重庆医学杂志 统计源期刊

重庆医学 2007年第05期杂志 文档列表

重庆医学杂志专家述评

慢性肾脏疾病的现状及其防治385-385

摘要：慢性肾脏疾病（chronic kidney diseases，CKD）常因起病隐匿已成为威胁人类健康的第一隐形杀手，对人类生存质量及社会发展构成极大危害。为了人类的健康，CKD问题不得不引起社会的高度重视。非常遗憾的是，至今为止，人们进行健康体检时，可以花几十元甚至几百元去作多种器械检查．却不作几元钱的尿液检查；很多人服降压药几年、十几年、甚至几十年，却从未查过尿常规。这些事实说明，人们，包括相当部分医务工作者和医政管理者，对于CKD的认识还非常不足，远不及对于肿瘤、心血管病和糖尿病的重视程度。

重庆医学杂志肾内科专题

体外组装补体膜攻击复合物建立肾小管上皮细胞亚溶破模型386-388

摘要：目的体外组装补体膜攻击复合物（membrane attack complex，MAC），建立肾小管上皮细胞HK一2亚溶破模型，为进一步探讨小管间质的免疫性损伤效应奠定基础。方法用酵母多糖激活急性期患者血清制备补体优球蛋白C56，以新鲜正常人血清（NHS）作为C7～C9来源，体外组装sMAC建立HK-2亚溶破模型，LDH检测评价细胞亚溶破剂量，激光共聚焦显微镜（LSCM）鉴定sMAC沉积，流式细胞仪检测sMAC对HK-2表面HLA-DR分子表达的影响。结果确定C56 1：480，NHS 1：20为HK-2最适亚溶破量；LSCM显示sMAC沉积于HK-2细胞表面；不同时相观察sMAC刺激后HK-2细胞HLA—DR表达量逐渐升高，HLA—DR比对照组显著增加（P〈0．01）。结论成功建立了肾小管上皮细胞补体膜攻击复合物亚溶破模型，补体活化可能导致TEC本身参与了免疫炎症效应。

体外组装补体膜攻击复合物对肾小管上皮细胞Ⅳ型胶原合成的影响389-390

摘要：目的探讨补体膜攻击复合物（membrane attack complex，MAC）对肾小管上皮细胞HK-2细胞外基质成分Ⅳ型胶原表达的影响。方法以纯化的c56及新鲜正常人血清（the normal human serum，NHS）作为C7～C9来源，体外组装sMAC建立HK-2亚溶破模型，通过流式细胞仪检测MAC刺激后的Ⅳ型胶原表达情况，荧光显微镜检测MAC的沉积。结果MAC刺激后的HK-2与对照组比较Ⅳ型胶原和合成增多（P〈0．05）。结论亚溶破剂量的MAC能使HKC的Ⅳ型胶原表达上调，可能是引起肾小管间质纤维化细胞外基质增多的原因之一。

小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定391-393

摘要：目的构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体，以期进一步进行研究其免疫学效应。方法酶切合有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒，亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上，在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组，筛选阳性克隆，酶切、测序鉴定正确后，脂质体法转染AD-293细胞进行包装，扩增，氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度。RT—PCR和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达，同时进行野生型腺病毒的检测。结果经酶切及测序证实IDO基因重组腺病毒载体构建成功，RT—PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达，且无野生型腺病毒的产生。结论成功构建了含小鼠IDO基因的重组腺病毒载体，为探讨IDO的生物学功能奠定了基础。

大鼠胚胎后肾间充质干细胞体外诱导分化的实验研究394-395

摘要：目的研究大鼠胚胎后肾间充质干细胞（MMSCs）体外诱导分化的生物学特性。方法原代分离培养后肾间充质干细胞，在体外特定诱导条件下观察细胞向成骨细胞、脂肪细胞及肾小管上皮细胞的分化及其形态演变，采用细胞免疫荧光检测细胞表面特定蛋白的表达变化。结果大鼠后肾间充质干细胞在特定诱导条件下可向成骨细胞、脂肪细胞及上皮细胞分化，免疫荧光结果显示分化后的上皮细胞E-cadherin蛋白表达明显增强，而vimentin、fibronectin的表达则明显降低甚至无表达。结论大鼠胚胎后肾间充质干细胞在特定条件下有定向分化的能力，具有潜在分化为肾实质细胞的能力。

维甲酸对UUO大鼠肾组织RANTES表达及炎症反应的影响396-399

摘要：目的探讨维甲酸对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织RANTES表达及肾组织炎症反应的影响。方法成年清洁级雄性SD大鼠45只，随机分为假手术组（S组），UUO组（U组）和治疗组（T组），每组15只。假手术组行左输尿管游离，不结扎。UU0组和治疗组行左输尿管结扎。治疗组术后每天给予5mg／kg全反式维甲酸（ATRA）皮下注射，假手术组和UUO组注射同体积溶剂。于术后第3、7、14天观察肾小管损害、肾问质炎性细胞浸润程度，免疫组化和RT-PCR法观察病变肾组织趋化因子RANTES及其受体CCR5和TGF-β1，表达。结果与UUO组相比，治疗组肾间质炎性细胞浸润和肾小管损害程度显著减轻（P〈0．05），肾组织RANTES、CCR5和TGF-β1表达显著降低（P〈0．01）。结论维甲酸能减少UU0大鼠肾间质炎性细胞浸润、减轻肾小管损害，抑制RANTES、CCR5和TGF-β1表达，从而减轻肾脏炎症反应和纤维化。

透析间期体重增加与透析患者营养状况和死亡率的关系研究400-402

摘要：目的探讨长期血液透析患者透析间期体重增加（interdialytic weight gain，IDWG）与其营养状况和死亡率之间的关系。方法观察2004年1月～2005年12月我院80例维持性血液透析患者，按IDWG分为两组，IDWG〈干体重的3％／d为A组，IDWG〉干体重的3％／d为B组。营养状况调查采用生化法（包括清蛋白、前清蛋白、总胆固醇、肌酐、透前血钾和血磷浓度）、标准蛋白分解率（nPCR）、人体测量（包括体重、体重指数、三头肌皮褶厚度）。结果A组前清蛋白、清蛋白、血钾、血磷、血肌酐水平较B组低，A组nPCR、体重、体重指数、三头肌皮褶厚度较B组低，差异均有统计学意义；生存曲线表明，A组患者2年存活率显著低于B组，71．8％VS92．7％，Pd0．01；血白蛋白水平〈4g／dl的患者较白蛋白水平〉4g／dl患者有较低的生存率，61．9％vs91．5％，P〈O．03。结论IDWG与血液透析患者营养参数密切相关，持续低水平的IDWG提示患者可能存在营养不良和较高的死亡率，临床应重视该类患者的营养支持。

ILK在TGFβ1诱导HKCs转分化过程中的表达和意义403-405

摘要：目的观察TGFβ1诱导的肾小管上皮细胞转分化过程中。整合素连接激酶（integrin-linked kinase，ILK）60表达及其在TEMT中所起的作用。方法以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系为对象，分别用TGFβ1（40ng／m1）及TGFβ1（40ng／m1）加HGF（100ng／m1）刺激，免疫组化方法检测ILK、E钙黏蛋白（E—cadherin）及纤维连接蛋白（FN）的蛋白表达．并用计算机真彩色图像分析系统对其进行半定量，并用Western Blot进一步检测ILK蛋白的表达。结果TG即，能以时间依赖的方式诱导ILK在肾小管上皮细胞中的表达；增加的ILK能介导肾小管上皮细胞发生表型变化，即使小管上皮细胞E钙黏蛋白的表达减少，而纤维连接蛋白的表达增多，用HGF能抑制上述作用。结论ILK参与TGFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞向间叶细胞的转分化。

激素抵抗肾病综合征患者肾组织GRβ和GRα的表达及意义406-408

摘要：目的探讨肾病综合征激素抵抗患者肾脏组织中GRβ和GRα的表达及意义。方法据糖皮质激素治疗效果将原发性肾病综合征患者分为以下3组：激素敏感组、激素抵抗组、复发后抵抗组。用免疫组织化学方法检测45例原发性肾病综合征患者肾组织中GRβ和GRα的表达，并用计算机图像分析系统对结果进行分析。结果复发后激素抵抗组和激素抵抗组肾组织中GRβ含量明显高于激素敏感组（P〈0．05）；复发后激素抵抗组肾组织中GRβ与激素抵抗组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；复发后激素抵抗组和激素抵抗组肾组织中GRα含量明显低于激素敏感组（P〈0．05）；复发后激素抵抗组肾组织中GRα与激素抵抗组之间差异无统计学意义（P〉O．05）。结论肾组织中GRβ的升高和GRα降低可能与原发性肾病综合征激素抵抗有关；检测肾组织中GRβ和GRα表达变化有助于预判断预后和调整治疗。

重组腺病毒AD—PTEN转染肾脏成纤维细胞对其细胞周期的影响409-410

摘要：目的将携带有PTEN基因的重组腺病毒转染大鼠肾脏成纤维细胞，观察其过度表达PTEN对细胞周期的影响。方法以免疫组化的方法确定PTEN在成纤维细胞中的亚细胞定位，以Ad—PTEN转染成纤维细胞，荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况及亚细胞定位，将转染的成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化，流式细胞仪分别检测细胞周期。结果免疫组化结果显示成纤维细胞的胞浆和胞核中均有PTEN的表达，在胞核中表达水平更高，荧光倒置显微镜下观察Ad—PTEN转染成纤维细胞后外源性PTEN其标志物绿色荧光蛋白（GFP）在胞浆和胞核中均表达，其中胞核表达水平更高，流式细胞仅检测在成纤维细胞中病毒转染组G1／S均明显高于对照组，提示Ad—PTEN转染组细胞存在明显的G1期细胞阻滞。结论PTEN过度表达将引起。肾脏成纤维细胞周期G1期阻滞，这一过程与PTEN在细胞核定位有关。

血小板反应蛋白1及血管内皮生长因子在肾间质纤维化中的表达及意义411-413

摘要：目的探讨肾脏组织中血小板反应蛋白1（thrombospondin-1，TSP-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在肾间质纤维化发生、发展中的表达及意义。方法选择不同类型肾脏疾病患者53例，按肾间质病理损伤程度对肾组织标本进行分组：正常对照组5例、轻度损伤组18例、中度损伤组19例、重度损伤组11例。用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测肾间质的TSP-1、VEGF、CD34、TGF-β1、α—sMA和Ⅳ型胶原表达情况。结果在正常对照组，TSP-1无阳性表达；TGF-β1在肾小管上皮细胞浆偶见表达；rsMA仅在血管壁表达；肾间质Ⅳ型胶原在肾小管基底膜、动脉管壁呈线状表达。而VEGF在肾小管上皮细胞及足突细胞浆均可见表达，CD34在肾小管周围毛细血管内皮细胞表达。随着病变程度加重，TSP-1、TGF-β1，α—SMA和Ⅳ型胶原其表达量及面积显著增加（P〈0．01），与肾间质病理损害程度呈显著正相关（r=0．86，0．674，0．779，0．784）。而VEGF及CD34表达量及面积则显著递减（P〈0．01），与肾间质病理损害程度呈显著负相关（r=-0．715，-0．672）。结论随着肾间质病理损伤程度加重，TSP-1在肾小管上皮细胞、肾间质区表达增强，与肾间质损害程度呈显著正相关；VEGF在肾小管上皮细胞、足细胞表达减弱，与肾间质损害程度呈显著负相关。提示TSP-1与VEGF对肾小管周围毛细血管作用失衡，使肾小管周围毛细胞血管减少，加重肾组织缺氧，导致慢性肾间质纤维化发生、发展。

TGFβ1对人肾小管上皮细胞表达糖原合成酶激酶-3β的影响414-416

摘要：目的研究转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGFβ1）对人肾小管上皮细胞株（human kidney proximal tubular epithelial cell line，HKCs）表达糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）的影响。方法将体外培养的的HKCs随机分为4组：正常对照组（C组）：无血清培养基（free serum medium，FSM）培养；Ta组、Tb组和Tc组；用含不同浓度TGFβ1（Ta组：5ng／ml，Tb组：10ng／ml，Tc组：20ng／m1）的FSM培养。12h后，分别用RT—PCR、Western blot检测HKCs GSK-3β的mRNA、总蛋白表达量以及蛋白磷酸化水平。结果（1）GSK-3β mRNA和总蛋白在各组间表达量差异无统计学意义（P〉0．05），和C组相比各T组GSK-3β蛋白磷酸化水平显著升高（P〈0．01）；（2）Tb组与Tc组相比，GSK-3β磷酸化水平更高（P〈0．01）；（3）Tb组与Tc组相比，GSK-3β磷酸化水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TGFβ1虽不影响HKCs的GSK-3β mRNA和总蛋白表达量，但能提高GSK-3β蛋白磷酸化水平，后者可能参与TGFβ1诱导的HKCs转分化过程。

环孢霉素A治疗22例难治性肾病综合征疗效观察417-418

摘要：目的探讨环孢霉素A（CsA）治疗难治性肾病（RNS）的疗效。方法对2004年8月～2006年8月收住院的22例RNS患者进行CsA治疗后的临床分析。男12例，女10例，年龄8～45岁，病程4个月～2年。激素依赖12例，激素无效10例。口服CsA3～5mg·kg^-1·d^-1，强的松龙0．1～0．5mg·kg^-1·d^-1和ACEI抑制剂洛丁新5～10mg／d，疗程6～12个月，观察应用CsA前后24h尿蛋白、血脂、肾肝功以及CsA血浓度变化。结果18例（81．8％）患者病情缓解，其中完全缓解14例（63．6％），部分缓解4例（18．1％），无反应4倒（18．1％）。24h尿蛋白定量从治疗前（3．45g±1．51）g下降至（0．862±0．35）g。不良反应有3例恶心、腹泻，4倒多毛症，3例g-龈增生和1例肝功能损害。结论CsA联合中小剂量强的松和ACEI抑制剂治疗RNS是安全和有效的。

TGF-β1对人肾成纤维细胞热休克蛋白47表达的影响419-421

摘要：目的探讨TGF-β1在肾组织纤维化中的作用机制。方法采用原代培养的人肾成纤维细胞，将细胞分为0、0．1、1、5ng／ml和10ng／ml不同浓度TGF-β1刺激培养组。应用免疫细胞化学方法检测TGF-β1作用下人肾成纤维细胞热休克蛋白47（heat shock protein 47，HSP47）表达，RT-PCR方法检测TGF-β1作用下人肾成纤维细胞HSP47和Ⅰ型胶原mRNA表达。结果（1）对照组（0ng／ml TGF-β1组）人肾成纤维细胞几乎无HSP47表达，在TGF-β1刺激下，培养的人肾成纤维细胞HSP47表达增强。（2）在0．1～5ng／ml范围内，TGF-β1以剂量依赖方式促进培养的人肾间质成纤维细胞表达HSP47和Ⅰ型胶原mRNA。结论TGF-β1促进肾组织纤维化形成，可能部分是通过其促进肾间质成纤维细胞表达HSP47，进而增加胶原合成所致。

慢性肾炎患者肾组织蛋白酶B的表达与尿蛋白的关系422-423

摘要：目的探讨慢性肾炎患者肾组织蛋白酶B（cathepsin B，CB）的表达及其与尿蛋白的关系。方法时肾活检组织病理切片进行形态计量，对病变肾小管肾间质进行半定量积分，分为轻度损害组、中度损害组和重度损害组。采用免疫组织化学SP法和计算机图像分析系统检测肾组织CB的表达情况，并检测24h尿蛋白和NAG酶（N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶）。结果CB在近曲小管表达最高，在其他部位表达较少。中度损害组和重度损害组CB的表达明显低于轻度损害组（P〈0．01）。24h尿蛋白定量和NAG随肾小管损害程度加重逐渐升高，3组相比差异有统计学意义（P％0．05）。CB表达与肾小管肾间质损害积分、24h尿蛋白量和NAG呈显著负相关（r分别为-0．89、-0．23和-0．75，P均〈0．01）。结论CB主要在肾近曲小管表达，可能参与了肾小管中尿蛋白的降解。其表达减少，将导致肾小管上皮细胞中蛋白的堆积，加重肾小管间质的损害。

CRRT治疗老年尿毒症低钾血症并发心律失常临床观察及分析424-425

摘要：目的研究连续性肾脏替代治疗（CRRT）在老年尿毒症患者出现低钾血症并发心律失常的治疗。方法用CRRT治疗该病例21例次，在心电监护下，根据监测的血钾浓度，在置换液中加入相应的10％氯化钾注射液。结果CRRT治疗1～5h后，低钾血症及心律失常完全得以纠正。结论CRRT在治疗老年尿毒症患者出现低钾血症并发心律失常方面是安全、及时有效的。

不同血液净化方案对尿毒症难治性高血压的疗效观察426-427

摘要：目的探讨持续不卧床腹膜透析（CAPD）、血液透析滤过（HDF）对并发难治性高血压的单纯规律血液透析（HD）患者的临床疗效。方法68例HD伴难治性高血压患者随机分为CAPD、HDF／HD两组。CAPD组每天腹透液总量8000ml，晚上留腹2000ml；HDF／HD组每周采用2次血液透析加1次血液透析滤过治疗，治疗时间为3个月。比较两组患者治疗前后平均动脉压、BUN及Cr的变化。结果与治疗前相比，治疗后两组平均动脉压水平、BUN与Cr水平均较治疗前明显下降，其差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后CAPD组与HDF／HD组相比，平均动脉压水平亦明显下降，其差异有统计学意义（P〈0．05）；但BUN与Cr水平两组相比无统计学意义（P〉0．05）。结论对于尿毒症难治性高血压患者血压的控制HDF／HD与CAPD均为有效的治疗方法，但CAPD效果更佳。

血液透析患者不同途径置入中心静脉导管并发症的对比研究428-429

摘要：目的比较血液透析患者经颈内静脉穿刺置入中心静脉导管（jgular catheter，JC）与股静脉穿刺置入中心静脉导管（femoral catheter，FC）发生并发症，尤其导管源性感染（catheter related bacteremia，CRB）的情况。方法经颈内静脉穿刺组（JC组，n=66）、经股静脉穿刺（FC组，n=35）。观察两组患者早期和晚期并发症。结果早期并发症包括穿刺点出血、血肿形成和穿入动脉，两组比较差异无统计学意义。晚期并发症主要为CRB，两组CRB发生率各为27％、48％，相差有统计学意义，P〈0．001。JC、FC组28d生存率各为77．2％、51．4％，两组相比差异有统计学意义，P〈0．001。金葡萄茵感染是CRB最常见感染细菌。结论JC操作方法简单，CRB等并发症发生率较低，导管留置时间较长，可作为临床上首选方法。