重庆医学杂志 统计源期刊

重庆医学 2006年第18期杂志 文档列表

重庆医学杂志医学检验专题

抗sAPRIL突变体多抗的制备及免疫抑制功能分析1633-1634

摘要：目的制备抗sAPRIL突变体多抗。观察其对sAPRIL促细胞增殖活性的影响。方法采用在sAPRILC端缺失45bp并加入HEL Th表位序列．且已经证实丧失sAPRIL天然活性的重组突变体蛋白，加上佐剂免疫BALB／c小鼠．6周后取血清。间接ELISA测定抗体滴度；Western blot测定抗体特异性；MTT检测所获抗血清抑制sAPRIL促Raji和Jurkat细胞增殖的作用。结果sAPRIL突变体能诱导小鼠产生特异性抗体，抗体具有较好的特异性，滴度达到1：10000～1：100000；抗sAPRIL突变体血清可明显降低sARPIL刺激Raji和Jurkat细胞增殖的吸光度值（P〈0．01）。结论成功获得抗sAPRIL突变体的多克隆抗体，该抗体可以在体外抑制sAPRIL促Raji和Jurkat细胞的增殖活性。

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究1635-1637

摘要：目的探讨糖皮质激素诱导型TNF受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor．GITR）抗体对L615白血病（T淋巴细胞来源白血病）的抑制效应及其作用机制。方法以L615小鼠建立白血病模型．分3个实验组和1个阴性对照组，观察实验小鼠生存状态及时间，检测外周血白细胞计数及分类，外周血和骨髓中白血病细胞形态变化．肝脾指数．肝脾组织病理改变。结果GITR抗体使用组能延长L615白血病小鼠的生存时间．可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死．肝脾指数降低。结论通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖．进而抑制白血病的发展。

人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达与初步纯化1638-1640

摘要：目的确立人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达条件和初步纯化条件。方法将pET32a（＋）/SLC分别转化大肠杆菌AD494（DE3）、BL21trxB（DE3）、BL21trxB（DE3）plusS．选择最佳宿主菌，优化诱导表达的条件，将大量表达的目的蛋白经金属离子亲和层析、除盐、肠激酶酶切、阳离子交换进行初步纯化。结果pET32a（＋），SLC最佳宿主菌为BI。21trxB（DE3）．优化的表达条件为37C、1mmol／LIPTG诱导3h，SDS-PAGE分析可见，表达蛋白的大小约为30kd，占菌体总蛋白的50%以上．可溶性蛋白约占50％。用SLC多克隆抗体进行Westernblm分析显示，在30kd处出现单一阳性条带，而对照的pET32a（＋）／BL21trxB（DE3）诱导菌则无此反应。SLC经一系列纯化步骤得到初步纯化。结论初步建立pET32a（＋）／SLC在宿主菌BL21trxB（DE3）中表达和纯化的方法。

乙肝病毒标志物定量检测与乙肝患者肝损伤的相关性分析1641-1642

摘要：目的分析乙肝病毒标志物定量检测与患者肝脏损伤间的相关关系，为乙肝的诊疗提供较好的监测指标。方法选择新八院乙肝患者的血清，应用时间分辨免疫荧光分析法（TRIFA）测定乙肝病毒标志物的含量；采用实时荧光定量PCR法（FQPCR）测定HBVDNA的含量；同步监测肝损伤指标（AI，T、AST、ALB、T—BIL、CRP）等的变化．并分析其相关关系。结果总体而言．乙肝患者肝脏损伤指标与乙肝病毒标志物定量检测间无明显相关关系．但乙肝活动期时．肝损伤指标与HBsAg、HBeAg、HBVDNA测定结果之间呈现一定的正相关。结论乙肝病毒标志物与乙肝炎症活动期肝损伤指标间有一定的相关关系．二者结合可作为乙肝肝损伤的重要监测指标。

巨细胞病毒感染对SMC脂质代谢的影响及反义寡核苷酸的调节作用1643-1644

摘要：目的了解体外情况下巨细胞病毒感染对平滑肌细胞（SMC）脂质代谢的影响及反义寡核苷酸的调节作用．探讨CMV感染SMC与动脉粥样硬化之间的关系。方法建立体外CMVAD169株感染SMC的模型．运用微量生化分析方法测定感染细胞脂质代谢的改变．同时观测反义寡核苷酸（ASON）和抗病毒药物GCV的调节作用。结果CMV感染后SMC内总胆固醇24～72h与对照组相比明显升高．甘油三酯水平在感染后48～72h明显增高．而ASON和GCV作用后．感染的SMC内总胆固醇和甘油三酯水平下降。结论CMV的体外感染能够促使脂质在SMC内积聚．而ASON和GCV能够下调脂质的积聚．这可能在CMV致AS的发病机制及治疗研究中具有重要意义。

体外循环心脏术后心肌损伤标志物的变化1645-1646

摘要：目的观察心脏和胸科术后48h内心肌标志物的变化．探讨以心肌标志物判断术后心脏损伤程度的价值。方法在心脏外科和胸外科手术后48h内对不同时相点采集静脉血，在自动分析仪上测定心肌肌钙蛋白T（cTnT），肌红蛋白（Myo），肌酸激酶同工酶（CK—MB）活性。结果两组患者术后Myo浓度及CKMB活性均明显升高，心脏手术组CKMB增高更显著：cTnT在心脏术后组各时相点均显著增高，胸科术后组无明显变化。结论cTnT时判断体外循环条件下心脏术后的心肌损伤程度有一定价值。

ERR1突变体K244A对其转录活化功能的影响1647-1648

摘要：目的分析ERR1突变体K244A对ERR1转录活化功能的影响。方法用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突变体ERR1/K244A到表达质粒pSG5上．通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 K244A对ERR1转录活化功能的影响结果测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5/ERR1／K244A。报告基因表达系统检测显示ERR1 K244A激活的荧光素酶报告基因活性明显低于野生型的ERR1。结论ERR1突变体ERR1 K244A转录活化功能明显低于野生型的ERR1．为进一步研究ERR1的结柏与功能打下了基础．

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究1649-1651

摘要：目的探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family related receptor．GITR）抗体通过调节Treg细胞和NK细胞的功能对L615白血病细胞增殖的影响．了解NK细胞对白血病细胞的杀伤活性。方法通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组．提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞．以L615白血病细胞作为靶细胞．在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况．并运用RT-PCR进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化。结果GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性．表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素（Perforin）、γ干扰素（IFN-γ）、Fas的表达量明显增加。结论GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性，进而有效的抑制L615自血病细胞。

主动脉冠状动脉旁路移植手术术中检测心肌肌钙蛋白I对术后心脏不良事件的预测价值1652-1653

摘要：目的测量主动脉-冠状动脉旁路移植（CABG）过程中早期[即心肺分流术（eardiopulmonary bypass，CPB）停止后]cTnI的释放，以了解不稳定心脏功能可能导致的血液动力学恶变及其相关不良后果（adverse outcome．AO）。方法95倒CABG患者于诱导麻醉前和CPB终止后采用荧光酶免疫吸附分析仪检测cTnI浓度。结果全组术前平均cTnI水平为（0．04±0．10）ng／L。CPB终止时出现不良后果组的cTnI平均值为（0．90±0．4）ng／L：其他患者为（0．37±0．2）ng/L（P〈0．001）。结论CABG过程终止钳cTnI释放可能提示术后的不良后果。手术早期进行血液样本分析cTnI浓度变化可以及时提供结果．为诊断和治疗性干涉血液动力学恶变提供依据。

浮动均值法用于全血细胞计数仪质量控制探讨1654-1655

摘要：目的探讨并建立全血浮动均值法（X-B分析法）进行血细胞计数的室内质量控制方法。方法应用SYSMEX SE9000全自动血细胞计数仪进行血常规检查．计算30d检测标本的RBC、Hb、MCH、MCHC、MCV、WBC、Plt均值作XB分析法．与全血质控物室内质控法比较。结果RBC、Hb、MCH、MCHC、MCV、WBC、Plt的均值都在较小的范围内变化．X-B质控图与全血质控品质控图变化趋势基本一致。结论X—B分析法可用于血细胞计数仪全血质控品室内质控的补充．是一种有效的室内控制方法。

肾病综合征患者血清Ig和补体C3的测定及临床意义探讨1656-1657

摘要：目的通过对肾病综合征和其他常见的几类肾脏疾病进行血清免疫球蛋白（Ig）的测定．探讨肾病综合征体液免疫功能的变化。方法采用散射免疫比浊法（nephelomelry）和酶联免疫吸附法（ELISA）分别对肾病综合征（NS）．慢性肾小球肾炎（CN）、慢性肾衰竭（CRF）氮质血症期和尿毒症期及正常对照组进行Ig和补体C3的测定。结果NS患者IgG为（5.92±3．71）g／L．明显低于其他各组（P〈0.01）。而IgM和IgE水平高于其他肾病组及正常对照组（P〈0．05）．慢性肾衰蝎（CRF）尿毒症期血清补体C3水平低于其他各组（P〈0．05）。结论血清Ig测定在肾病综合征的诊断和治疗过程中具有重要的，临床意义。

307例抗酸染色阳性病例的临床分析1658-1659

摘要：目的通过对307例抗酸染色阳性病例的临床分析．探讨结核病的发病率及流行趋势．为结核病的防治提供流行病学依据。方法统计2003年1月～2005年12月我院所做抗酸染色的全部病例，结合病例的临床资料．获得近年来结核痛的发病率及其流行趋势变化。结果3年共做抗酸染色14060例．阳性307例．阳性率为2、18％．2003、2004和200j年的阳性检出率分别为1．12％（55／3876）、2．14％（98／4580）、2．75％（154／5604）．经统计学分析差异有统计学意义．P〈0．05。其中．经临床及实验室确诊为免疫功能受损或低下患者1151例．抗酸染色阳性55例，阳性率为4．78％．2003、2004和2005年的阳性率分别为2．83／（9／318）、4．76％（17／357）、6．09％（29／476），统计学分析差异有统计学意义．P〈0．01。结论结核杆菌的感染率呈逐年上升趋势．尤其是免疫功能受损或低下患者的感染率明显上升．结核病的防治将面临严重的挑战。

服用抗生素后对尿液细菌培养的影响及其对策1660-1660

摘要：目的通过分析泌尿系统感染患者使用抗生素前后对尿液细菌培养的栓出率，探讨其对细菌培养的影响及其对策。方法选择泌尿系统感染患者176例，其清洁中段尿离心沉渣白细胞数〉10个/HP．在使用抗生素前后1、3、5d进行尿液细菌培养．其中在抗生素使用1d时的尿液另进行基础肉汤增菌。结果176例泌尿系统感染患者在尚未使用抗生素时尿液细菌培养阳性65例．阳性率为36．9％，当使用抗生素后1、3、5d时尿液细菌培养阳性分别为17、9、6例．其阳性率分别为9．7％、5．1％、3．4％，经统计学分析差异有统计学意义。P〈0．01。其中在抗生素使用1d时的尿液经基础肉汤增菌后细菌培养阳性39例．阳性率为22．1％。与尿液直接接种血平皿的阳性率比较差异有统计学意义，P〈0．01。结论尿液细菌培养阳性率与感染患者是否服用抗生素密切相关．服用抗生素后细菌培养阳性率明显降低．但尿液经基础肉汤增菌后可明显提高其检出率。

网织红细胞参数对贫血的临床诊断价值探讨1661-1662

摘要：目的探讨网织红细胞（简称网红）参数网红百分数（RET）和未成熟网红指数（IFR）在各种疾病贫血的临床诊断价值。方法用Sysmex XT-2000i五分类血液细胞分析仪分别对538例健康成人和73例各种疾病贫血患者的RET和IFR进行测定，统计出相应参数的平均值（^-x）和标准差（s）．并作均数t检验；缺铁性贫血和恶性肿瘤在治疗后1周和化疗后？周重测上述数据并作统计．与之治疗和化疗前作均数t检验。结果所有疾病贫血患者组的RET和IFR与正常对照组差异均有统计学意义（P〈0．05．P〈0．01）；缺铁性贫血治疗后1周较治疗前RET差异有统计学意义（P〈0．05），IFR差异有统计学意义（P〈0．01）：恶性肿瘤化疗后2周较化疗前RET差异有统计学意义（P〈0．05）．IFR差异有统计学意义（P〈0．01）。结论RET和IFR不失为反映骨髓造血功能的较好指标．而IFR更为灵敏。两参数的测定与动态观察．对疾病的贫血诊断、治疗和疗效观察等部有重要的临床应用价值。

重庆医学杂志论著

人趋化因子受体CCR6的克隆、表达及其功能分析1663-1665

摘要：目的构建人趋化因子受体6（CCR6）cDNA序列的真核表达载体．并在HEK293细胞中表达．为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DN段．并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3．1（＋）中，构建重组真核表达质粒pcDNA3、1（＋）-CCR6；将该质粒pcDNA3、1（＋）-CCR6转染HEK293细胞．用流式细胞术检测转染pcDNA3．1（＋）-CCR6质粒的HEK293细胞；采用体外趋化实验、钙流实验，验证转染pcDNA3.1（-）．CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性。结果经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DN段．构建了重组真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-CCR6：转染HEK293细胞．经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实．表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性。结论重组人趋化因子受体CCR6克隆成功．并在HEK293细胞中获得了表达．为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础。

^125I-Genistein在荷人乳腺癌裸鼠体内分布的实验研究1666-1667

摘要：目的研究^125I-Genistein在荷人乳腺癌裸鼠体内的生物学分布情况．探讨Genistein用于治疗人乳腺癌的可行性。方法Iodogen法标记Genistein；建立荷人乳腺癌裸鼠移植瘤模型；测定^125I-Genistein在荷瘤裸鼠体内的放射性分布．计算肿瘤（T）与非肿瘤组织（NT）的放射性比值。结果^125I-Genistein比活度为336KBq/μg．放射性化学纯度为98．72％。尾静脉给药30min后肿瘤组织的放射性达到高峰．但在各观察时相点肿瘤（T）放射性均显著低于血液、肝脏与肾脏（NT）（P〈0．01）；肾脏放射性明显高于肠道,30min后高于除血液外的其他受检组织；肠和脾脏的放射性始终处于极低水平。结论Genistein用于人乳腺癌的治疗需要进一步研究。以提高其在肿瘤组织中的分布。

慢性肺心病哮喘持续状态218例临床分析1668-1670

摘要：目的探索治疗慢性肺心病哮喘持续状态的方法。方法回顾性分析1983年10月～2005年3月收治的218例慢性肺心病哮喘持续状态患者的临床资料。结果哮喘持续状态在48h以内被控制的62例（28．4％）；在72h以内控制的56例（25．7％）；在120h以内控制的25例（11．5％）；在168h以内控制的34例（15．6％）；痊愈出院177例（81．2％）；死亡41例（18．8％）。结论（1）治疗慢性肺心病哮喘持续状态．根据患者的病理变化．综合治疗．效果显著。（2）在治疗过程中．要恰当选择抗生素和平喘药；对那些血液黏滞度增高的患者．要加用血液稀释疗法。（3）测定血液黏滞度和氧饱和度．可以指导治疗、估计预后．应当列为常规检查。

虫草菌丝对实验性大鼠非酒精性脂肪肝的疗效观察及其分子机制探讨1671-1673

摘要：目的观察虫草菌丝对实验性大鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）的治疗效果．探讨其可能的分子机制。方法高脂饮食建立大鼠NAFLD模型．同时设正常饮食对照组（Bαsic diet．B组）．模型对照组（单纯性非酒精性脂肪肝组．NAFL组）．病理对照组（非酒精性脂肪性肝炎组．NASH组）．虫草菌丝治疗组（CS组）。HE染色法观察肝脏病理改变；ELISA测定血清TNFα；免疫组织化学染色观察肝组织TNFα。解耦联蛋白2（UCP2）表达情况；逆转录PCR检测肝组织UCP2 mRNA；鲎试剂法测血清内毒素。结果（1）NAFL组肝组织广泛脂肪变性．脂质沉积；UCP2表达增加．而TNFα、血清内毒素水平均无显著变化；（2）NASH组肝组织广泛弥漫脂肪变性，炎性细胞浸润、坏死，局部纤维组织增生；UCP2、TNFα、血清内毒素水平均显著升高；（3）CS组肝组织广泛脂肪变性．仅有轻微炎性细胞浸润．未见坏死灶及纤维组织增生；UCP2、TNFα、血清内毒素水平均显著下降。结论早期UCP2表达上调．可能是机体的适应性反应．而晚期UCP2过度表达、TNFα水平升高以及内毒素血症共同诱导或加剧脂肪性肝病向脂肪性肝炎．甚至向脂肪性肝纤维化发展。虫草菌丝能发挥有效的护肝作用．可能通过上调UCP2．减轻内毒素血症．下调TNFα等多靶点、多途径发挥治疗作用。