水平显著低于对照组,而OCN、Lef-1、Wnt5a mRNA表达水平显著高于对照组;诱导分化后第14天实验组frizzled-2、Lef-1和Wnt5a mRNA表达水平均显著高于对照组（P〈0.05）。结论对大鼠BMSCs Axin2进行RNAi后,BMSCs向成骨细胞分化晚期细胞外基质矿化能力减弱。序贯通气治疗重症急性胰腺炎所致急性呼吸窘迫综合征的临床研究
摘要：目的探讨有创-无创序贯通气疗法在治疗重症胰腺炎所致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中的疗效。方法将78例重症胰腺炎所致ARDS患者随机分为有创通气组（A组,n=38）与序贯通气组（B组,n=40）,对比分析两组有创通气时间、总机械通气时间、呼吸机相关肺炎（VAP）发生率和病死率等。结果 B组有创通气时间[（3.45±1.24）d]较A组[（4.27±2.53）d]明显缩短,差异有统计学意义（P〈0.05）;B组VAP发生率（5.00%）较A组（26.32%）明显降低,同时B组病死率（2.50%）较A组（10.53%）明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组总机械通气时间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论有创-无创序贯通气疗法治疗重症胰腺炎所致急性呼吸窘迫综合征可有效缩短有创通气时间、降低VAP发生率及病死率,具有肯定的临床疗效。胃癌组织中FAF1蛋白表达与幽门螺杆菌感染相关性研究
摘要：目的探讨胃癌组织中Fas相关因子1（FAF1）蛋白表达与幽门螺杆菌（Hp）感染之间的相关性及其可能的作用机制。方法免疫组化检测40例胃癌手术标本和相应的正常胃黏膜组织中FAF1蛋白的表达,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检查细胞凋亡,HE、甲苯胺蓝染色和Warthin-Starry（W-S）银染法检测Hp感染。结果在40例胃癌组织中FAF1的阳性表达率为37.50%,而在40例正常胃黏膜组织中FAF1阳性表达率为72.50%,二者差异有统计学意义（P〈0.05）;FAF1蛋白表达与肿瘤浸润深度、大小、临床分期和淋巴结转移无明显相关性（P〉0.05）,但与胃癌的分化程度有关,低分化胃癌组织FAF1阳性表达率显著低于高、中分化胃癌组织（P=0.010 2）。FAF1表达阴性组的胃癌细胞凋亡指数显著低于FAF1阳性组（P=0.011 0）。Hp阳性胃癌组织的FAF1阳性表达率明显低于Hp阴性者,二者差异有统计学意义（P〈0.05）。结论胃癌的发生、发展可能与FAF1的低表达有关,Hp感染可能通过下调FAF1蛋白的表达影响胃癌的分化和凋亡而发挥作用。多索茶碱治疗75例学龄儿童重症支气管哮喘的研究
摘要：目的观察多索茶碱治疗学龄儿童重症支气管哮喘的疗效和不良反应。方法将150例重症支气管哮喘患儿随机分为治疗组（多索茶碱,n=75）、对照组（氨茶碱,n=75）,并辅以常规治疗。观察及比较两组患儿治疗前、后有效率、最大呼气高峰流速（PEF）、血气改变以及药物不良反应等。结果与对照组相比,治疗组有效率、PEF及血气改变的差异有统计学意义（P〈0.05）。多索茶碱不良反应发生率明显小于氨茶碱。结论多索茶碱治疗学龄儿童重症支气管哮喘较氨茶碱起效时间短、作用强、安全,可作为重症哮喘附加治疗方案的首选。乳腺癌术后胸壁局部复发再次手术胸壁创面修复术式探讨
摘要：目的探讨乳腺癌胸壁复发再次手术局部创面修复的手术方式。方法对23例乳腺癌胸壁复发再次手术的局部创面分别采用邻位皮瓣转移、背阔肌肌皮瓣、腹直肌肌皮瓣修复创面。结果皮瓣全部成活,创面修复满意。结论乳腺癌胸壁复发再次手术应根据创面及患者情况选择合适的皮瓣或肌皮瓣修复胸壁创面。连续性血液滤过在肝移植术后并发急性肾功能衰竭中的治疗价值
摘要：目的探讨连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH）对肝移植术后并发急性肾功能衰竭的临床应用价值。方法应用CVVH对该院的22例肝移植术后并发急性肾功能衰竭的患者进行治疗,比较治疗前、后患者的生命体征,血流动力学,肾、肝功能,电解质,动脉血气分析,凝血象,血小板计数的变化,并观察其病死率,以评价CVVH的治疗效果及不良反应。结果 CVVH治疗后患者生命体征和血流动力学平稳（P〈0.05）,血清尿素氮和肌酐明显下降,总胆红素和结合胆红素明显下降;高钾血症、低钠血症以及代谢性酸中毒纠正（P〈0.05）;治疗前、后患者凝血象、血小板计数无明显变化（P〉0.05）;患者病死率有所下降。CVVH治疗过程中,患者耐受性好,无明显不良反应。结论 CVVH是肝移植术后并发急性肾功能衰竭的有效治疗方法之一。多层螺旋CT动态增强扫描对不典型肝脓肿的诊断价值
摘要：目的探讨多层螺旋CT动态增强扫描对不典型肝脓肿的诊断价值。方法回顾性分析经临床或病理检查证实的48例不典型肝脓肿平扫及动态增强扫描各期CT表现特征。结果 48例患者中肝脓肿位于肝左叶17例,肝右叶25例,同时累及肝左、右叶6例。平扫全部病灶呈均匀低密度或不均匀等低混杂密度。增强扫描动脉期26例病灶所在肝段或灶周出现楔形或片状一过性强化;门静脉期呈团块状强化9例,出现＂晕征＂10例,出现＂网格征＂或＂蜂窝征＂21例;延迟期29例病灶范围较平扫时缩小,7例房间隔或蜂房壁保持持续强化。结论多层螺旋CT动态增强扫描诊断不典型肝脓肿具有特征性,对提高不典型肝脓肿的诊断率及鉴别诊断具有重要价值。子宫倾斜角与B超测量的胎轴倾斜角的关系研究
摘要：目的探讨子宫倾斜角与B超测量的胎轴倾斜角的关系。方法采用子宫倾斜角测量仪和妇科B超对51例孕妇子宫倾斜角和胎轴倾斜角进行测量,分析配对资料子宫倾斜角与胎轴倾斜角的相关程度。结果在51例孕妇中,23例胎轴倾斜角向左倾斜,大小为（8.8±7.0）度;25例向右倾斜,大小为（9.6±8.2）度。子宫倾斜角与胎轴倾斜角差异无统计学意义（P=0.767 8）。子宫倾斜角与胎轴倾斜角呈线性相关（r=0.903 9,P〈0.01）。结论子宫倾斜角与胎轴倾斜角有明显相关性,可以用子宫倾斜角间接反映胎轴倾斜角。HBV X蛋白对大鼠肾小球系膜细胞增殖及促炎性细胞因子表达的影响
摘要：目的探讨HBV X基因表达的蛋白（HBVx）对体外培养的大鼠系膜细胞表达肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-1β、IL-6及细胞增殖的影响。方法构建含HBV X基因的真核表达载体pCI-neo-X,采用脂质体法将pCI-neo-X转染给体外培养的大鼠系膜细胞,Western blot测定HBx的表达,以半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定体外培养大鼠系膜细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞增殖。结果转染pCI-neo-X的系膜细胞（MC＋pCI-neo-X组）,HBx在36、48 h表达明显。同时TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达量较未转染和转染空载体组明显增高。上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平在MC＋pCI-neo-X组较未转染和转染空载体组均增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）;细胞增殖在36、48 h MC＋pCI-neo-X组最明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HBx可诱导大鼠系膜细胞高表达TNF-α、IL-1β和IL-6,促进系膜细胞增殖。HBx对系膜细胞的增殖作用可能与TNF-α、IL-1β、IL-6的高表达有关。人S100 A9重组腺病毒载体的构建和鉴定
摘要：目的制备人S100A9（hS100A9）重组腺病毒载体,为进一步研究人S100A9蛋白的分子生物学作用奠定基础。方法从pHAHA-hS100A9中PCR扩增hS100A9片段,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-TOX,获得重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A9。酶切、聚合酶链反应（PCR）及测序鉴定正确后经PmeⅠ酶切电转入AdEasier感受态细胞,获得重组腺病毒质粒pAdhS100A9,该质粒经PacⅠ酶切后由脂质体转染至HEK293细胞中包装扩增重组腺病毒并进行滴度测定,最后通过PCR及蛋白印迹法（Western blot）鉴定重组腺病毒。结果正确扩增出hS100A9基因;重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A9均及重组腺病毒质粒pAdhS100A9构建成功,并在HEK293细胞中成功包装且扩增后滴度为1 010 I U/mL;重组腺病毒AdhS100A9在HEK293细胞中成功转录和表达。结论用pAdEasy系统成功构建hS100A9重组腺病毒载体,为探讨其生物学作用奠定了基础。
